乐果降解菌L3的分离、鉴定及降解性能

合集下载

邻苯二甲酸二丁酯高效降解菌的分离、鉴定及降解特性

邻苯二甲酸二丁酯高效降解菌的分离、鉴定及降解特性杨统一;高俊贤;刘琦;连梓竹【摘要】从土壤中分离出1株能够以邻苯二甲酸二丁酯为碳源和能源生长的细菌XHYG.经形态观察、生理生化鉴定、16S rDNA序列及系统发育分析,鉴定该菌株为无色杆菌(Achromobacter insolitus).对该菌株的降解条件进行优化,确定最佳降解条件为:温度30℃,pH =6.5 ～8.0.在最佳降解条件下,其在48 h内对400 mg/L DBP降解率达到90.67％,为邻苯二甲酸二丁酯的高效降解菌.底物降解广谱性试验表明,该菌株对邻苯二甲酸二辛脂(DOP)、邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯(DEHP)都具有良好的降解能力,表明具备良好的底物降解广谱性,说明该菌株在处理邻苯二甲酸酯类化合物的污染治理中有独特的应用潜力.【期刊名称】《江苏科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(029)006【总页数】5页(P607-611)【关键词】邻苯二甲酸二丁酯;降解特性;生物降解;降解条件;16S rDNA【作者】杨统一;高俊贤;刘琦;连梓竹【作者单位】江苏科技大学环境与化学工程学院,江苏镇江212018;江苏科技大学环境与化学工程学院,江苏镇江212018;江苏科技大学环境与化学工程学院,江苏镇江212018;江苏科技大学环境与化学工程学院,江苏镇江212018【正文语种】中文【中图分类】X172邻苯二甲酸酯类(phthalic acid esters，PAEs)是一类重要的有机化合物，被广泛用作塑料助剂、油漆溶剂、合成橡胶增塑剂及化妆品、香味品、润滑剂等生产原料中［1］.然而，由于邻苯二甲酸酯增塑剂并非与树脂共价连接，因此极易扩散到环境中.目前，PAEs在环境中已到了普遍检出程度，包括在陆地生态系统及水域生态系统等都能检测到PAEs的存在［2］.近期研究表明，PAEs具有致畸性、致突变性、致癌性及生殖毒性，可在极低浓度下干扰人和动物的内分泌系统，导致其发育紊乱［3］.且在环境研究领域，邻苯二甲酸酯类被中国环境监测总站、美国国家环保局(EPA)和欧盟列为优先控制污染物［4］.PAEs在自然界中的降解分为生物降解和非生物降解两种，而微生物降解是其降解的主要途径［5］.目前国内外有关PAEs微生物降解的研究有很多［6-7］，如Delfia sp.［8］，Sphingomonsa sp.［9］，Arthrobacter sp.［10］，Paenibacillus sp.［11］等.但已报道的菌株能降解DBP且能降解多种邻苯二甲酸酯类化合物的还较少，因此有必要筛选高效广谱的DBP降解菌，丰富降解菌种类.本研究从镇江市江苏科技大学西校区垃圾处理站土样中分离到了1株能够高效降解邻苯二甲酸二丁酯的细菌，采用生理生化及16S rDNA序列分析等手段对该菌进行了鉴定，并研究其生长和降解特性，以期为PAEs污染物的治理及土壤修复提供一定的科学依据.1.1 实验材料实验土样取自镇江市江苏科技大学西校区垃圾处理站附近土壤.基础无机盐(MSM)培养基(g/L):K2HPO45.8，KH2PO44.5，(NH4)2SO42.0，MgCl20.16，CaCl20.02，Na2MoO4·2H2O 0.002 4，FeCl30.001 8，MnCl2·2H2O 0.001 5，pH=7.0，于121℃湿热灭菌20 min.固体培养基为含DBP的液体培养基加琼脂20 g/L.富集培养基(g/L):牛肉膏5.0，蛋白胨10.0，NaCl 5.0，pH=7.0，于121℃湿热灭菌20 min.主要试剂:邻苯二甲酸二丁酯(DBP，分析纯);邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯(DEHP，分析纯);邻苯二甲酸二辛脂(DOP，分析纯);环己烷(色谱级)，甲醇(色谱级).1.2 实验方法1.2.1 DBP降解菌的筛选与纯化称取10 g土壤样品，加入20 ml无菌水，剧烈振荡混合均匀后于4 000 r/min离心机中离心5 min，取上清液;接着重复此步骤2次，最后取上清液获得土壤溶液.取分别稀释100倍、1 000倍、10 000倍的土壤溶液，涂布在固体MSM培养基(含DBP 100 mg/L)于30℃培养箱内培养7 d.然后挑取筛选的菌落接种于含DBP 200 mg/L的液体MSM培养基，150 r/min、30℃ 的摇床培养7 d，再用划线法划线于固体MSM培养基(含DBP 200 mg/L)于30℃培养箱内培养7 d，进一步分离单菌落.重复上述两步并逐步提高培养基中DBP含量依次为200，250，300，350，400 mg/L.最后将分离出的单菌用富集培养基富集.1.2.2 菌株的生理生化鉴定降解菌株形态及生理生化特性鉴定参照常见细菌系统鉴定手册［12］等文献.1.2.3 菌株DNA的鉴定降解菌株分子生物学鉴定采用16S rDNA序列分析.首先提取分离的降解菌DNA作为模板，利用16S rDNA基因通用引物F27和R1492进行PCR扩增.其中，引物F27为5’-AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3’，引物R1492为5’-GGC TAC CTT GTT ACG ACT T-3’.PCR扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃变性40 s;55℃退火40 s;72℃延伸90 s，30个循环; 72℃最终延伸7 min，4℃保存.PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测后，送上海生工生物工程技术服务有限公司完成测序工作.将测序结果提交GenBank，获得序列号KM598778，并同GenBank数据库中的基因序列进行BLAST比对，以获得相似性较高的相关菌株，采用MEGA6.0软件进行多序列比对，并构建系统进化树.1.2.4 溶液中PAEs的含量测定采用高效液相色谱法检测溶液中PAEs，具体处理方法如下:待测溶液于超声波振荡器中振荡10 min后取10 ml加入20 ml环己烷，剧烈振荡后放入超声波振荡器中振荡5 min，后倒入离心管在高速离心机(5 000 r/min)中离心分离取上层有机相，再用孔径为0.22 μm的有机相过滤器过滤后上机测定.高效液相色谱条件:色谱柱为5μm Eclipse XDB-C18柱;流动相为甲醇∶水=90∶10;检测器波长为228 nm;柱温为35℃;柱压为15 bar;流速0.5 mL/min;进样量为10 μL;保留时间为11 min.1.2.5 生物量测定方法测定菌株的生物量，采用721型可见分光光度计在600 nm处测量培养基的光密度OD600.1.3 降解菌底物广谱性测试在基础无机盐培养基中分别加入邻苯二甲酸二辛脂(400 mg/L);邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯(400 mg/L)于121℃湿热灭菌20 min.