间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析
四种方法检测抗核抗体的对比分析
为： ０ ． ９ １ ４ 、 ０ ． ７ ９ ８ 、 ０ ． ９ １ ８ 、 ０ ． ７ ０ １ 。其中 ， Ｉ Ｉ Ｆ和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 的 灵 敏 性 明 显 高 于 其 他 两 种 方 法 （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ； Ｌ １ Ａ法 的 特 异 性 最 高 ； Ｉ Ｉ Ｆ 和Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 的 Ｒ Ｏ Ｃ 曲线 下 面 积 明显 大 于其 他 两 种方 法 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。结 论 ： 四种 方 法 检 测 Ａ Ｎ Ａ 均 有 较 高 的 特 异 性 和准 确 性 ，
都可用于临床检测 。
【 关键 词 】抗 核抗 体 ； 间接 免 疫 荧 光 法 ； 化学发光法 ； 酶联免疫吸附试验 ； 线 性 免 疫 印 迹 法
【 文章 编号】 １ ０ ０ ５ — ３ ６ ９ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ — ０ ３ ０ ５ — ０ ５ 【 中图分 类号】Ｒ ５ ９ ３ ． ２ 【 文献标志码 】Ａ
采用四格表计算灵敏性sen特异性spe准确性acc阳性预测值ppv阴性预测值npv阳性似然比plr和阴性似然比nlr并通过受试者工作特征roc曲线来分析四种方法检测ana的准确性
第２ ８卷
第 ４期
川
北
医
学
院
学
报
Ｖｏ １ ．２ ８． Ｎｏ ． ４
２ ０ １ ３Ｈ Ｓ Ｉ ＣＨＵＡＮ ＭＥＤＩ ＣＡＬ ＣＯＬＬ ＥＧＥ
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果评价
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果评价作者：黄丽樊英俊来源：《健康必读·下旬刊》2018年第12期【摘要】：目的：探讨抗核抗体实施间接免疫荧光法检测的结果。
方法：对本院120例疑似自身免疫性疾病患者（2017年1月到2018年5月间）实施研究观察，对所有患者进行间接免疫荧光法检测抗核抗体，用免疫印迹法检测抗核抗体谱，分析总结两种检查方式的效果。
结果：以抗核抗体滴度≥1：100为阳性标准，实施间接免疫荧光法检测时漏诊1例，误诊6例，实施免疫印迹法检测是漏诊28例，误诊0例。
自身免疫性疾病实施间接免疫荧光法诊断的灵敏度99.1%显著高于免疫印迹法90.9%，实施间接免疫荧光法检测的特异度22.2%显著低于免疫印迹法100.0%（P【关键词】：抗核抗体；间接免疫荧光法；自身免疫性疾病；免疫印迹法【中图分类号】R392 11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2018）12-03--02自身免疫性疾病是因机体对自身抗原发生免疫反应而导致的自身组织损害疾病，目前临床常见的自身免疫性疾病较多，包括系统性红斑狼疮、硬皮病、甲状腺自身免疫病、系统性血管炎、类风湿性关节炎、皮肌炎等，自身免疫性疾病常引起多系统损伤，且患者受个体差异影响临床表现差异性较大，诊断难度较大。
自身抗体是自身免疫性疾病患者诊断中的重要标志物。
目前抗核抗体检测在自身免疫性疾病患者诊治中运用较为广泛，为明确间接免疫荧光法检测抗核抗体在自身免疫性疾病中的应用价值，本研究对120例疑似自身免疫性疾病患者的间接免疫荧光法检测抗核抗体检测效果与免疫印迹法检测抗核抗体谱效果实施了对比。
现行报道：1 资料与方法1.1 一般资料在2017年1月到2018年5月间进行病例筛选，选期间内本院120例疑似自身免疫性疾病患者作为研究对象。
患者年龄12～73岁，平均年龄45.6岁（s=12.5）；性别分布：男/女为57/63；患者病理检查结果为：系统性红斑狼疮14例，类风湿性关节炎52例，硬皮病5例，干燥综合征21例，皮肌炎5例，甲状腺自身免疫病14例，非自身免疫性疾病9例。
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体（ANA）是一种特殊的抗体，它们是人体免疫系统产生
的一类抗体，主要针对自身细胞核中的蛋白质和核酸成分。
抗核抗
体的检测方法主要用于自身免疫性疾病的诊断，如系统性红斑狼疮（SLE）和类风湿性关节炎（RA）等。
目前常用的抗核抗体检测方法包括间接免疫荧光法（IFA）和酶
联免疫吸附试验（ELISA）。
1. 间接免疫荧光法（IFA）：
该方法主要通过观察抗核抗体与细胞核结构的结合情况来确定
是否存在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与细胞核结构进行反应。
- 通过荧光显微镜观察，如果血清中存在抗核抗体，它们会与
细胞核结构结合形成荧光标记的复合物。
