miR-33a通过TWISTET-1信号级联通路调控骨肉瘤耐药的分子机制探究
IL-33调控NF-κB
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2023.09.005IL-33调控NF-κB/Twist信号通路促进肺泡上皮细胞上皮-间质转分化的机制研究①高云星②付裕③陈晓李泽朋何晓伟李先伟（皖南医学院药学院药理学教研室，芜湖 241002）中图分类号R392.12 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）09-1814-08［摘要］目的：探究IL-33是否通过激活NF-κB/Twist信号通路，进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生上皮-间质转分化（EMT）而促进肺纤维化（PF）的进程。
方法：C57BL/6小鼠48只，随机分成对照（CON）组、博莱霉素（BLM）组、BLM+IL-33 （30 μg/kg）组和BLM+抗IL-33抗体（Anti-IL-33 Ab）（100 μg/kg）组，每组12只。
气管注射BLM（5 000 U/kg）诱导PF小鼠模型。
造模后每隔1 d腹腔注射1次重组IL-33和抗IL-33抗体，连续注射3周。
HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况。
ELISA检测血浆IL-33的水平。
免疫组化检测肺组织IL-33跨膜受体ST2L的表达。
体外培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞，实验设Control组、IL-33（100 ng/ml）组、IL-33+二甲基亚砜（DMSO）组及IL-33+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC， 100 μmol/L）组，每组设复孔6个。
细胞先用PDTC或DMSO预处理1 h，再用IL-33处理48 h。
RT-PCR检测肺组织或肺泡上皮细胞中Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA的表达。
Western blot检测肺组织和（或）肺泡上皮细胞IL-33、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达及细胞核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平。
骨肉瘤化疗耐药机制及逆转治疗的进展
2012年11月第9卷第32期·综述·CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报骨肉瘤是青少年最常见的一种骨源性恶性肿瘤，在原发性骨恶性肿瘤中发病率最高。
单纯手术治疗其治愈率仅有15%～20%，伴随着新辅助化疗其5年生存率提高到70%左右[1]。
然而对化疗药物的多药耐药（multidrug resistance ，MDR ）严重影响了其临床疗效和长期生存率。
有数据显示复发患者生存率不足30%[2-3]。
因此，研究骨肉瘤MDR 发生机制，寻找有效地预防或逆转耐药的方法已成为目前骨肉瘤研究的热点和难点，也是临床亟待解决的问题。
现对近年来国内外对骨肉瘤耐药机制及逆转研究现状予以简要概述。
1骨肉瘤化疗的耐药机制骨肉瘤化疗耐药的产生是多种耐药机制共同作用的结果，是多因素、多水平、多基因参与的复杂过程，主要与膜转运蛋白、细胞凋亡、细胞内解毒系统、肿瘤干细胞等有关。
1.1细胞膜转运蛋白异常1976年Juliano 等首次提出跨膜转运蛋白的药泵作用是导致肿瘤细胞耐药的重要机制，后来被称为“经典MDR ”。
ABC 转运蛋白（ATP-binding cassette transportes ，ABC trans -porters ）超家族成员，包括P-糖蛋白（P-glycoprotein ，P-gp 、ABCB1）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance associated protein ，MRP1ABCC1and MRP2ABCC2）、乳腺癌多药耐药相关蛋白（breast resistance protein ，BCRP ABCG2）等，是目前公认的在骨肉瘤耐药中起重要作用的药泵蛋白[4]。
这些蛋白与药物结合，通过三磷酸腺苷（ATP ）供能，改变蛋白构象，将细胞内的抗肿瘤药物排出细胞外，从而降低细胞内药物有效浓度，导致肿瘤细胞耐药[5]。
黄纲等[6]研究发现骨肉瘤对化疗不敏感与MDR1、P-gp 表达有关。
miR-29 a在骨肉瘤中的表达及预后研究
miR-29 a在骨肉瘤中的表达及预后研究王喆;刘丽娜【期刊名称】《河南医学研究》【年(卷),期】2018(027)006【摘要】目的研究miR-29a在骨肉瘤及配对癌旁中的表达情况,及与其临床资料的关系.方法选取2012年3月至2014年12月南阳市第二人民医院收治的32例骨肉瘤患者,采用荧光实时定量PCR(real-time reverse transcription,qRT-PCR)的方法检测癌及癌旁组织中miR-29a的表达情况,分析其与患者临床资料及预后的关系.结果癌组织中miR-29a的平均表达量比癌旁组织下调.miR-29a与骨肉瘤病理分级呈负性相关关系,和临床分期呈正性相关关系(P均<0.05).Cox回归多因素分析发现临床分期和miR-29a为患者独立的预后因子.结论 miR-29a在骨肉瘤的发生及进展中发挥关键的调节作用,有作为骨肉瘤的诊断及预后标志物的潜力.【总页数】4页(P974-977)【作者】王喆;刘丽娜【作者单位】南阳市第二人民医院检验科河南南阳 473012;南阳市第二人民医院肿瘤科河南南阳 473012【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.miR-29在胃癌患者血清中的表达及其对预后的影响 [J], 陈陵;陈先华;李学成;熊晓峰;陈霞;高军;邹利全2.临床研究趋化因子CXCLl4在骨肉瘤中的表达及其与预后的关系 [J], 卢金昌; 王晋; 雍碧城; 宋国徽; 赵志强; 唐清连; 邹昌业; 尹军强; 谢显彪; 沈靖南3.miR-34a在骨肉瘤患者血清中的表达及在诊断和预后中的价值 [J], 骆浪;何伟;张磊4.SP6在骨肉瘤中的表达及预后影响分析 [J], 孙超;海娜;赵劲民5.骨肉瘤中survivin蛋白与PCNA的表达及其与预后关系的研究 [J], 潘哲尔;顾湘杰;黄加张;李剑敏;王群姬;叶澄宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
多发性骨髓瘤免疫调节药物耐药的机制及应对策略研究进展