以2%的接种量将降解菌种子液接种到100 mLMSM中，160 r/min、30℃摇床培养.培养5 d后取样，用高效液相色谱法测定不同邻苯二甲酸酯的残留量.1.4 菌株的降解特性研究1.4.1 降解菌对DBP的降解曲线及生长曲线将菌液离心分离获取菌体，再用MSM培养基重悬，调整菌液浓度OD600=1.0.然后将上述菌液1 ml接种到液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L) 25 ml中，在150 r/min、30℃ 的摇床培养，并设置一组液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L)不加入菌液作为对照.每24 h定时取样用高效液相色谱法测定其中DBP的含量，并测定其OD600值.1.4.2 DBP高效降解菌的降解条件优化1)温度将菌株的菌液离心分离获取菌体，再用MSM培养基重悬，调整菌液浓度OD600=1.0.然后取上述菌液5份，每份1 ml分别接种到液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L)25 ml中，在150 r/min、温度分别为25，30，35，40，45℃ 的摇床培养5 d，并设置一组液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L)不加入菌液作为对照.用高效液相色谱法测定其中DBP的含量.2)pH将菌株的菌液离心分离获取菌体，再用MSM培养基重悬，调整菌液浓度OD600=1.0.然后取上述菌液5份，每份1 ml分别接种到液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L)25 ml中，将5份培养基pH分别调整为6.0，7.0，8.0，9.0，10.0在150 r/min、30℃ 的摇床培养5 d，并设置一组液体MSM培养基(DBP含量为400 mg/L)不加入菌液作为对照.用高效液相色谱法测定其中DBP的含量. 2.1 菌株XHYG的分离及部分生理生化特征经过富集培养，分离得到1株能够在DBP含量为400 mg/L的MSM培养基中很好生长的降解菌，此菌株能以DBP为唯一碳源很好地生长，将其命名为XHYG.XHYG菌株在MSM平板上于30℃恒温培养箱中培养5 d后，菌落呈圆形，不透明，黄色，中央部分突起，边缘部分光滑，质地致密且有光泽，不含水溶性色素，在显微镜下观察为球状.生理生化测试发现，菌株XHYG为革兰氏阴性菌，接触酶呈阳性反应，淀粉水解酶呈阴性反应，不产硫化氢气体，明胶液化反应、甲基红反应均呈阴性反应，能够发酵葡萄糖(详见表1).2.2 降解菌底物广谱性测试接种5 d后观察菌株XHYG都能很好地利用DOP和DEHP，根据图1所示，菌株XHYG对DOP的降解较DEHP要好.这与文献［13］中邻苯二甲酸脂类的生物降解效果与碳链长度和复杂程度呈反比相一致.2.3 菌株XHYG的16S rDNA分子鉴定与系统发育分析测序结果提交 GenBank的登录号为KM598778.在GenBank中进行BLAST比对分析，结果发现与菌株XHYG的16S rDNA序列相似性最高的是Achromobacter insolitus，其相似性达到99%.结合其形态学和生理生化特征，可以初步确定XHYG为无色杆菌(Achromobacter insolitus).选取部分文献报道的PAEs降解菌，用MEGA 6.0软件包构建系统发育树(图2)，对比降解菌的系统进化关系.由图2可以看出，文中筛选的XHYG菌株与无色杆菌(Achromobacter insolitus)处于同一分支，具有相同的进化距离，因而更进一步说明菌株XHYG为无色杆菌属.从图2还可看出，部分PAEs降解菌与XHYG菌株进化距离较远，说明PAEs降解基因广泛分布在不同种属.2.4 菌株XHYG的生长曲线和降解曲线菌株XHYG的生长和降解曲线如图3.由图3可以看出，在0～1 d时，菌株XHYG生长缓慢，DBP的降解率较低，培养基呈现淡淡的乳白色;菌株在1～3 d为迟滞期;3～5 d为对数生长期;5 d后进入平衡期;从降解曲线上来看，菌株在48 h时对400 mg/L DBP降解率达到90.67%，在3～6 d，菌株XHYG以DBP为唯一碳源和能源迅速繁殖生长，在培养基底部逐渐产生灰白色悬浮颗粒物即菌体，而DBP也被大量降解，培养基颜色逐渐澄清;在5～6 d时期，菌株的生长进入平衡期，其OD600稳定在1.2左右，菌株的生长量逐渐达到最大值，DBP的残留量仅为4.09 mg/L，降解率达到98.99%.因此，确认菌株XHYG为DBP的高效降解菌.2.5 温度对菌株XHYG降解DBP的影响由图4看出，菌株XHYG对DBP的降解效果先随温度的升高而升高，达到最大值后，随着温度的升高而降低，菌株XHYG的最适生长温度为30℃，在温度超过35℃后降解活性大大降低.由此表明，温度过高或过低都会使菌株XHYG的生长受到抑制，降解活性降低.这与文献［11］的研究结果一致.这可能由于当温度过低时，菌体内酶的活性在低温下大大降低，导致菌株对DBP的降解效率降低;当温度过高时酶活性失活导致降解效率降低.2.6 pH对菌株XHYG降解DBP的影响由图5可以看出菌株XHYG的最适生长pH值在6.5～8.0左右，菌株的降解率能达到85%以上，而当pH值过低或者过高时菌株的生长均受到抑制，降解活性降低.由此表明，中性环境更利于这株菌株对DBP的降解.这与文献［16］分离出的HS-B1菌株相似，该菌株被鉴定为不动杆菌(Acinetobacter sp.)，当pH＞8.0，菌株的降解效率大大降低.1)从土壤中分离得到了一株能够以DBP为碳源和能源生长的细菌XHYG，经过形态学特征、生理生化特征和16S rDNA序列系统学分析，初步鉴定该菌株为无色杆菌(Achromobacter insolitus).2)XHYG生长和降解DBP的最佳培养条件为:温度30℃，pH 7.0;在此条件下，菌株迅速利用DBP作为碳源和能源进行生长，能够在DBP浓度为400 mg·L-1的无机盐培养基中生长良好，有较高的耐受性和降解效率.【相关文献】［1］Blount B C，Milgram K E，Silva M J，et al.Quantitative detection of eight phthalate metabolites in human urine usingHPLC-APCI-MS/MS［J］.Analytical Chemistry，2000，72(17):4127-4134.［2］Zolfaghari M，Drogui P，Seyhi B，et al.Occurrence，fate and effects of Di(2-ethylhexyl)phthalate in wastewater treatment plants:a review［J］.Environmental Pollution，2014，194:281-293.