- 根据荧光标记的情况，可以确定抗核抗体的存在及其荧光模式，进而进行疾病的诊断。
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：
该方法通过测定抗核抗体与特定抗原的结合情况来确定是否存
在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与特定抗原进行反应。
- 加入特定抗核抗体的检测试剂，使其与抗核抗体结合。
- 加入酶标记的抗人免疫球蛋白抗体，使其与抗核抗体结合形
成复合物。
- 加入底物，使酶标记的抗体与底物发生反应，产生颜色反应。
- 通过测定反应产生的颜色强度，可以确定抗核抗体的存在及
其浓度水平。
以上是两种常用的抗核抗体检测方法。
这些方法的原理基于抗体与特定抗原的结合反应，并通过不同的检测手段来确定抗核抗体的存在及其水平。
这些检测方法在临床上被广泛应用于自身免疫性疾病的早期诊断和疾病活动性的监测。
抗核抗体检测及临床意义LLL
抗核抗体检测及临床意义LLL抗核抗体（ANA）检测是一种用于检测人体血清中是否存在针对细胞核自身抗原的抗体的试验。
该检测主要用于系统性红斑狼疮（SLE）的诊断，但也常用于其他自身免疫性疾病的筛查和辅助诊断。
ANA检测是通过间接免疫荧光法进行的。
在该试验中，人体血清与细胞核自身抗原结合，形成免疫复合物，然后用荧光标记的二抗检测这些抗体的存在。
正常情况下，储存在细胞核内的抗原是隐蔽的，抗体不会结合。
而在自身免疫性疾病患者中，细胞核结构和组成发生了改变，使得抗原暴露在胞质中，即可触发产生ANA抗体。
ANA检测的结果以荧光染色的形式呈阳性或阴性。
阳性结果可以进一步进行亚型检测，包括抗dsDNA（双链脱氧核糖核酸）、抗Sm（Smith）抗体、抗Ro/La抗体等。
这些亚型的检测有助于进一步明确患者是否患有其中一种具体的自身免疫性疾病。
对于SLE患者，ANA检测的阳性率可以高达95%以上。
但需要指出的是，ANA检测并不能单独用于SLE的诊断，因为这种抗体在其他自身免疫性疾病和一部分非自身免疫性疾病中也可以出现阳性反应。
因此，ANA检测通常作为其他临床病征和实验室检查的辅助诊断指标。
除SLE外，其他一些自身免疫性疾病也可检测到ANA抗体。
例如，系统性硬化症、类风湿性关节炎和干燥综合征等疾病在临床上也存在ANA阳性的情况。
通过进一步检测抗体亚型，可有助于明确患者患病的特定类型和病情严重程度。
对于临床医生而言，ANA检测的结果常常与患者的病史、体征和其他实验室检查结果综合分析来进行诊断。
这些综合信息有助于明确患者是否存在自身免疫性疾病，并辅助制定治疗方案。
总的来说，抗核抗体（ANA）检测在自身免疫性疾病的诊断和辅助诊断中起着重要的作用。
通过检测患者血清中的ANA抗体，可以帮助医生进行早期诊断和治疗，提高患者的生活质量和预后。
然而，需要注意的是，ANA检测的结果仅仅是一个辅助指标，最终诊断应综合考虑病史、体征和其他实验室检查结果。
抗核抗体诊断标准
抗核抗体诊断标准
抗核抗体（ANA）是一种检测自身免疫性疾病的重要指标，
常用于诊断系统性红斑狼疮（SLE）和其他结缔组织病。
抗核
抗体的诊断标准通常包括以下几个方面：
1. 实验室检测结果：抗核抗体通常通过间接免疫荧光法（IIF）进行检测。
阳性结果表示存在抗核抗体，但不能确定具体的抗核抗体种类。
通常需要进一步进行特异性抗核抗体检测，如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体等，以确定疾病的类型和严重程度。
2. 异质性：抗核抗体的阳性结果需要在不同时间点进行重复检测，以排除偶发阳性和暂时感染等非自身免疫因素。
3. 结合临床表现：抗核抗体的阳性结果应结合患者的临床表现进行综合分析。
一般来说，阳性结果结合相关症状和体征，如关节痛、皮疹、发热等，可以认为是系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的可能。
需要注意的是，抗核抗体作为一项检测指标，并非仅凭阳性结果就可以诊断某一疾病，还需结合其他相关指标和临床表现进行全面判断。
此外，不同类型的抗核抗体与不同的自身免疫性疾病之间存在一定的关联性，具体的诊断标准可能会根据具体疾病而有所不同。
因此，建议在临床实践中，医生应根据患者的具体情况进行综合分析和判断。
浅议间接免疫荧光法检测抗核抗体的报告模式
得进一步推广 刊。
参 考 文 献
人喉癌上皮细胞 ， 其核抗 原丰富 、 特异性强 、 含量高 ， 核大 、 乡 Ⅲ 胞 结构清 晰 ， 易于判读荧光染色核 型结果 ， 该基质 片较 鼠肝 （ 肾） 冰冻切片检测 Ａ Ｎ Ａ， 阳性率可提高 １ ０ ％～ ２ ０ ％［ ６ １ 。
期 细 胞 染 色 体 阴性 ， 主要 包 括 抗 Ｐ Ｍ — Ｓ ｃ ｌ 抗体 、 抗 Ｒ ＮＡ多 聚 酶
Ｉ抗 体 、 抗 原 纤 维 蛋 白抗 体 和 抗 Ｓ ｃ ｌ 一 ７ ０抗 体 ④ 核 膜 型
（ ｍｅ ｍ ｂ ｒ ａ ｎ ｏ ｕ ｓ ｐ ａ ｔ ｔ ｅ ｒ ｎ ， Ｍ） ， 间期 细胞 核 呈 均 匀 的荧 光 ， 核周增 强 ，
１ ４ ３ －１ ４ ４ ．