多发性骨髓瘤免疫调节药物耐药的机制及应对策略研究进展段圆圆1，李子坚21 兰州大学第一临床医学院，兰州730000；2 兰州大学第一医院血液科摘要：免疫调节药物作为多发性骨髓瘤治疗方案中的常用药，其耐药性的发生与CRBN表达下调或基因改变、CRL4及Ikaros家族锌指蛋白1/3突变、表观遗传改变、信号通路失调、转运蛋白及RUNX表达异常等多种机制相关。
患者发生耐药后容易变得复发难治，病情加速进展。
新一代免疫调节药物、蛋白降解靶向嵌合体及表观遗传疗法等针对免疫调节药物耐药的新型治疗方法相继开发，有望改善多发性骨髓瘤患者的临床结局。
然而，免疫调节药物耐药机制及逆转耐药的策略研究主要处于细胞实验水平或早期临床试验阶段，未来还需要在大样本量患者中进行全面评估。
关键词：免疫调节药物；肿瘤耐药；多发性骨髓瘤；CRBN蛋白；蛋白降解靶向嵌合体；表观遗传疗法doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.20.028中图分类号：R733.3 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）20-0111-05多发性骨髓瘤（MM）是血液系统常见恶性肿瘤，经过免疫调节药物及蛋白酶体抑制剂等标准治疗［1］，多数患者生存状况明显改善，但绝大多数患者在疾病后期会出现耐药甚至多药耐药。
虽然针对MM的新药如双特异性抗体及嵌合抗原受体-T淋巴细胞等不断研发，但免疫调节药物仍然是当前治疗MM的关键药物。
免疫调节药物主要通过结合E3泛素连接酶底物受体（CRBN）蛋白靶点，改变E3连接酶的底物特异性，选择性泛素化和降解Ikaros家族锌指蛋白（IKZF）1/3［2］，诱导干扰素调节因子4（IRF4）和MYC下调，从而发挥直接细胞毒性效应。
然而，耐药性的出现限制了免疫调节药物疗效的发通信作者：李子坚（E-mail： ldyy_lizj@）［30］KNOERL R， MAZZOLA E， WOODS H， et al. Exploring influ‑encing factors of anxiety improvement following mindfulness-based music therapy in young adults with cancer［J］.J MusicTher， 2023，60（2）：131-148.［31］《中成药治疗优势病种临床应用指南》标准化项目组.中成药治疗癌因性疲乏临床应用指南（2020年）［J］.中国中西医结合杂志，2021，41（5）：534-541.［32］刘鹏，彭昭文，尤海玲，等.基于益气温阳理论应用中药沐足联合电艾灸治疗癌因性疲乏（CRF）临床疗效及安全性观察［J］.现代肿瘤医学，2023，31（2）：347-353.［33］何佩珊，潘国凤，杨公博，等.“温阳益气方”穴位贴敷治疗乳腺癌化疗期间疲乏的临床研究［J］.时珍国医国药，2019，30（2）：391-393.［34］LAM C S， PENG L W， YANG L S， et al. Examining patterns of traditional Chinese medicine use in pediatric oncology： A system‑atic review，meta-analysis and data-mining study［J］.J IntegrMed， 2022，20（5）：402-415.［35］LAM C S， CHENG Y M， LI H S， et al. Use of complementary or alternative medicine and potential interactions with chronic medi‑cations among Chinese survivors of childhood cancer［J］. J Can‑cer Surviv， 2022，16（3）：568-581.［36］LI D， LI Y， BAI X， et al. The effects of aromatherapy on anxiety and depression in people with cancer：a systematic review andmeta-analysis［J］. Front Public Health， 2022，10：853056.［37］STAVINOHA P L，OLSTHOORN I M，SWARTZ M C，et al.Non-pharmacological sleep interventions for pediatric cancer pa‑tients and survivors： a systematic review protocol［J］. Syst Rev，2021，10（1）：166.［38］QI Y， LIN L， DONG B， et al. Music interventions can alleviate cancer-related fatigue： a metaanalysis［J］. Support Care Cancer，2021，29（7）：3461-3470.［39］LEVESQUE A， CARU M， DUVAL M， et al. Cancer-related fa‑tigue in childhood cancer survivors：a systematic scoping reviewon contributors of fatigue and how they are targeted by non-phar‑macological interventions［J］.Crit Rev Oncol Hematol，2022，179：103804.［40］HILFIKER R， MEICHTRY A， EICHER M， et al. Exercise and other non-pharmaceutical interventions for cancer-related fatiguein patients during or after cancer treatment：a systematic reviewincorporating an indirect-comparisons meta-analysis［J］.Br JSports Med， 2018，52（10）：651-658.（收稿日期：2023-04-10）111挥。
MicroRNA-451介导骨肉瘤细胞抗失巢凋亡的作用和机制研究
MicroRNA-451介导骨肉瘤细胞抗失巢凋亡的作用和机制研究研究背景骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤,好发于青少年,有高度的侵袭和转移特性,预后较差。
自二十世纪七十年代起,由于新辅助化疗的应用,骨肉瘤的五年生存率逐渐提高到65%以上,但是自九十年代以来,骨肉瘤的治疗效果进入平台期,生存率一直没有明显的提高。
骨肉瘤转移是引起患者最终死亡的主要原因,深入理解转移的机制,对于改善治疗效果有重要意义。
失巢凋亡是由细胞脱离细胞外基质引起的程序性细胞死亡。
在生理情况下,失巢凋亡可以阻止脱落的细胞重新粘附到不正确的位置上,对机体起着重要的防御作用。