［3］Gu J D，Li J，Wang Y.Biochemical pathway and degradation of phthalate esterisomers by bacteria［J］.Water Science Technology，2005，52(8):241-248.［4］骆祝华，黄翔玲，叶德赞.环境内分泌干扰物:邻苯二甲酸酯的生物降解研究进展［J］.应用与环境生物学报，2008，14(6):890-897.Luo Zhuhua，Huang Xiangling，Ye Dezan.Advances in research of biodegradation of environmental endocrine disruptors-phthalate esters ［J］.Chinese Journal of Applied＆Environmental Biology，2008，14(6): 890-897.(in Chinese)［5］Staples C A，Peterson RT.F.The environmental fate of phthalate esters:a literature review［J］.Chemosphere，1997，35(4):667-749.［6］Fang C，Long Y，Shen D.Removal of dibutyl phthalate from refuse from different phases of landfill in the presence of its dominant bacterial strains［J］.Ecological Engineering，2014，71:87-93.［7］Fang C，Yao J，Zheng Y，et al.Dibutyl phthalate degradation by Enterobacter sp.T5 isolated from municipal solid waste in landfill bioreactor［J］.International Biodeterioration＆Biodegradation，2010，64(6):442-446.［8］刘洋，马保华，王兆梅，等.食品塑料包装中邻苯二甲酸酯类增塑剂的调查分析［J］.现代食品科技，2013，29(1):181-185.Liu Yang，Ma Baohua，Wang Zhaomei，et al.Investigation of phthalates contamination in the market-sold plastic food packages［J］.Modern Food Science and Technology，2013，29(1):181-185.(in Chinese)［9］周洪波，胡培磊，刘飞飞，等.DBP降解菌株XJ1的分离鉴定及其降解特性［J］.生物技术，2008，18 (2):64-67.Zhou Hongbo，Hu Peilei，Liu Feifei，et al.Isolation and identification of DBP-degrading strain XJ1 and its degradation characters［J］.Biotechnology，2008，18 (2):64-67.(in Chinese)［10］Jin D C，Liang R X，Dai Q Y，et al.Biodegradation of di-n-butyl phthalate by Rhodococcus sp.JDC-11 and molecular detection of 3，4-phthalate dioxygenase gene ［J］.Journal of Microbiol Biotechnol，2010，20 (10):1440-1445.［11］金雷，陈瑜，严忠雍，等.邻苯二甲酸二丁酯高效降解菌H-2的分离鉴定及其降解特性［J］.食品科学，2014，35(15):202-206.Jin Lei，Chen Yu，Yan Zhongyong，et al.Isolation and identifi cation of a di-n-butyl phthalate(DBP)-degrading strain H-2 and its degradation characteristics［J］.Food Science，2014，35(15):202-206.(in Chinese) ［12］东秀珠，蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册［M］.北京:科学出版社，2001.［13］Chang B V，Yang C M，Cheng C H，et al.Biodegradation of phthalate esters by two bacteria strains［J］.Chemosphere，2004，55(4):533-538.［14］吴学玲，金德才，赵维良，等.4株邻苯二甲酸二丁酯降解菌的分离鉴定及其相关降解基因的克隆［J］.环境科学，2009，30(9):2722-2727.Wu Xueling，Jin Decai，Zhao Weiliang，et al.Isolation and identification of four DBP-degrading strains and molecular cloning of the degradation genes［J］.Environmental Science，2009，30(9):2722-2727.(in Chinese) ［15］金雷，严忠雍，施慧，等.邻苯二甲酸二丁酯DBP降解菌S-3的分离、鉴定及其代谢途径的初步研究［J］.农业生物技术学报，2014，22(1):101-108.Jin Lei，Yan Zhongyong，Shi Hui，et al.Identification of a dibutyl phthalate(DBP)-degrading strain S-3 and preliminary studies on the metabolicpathway［J］.Journal of Agricultural Biotechnology，2014，22(1): 101-108.(in Chinese)［16］陈湖星，杨雪，张凯，等.1株高效BBP降解菌的分离与特性研究［J］.环境科学，2013，34(7):2882-2888.Chen Huxing，Yang Xue，Zhang Kai，et al.Isolation and characterization of a highly efficient BBP-degrading bacterium［J］.Environmental Science，2013，34(7): 2882-2888.(in Chinese)。