光染色模型 （ 以Ｈ ｅ ｐ 一 ２细胞为基质 ） ： ① 核均质型（ ｈ ｅ 一ｍｓ
ｐ ａ ｔ ｔ ｅ ｒ ｎ ， Ｈ） ， 间期 细胞 核 呈 均 匀 的 荧 光 ， 分 裂 期 细 胞 浓 缩 染 色 体
ｆ ３ ］ 翟暖峰． 经阴道彩色多普勒对早期未破裂 型宫外 孕的临床价值叨．
浓缩染色体 阴性 ， 染色体周 围区域为颗粒 样荧光 ， 可 细分 为核
粗 颗 粒 型 和 核 细 颗 粒 型 ，其 靶 抗 原 主要 有 ｎ Ｒ Ｎ Ｐ 、 Ｓ ｍ、 Ｓ Ｓ — Ａ ｆ ｌ １ 】
ｓ ｓ — Ｂ 。③核仁型（ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｏ ｌ ａ ｒ ｐ ａ ￣ ｅ ｍ， Ｎ） ， 问期细胞核ｆ 性， 分裂
１ 抗 核 抗 体 简 介
荧光染色 阳性 ， 主要 包括抗线粒 体抗体 （ 胞浆粗 颗粒 型 ） 、 抗核 糖体 Ｐ蛋 白抗体 （ 胞浆细颗 粒型 ， 有 时可见核彳 ＿ 阳性 ） 、 抗Ｉ Ｊ Ｉ １ — １ 抗体 、 抗高尔基抗体 、 抗溶酶体抗体 、 抗 肌动蛋 白抗体和抗波形 蛋 白抗体等。实际工作 中， 同一份标 本同时检 出 ２种或 ２种 以 上荧光染 色模 型 的混合 型也 比较常 见 ， 此外， 还有 一 些较少 ＿ 』 ］ Ｌ
间接免疫荧光法检测抗核抗体与免疫印迹法检测抗核抗体谱结果分析
—
Ａ Ｎ Ａ—Ｉ Ｉ Ｆ法 与 Ａ Ｎ Ａ ｓ—Ｌ Ｉ Ａ法 检 测 结果 ： Ａ Ｎ Ａ—Ｉ Ｉ Ｆ法与 Ａ Ｎ Ａ ｓ—Ｌ Ｉ Ａ法分 别 检测 ３ ０ ０例与 ２ ６ ３例 患者血 清抗 核抗 体 和抗核抗体谱 ， 两种方法检 出的阳性率 无 显著性差异 （ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） 。见表 １ 。 ３ Ｏ例 同 时 进 行 Ａ Ｎ Ａ —Ｉ Ｉ Ｆ 、 Ａ Ｎ Ａ ｓ— ｕＡ检测 结果 比较 ： ３ Ｏ例 中结 果 一 致 的
摘 要 目 的 ： 探 讨 间 接 免 疫 荧 光 法
（ Ｉ Ｉ Ｆ ） 检 测 抗 核 抗体 （ Ａ Ｎ Ａ ） 与线 性 免 疫 印
３ ０ ０ ０ ｒ ／ 分离 心 １ ０分 钟 ， 分 离 血清 直接 检
测。
迹 法（ Ｌ Ｉ Ａ） 检测抗核 抗体谱 （ Ａ Ｎ Ａ ｓ ） 在自 身免疫性 疾病临床诊 断中的价值 。方法 ：
种 方法不能相互取代 ， 应联合应 用。
和抗 Ｓ Ｓ Ｂ抗体多见于干燥综合征患者 ， 抗
Ｓ Ｓ Ａ抗体敏感性较强 ， 抗Ｓ Ｓ Ｂ抗体 特异性
关键词 自身免 疫性 疾病 抗核 抗体
间接 免 疫 荧 光 法 免 疫 印迹 法
２ ２例 中， １ ０例 全 阳性 ， １ ２例全 阴性 ， 一致 率７ ３ ． ３ ％； 结果不 一致 的 ８例 中 ， Ａ Ｎ Ａ—
检率 ６ ． ７ ％， 见表 ２ 。
讨 论
体 和胞 质 抗 原抗 体 。Ａ Ｎ Ａ和 Ｅ Ｎ Ａ抗 体
的检 测 ， 对胶原性疾病， 特别 是 Ｓ Ｌ Ｅ、 与
原 因分析为 ， 该谱只含有与常见 自身免 疫 性 疾病相关的 １ ２项抗 核抗 体 ， 而 不代 表
1725例血清抗核抗体及抗核抗体谱检测结果分析
免疫印迹法与间接免疫荧光法检测抗核抗体对照分析_张铁汉
是简便经济有效的 方法. LCT 是对原细 胞涂片技 术的改进。随 着 FDA 批准 LCT 应用于临床, 其在国外应用已相当广泛。本研 究结果显示, LCT 提高了宫颈早期病变的检出率, 有利于宫颈疾 病的早期诊断和治疗, 降低了宫颈癌的 发生率。阴道镜 检查可 观察宫颈上皮及血管的微小变 化, 有针对性 地进行活组 织病理 检查, 是诊断早期宫颈癌及癌前病变的重要检查手段之一, 而组 织学诊断是 宫颈 病变 诊断 的金 标准, 故应 广 泛推 广细 胞学 检 查 阴道镜下活检 病理学 检查 的宫颈 疾病 三阶梯 式诊 断程 序。
关键词: 抗核抗体; 抗可提取性核抗原; 自身抗体; 免疫印迹 中图分类号: R 593. 2 文献标识码: B 文章 编号: 1009- 9727( 2008) 4- 568- 03
Com par ison of detection of serum an tinu clear an tibody w ith imm unob lotting and ind irect immunofluorescence ( IIF) . ZHANG T ie- han, ZHAO Y ong- x in, ZHENG H u,i et a.l ( T hird A ffiliated H osp ital of X inx iang M ed ica l College, X inx iang 453003, H enan, P. R. Ch ina)
参考文献:
[ 1] H erbest A L. The B ethesda system for report ing cervical/ vagin al cyto logical d iagnoses[ J]. C l in Ob stet G yn eco,l 1992, 35( 1) : 22~ 27.