肿瘤细胞初始以原发灶的形式存在,待其脱离细胞外基质后,极少数获得抗失巢凋亡能力,可以在悬浮条件下存活,进而通过血液、淋巴等途径转移到其他器官增殖和分化。
目前普遍认为,在肿瘤的发生发展过程中,抗失巢凋亡是转移和侵袭的重要基础。
肿瘤细胞通过上皮-间质转化、激活抗凋亡的信号通路、调整细胞能量代谢等方式获得抗失巢凋亡的能力,而microRNA参与其中,起着重要作用。
MicroRNA是一类非编码的小RNA分子,miRNA基因经过RNA聚合酶II、DROSHA、DICER等酶的转录加工,最终形成成熟的miRNA。
成熟的miRNA通常和靶mRNA的3’非翻译区结合,在转录后水平调节基因表达。
目前普遍认为,miRNA不但与细胞的凋亡调控、增殖分化和胚胎发育等生理过程密切相关,还可以作为致癌或抑癌基因,在肿瘤发生发展过程中起关键作用。
MiR-451基因位于第17号染色体上,在很多恶性肿瘤中表达失调,通过不同的机制影响肿瘤的进展。
但是,miR-451对骨肉瘤细胞抗失巢凋亡的作用和可能的机制,目前尚未阐明。
第一章miR-451介导骨肉瘤细胞抗失巢凋亡目的:探讨miR-451在骨肉瘤细胞抗失巢凋亡中的作用,为临床诊疗寻找新的靶点。
方法:选用骨肉瘤U20S和Saos-2细胞株,贴壁培养模拟骨肉瘤原发灶细胞的生长状态,为贴壁培养组;建立失巢凋亡模型,模拟骨肉瘤转移灶细胞的生长状态,为失巢凋亡模型组。
Wnt信号通路在骨肉瘤发生机制中作用的研究进展
Wnt信号通路在骨肉瘤发生机制中作用的研究进展张熙;王东伟;刘爽【摘要】骨肉瘤是常见青少年恶性肿瘤,其发病机制至今不明.研究表明经典Wnt/β-catenin通路与骨恶性肿瘤,包括乳腺癌或前列腺癌诱发的骨转移瘤、多发性骨髓瘤以及骨肉瘤之间有着密切的关系,部分Wnt配体、受体以及共受体在骨肉瘤中异常高表达,而Wnt的抑制因子受到抑制.本文总结了经典Wnt/β-catenin通路在骨肉瘤的发生、发展中的作用,概述了Wnt信号分子异常激活与骨肉瘤进展的关系,以期对进一步深入研究经典Wnt/β-catenin通路在骨肉瘤中的影响有所帮助.【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2018(034)023【总页数】3页(P4005-4007)【关键词】骨肉瘤;Wnt信号通路;Wnt/β-catenin【作者】张熙;王东伟;刘爽【作者单位】佳木斯大学黑龙江佳木斯 154007;佳木斯大学黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学黑龙江佳木斯 154007【正文语种】中文骨肉瘤是起源于成骨间叶组织的原发性恶性骨肿瘤，约占小儿恶性肿瘤的5%。
同时，骨肉瘤发病机制不明，预后较差，伴有较高的复发率和转移风险［1］。
因此，研究骨肉瘤发生发展机制对于预防、优化临床治疗方案，提高患者生存率具有深远的意义。
近年来骨肉瘤细胞遗传学和分子生物学机制已有了较为深入的研究，原癌基因C-myc、erbB-2、SAS等，抑癌基因 Rb、p53、DCC、PTEN等，以及血管内皮生长因子、环氧合酶-2等都已证实与骨肉瘤存在着密切关系。
一般认为，骨肉瘤的发生是由于成骨细胞分化异常所致，而Wnt/β-Catenin在成骨细胞的增殖、分化以及迁移过程中扮演着重要角色，许多骨肿瘤中已发现Wnt/β-Catenin信号通路的异常激活。
异常的Wnt/β-Catenin信号通过上调致癌基因（如c-Myc、CCND1、c-MET）引起骨肉瘤的发生［1］。
越来越多的研究表明Wnt/β-Catenin信号分子与骨肉瘤的发生发展存在着密切关系，本文综述了wnt信号分子在骨肉瘤发生发展中的影响，望其成为治疗骨肉瘤的突破口。
LIMK1调控骨肉瘤细胞耐药的实验研究及机制分析
ＣＦＰ ＬＩＭ Ｋ１一Ｗ Ｔ ｃＤＮＡ ｂｙ ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｔｒａｎｓｆｅｃｔ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ ｃｅｌｌｓ Ｍ Ｇ６ ３．ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎｅｄ ｂｙ ＲＴ—ＰＣＲ ．ＣＣＫ一８ ｍ ｅｔｈｏｄ ｉｓ ｕｓｅｄ ｔＯ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
摘 要 ：目 的 探 索 ＬＩＭＫ１（ＬＩＭ Ｋｉｎａｓｅ１）基 因 表 达 上 调 对 人 成 骨 肉 瘤 细 胞 耐 药 的 影 响 ，分 析 其 可 能 的 机 制 。方 法 应 用 阳离 子 脂 质 体 介 导 的方 法 ，将 含 有 ＬＩＭＫ１激 酶 活 性 的 重 组 质 粒 ＣＦＰ—ＬＩＭＫ１一ｗ Ｔ ｃＤＮＡ 按 不 同浓 度 梯 度 瞬 时 转 染 人 骨 肉瘤 细 胞 ＭＧ６３，通 过 ＲＴ—ＰＣＲ 验 证 转 染 效 率 ；采 用 ＣＣＫ一８法 检 测 上 述 细 胞 对 不 同 浓 度 长 春 新碱 的耐 药 情 况 ，并通 过 Ｍｕｌｔｉ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ Ｍａｔｒｉｘ（ＭＥＭ ）和 Ｔｈｅ Ｄａｔａｂａｓｅ ｆｏｒ Ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ，Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ （ＤＡＶＩＤ）数据平台筛选 ＬＩＭＫ１共表达基因及其富集信号通路 ，分析可能 的耐药机 制 。结果 随着转染 浓度梯度增 加 ，ＬＩＭＫ１及 ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １（ＭＤＲ１）基 因表 达 呈 明 显 上 调 趋 势 ，人 骨 肉瘤 细 胞 ＭＧ６３的 耐 药 程 度 增 强 。ＬＩＭＫ１及 其 共 表 达 基 因 主 要 富 集 的 信 号 通 路 有 Ｒａｐ１ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ、ＴＮＦ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ等 。结 论 ＬＩＭＫ１基 因表 达上 调促 进人 骨 肉 瘤 细 胞 耐 药 ，上 述 作 用 可 能 通 过 Ｒａｐｌ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ、ＴＮＦ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ等
低表达miR-33a诱导胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药