环境污染物高效降解菌的筛选

探索更快速、准确的筛选方法，提高高效降解菌的筛选效率。
发展复合降解技术
结合物理、化学和生物等多种方法，发展复合降解技术，提高污染物的去除效果。
06 结论
研究成果总结
成功筛选出多种高效降解不同类型污染物的菌种，这些菌种在实验室条件下表现出良好的降解性能。
研究结果为进一步开发高效生物治理技术提供了理论依据和实践指导，有助于解决环境污染问题。
02
探索高效降解菌的生态学特征和进化机制，以更好地了解其在自然界中的分布和作用。
04
加强高效降解菌在实际污染治理中的应用研究，包括工艺优化、成本效益分析和长期稳定性评估等。
THANKS
降解特性分析
总结词
研究高效降解菌在各种环境条件下的降解性能和降解机制。
详细描述
降解特性分析包括降解动力学研究、降解产物检测、降解酶的分离与鉴定等，有助于全面了解菌种的降解能力和应用潜力。
05
高效降解菌的应用前景与挑战
应用前景
高效降解污染物
高效降解菌能够快速分解和转化多种环境污染物，降低其对环境和生态系统的危害。
详细描述
生理生化鉴定主要包括形态观察、培养特性分析、代谢产物检测等，有助于初步判断菌种的降解能力和适应环境的能力。
分子生物学鉴定
总结词
利用分子生物学技术，如16S rRNA基因测序，对高效降解菌进行准确鉴定和分类。
详细描述
通过分子生物学鉴定，可以更深入了解菌种的基因组信息和系统发育关系，为后续的降解机制研究提供基础。
生物修复技术
利用高效降解菌进行生物修复，对受污染的环境进行治理和恢复，具有成本低、环保等优势。
促进可持续发展
高效降解菌的应用有助于推动环保产业和循环经济的发展，促进可持续发展。

土壤中乐果降解菌的筛选及其特性研究

中图分类号：１４３文献标识码：ｓ５．４Ａ文章编号：６２２４（０６０ — ２５０１７ — ０３２０）５１５ — ５
ＭｉｒｂｉｌＲｅｄａｉｎｏｍｅｈｏｔ－ＣｏｎａｉａｅｉｃｏａｍｅｉｔｏｆＤｉｔａｅｔｍｎｔｄＳｏｌ
ＡｂｔａｔＰｓｉｉｅｌｙａｏｔｎｏｅｉｅＳｃｅｓｏｄｒｒｎｎｏｒｄｃｉｎＨｏｅｅ，ｔｅｒｌａｅｏｅｔｉｅｈｓｒｃ：ｅｔｄｓｐａｎｉｃｍｐｒａｔｌｎｔｕｃｓｆｒｈｍｏｅｆｍｉｇａｄｆｄｐｏｕｔ．ｎａｏｏｗｖｒｈｅｅｓｆｓｉｄｓｏｔｅｐｃｔ
ＷＡＮＧＨｕＡ１ａＷＥａ－ｎＸＩｅ，ＨＡＮＧｈ— ｉｇ，ａ，ｏ，ＴＮＸｉｏｆｇ，ＥＬｉＺａＳｉｎＨＵＡｑＮＧｕ —ｈｎＪｎｓｅｇ
பைடு நூலகம்
（ＣｉａＡｃｄｍｙｏｒｐｃｌｒｕｔｒｃｅｃ，ｎｉｎｎｎｌｎｒｔｃｉｎＲｅｅｒｈＩｓｉｔ，ｔｔｙＬｂｆｒｒｐｃｌｒｐ１ｈｎａｅｆｏｉａｉｌｅＳｉｎｅＥｖｒｍｅｔｄＰａｔｏｅｔｓａｃｎｔｕｅＳａｅＫｅａｏｏｉａｏｓＴＡｇｃｕｏａＰｏｔＴＣ
ｅｉｏｍｅｔａｓｎｒｍｎｐｏｅｓｐｏａｔｃ，ｌｇｌｏｅｒｔｏｒｍｉｕｅｉｎｒａｉｇｙｒｃｇｚｄａｏｒｂｕｉｏｓｉｃｎ－ｎｖｒｎｎｒｉｇｆｏｎｏ —ａｐｒｖｄｕｅ，ｏｒｐｒｃｉｅｉｌａｐａｉｎｓｏｓｓｓｉｃｅｓｎｌｅｏｎｉｅｓｃｎｔｉｅｉｔｎｇｔｏｌｏｔｍｉｔｏａｎａｉｎ．Ｓ，ｓｒｅｎｏｃｏｒａｉｍｓｗｉｈｈｉｈｄｅｒｄｉｇａｌｔｃｏｃｅｎｉｇｓｍｅｍｉｒｏｇｎｓｔｇｇａｎｂｉｙｂｅｏｍｅｍｐｏｔｎ．ＡａｔｒａｓｒｉａｄＬ一３ｓｉｏａｅｉｓｉｒａｔｂｃｅｔａｎｎｍｅｉ９ｗａｓｌｔｄ

多菌灵降解菌的鉴定及降解条件初步优化

多菌灵降解菌的鉴定及降解条件初步优化作者：徐惠娟胡典典张虹来源：《湖北农业科学》2015年第10期摘要：对已分离到的多菌灵降解菌进行16S rDNA序列分析后，采用均匀设计法，优化多菌灵降解菌降解条件。

用4因素6水平混合均匀设计表，综合考察培养时间、接种量、pH、温度对多菌灵降解菌降解能力的影响。

通过二次多项式逐步回归得出最终降解条件为：培养时间6 d、接种量10%、pH 4.0、温度为45 ℃时，最优目标函数Y（降解率）为68.65%。

进一步进行盆栽试验，检测该菌在实际应用中的降解效率为59.54%。

关键词：多菌灵降解菌；均匀设计；降解条件优化；盆栽试验中图分类号：Q939.9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）10-2372-02DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.10.016多菌灵是一种高效广谱低毒的内吸性杀菌剂，广泛应用于工业和农业生产，主要用于水果保鲜、蔬菜、果树和谷类作物的真菌病害防治[1]。

多菌灵化学性质稳定且降解半衰期长，在果蔬及土壤中的残留能对生态环境和人、畜健康造成极大危害[2]。

利用生物降解法去除多菌灵残留已成为热点。

本研究运用均匀试验设计的方法，多因素多水平地优化多菌灵降解菌对多菌灵的降解条件，评估降解菌的降解能力，为实现多菌灵残留去除的生物修复提供理论依据。

1 材料与方法1.1 试验菌株试验菌株从长期喷洒多菌灵的花卉基质土中分离纯化得到，保存于实验室内。

1.2 试剂与培养基多菌灵标准品由Adamas公司生产，纯度为98%，80%多菌灵悬浮剂为苏州遍净植保科技有限公司生产。

种子培养基参考文献[3]，降解培养基为NaCl 100 mg，K2HPO4 150 mg，KH2PO4 50 mg，MgSO4·7H2O 20 mg，（NH4）2SO4 200 mg，多菌灵20 mg，去离子水 100 mL。