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析[摘要]目的：对间接免疫荧光法（IIFA）检测抗核抗体的结果进行分析。
方法：选择我院在2019年1月-2020年1月中收治自身免疫性疾病患者共50例进行检测。
分别用IIFA 和胶乳法进行检测，IIFA检测结果分为观察组，胶乳法检测结果分为对照组。
对两组结果的检测准确率进行对比。
结果：IIFA的检测准确率为82%，超过胶乳法检测准确率64%。
数据对比有统计学意义，P＜0.05.结论：IIFA对于抗核抗体的检测准确率更高，值得在临床上进行推广。
【关键词】间接免疫荧光法；胶乳法；抗核抗体抗核抗体（ANA ）也叫作抗核酸抗原抗体，是指哺乳动物的自身抗体的总称。
一般包括细胞核的自身抗体，细胞质内的核酸和核蛋白的所有成分。
按照其核内分子性能的不同，也可以将其分为DNA抗体。
抗组蛋白抗体，抗非组蛋白抗体，抗核仁抗体等。
在临床医学的过往研究中发现，抗核抗体在患者的自身免疫系统疾病中均呈现出不同程度的阳性，特别是风湿类疾病中，抗核抗体的反应尤为敏感。
因此，对于患者的临床诊断过程中，患者的抗核抗体检测指标已经成为了重要的判定依据[1]。
通过对患者的抗核抗体进行检测，可以帮助医生迅速的确定患者的疾病种类，帮助医生制定正确的治疗方案，缓解患者的身体病症，帮助患者更快的痊愈。
而更准确，结果更全面的检测方式在医学检测上的需求就越来越大。
因此ANA检测方式的研究已经是医学检测研究的重点。
为此我院对检测方案也进行了比较研究，取得了良好的效果，现报告如下。
[OBJECTIVE]: to ANA lyze the results of antinuclear antibody (ANA ) detected by indirect immunofluorescence (IFA) . METHODS: 50 patients with autoimmune diseases were selected from January 2019 to January 2020 in our hospital. IFA and latex method were used to detect IFA, IFA results were pided into observation group, Latex test results were pided into control group. The accuracy of the two groups were compared. Results: The accuracy of IFA was82% , which was 64% higher than that of latex method. The data contrast has the statistical significance, p < 0.05. Conclusion: IFA is more accurate in the detection of antinuclear antibodies, and it is worth popularizing in clinic. [Keywords] Indirect immunofluorescence assay; Latex Assay; Antinuclear antibody 1一般资料和方法1.1一般资料选择了2019年1月-2020年1月中在我院进行治疗的自身免疫性疾病患者的血清共50例。
抗核抗体诊断标准
抗核抗体诊断标准抗核抗体（ANA）诊断标准是根据患者血清中是否存在自身免疫系统产生的抗核抗体来确定。
抗核抗体是针对细胞核中的结构和分子的抗体，其存在可以提示患者可能存在某些自身免疫性疾病。
一般来说，抗核抗体检测是通过间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay, IFA）来进行的。
在此方法中，患者血清中的抗核抗体与人类细胞核抗原结合，在荧光显微镜下观察是否出现荧光染色。
如果有荧光染色，则说明患者存在抗核抗体。
根据国际抗核抗体标准化组织（International Consensus on Antinuclear Antibody Patterns, ICAP）的建议，抗核抗体的结果应该按照和特定疾病的关联性进行评估。
常见的抗核抗体模式有以下几种：1. 核周型（Perinuclear pattern, P-ANCA）：可提示相关的抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibodies, ANCA）相关性疾病，如Wegener肉芽肿。
2. 斑点型（Speckled pattern, S-ANA）：常见于系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）、结缔组织病（connective tissue diseases）等。
3. 核周环型（Nucleolar pattern）：常见于硬皮病（systemic sclerosis, SSc）等。
4. 角质层型（Epithelial pattern）：常见于类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）等。
需要注意的是，抗核抗体阳性并不代表一定存在自身免疫性疾病，还需要结合临床症状和其他实验室检查结果来综合评估。
因此，对于抗核抗体阳性的患者，通常需要进一步进行深入的检查和评估才能确定是否存在自身免疫性疾病。
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析作者：刘清银涂斌来源：《中国卫生产业》2016年第27期[摘要] 目的探讨间接免疫荧光法（IIFA）检测抗核抗体在自身免疫性疾病（AID）患者中的结果应用分析。
方法分别采用IIFA和胶乳法检测50例自身免疫性疾病患者血清样本抗核抗体（ANA）。
结果 IIFA法检测血清ANA的灵敏度为76%，胶乳法检测血清ANA的灵敏度为58%，差异有统计学意义（P[关键词] 抗核抗体；间接免疫荧光法；胶乳法[中图分类号] R446.61 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2016）09（c）-0090-02[Abstract] Objective To discuss the results of indirect immunofluorescence in detecting the antinuclear antibodies in patients with autoimmune diseases. Methods The antinuclear antibodies of serum samples of 50 cases of patients with autoimmune diseases were detected respectively by the IIFA and emulsion method. Results The difference in the sensitivity degree of ANA detected by IIFA method and emulsion method had statistical significance（76% vs 58%）（P[Key words] Antinuclear antibodies； Indirect immunofluorescence； Emulsion method抗核抗体（ANA）包括细胞核的自身抗体和细胞质内的核酸和核蛋白的所有成分的自身抗体，是指哺乳动物的细胞中以细胞核为靶抗原的自身抗体的总称[1]。
抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析
• 1344 •浙江临床医学2020年9月第22卷第9期•检测诊断•抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析夏晓旭徐思琪*【摘要】目的分析抗核抗体（A N A)和A N A谱的相关性，探讨其在临床疾病中的特征：方法采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(IgG ),免疫印迹法检测抗核抗体谱结果690例怀疑自身抗体阳性的临床标本涉及多种疾病，其中A N A阳性标本为494例，以滴度为1: 1000的阳性标本居多；自身免疫性疾病A N A滴度偏高，其他继发性免疫反应疾病A N A滴度在不同疾病中的分布无明显规律；A N A谱检测特异性自身抗体阳性标本共245例，抗SSA和抗R o-52抗体阳性率最高；抗核小体、抗d sD N A、抗组蛋白、抗S m、抗U l-n R N P、抗着丝点B 蛋白、抗S S B、抗抗线粒体抗体-M2抗体阳性标本A N A滴度主要集中在1:320~1 : 1000;抗SS A、抗R o-52、抗S d-70、抗J o-1抗体阳性标本可存在于各种滴度的A N A阳性标本中，无明显的A N A滴度分布特征。
结论A N A和A N A谱阳性可出现在各种疾病中，A N A检查对疑似自身抗体阳性患者有重要初筛作用，AN A谱特异性抗体检测对A N A检测阳性的标本具有补充诊断作用，但两种方法检测结果并不完全相关，不能 代替，同时检测AN A和A N A谱能更好的为临床诊断和评估预后提供帮助【关键词】抗核抗体抗核抗体谱间接免疫荧光免疫印迹[A b stra c t 】Objective To analyze the situation and relationship o f ANA and ANA profile retrospectively, also to explore the features o f them in clinical disorders. Methods Indirect immunofluorescence was used to detect the antinuclear antibody ( IgG )，immunoblot assay was used to detect the antinuclear antibody profile. Results 690 samples that suspected auto antibody positive were related to a wide range o f diseases. There were totally 494 samples ANA positive, more o f them were positive with the titer 1• 1000. High titer o f AN A was found in autoimmune diseases, there was no significandy regularity o f titer in diseases secondary to immunoreaction.There were 245 samples in AN A profile test for specific autoantibody, anti—SSA antibody and anti—R〇—52 antibody had the most positive percentage.The titer o f AN A was focused on 1: 320〜1: 1000 in specific antibody positive samples, these antibodies including anti-N ucleosom e antibody, anti-dsD N A antibody, anti-H istone antibody, anti-Sm antibody, anti- U l—n R N P antibody, anti—Cenp B antibody, anti—SSB antibody, anti-A M A—M2 antibody.But the titer o f ANA had no obvious characteristics in anti—SSA antibody, a n ti-R〇-52antibody, a n ti-S cl-70antibody and anti—J o-1antibody. Conclusion We find that ANA positive or ANA profile positive samples in various disorders.Test for ANA has important role o f screening in suspected auto antibody positive patients, test for ANA profile has crucial role o f supplementing in A N A positive patients. The results o f these two methods are not entirely relevant, and can not be replaced. Simultaneously detecting ANA and ana spectrum can provide better help for clinical diagnosis and prognosis evaluation.【K e y w o r d s 】ANA ENA Indirect immunofluorescence Immunoblot自身免疫性疾病（AID)是指机体对自身器官、组织、细胞的抗原发生免疫反应，导致A身机体损害 而引起的疾病。
抗核抗体与ENA15项检测结果分析
１ 资 料与 方法 ６ ８ ５例病 人 标 本 均 来 自包 头 医 学 院第 二 附 属
医 院 门诊 及 住 院 病 人 ， 怀 疑 自身 免 疫 性 疾 病 的病
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ６ — ４— ０ ２ ７ ； 修 回 日期 ： ２ ０ １ ６ — ０ ８ — ２ １
基金项 目 ： 内蒙古 自然科学基金 （ ２ ０ １ ４ ＭＳ ０ ８ １ １ ３ ） 作者简介 ： 张丽平（ １ ９ ７ ８ 一 ） ， 女， 包 头医学院第二附属医 院检验科 主管检验师 。
中图分类号 ： Ｒ ３ ９ ２ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ： ２ ０ ９ ５ － ５ １ ２ Ｘ（ ２ ０ １ ６ ） ０ ５ － ０ ４ ７ １ － ０ ３
自身免疫性疾病是 由多因素引起机体免疫功
能紊 乱 ， 产生 自身 免疫 应答 而造 成 多系统 损 害 的疾 病 。抗核 抗体 是具 有 多种 细胞 核成 分 的 自身 抗体 ， 是 以真核 细胞 的核 成分 为靶 抗 原 的 自身 抗 体 的 总 称， 可用 于 多 种 自身 免 疫 性 疾 病 的筛 查 。 Ｅ Ｎ Ａ１ ５ 项 包 括抗 Ｕ １ Ｒ Ｎ Ｐ ／ Ｓ ｍ抗 体 ； 抗 Ｓ Ｓ Ａ抗 体 ； 抗 Ｒ ｏ ５ ２ 抗体 ； 抗Ｓ Ｓ Ｂ抗 体 ； 抗 组 蛋 白抗 体 ； 抗 着 丝 点 Ｂ蛋