《中国癌症杂志》2015年第25卷第2期CHINA ONCOLOGY 2015 Vol.25 No.287低表达miR-33a诱导胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药梁晨，王瑧，李影奕复旦大学附属肿瘤医院肿瘤研究所，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032 ［摘要］ 背景与目的：胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤。
由于其对一线化疗药物吉西他滨的耐受，往往导致预后较差。
MicroRNA(miRNA，miR)是一类非编码小RNA，参与肿瘤的多种生物学功能。
miR-33a作为代谢相关的miRNA被广泛研究，而与耐药之间关系的报道较少。
该研究通过探讨miR-33a参与胰腺癌吉西他滨耐药及其作用解析，为胰腺癌化疗提供新的理论依据。
方法：采用原位杂交方法检测胰腺癌组织中miR-33a的表达情况；采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各胰腺癌细胞系中miR-33a的表达情况。
利用SW1990和Miapaca-2胰腺癌亲本细胞株，构建吉西他滨耐药细胞株(SW1990res，Miapaca-2res)及miR-33a稳定表达细胞株(SW1990-miR-33a，Miapaca-2-miR-33a、SW1990res-miR-33a和Miapaca-2res-miR-33a)；采用细胞毒性实验检测miR-33a的表达对胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的影响。
结果：miR-33a在胰腺癌组织样本中普遍低表达。
与HEK293T正常人胚肾细胞相比，其在各胰腺癌细胞系中均呈低表达。
miR-33a过表达可以增加胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性，能有效逆转胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。
结论：miR-33a在胰腺癌组织中低表达，导致胰腺癌患者对吉西他滨获得性耐药。
增加miR-33a表达，从而增强了胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性，为开发新型胰腺癌分子靶向治疗药物，联合化疗提供新的理论依据。
［关键词］ miR-33a；胰腺癌；吉西他滨耐药 DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2015.02.002 中图分类号：R735.9 文献标志码：A 文章编号：1007-3639(2015)02-0087-08Down regulation of miR-33a is involved in gemcitabine chemoresistance in human pancreatic cancer LIANG Chen, WANG Zhen, LI Yingyi (Cancer Research Institute, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China)Correspondence to: LI Yingyi E-mail: liyingyi@ ［Abstract］ Background and purpose: Pancreatic cancer is one of the most deadly human malignant neoplasms. Resistance to chemotherapeutic drugs is a major reason responsible for poor prognosis in the treatment of pancreatic cancer patients. MicroRNA (miRNA, miR) is a family of small non-coding RNA molecules, dysregulated miRNA is associated with various tumor biological function. miR-33a has been widely reported as a metabolism-related miRNA, while its relationship with drug resistance has little understand. This study was focused on the effect of miR-33a on gemcitabine chemoresistance in pancreatic cancer to bring the novel theoretical basis to chemotherapy for pancreatic cancer.Methods: In situ hybridization and Real-time PCR were used to analyze the miR-33a expressions in pancreatic cancer tissue sample and cell lines, respectively. Cell counting kit 8 (CCK-8) assay was used to calculate the IC50 value of different pancreatic cancer cells. Results: miR-33a was down-regulated in pancreatic cancer tissue and cell lines compared with para-cancerous tissues and normal HEK293T cells. Moreover, miR-33a over expression not only could enhance the chemosensitivity to gemcitabine in pancreatic cancer cells, but also rescue the gemcitabine resistance in pancreatic cancer cells. Conclusion: Down regulation of miR-33a in pancreatic cancer decreases the chemosensitivity to gemcitabine, resulting in development of acquired gemcitabine chemoresistance. It provides the theoretical basis to develop a new molecular targeted drug to combine with chemotherapy for pancreatic cancer. ［Key words］ miR-33a; Pancreatic cancer; Gemcitabine chemoresistance基金项目：国家自然科学基金面上项目(30973476、81272727、81472223)；上海市浦江人才计划(10PJ1402100)。