pH依需要调节。

有机磷农药降解菌的筛选及其降解能力的研究

第３４卷第１期２Ｏｌ１年３月
辽宁师范大学学报（自然科学版）
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＬｉａｏｎｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）
文章编号：１０００－１７３５（２０１１）０１－００９３－０５
ｏ１３４Ｎｏ．１Ｍａｒ．２０１１
有机磷农药降解菌的筛选及其降解能力的研究
姜华，石爽。，胡晓静。
（１．辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连１１６０２９；２．沈阳音乐学院大连校区，辽宁大连１１６６５０３．辽宁出入境检验检疫局，辽宁大连１１６００１）
胡晓静（１９６２一），女，辽宁大连人，辽宁｝｝；入境检验检疫局高级Ｔ程师．Ｅ—ｍａｉｌ：ｊｘｈｕ＠２６３．ｎｅｔ
９４
辽宁师范大学学报（自然科学版）
第３４卷
度与对照处理的比值．其公式为：降解率：＝＝（Ｋ—Ｍ）／Ｋ（Ｋ一不含目的菌测定液的乐果浓度；Ｍ一含目的菌测定液的乐果浓度）．１．２．３菌种鉴定采用全自动微生物分析仪］．１．２．４目的茵生长曲线及ｐＨ值、温度对其生长影响的测定采用单因素试验法逐一考察多种因素对目的菌生长的影响【４］．１．２．５菌株对农药耐受性的测定分别以不同浓度的乐果培养基，于３０℃ 、１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养目的菌种，测定ＯＤ。。值、计算菌浓度及其对乐果的耐受性．１．２．６农药降解茵对乐果污染土壤修复效果的检测土壤全Ｎ、全Ｐ、速效磷、速效钾、ｐＨ和有机质含量的测定采用常规方法［４］．

假单胞菌L-3对氧化乐果降解条件的优化

并通过正交旋转组合实验优化设计，优选出最适的碳源、氮源和磷源及其质量浓度；菌株在不同对
的温度、Ｈ值、种体积分数、始氧化乐果质量浓度环境条件下进行降解，ｐ接初通过测定降解率优化出最适的环境条件。结果表明，菌株Ｌ３最适降解条件为：－蔗糖１７ｇｄ牛肉蛋白胨０９／Ｌ，＿／Ｌ，．２ｇｄＫＨ２Ｏ０１４ｇｄ最佳的降解环境条件为ｐ７３Ｃ、种体积分数３、始氧化乐果质量Ｐ．８／Ｌ；Ｈ、０口接初浓度为５／；化后对氧化乐果的降解率高迭８．９／０ｍｇＬ优２５。９６
ＫＨ２ＰＯ４Ｔｈｅｏｉａｅｒｄｔｏｎｒｍｅａｏｎｔｏａ．ｐｔｍｌｄｇａａｉｎｅｖｉｏｎｎｔｌｃｄｉｉｎｗｓｐＨ．７０，
３ ℃ ，３ｉｏｕｕｓｚ，５／ｎｔｌｆｌｔｃｎｅｔａｉｎＯｎｃｌｍｉｅ０ｍｇＬｉｉａｏｉｏｃｎｒｔｏ．Ｗｉｈｐｉｎｃｎｉｉｎ，ｉｍａｔｔｅｏｔｈｍｕｏｄｔｏｓ
文章编号：６３１８Ｉ０００ — ７８０１７ — ６９１）５０８ — ８２
假单胞菌Ｌ３一对氧化乐果降解条件的优化
王立东阮长青一，郎双静，
（．黑龙江省农产品加工工程技术研究中心，龙江大庆１３１；２１黑６３９．黑龙江八一农垦大学食品

南疆梨园有机磷降解菌的分离及其降解谱研究

酯（氧化乐果的有效成分，简称Ｏｐｓ１）、２，２一二氯乙烯基二甲基磷酸酯（敌敌畏的有效成分，简称Ｏｐｓ２）、０，（）－二
降解已有报道，降解菌包括木霉［６］、尼古丁节杆菌［７］、鞘氨醇单胞菌等］，不同的菌株降解的能力及特性不同，
第一作者简介：杨瑞￣（１９８０－），女，博士研究生，讲师，现主要从事生物学等基础教育研究工作。Ｅ－ｍａｉ１：ｙａｎｇｒｕｉｈｏｎｇ９９＠１６３．ｃｏｎ－１．责任作者：王纯利（１９５９－），男，副教授，现主要从事环境微生物研
这３株菌株分别为假单孢茵、芽孢杆菌和土壤杆菌；不同菌株对有机磷农药的降解谱存在差异，其中假单孢茵ＤＹＹ－３的降解能力较其它２株茵高。该研究结果为今后关于菌株复配制剂及其田
间应用奠定了良好的基础。
关键词：生物降解；有机磷；土壤细菌；降解谱
理的使用，给环境和人类健康带来了极大的危害ｌ＿１］。有
机磷化合物是一类与人类和昆虫中枢神经系统有关的胆碱酯酶的抑制剂，而胆碱酯酶与神经递质乙酰胆碱的
以南疆常年使用有机磷农药的梨园土壤为研究对象，分离其中对有机磷农药有降解作用的细菌，同时检测所获得
很多，毒性及残留期因种类而有所不同。Ｏｐｓ组分的降解可由生物学因子介导＿２］，如Ｏｐｓ杀虫剂的降解受到生物作用而加速降解，在其中起重要作用的不同种类的微生物已被发现＿３］。有机磷在自然条件下可通过环境降解，然而降解效率不高，而且不能完全降解［４］。近几年来，人们试图通过结合微生物降解的方法来提高土壤中

一株新的尼古丁降解菌的分离鉴定及降解特性

一株新的尼古丁降解菌的分离鉴定及降解特性作者：陈辰朱润琪倪新程等来源：《中国烟草科学》2019年第01期摘 ;要：针对降解高毒、高危害的尼古丁微生物种类较少的实际情况筛选出具有高尼古丁降解活性的菌株，探究其降解条件及降解特性，为尼古丁的生物降解提供新的微生物资源。