６ ８ ５例 标 本 同 时做 Ｅ Ｎ Ａ１ ５项检 测 ， 阳性 数 为 １ ８ ８例 ， 阳 性 率 为２ ７ ． ４ ％（ １ ８ ８ ／ ６ ８ ５ ） 。 阳 性 标 本 出现 较 多 的 是 抗
Ｓ Ｓ Ａ、 Ｒ ｏ ５ ２ 、 Ｕ Ｒ Ｎ Ｐ ／ Ｓ ｍ和 Ａ ＭＡ— Ｍ，等， 基本 上与 荧光 法测定 Ａ Ｎ Ａ核型 的结果相符。 只有 当 Ａ Ｎ Ａ为低 滴度 （ 起 始滴度为 １ ： １ ０ ０ ） 时， Ｅ Ｎ Ａ １ ５项 为阴性 的可能性较 高。结论 ： 不 同荧光核 型的 Ａ Ｎ Ａ与 Ｅ Ｎ Ａ １ ５项之 间有一定 的关 系， 但并无 绝对 的规律 可寻 ， 间接免疫 荧光和 欧蒙印迹 法联 合应用 ， 有助 于 自身免 疫性 疾病 的诊 断和预后观察 。 关键 词 ： 自身免 疫性 疾病 ； 抗核抗体 ； Ｅ Ｎ Ａ １ ５项
成人重症肌无力1642例抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析
成人重症肌无力１６４２例抗核抗体和抗核抗体谱检测结果分析冯 苏，梁翠娟，程丽姗，潘 婧，宋国威，梁 芸（石家庄市第一医院检验科，河北石家庄０５００１１）摘要：目的 研究抗核抗体（ａｎｔｉｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡＮＡ）和抗核抗体谱在成人重症肌无力中的分布和临床意义。
方法 采用间接免疫荧光法（ＩＩＦ）检测１６４２例成人重症肌无力患者抗核抗体，免疫印迹法同时检测ＡＮｕＡ、Ａｎｔｉ Ｐ、ａｈａ、ＡＭＡＭ２、ＣＥＮＰＢ、Ｊｏ １、ＰＣＮＡ、ＰＭ Ｓｃｌ、Ｒｏ ５２、ＳＣＬ ７０、ＳＳ Ｂ、Ｓｍ、ｄｓＤＮＡ、ｎＲＮＰ／Ｓｍ、ＳＳ Ａ共１５种抗核抗体。
结果 在１６４２例成人重症肌无力患者中，ＡＮＡ阳性率为３９．０％，其中男性阳性者占３２．１４％，女性阳性者占６７．８６％，二者差异有统计学意义（Ｐ＜０．００１）；同性别不同年龄组间ＡＮＡ阳性率差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；同年龄组间女性ＡＮＡ阳性率均高于男性（Ｐ＜０．００１）。
成人重症肌无力ＡＮＡ阳性患者荧光模式分析结果表明，单一荧光核型以均质型最多（３４．１７％），其次是核斑点型（２８．５５％）和胞浆型（１４．９８％）。
混合荧光模式以核斑点型／细胞浆型（Ｓ／Ｃ）为主（４．８４％）。
ＡＮＡ阳性患者滴度以１∶１００为主，占５７．５７％。
抗核抗体谱以Ｒｏ ５２、ＳＳ Ａ、ＡＭＡＭ２和ＣＥＮＰＢ阳性率较高，约７０％ＡＮＡ均质型阳性标本中其ＡＮＡ谱为阴性。
结论 成人重症肌无力患者ＡＮＡ阳性率女性显著高于男性，高年龄组阳性率更高。
ＡＮＡ荧光核型以均质型、核斑点型和胞浆型为主，ＡＮＡ谱以Ｒｏ ５２、ＳＳ Ａ、ＡＭＡＭ２和ＣＥＮＰＢ阳性率较高。
约７０％ＡＮＡ均质型阳性标本中其ＡＮＡ谱为阴性，因此均质型中高度怀疑有其他重症肌无力特异性抗体未被识别。
关键词：重症肌无力； 抗核抗体； 抗核抗体谱； 自身免疫性疾病； 滴度中图分类号：Ｒ７４６．１ 文献标识码：ＡＡｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＴｅｓｔｉｎｇＲｅｓｕｌｔｓｏｆＡｎｔｉｎｕｃｌｅａｒＡｎｔｉｂｏｄｙａｎｄＡｎｔｉｎｕｃｌｅａｒＡｎｔｉｂｏｄｙＳｐｅｃｔｒｕｍｉｎ１６４２ＡｄｕｌｔｓｗｉｔｈＭｙａｓｔｈｅｎｉａＧｒａｖｉｓＦＥＮＧＳｕ，ＬＩＡＮＧＣｕｉｊｕａｎ，ＣＨＥＮＧＬｉｓｈａｎ，ＰＡＮＪｉｎｇ，ＳＯＮＧＧｕｏｗｅｉ，ＬＩＡＮＧＹｕｎ（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｓｏｆａｎｔｉｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｂｏｄｙ（ＡＮＡ）ａｎｄａｎｔｉｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｂｏｄｙｓｐｅｃｔｒｕｍ（ＡＮＡｓ）ｉｎａｄｕｌｔｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＩｎｄｉｒｅｃｔｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＩＩＦ）ｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＡＮＡｉｎ１６４２ａｄｕｌｔｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ．ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＡＮＡｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ１５ｍａｒｋｅｒｓｓｕｃｈａｓＡＮｕＡ，Ａｎｔｉ Ｐ，ａｈａ，ＡＭＡ Ｍ２，ＣＥＮＰＢ，Ｊｏ １，ＰＣＮＡ，ＰＭ Ｓｃｌ，Ｒｏ ５２，ＳＣＬ ７０，ＳＳ Ｂ，Ｓｍ，ｄｓＤＮＡ，ｎＲＮＰ／Ｓｍ，ａｎｄＳＳ Ａ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｍｏｎｇ１６４２ａｄｕｌｔｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ，ｔｈｅＡＮＡｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｗａｓ３９．０％，ｏｆｗｈｉｃｈｍｅｎａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ３２．１４％ａｎｄｗｏｍｅｎａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ６７．８６％（Ｐ＜０．００１）；ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＡＮＡａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｇｅｇｒｏｕｐｓｏｆｔｈｅｓａｍｅｓｅｘｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔ（Ｐ＜０．０５）；ｔｈｅＡＮＡｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｗａｓｈｉｇｈｅｒｉｎｗｏｍｅｎｔｈａｎｍｅｎｉｎｔｈｅｓａｍｅａｇｅｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．００１）．ＴｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｐａｔｔｅｒｎｏｆＡＮＡｐｏｓｉｔｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｏｓｔｓｉｎｇｌｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｋａｒｙｏｔｙｐｅｗａｓｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ（３４．