中医药通过调控ABC跨膜转运蛋白逆转骨肉瘤化疗耐药的研究进展
doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2021.20.0623中医药通过调控ABC跨膜转运蛋白逆转 骨肉瘤化疗耐药的研究进展丁聚贤1,2，谢兴文1，许伟3，李鼎鹏1，李宁2，苏积亮2，柳博2，李建国1，柴利军1 Reviews on TCM in Reversing Chemotherapy Resistance of Osteosarcoma from ABC Transmembrane ProteinDING Juxian1,2, XIE Xingwen1, XU Wei3, LI Dingpeng1, LI Ning2, SU Jiliang2, LIU Bo2, LI Jianguo1, CHAI Lijun11. Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of Northwest Minzu University, Lanzhou 730000, China;2. Graduate School of Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China;3. Department of Bone Oncology, Gansu Provincial Hospital of TCM, Lanzhou 730050, ChinaCorrespondingAuthor:XIEXingwen,E-mail:****************Abstract: Osteosarcoma (OS) is the most common primary malignant bone tumor in clinic. It has high mortality and disability rate. Effective neoadjuvant chemotherapy combined with limb salvage surgery can improve the 5-year survival rate of OS patients. Drug resistance or low sensitivity of tumor cells is the most common cause of postoperative local recurrence and metastasis. Therefore, the sensitivity of OS cells to chemotherapy drugs is of great value to the prognosis of the patients. In recent years, traditional Chinese medicine has been widely used because of high efficiency and low toxicity. A large number of studies have confirmed that part of traditional Chinese medicine can reverse the chemotherapy resistance of OS cells by regulating the ABC transmembrane transport protein system. This article gives an overview of its related mechanisms and latest developments. Key words: Osteosarcoma; Chemotherapy resistance; TCM; ABC transmembrane proteinFunding: National Natural Science Foundation of China (No. 81704104); Gansu Youth Science and Technology Fund Project (No. 17JR5RA050)Competing interests: The authors declare that they have no competing interests.摘 要：骨肉瘤（OS）是临床最常见的原发恶性骨肿瘤，其病死、病残率高，有效的新辅助化疗联合保肢手术可提高OS患者的5年生存率，肿瘤细胞耐药或低敏感度是导致术后局部复发与转移最常见的原因，因此，OS细胞对化疗药物的敏感度对患者的预后有重要价值。
MiR-34a-5p靶向FoxM1调控骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的机制研究
MiR-34a-5p靶向FoxM1调控骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的机制研究MiR-34a-5p靶向FoxM1调控骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的机制研究骨肉瘤（osteosarcoma，简称OS）是一种高度侵袭性的恶性骨肿瘤，常见于儿童和青少年。
该疾病的发病机制复杂，尚未完全解明。
近年来，研究人员发现非编码RNA（non-coding RNA）在调控肿瘤的发生和发展中起着关键的作用。
miRNAs（microRNAs）作为一种重要的非编码RNA，通过靶向调控基因的表达，影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡。
本文旨在研究miR-34a-5p对骨肉瘤细胞中转录因子FoxM1的调节作用，以揭示其在调控骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡中的机制。
首先，我们通过实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）方法检测了miR-34a-5p在骨肉瘤细胞中的表达水平。
结果显示，在骨肉瘤细胞系中miR-34a-5p的表达水平明显下降。
随后，我们利用miR-34a-5p的模拟剂（miR-34a-5p mimic）和抑制剂（miR-34a-5p inhibitor）分别转染骨肉瘤细胞，观察到miR-34a-5p的上调抑制了细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导了细胞的凋亡。
为了探究miR-34a-5p调控骨肉瘤细胞的机制，我们进一步研究了miR-34a-5p的靶向基因。