从烟草种植大田土壤分离纯化得到一株具有高尼古丁降解能力的菌株，对其形态学、生理生化特征、16S rRNA基因序列同源性进行了分析鉴定，探究了不同条件下尼古丁降解特性并对其动态降解过程进行了HPLC分析。

经鉴定命名为Stenotrophomonas sp. ZUC-3，适宜的发酵条件为：温度30 ℃、起始pH 7.0、接种量10%、培养转速180 r/min，此条件下尼古丁降解率可达到91.53%，HPLC分析显示了ZUC-3降解尼古丁过程的动态变化及其高效性。

研究结果为尼古丁生物降解提供了新的微生物资源，对烟草行业可持续发展具有理论意义与实际应用价值。

关键词：尼古丁;生物降解;Stenotrophomonas sp. ZUC-3;降解特性中图分类号：TS41+1 ;;;;;;;;;文章编号：1007-5119（2019）01-0089-09 ;;;;;DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2019.01.012Abstract： The aim of this study was to isolate and identify a strain with high nicotine degradation activity in the situation where there are few kinds of nicotine-degrading microorganisms available， and to explore the conditions and characteristics of nicotine degradation， which will provide a new microbiological resource for the biodegradation of nicotine. A strain with high activity of nicotine degradation was obtained by isolation and purification from tobacco field soil. The strain was identified by morphological， physio-biochemical and 16S rRNA gene analysis， and the characteristics of nicotine degradation under different conditions were investigated with dynamic process by HPLC analysis. The optimum condition of nicotine degradation by Stenotrophomonas sp. ZUC-3 was 30 ℃ with 10% inoculum at the initial pH 7.0 and 180 r/min， in which the rate of nicotine degradation by Stenotrophomonas sp. ZUC-3 reached 91.53%. HPLC analysis illustrated the dynamic process and high efficiency of nicotine degradation. The study provides a new microbiological resource for biodegradation of nicotine and has theoretical and practical significance in tobacco industry.Keywords： nicotine; biodegradation; Stenotrophomonas sp. ZUC-3; degradation characteristics尼古丁（Nicotine）具有高毒性，可透过生物膜，化学结构稳定不易降解[1]，并且是致癌物质烟草特有亚硝胺（TSNAs）的重要前体物[2]，由于其特殊的水溶性，能够与水以任意比例互溶，对人类生活及生态环境是一个极大的威胁[3]。

有机磷农药乐果降解的研究现状与进展_黄雅

[ 11]
从常
年施用农药乐果的土壤中 , 通过富集培养和平板稀释法 , 分离得到一株具有较强降解有机磷农药乐果能力的真菌菌株 L 3, 通过形态观察及真菌的 I T S ( i n t e r n a l t r a n s c r i b e ds p a c e r ) 检测 , 对其进行了鉴定 , 同时对其性质进行了初步研究。结果表明 , 该菌株为曲霉菌。在查氏培养基中最高能耐受 6 000 m g /L 的乐果 ; 在 28℃、p H 6. 0 的条件下生长较好 , 120 h 对乐果的降解率达 29. 2%, 并且对其他有机磷农药也有较好的降解作用 , 120 h 对乙酰甲胺磷和辛硫磷的降解率分别达 65 . 9%和 95. 3%, 初步确定菌株 L 3 对有机磷农药的降解有一定的广谱性。徐会兰 [ 6] 等从长江水体中分离到一株最优功能菌株 J D 1, 经初步鉴定该菌株为琼氏不动杆菌属。该菌株最高可耐受质量浓度 600 m g /L 的乐果 , 降解乐果的最适温度为 32 ℃, 在 30℃ ～ 37℃ 的广泛温度下仍生长良好 , 最适 p H值为 7. 2 左右 , 具有广泛的 p H值生长范围 ( p H= 5. 5 ～ 9. 0) 。研究发现 , 装液量、接种量对菌株的降解有明显影响。装液量由 3 /10 调整为 1 /5时 , J D 1 对质量浓度 100 m g /L 的乐果降解率从 21 % 提高到 51. 54%。
· 20·
第 34卷第 4 期 2009 年 4 月
黄雅等 · 有机磷农药乐果降解的研究现状与进展
V o l . 34 N o . 4 A p r .2009
菌、霉菌、放线菌等 , 通过各种生物化学反应作用参与分解乐果。其中研究较多的主要是细菌和真菌。细菌在生化上具有多种适应能力 , 容易诱发产生突变菌株 , 在降解有机磷农药的生物中占据主要的位置 , 假单胞菌属是最活跃的菌株。研究者们从受该有机磷农药污染的土壤、水体底泥或者生产车间的排水道、污水处理厂出口的污泥等受污染的环境介质中筛选、驯化、富集和分离鉴定。王华等

解磷菌的分离、筛选、鉴定及解磷能力研究

解磷菌的分离、筛选、鉴定及解磷能力研究上官亦卿;常帆;吕睿;齐凡;贾凤安;王艳;丁浩【摘要】为开发高效微生物解磷肥,利用解磷菌选择培养基(蒙吉娜卵磷脂培养基)从陕西省西安市周至县猕猴桃园农田土壤中分离出11株解磷菌,通过纯化培养,筛选出1株高效解磷菌JYP9.利用16S rDNA基因序列分析方法对该菌株的分类信息进行鉴定,鉴定结果表明该菌株为假单胞菌(Pseudomonas extremori-entalis).并用解磷圈法和液体摇瓶培养法,分别以卵磷脂为惟一磷源,确定了该菌株的最适培养温度为26℃、最适转速为200 r/min、最适起始pH为7和最适起始接种量为2％.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2019(058)001【总页数】6页(P30-34,38)【关键词】解磷菌;筛选;鉴定;最适条件【作者】上官亦卿;常帆;吕睿;齐凡;贾凤安;王艳;丁浩【作者单位】陕西省科学院,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省科学院,西安710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043【正文语种】中文【中图分类】S154.39磷是植物生长所需的一种主要营养元素，但植物对土壤中的磷元素利用率很低，严重影响着植物的生长[1]。