１７％），ｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｓｐｅｃｋｌｅ（２８．５５％）ａｎｄｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ（１４．９８％）．Ｔｈｅｍｉｘｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｗａｓｍａｉｎｌｙｎｕｃｌｅａｒｓｐｏｔ／ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ（Ｓ／Ｃ）（４．８４％）．ＴｈｅｔｉｔｅｒｏｆＡＮＡｐｏｓｉｔｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓｗａｓｍａｉｎｌｙ１∶１００，ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．０７．００６收稿日期：２０２０ ０３ ２７；修回日期：２０２０ ０７ ０６基金项目：河北省石家庄市科技支撑计划（编号：１５１４６０８６３）作者简介：冯苏（１９８１—），女，主管检验师。
细胞分子免疫学-间接免疫荧光法检测抗核抗体精品文档
间接免疫荧光法检测抗核抗体
<<细胞与分子免疫学技术>>
实验原理
ANA (Antinuclear Antibodies) 是针对细胞核成分的 自身抗体 间接免疫荧光法检测ANA是初步筛选实验 ANA阳性提示患有自身免疫性疾病SLE和其他不同类 型的风湿病，抗体滴度≧1:100 Hep-2细胞为抗原基质，产生的荧光核型与靶抗原的 分布部位有关
FITC-羊抗人 IgG: 20 µl per field 孵育 30min
PBS/Tween20
Wash PBS-TwΒιβλιοθήκη en冲洗1 s5 min 浸泡
抗原片背面滤纸吸干
清水冲 洗加样 板，滤 纸擦干
Glycerol/PBS
生物薄片上滴加1滴磷酸 盐缓冲甘油
北京欧蒙生物技术有限公司 抗核抗体谱（IgG）检测试剂盒
抗原片组合：Hep-2细胞+灵长类肝脏冰冻切片 ANA没有器官和种系的特异
(Homogeneous nucleoplasmic)
(在SLE中阳性率40%-70%)
(Coarse speckled nucleoplasmic)
(Fine speckled nucleoplasmic)
Hep-2
10X100X1000X 4L 标本 + 36 LPBS-Tween
25 µl per field
加样板
PBS 原液、1:10、1:100、1:1000
孵育 30min
PBS-Tween冲洗1 s
5 min 浸泡
抗原片背面滤纸吸干
清水冲 洗加样 板，滤 纸擦干
PBS/Tween20
加样板
核仁型（Nucleolar pattern）
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析
间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析目的探讨间接免疫荧光法（IIFA）检测抗核抗体在自身免疫性疾病（AID）患者中的结果应用分析。
方法分别采用IIFA和胶乳法检测50例自身免疫性疾病患者血清样本抗核抗体（ANA）。
结果IIFA法检测血清ANA的灵敏度为76%，胶乳法检测血清ANA的灵敏度为58%，差异有统计学意义（P＜0.01）。
结论IIFA 法检测ANA的敏感度明显高于胶乳法，提高了临床的阳性检出率。
IIFA法用于ANA的筛查，阳性标本在进行滴度检测，有助于临床诊断。
标签：抗核抗体；间接免疫荧光法；胶乳法[Abstract] Objective To discuss the results of indirect immunofluorescence in detecting the antinuclear antibodies in patients with autoimmune diseases. Methods The antinuclear antibodies of serum samples of 50 cases of patients with autoimmune diseases were detected respectively by the IIFA and emulsion method. Results The difference in the sensitivity degree of ANA detected by IIFA method and emulsion method had statistical significance（76% vs 58%）（P＜0.01）. Conclusion The sensitivity degree of ANA detected by IIFA method is obviously higher than that detected by the emulsion method，which improves the positive detection rate in clinic，the application of IIFA method for ANA screening and the application of positive specimens for titer detection contribute to clinical diagnosis.[Key words] Antinuclear antibodies；Indirect immunofluorescence；Emulsion method抗核抗体（ANA）包括细胞核的自身抗体和细胞质内的核酸和核蛋白的所有成分的自身抗体，是指哺乳动物的细胞中以细胞核为靶抗原的自身抗体的总称[1]。
临床免疫实验 间接免疫荧光法测抗核抗体实验报告
实验三、间接免疫荧光法检测血清中抗核抗体一、实验目的：1、掌握免疫荧光法的原理。
2、掌握免疫荧光法检测过程中避免非特异荧光干扰的方法。
二、实验原理：间接免疫荧光技术是利用荧光抗体标记第二抗体检测未知抗原或未知抗体（第一抗体）的方法。
以检测人血清抗核抗体（ANA）为例。
病人血清中ANA（Ab）能与各种系细胞核成分（Ag）特异性结合，此种结合的Ab（IgG型）能与荧光标记的羊抗人IgG（二抗）结合，在荧光显微镜下，细胞核显示荧光，提示血清中ANA的存在。
三、试验材料：0.1M，pH6.8PBS；小白鼠，待测血清，对照血清（阴性血清），羊抗人IgG荧光抗体、滴管、试管、孵箱、荧光显微镜等。
四、实验步骤：1、小鼠断颈处死取肝，NS漂洗，剪取肝横断面印片于玻片上，左右各一处，自然干燥；滴加无水乙醇固定，室温凉干；2、左右印片处分别盖上一片小纸片，分别滴加阳性血清和阴性血清各1滴，37℃30′；3、去除纸片，PBS冲洗1min×3次，吸干水分；4、左右印片处分别盖上一片小纸片，并滴加荧光标记羊抗人IgG（二抗）各1滴，37℃305、去除纸片，PBS漂洗1min×3次，吸干水分；6、荧光显微镜镜检。
五、实验结果：荧光显微镜下观察：细胞核发黄绿色荧光为阳性染色细胞，不发荧光为阴性；抗原片中出现阳性染色细胞为ANA 阳性，否则为阴性；阳性待检血清可作进一步稀释后测定效价。
（均质型）细胞核呈均匀一致的荧光(斑点型)细胞核内呈现斑点状荧光六、实验讨论：1、注意事项：1）制作核抗原片（印片）不宜太厚；2）滴加的血清或荧光抗体要充分盖满抗原片；3）荧光抗体孵育时要注意避光;4）染色后的片子应及时镜检，不宜放置过久。
5）注意各步骤的漂洗要充分。