通过生物信息学分析、荧光共轭PCR和Western blot等技术，我们发现转录因子FoxM1是miR-34a-5p的直接靶点。
FoxM1被广泛认为是肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移的关键调节因子。
miR-34a-5p的上调通过与FoxM1的3'非翻译区（3'UTR）结合，抑制了FoxM1的表达。
通过过表达和敲低FoxM1的实验验证了该调控作用。
进一步研究发现，miR-34a-5p通过靶向FoxM1抑制了骨肉瘤细胞中多种与增殖、侵袭、迁移和凋亡相关的分子。
miR-335靶向调控ROCK1抑制骨肉瘤细胞侵袭转移的研究的开题报告
miR-335靶向调控ROCK1抑制骨肉瘤细胞侵袭转移的研究的开题报告摘要：骨肉瘤是一种常见的恶性肿瘤，其特点是高度浸润性和侵袭性，常常在患者的肺部和其他部位转移。
目前对骨肉瘤治疗的研究主要集中在探索新的治疗方法和寻找新的治疗靶点。
本文旨在研究miR-335与ROCK1在骨肉瘤细胞中的作用，分析miR-335靶向调控ROCK1对骨肉瘤细胞侵袭转移的作用，为探索骨肉瘤治疗的新靶点提供理论依据。
关键词：骨肉瘤；miRNA-335；ROCK1；侵袭转移I. 研究背景骨肉瘤是一种高度浸润性和侵袭性的恶性肿瘤，常常在患者的肺部和其他部位转移。
目前对骨肉瘤治疗的研究主要集中在探索新的治疗方法和寻找新的治疗靶点。
以往的研究表明，微小RNA(miRNA)在调节肿瘤细胞侵袭和转移中具有重要的作用。
miRNA-335作为一种重要的miRNA已经被研究证明在多种肿瘤中起到抗癌作用。
在骨肉瘤中，miRNA-335的表达水平也被发现降低，但其具体作用机制尚未明确。
ROCK1作为一种关键的信号转导蛋白，在多种肿瘤的侵袭和转移中起到重要作用。
以往的研究表明，在骨肉瘤中ROCK1的表达水平升高。
然而，ROCK1与miRNA-335之间的关系及其在骨肉瘤中的具体作用机制还未得到深入的研究。
II. 研究目的本研究旨在探究miRNA-335与ROCK1在骨肉瘤细胞中的作用机制，并分析miRNA-335靶向调控ROCK1对骨肉瘤细胞侵袭转移的影响，为探索骨肉瘤治疗的新靶点提供理论依据。
III. 研究方法1. 细胞培养和转染：选取人骨肉瘤细胞株作为实验材料，将细胞贴壁培养至70%~80%的密度后进行转染。
2. qRT-PCR检测：采用qRT-PCR检测miRNA-335和ROCK1的表达水平。
3. Western blot检测：采用Western blot检测ROCK1的蛋白表达水平。
4. 细胞侵袭实验：采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。
miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义
miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义胡维信;赵智伟【摘要】目的:探讨miR-19a和miR-19b在骨肉瘤组织及配对瘤旁组织中的表达及其与临床病理特征的相关性.方法:收集32对骨肉瘤和配对的瘤旁组织,运用实时荧光定量PCR(qPCR)检测骨肉瘤组织及其瘤旁组织中miR-19a和miR-19b的表达,分析其与骨肉瘤临床病理特征的相关性及其临床意义.结果:qPCR结果显示骨肉瘤组织中miR-19a和miR-19b的平均表达量较瘤旁组织中均明显上调(P均＜0.05).二者的表达水平呈正相关(r=-0.685,P=0.000).miR-19a和miR-19b的表达与骨肉瘤病理分级之间存在正相关(r=-0.478,P=0.027);miR-19a的表达与临床分期呈正相关(r=-0.365,P=0.031)且与预后相关.Cox回归多因素分析发现miR-19a 可作为骨肉瘤患者预后的影响因子(P=0.037).结论:miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中表达上调,在骨肉瘤的发生发展中可能发挥重要的作用,其中miR-19a可能作为骨肉瘤独立的预后标志物.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2017(029)001【总页数】5页(P55-59)【关键词】骨肉瘤;miR-19a;miR-19b;预后【作者】胡维信;赵智伟【作者单位】开封市中心医院骨二科,河南开封475000;河南科技大学第一附属医院康复科,河南开封475000【正文语种】中文【中图分类】R711.74骨肉瘤是一种高度恶性，侵袭性很强的骨肿瘤，主要发生在儿童和青少年。
它的特点是早期肺转移和预后不良[1]。
青春期是骨肉瘤的发病高峰期，这时性腺开始发育，身体第二性征开始出现。
男孩骨肉瘤发生的概率是女孩的两倍(15～18岁年龄组)[1]。
大约一半的骨肉瘤患者开始治疗时已经伴有远处转移。
不同的化疗方案5年生存率能够提高60%～70%。
骨肉瘤的药物耐药机制与逆转
论文题目：骨肉瘤的药物耐药机制与逆转摘要骨肉瘤是一种常见的恶性骨肿瘤，治疗方案通常包括手术切除、放射治疗和化学药物治疗。
然而，由于药物耐药的出现，部分患者的治疗效果受到限制。
本文旨在探讨骨肉瘤药物耐药的机制以及逆转耐药的潜在策略。
药物耐药机制骨肉瘤耐药机制复杂多样，主要包括：1.多药耐药蛋白(MDR)：MDR蛋白家族成员，如P-gp、MRP和BCRP，在药物耐药中发挥重要作用，通过减少细胞内药物浓度来增加细胞对药物的耐受性。
2.细胞凋亡逃逸：骨肉瘤细胞的凋亡逃逸是耐药的一个关键机制，这可能与Bcl-2家族、PI3K/Akt/mTOR和MAPK等信号通路的异常活化有关。
3.肿瘤干细胞(TICs)：TICs在耐药中起到重要作用，它们具有自我更新和多向分化能力，对化疗和放疗具有较高的抵抗性。
4.肿瘤微环境：肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞、间充质细胞和血管内皮细胞等成分也参与了药物耐药的形成。
药物耐药的逆转策略1.靶向耐药机制：针对耐药机制的药物开发，如针对MDR蛋白的P-gp抑制剂或Bcl-2抑制剂。
2.肿瘤细胞凋亡恢复：通过调节凋亡相关通路，如针对Bcl-2家族的抑制剂、PI3K/Akt/mTOR和MAPK通路的抑制剂。
3.肿瘤干细胞的靶向治疗：发现和靶向TICs的药物，以减少肿瘤的耐药性。
4.改变肿瘤微环境：通过干预肿瘤微环境，如调节肿瘤相关巨噬细胞和间充质细胞的功能，增强肿瘤对治疗的敏感性。
结论骨肉瘤的药物耐药是当前治疗面临的主要挑战之一，深入理解耐药机制并探索逆转策略对于提高治疗效果至关重要。
未来的研究应该加强对骨肉瘤耐药机制的探索，寻找更多新的靶向药物和组合治疗方案，以改善患者的预后和生存率。
miR-33a-5p对骨肉瘤细胞Saos-2增殖的影响及其机制