有机磷是土壤磷的重要组成部分，一般占土壤全磷的20%～50%，其中植酸磷占有机磷的10%～50%[2]，是土壤有机磷的主要存在形式。

解磷菌能将植物难以吸收利用的难溶性或不溶性磷转化为可利用的形态，提高土壤中磷素的利用效率，减少化学肥料的施用，降低农业投入成本。

因此，对土壤环境进行微生物修复是提高作物产量、解决土壤速效磷缺乏的重要途径之一[3，4]。

植物对水溶液中乐果的降解及影响因素分析

中围分类号：Ｘ５２９文献标识码：Ａ文章编号：１７．１５（０６）０．０３０６２２７２０１０２．４
中国环境有机污染日益严重，环境污染治理与修复已得到政府的高度重视。由于常规的物理和化学修复技术成本昂贵，一般用于点源污染的治理与修复。微生物技术虽可广泛用于点源和面源污染的治理与修复，但特定的微生物只能降解特定类型的化合物，从而限制了它们在水体治理和修复中的应用［１】。植物修复作为直接利用绿色植物系统通过转移、降解或固定的方式修复污染的土壤、沉积物、水和空气的新兴技术。不仅具有美学价值，价格低廉，仅需太阳能驱动，能够去除大部分的环境污染物，且对于浅层轻度污染的区域非常有效【２Ｊ。近年
１１试验材料．
．（）Ｔ４．ＮＨ４ＭｏＯ２４６０５ｍ・ＤＡ０４・～ｇ『，ＥＴ．４ｍｇ。为抑制藻类的生长，【７Ｌ
培养液中还加人ｌｇ～ｕＯ。０－ＣＳ４ｍＬ１３试验方法．１．三种植物的降解效果比较．１３在２０Ｌ三角瓶中加入１５Ｌ含５ｇ乐５ｍ２ｍ・ｍＵ果的霍格兰氏液，并加入１ｍ・氨苄青霉素以抑０ｇＬ制微生物生长，以消除微生物作用对实验结果的影响【向三角瓶中移人经过预培养生长良好的植株，８】。并称得各植株的鲜质量在１之间，在１光２ｇ２ｈ照周期下进行室内培养。培养液初始的ｐＨ约为５，电导率为２ｍＳｍ．１－＂３ｃ。之后每天监测溶液的ｐＨ值，使之维持在５６～之间，适宜植物生长【ＪＩ。每种Ｉ

不同驯化方式对微生物降解乐果的影响

不同驯化方式对微生物降解乐果的影响沈齐英,　刘欢,　张英俊(北京石油化工学院化工系,北京　102617)摘　要:为了获得有效降解有机磷农药乐果的微生物,采用北京大兴黄村施用过乐果的土壤为菌源,以乐果作为唯一碳源和能源采用一次性大剂量冲击驯化和逐渐加量的驯化方式分离得到7株对乐果有一定降解能力的微生物。

微生物降解乐果实验结果显示:不同的驯化方式对微生物的降解能力有明显的影响,大剂量冲击驯化获得的微生物对乐果的降解能力优于逐渐加量驯化获得的微生物。

关键词:乐果;　微生物;　驯化方式;　降解中图分类号:Q939 文献标识码:A 文章编号:100326504(2005)022******* 农药既是有毒又是农业生产中不可缺少的物质,因此,合理利用农药并解决由农药引起的环境污染问题显得尤其重要。

有机磷农药是一类使用非常广泛,效果较好的杀虫剂,在农业生产中起重要作用,对有机磷农药引起污染的治理在农药污染防治中占有重要位置。

研究表明利用微生物及其产生的降解酶对环境中有机磷农药的净化处理是行之有效的,并已显示出良好的应用前景[1-2]。

1　实验材料菌源:北京市大兴区黄村施用过有机磷农药乐果的土壤。

无机盐培养基为:KH2PO40.5g,K2HPO40.5g, MgSO40.2g,CaCl20.1g,NaCl0.2g,MnSO4痕量, FeCl2痕量,N H4NO31.0g,H2O1000mL。

选择培养基(琼脂平板):牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,氯化钠2.5g,琼脂10g,乐果原液1mL,水500mL。

斜面培养基:牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,氯化钠2.5g,琼脂10g,水500mL。

富集培养基:牛肉膏2.5g,蛋白胨5.0g,氯化钠2.5g,水500mL。

HZQ-C型空气浴振荡器,哈尔滨市东明医疗仪器厂;D H3600A电热恒温培养箱,天津市泰斯特仪器有限;XSP-18B型显微镜,上海光学仪器厂;SP-2102UV型紫外可见分光光度计,上海光谱仪器有限公司;YX-280B型蒸汽灭菌器,江阴市医疗设备厂; L GR10-4.2型冷冻离心机,北京医用离心机厂;P HS -3B精密p H计,上海雷磁仪器厂。

有机磷农药降解菌的筛选、分离鉴定及其降解动力学特性研究

ｂｅｃａｕｓｅｏｆｔｈｅ
ｅｃｏｎｏｍｉｃ，ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ
ｕｓｅ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
ｐｅｓｔｓｃｏｎｔｒ０１．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｗｉｄｅｓｐｒｅａｄｔｈｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｔｈｒｅａｔｅｎｅｄ
ｏｆｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｈａｓｃａｕｓｅｄｓｅｒｉｏｕｓｐｏｌｌｕｔｉｏｎｔｏｓｕｒｖｉｖａｌａｎｄｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．
ｆｒｏｍ
ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｐｅｓｔｉｃｉｄｅ－ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｉｎｃｌｕｄｉｎｇ
ｓｔｒａｉｎ
Ｍ１ａｎｄＭ２，
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ
ａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，１６ＳｒＤＮＡ
Ｖ
兰州理工大学学位论文原创性声明
本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。
ａｎｄＭ２
ｏｆｓｏｉｌ
ｗｅｒｅ
ｈｉｇｈｅｒ
ｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｎａｔｕｒａｌｃｏｕｌｄｔｏｌｅｒａｔｅ
ａｎｄ
ｔｏ
ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｃａｐａｃｉｔｙ
ｐａｒｔｉｃｌｅｓ．Ｔｈｅｙ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｕｐ
５００ｍ＃Ｌ
ｏｆｍｅｔｈｙｌｐａｒａｔｈｉｏｎ，５００ｍｇ／Ｌｏｆｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ

实验一富集培养法对农药降解菌的分离及培养

实验一富集培养法对农药降解菌的分离实验目的：利用富集培养和稀释平板法对农药降解细菌进行分离实验原理：富集培养，指从微生物混合群开始,对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。