miR-33a-5p对骨肉瘤细胞Saos-2增殖的影响及其机制袁忠;胡俊;雷家维;付璐珩;俞曾强;汪海燕【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(56)32【摘要】目的观察miR-33a-5p对骨肉瘤细胞Saos-2增殖的影响,并探讨其相关机制.方法采用Real time-PCR法检测骨肉瘤细胞Saos-2及正常人成骨细胞hFOB1.19中miR-33a-5p mRNA相对表达量.将对数生长期的骨肉瘤细胞Saos-2分为两组,分别转染miR-33a-5p mimics(mimics组)及Scramble(对照组).采用MTT法检测两组培养24、48、72、96及120 h细胞增殖能力,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力(以克隆形成率表示),流式细胞术比较细胞周期,Westen blotting法检测细胞周期蛋白激酶2(CDK2)、CDK4、细胞周期蛋白D(CyclinD)及Cy-clinE蛋白相对表达量.结果骨肉瘤细胞Saos-2及正常人成骨细胞hFOB1.19中miR-33a-5p mRNA相对表达量分别为2.65±0.43和24.32±3.21,两者比较P＜0.01.随着培养时间延长,两组细胞增殖能力均呈升高趋势;与对照组同时间点比较,mimics组细胞增殖能力均降低(P均＜0.01).mimics组和对照组克隆形成率分别为25.34％±3.46％、53.27％±5.82％,两组比较P＜0.01.mimics组和对照组分别有46.37％±4.28％、30.64％±3.52％的细胞处于G1期,分别有13.25％±1.25％、22.62％±2.01％的细胞处于G2期,两组比较P均＜0.01.mimics组CDK2、CDK4、CyclinD、CyclinE蛋白相对表达量均低于对照组(P均＜0.01).结论骨肉瘤细胞Saos-2中miR-33a-5p表达降低,上调其表达可抑制细胞增殖;下调CDK2、CDK4、Cyclin D及Cyclin E等细胞周期相关蛋白的表达可能为miR-33a-5p的作用机制.【总页数】4页(P5-8)【作者】袁忠;胡俊;雷家维;付璐珩;俞曾强;汪海燕【作者单位】江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006;江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006;江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006;江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006;江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006;江西中医药大学附属洪都中医院,南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.核仁素表达下调对顺铂诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响 [J], 吴蓓;王万春;黎志宏2.原花青素对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的影响及机制研究 [J], 李灿;江波;李瑞生;张文静3.miR-20b在人骨肉瘤细胞中的表达及对Saos-2细胞增殖、侵袭能力的影响观察[J], 聂琨; 汪阳4.TRIM 11对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究 [J], 王兆丰;许晓波;唐文潇;朱有才;胡继超;张新根5.长链非编码RNA511对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、迁移与凋亡的影响和机制 [J], 许常利;乔苏迟;魏华学;汪淼;汪秉轩;王志伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
骨肉瘤耐药性相关信号转导通路研究进展
骨肉瘤耐药性相关信号转导通路研究进展孙振国;张治宇;王锋【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)003【摘要】Osteosarcoma is one of the most common malignant bone tumors,and improving the cure rate is of great sig-nificance in the research of osteosarcoma. Drug resistance(especially multi-drug resistance) is the major cause of clinical treatment failure. The multi-drug resistance of osteosarcoma is associated with many factors. Wnt pathway and phosphatidyli-nositol 3-kinase (PI3K) pathway play an important role in the development of drug-resista nce of osteosarcoma,and it′s very importantto understand the mechanism of signal transduction pathways in the drug-resistance generation and development to osteosarcoma,and is of great significance for the research and development of targeted drugs and improve the survival rate.%骨肉瘤是临床最常见的严重危害人类健康的恶性骨肿瘤，进一步提高治愈率是骨肉瘤研究的重要方向。
骨肉瘤化疗耐药机制及逆转治疗的研究进展
骨肉瘤化疗耐药机制及逆转治疗的研究进展张燕;张俐;牛素生;刘俊宁【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2012(9)32【摘要】骨肉瘤是常见的骨源性恶性肿瘤,化疗是其重要的治疗手段,但肿瘤耐药性的存在,成为骨肉瘤复发和治疗失败的重要原因.明确其耐药机制,有效预防或逆转骨肉瘤耐药是目前临床亟待解决的问题.本文将对骨肉瘤耐药机制及其逆转策略的研究进展作一综述.%Osteosarcoma is a sort of malignant commonly-seen osteogenic sarcomas, a better treatment for it is chemotherapy. However, tumor drug resistance is a key factor causing recurrence of osteosarcoma and treatment failure. Therefore, clearly understand its drug resistance mechanism and further effectively prevent or reverse osteosarcoma's drug resistance are urgent problems needed to be solved in current clinic. The article is going to review on drug resistance mechanism of osteosarcoma and strategy for its reversal.【总页数】3页(P23-25)【作者】张燕;张俐;牛素生;刘俊宁【作者单位】福建中医药大学骨伤学院,福建福州,350108;福建中医药大学骨伤学院,福建福州,350108;福建中医药大学骨伤学院,福建福州,350108;福建中医药大学骨伤学院,福建福州,350108【正文语种】中文【中图分类】R735.340.2【相关文献】1.恶性卵巢肿瘤化疗耐药机制及逆转的研究进展 [J], 冯继良;吴强2.骨肉瘤继发性化疗耐药机制的研究进展 [J], 符策岗;赵红卫;刘扬;贺露姣;陈海丹3.软组织肉瘤化疗耐药机制及治疗的研究进展 [J], 徐云虎;林明哲4.中药活性成分逆转卵巢癌化疗耐药机制的研究进展 [J], 杨红;钱麟;周华;齐聪5.中医药通过调控ABC跨膜转运蛋白逆转骨肉瘤化疗耐药的研究进展 [J], 丁聚贤;谢兴文;许伟;李鼎鹏;李宁;苏积亮;柳博;李建国;柴利军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
miR-155通过调节Ets-1逆转白血病细胞阿霉素耐药的研究
miR-155通过调节Ets-1逆转白血病细胞阿霉素耐药的研究沙敏;叶军;郭婷;张立新;栾正云【期刊名称】《临床肿瘤学杂志》【年(卷),期】2015(000)012【摘要】Objective To detect the expression of miR⁃155 and Ets⁃1 in leukemia cell line K562 and adriamycin resistance K562/A02 cell line, and explore the relationship between miR⁃155, Ets⁃1 and drug resistance in leukemia treatment. Methods miR⁃155 simulation oligonucleotide probes and miR⁃155 inhibitor oligonucleotide probes, Ets⁃1 expression plasmid and Ets⁃1 interference expression plasmid were transfected in K562 andK562/A02 cells by Lipofectamine 2000. Real⁃time quantitative PCR was used to de⁃termine the expression of miR⁃155, Ets⁃1 and multidrug resistance( MDR1) . The protein levels of Ets⁃1 and MDR1 were analyzed by Western blotting. The viability of K562 and K562/A02 cells was evaluated by MTT assay. Results The expression levels of miR⁃155, Ets⁃1 and MDR1 were significantly increased in K562/A02 cells than those in K562 cells. Down⁃regulation of miR⁃155 could obviously increase the inhibition rate of adriamycin on K562/A02 cells and inhibit the expression of Ets⁃1 and MDR1, which could be reversed by overexpression of Ets⁃1. While,up⁃regulation of miR⁃155 could significantly increase the inhibition rate of adriamycin on K562 cells and stimulate the expression of Ets⁃1 and MDR1, which could be reversed by Ets⁃1 siRNA. Conclusion miR⁃155 is involved inthe mechanism of drug resistance in leukemia by regulating Ets⁃1 expression, which may provide a potential novel target for overcoming drug⁃resistance.%目的通过检测人白血病细胞株K562及阿霉素耐药细胞株K562／A02中miR⁃155和Ets⁃1表达，探讨miR⁃155、Ets⁃1表达与白血病化疗耐药的关系。
竞争性内源RNA轴调控骨肉瘤生物学行为研究进展
竞争性内源RNA轴调控骨肉瘤生物学行为研究进展
张帅;魏巍
【期刊名称】《中国研究型医院》
【年(卷),期】2022(9)4
【摘要】骨肉瘤(OS)恶性程度高,发病机制不清楚,大量研究表明竞争性内源RNA(ceRNA)轴在OS的发生、发展机制中具有重要作用。
其中长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)通过竞争性结合等方式对其下游微小
RNA(miRNA)进行调控,进而调节肿瘤增殖、凋亡、迁移和侵袭等,有望成为OS诊疗的关键靶点,故对ceRNA轴中的lncRNA、circRNA调控OS生物学行为的研究进行综述,为OS的机制研究与治疗提供新思路。
【总页数】6页(P71-76)
【作者】张帅;魏巍
【作者单位】佳木斯大学附属第一医院骨二科
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.非编码RNA通过竞争性内源性RNA机制对肿瘤生物学行为的调控
2.非编码RNA及竞争性内源RNA调控网络在肺纤维化中的研究进展
3.长链非编码RNA的竞争性内源RNA调控模式在动脉粥样硬化中的研究进展
4.银屑病相关非编码RNA及竞争性内源RNA调控网络的研究进展
5.长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因家族调控骨肉瘤生物学行为研究进展
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