在适于目标微生物而不适于其他微生物生长的条件下继续培养，则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。

通过连续富集培养的方法分离降解高浓度污染物的环保菌。

如以农药作惟一碳源对样品进行富集培养，待底物完全降解后，再以一定接种量转接到新鲜的含农药的富集培养液中，如此连续移接培养数次。

同时将农药的浓度逐步提高，便可得到降解苯胺占优势的菌株培养液，采用稀释涂布法或平板划线法进一步分离，即可得到能降解高浓度农药的微生物。

实验材料：豆磺隆，菜园土壤，富集培养基,基本培养基实验步骤：1. 培养基的配置（参照课堂笔记）富集培养基配制：基础培养基：普通培养基：将上面各物溶解于水，在121℃蒸汽下灭菌20 分钟。

2. 取菜园土壤2.0g于100ml富集培养基中，豆磺隆浓度为100mg/L,置于37℃，180rpm 摇床培养。

以后每周培养一次，以接种量10%接入新鲜培养液中，并逐渐提高豆磺隆用量，至培养液中的豆磺隆浓度达到500mg/L,然后用基础培养基代替富集培养基，每隔1-2周移种一次，豆磺隆的浓度仍为500mg/L。

如此驯化2周以上，最后用平板划线法在普通培养基上分离好氧性降解菌。

实验结果：1.利用富集培养法是否分离得到农药降解细菌，如果不是请分析原因并重做。

2.描述你分离到的菌落的特征。

实验二农药降解菌的分离纯化实验目的了解平板划线分离纯种的原理，并熟练掌握该操作法。

实验原理平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。

有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。

三氯乙烯降解菌的分离鉴定及其降解特性

生态环境 2008, 17(5): 1778-1783 Ecology and Environment E-mail: editor@基金项目：国家自然科学基金项目(30670391)；国家重点基础研究发展规划(973)项目(2004CB418505)作者简介：王新新(1983年生)，男，硕士研究生，主要从事环境微生物学方面的研究。

E-mail: wangxx2005@ *通讯作者收稿日期：2008-04-24三氯乙烯降解菌的分离鉴定及其降解特性王新新1,2，张颖1*，韩斯琴1，王元芬1,2，李慧11. 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室，辽宁沈阳110016；2. 中国科学院研究生院，北京 100049摘要：三氯乙烯是一种具有“三致”效应的有机氯代烃化合物，作为一种重要的化工原料在工业上广泛应用，同时也造成了大量的三氯乙烯进入自然环境，引起了严重的环境污染。

为获得更为丰富的三氯乙烯降解微生物资源，利用水-硅油双相系统从实验室高浓度三氯乙烯胁迫底泥中，分离筛选得到两株三氯乙烯降解菌WF1、FT10。

在三氯乙烯初始质量浓度为5 mg·L -1的条件下，培养72 h ，菌WF1、FT10对三氯乙烯的降解率分别为53.36%、48.06%；在500 mg·L -1乙酸钠作为共代谢基质的情况下，降解率分别为55.95%、55.62%，降解速率明显提高。

根据形态学观察、16项生理生化实验和16S rRNA 序列分析结果，将菌株WT1归为Achromobacter xylosoxidans ，将菌株FT10归为Sporosarcina aquimarina 。

对菌株培养条件进行优化，经SlideWrite 统计软件拟合，菌株WT1和FT10在牛肉膏蛋白胨液体培养基上的最适生长温度分别为33.7 ℃和35.4 ℃，最适生长pH 分别为7.6和7.9。

关键词：三氯乙烯；降解菌；分离鉴定；底泥；无色杆菌；八叠球菌中图分类号：X172 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2008）05-1778-06三氯乙烯是一种易挥发的有机氯代烃化合物，作为一种优良的溶剂广泛应用于多个行业。

实用文档其他之解钾菌的分离、鉴定及解钾能力

解钾菌的分离、鉴定及解钾能力摘要：为了开发高效微生物解钾肥，利用解钾菌选择培养基，从陕西省周至县猕猴桃园农田土壤中分离出具有解钾能力的菌株共计12株，通过纯化培养，筛选出1株高效解钾菌jk3。

利用16srdna基因序列分析方法对该菌株的分类信息进行鉴定，鉴定结果表明该菌株为胶质芽孢杆菌（paenibacillus mucilaginosus），并通过试验确定该菌株的最适培养条件：初始接种量1.5%，摇床转速200 r/min，培养温度30 ℃，初始ph值为7，最佳碳源为糖蜜，最佳氮源为麸皮。

试验结果可为解钾菌jk3的大规模工业化生产提供数据支持。

关键词：解钾菌；分离；筛选；鉴定；最适条件中图分类号： s182 文献标志码： a文章编号：1002-1302（2016）11-0471-04钾是植物生长所必需的三大营养元素之一，一般植物体内含钾量占干物质质量的0.3%～0.5%[1]。

钾的营养功能主要表现于钾能激活多种酶的活性，目前已知的多种酶需要一价阳离子活化，其中钾离子是植物体内最有效的激活剂；钾能促进光合作用，提高二氧化碳的同化率；钾可促进作物体内物质的合成与转运[2]；钾能维持细胞膨压，促进植物生长，植物各种正常代谢过程都需要细胞维持正常的结构和形态，而细胞的正常结构和形态的维持又需要一定的渗透压，钾离子和氯离子正是维持植物细胞渗透压的主要离子；钾能增强植物抗逆性[3]，钾也能增强作物抗寒、抗旱、抗高温、抗病、抗盐、抗倒伏等的能力，从而提高其抵抗外界环境的忍耐能力。

然而，随着种植业结构的调整，农作物产量和复种指数的不断提高，土壤中的耗钾量不断增加，全国耕地土壤速效钾含量以2mg/kg速度下降，南方各地土壤缺钾情况更为严重[4-5]。

一方面，我国可溶性钾矿资源严重匾乏，国家每年花巨额外汇进口钾肥仍难以满足农业上对钾肥的需要[6-7]。

另一方面，土壤自身含有大量的含钾矿物，只是它们主要以稳定的硅铝酸盐形式存在，其钾不能为作物吸收利用[8]。