2、临床意义：1）总的ANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个极为重要的筛选试验。
绝大多数自身免疫性疾病均可呈阳性。
ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价有重要意义。
抗核抗体2分析解析
抗核抗体2分析解析ANA-2检测的意义在于检测抗核抗体的存在。
抗核抗体是一类针对细胞核内的成分产生的自身抗体。
在正常情况下，免疫系统应该只攻击感染的细胞或外来抗原，而不应攻击自身细胞。
然而，在一些自身免疫性疾病中，免疫系统会错误地攻击自身细胞，导致炎症和组织损伤。
ANA-2检测可以帮助诊断这些疾病，并指导治疗。
ANA-2检测通常使用间接免疫荧光法（IFA）进行。
在这种方法中，患者的血液样本与人类细胞进行反应，然后使用荧光染料观察结果。
在正常情况下，没有抗核抗体的存在，细胞核不会发光。
当存在抗核抗体时，细胞核会发光，这可能暗示自身免疫疾病的存在。
然而，ANA-2测试结果的解读并不是绝对的。
ANA-2阳性并不意味着一定存在自身免疫性疾病。
这是因为ANA-2可能在其他情况下也会出现阳性结果，比如感染性疾病、药物反应、癌症以及年龄和性别等因素的影响。
因此，阳性结果需要进一步的临床和实验室评估来确定是否存在自身免疫性疾病。
除了阳性结果，ANA-2测试还可以产生阴性或低滴度的结果。
这可能意味着不存在自身免疫疾病，或者疾病处于早期阶段，免疫系统尚未产生足够的抗体。
如果临床症状不符合ANA-2阴性的结果，可能需要多次测试来排除自身免疫性疾病的可能性。
在一些情况下，ANA-2测试可能显示不确定结果。
这意味着测试结果不明确，需要进一步的检查来确认诊断。
不确定结果可能是由于一些因素干扰了结果的解读，比如技术问题或测试中使用的细胞底物。
除了结果解读的复杂性外，ANA-2测试还存在一些其他的局限性。
首先，ANA-2并不是一种特异性检测，也就是说，阳性结果并不能明确指示其中一种自身免疫性疾病的存在，而且可能会出现假阳性。
其次，ANA-2测试无法预测疾病的严重程度或进展。
最后，ANA-2测试也无法用于监测治疗效果或预测疾病预后。
总结起来，ANA-2是一个重要的实验室检查工具，用于筛查和确诊自身免疫性疾病。
然而，测试结果的解读需要结合临床和其他实验室检查结果，以及评估可能的干扰因素。
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间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析目的探讨间接免疫荧光法（IIFA）检测抗核抗体在自身免疫性疾病（AID）患者中的结果应用分析。
方法分别采用IIFA和胶乳法检测50例自身免疫性疾病患者血清样本抗核抗体（ANA）。
结果IIFA法检测血清ANA的灵敏度为76%，胶乳法检测血清ANA的灵敏度为58%，差异有统计学意义（P＜0.01）。
结论IIFA 法检测ANA的敏感度明显高于胶乳法，提高了临床的阳性检出率。
IIFA法用于ANA的筛查，阳性标本在进行滴度检测，有助于临床诊断。
标签：抗核抗体；间接免疫荧光法；胶乳法[Abstract] Objective To discuss the results of indirect immunofluorescence in detecting the antinuclear antibodies in patients with autoimmune diseases. Methods The antinuclear antibodies of serum samples of 50 cases of patients with autoimmune diseases were detected respectively by the IIFA and emulsion method. Results The difference in the sensitivity degree of ANA detected by IIFA method and emulsion method had statistical significance（76% vs 58%）（P＜0.01）. Conclusion The sensitivity degree of ANA detected by IIFA method is obviously higher than that detected by the emulsion method，which improves the positive detection rate in clinic，the application of IIFA method for ANA screening and the application of positive specimens for titer detection contribute to clinical diagnosis.[Key words] Antinuclear antibodies；Indirect immunofluorescence；Emulsion method抗核抗体（ANA）包括细胞核的自身抗体和细胞质内的核酸和核蛋白的所有成分的自身抗体，是指哺乳动物的细胞中以细胞核为靶抗原的自身抗体的总称[1]。
ANA在系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病、慢性活动性肝炎等自身免疫疾病中均呈不同程度的阳性。
因此在自身免疫性疾病的临床诊断、鉴别以及评价预后中，ANA检测已成为重要的筛查指标[2]。
临床上ANA检测方法较多，现阶段最常用、最有效的检测方法是IIFA法。
由于不同检测方法检测灵敏性、准确性不同，往往影响到检测结果，使检测结果存在一定的差异，尤其在ANA 呈弱阳性的标本中，不同检测方法的检测成为争议的焦点。
为进一步确认IIFA 法和乳胶法检测ANA的效果，进而客观评价该两种检测方法差异性，该文2015年10—12月间选取该院确诊或疑似为AID的患者50例作为观察对象，同时采用IIFA法和乳胶法检测，报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料所有标本均来自2015年10—12月到该院确诊或疑似AID的门诊和住院患者50例，男性15例，女性35例，年龄15～65岁。
1.2 仪器和试剂IIFA法采用北京和杰创新公司试剂盒；胶乳法采用Santa Monica U.S.A试剂盒。
试剂均在有效期内使用。
仪器设备Olympus BX60型荧光显微镜，TS-1型转移脱色摇床。
1.3 方法将HEp-2细胞进行第1次温育，并固定在载片反应区上，使用1：100稀释的血清加入，观察两者反应，如果特异性IgA、IgG和IgM抗体与相应抗原结合，则表示标本呈阳性。
在继续进行第二次温育时，使用显微镜观察HEp-2细胞的特异性的荧光模型，结合抗体和荧光素标记的抗核抗体反应进行判断，如果显微镜下HEp-2细胞显示无特异性荧光或极弱且均匀的荧光，则表示标本为阴性；如果显微镜下HEp-2细胞显示显著特异性荧光，则表示标本为阳性。
并根据靶抗原在细胞内所处位置的不同区分荧光核型，并按1∶100、1∶320、1∶100 0、1∶320 0滴度系统报告抗体最终滴度。
荧光较弱型不易区分者，为弱阳性，即滴度为1：100。
胶乳法在黑色反应卡上各滴加50 uL的血清和反应液，搅拌均匀，80～100 rpm旋转摇匀2 min，立即读取结果。
出现凝集颗粒为阳性，没有出现凝集颗粒为阴性，对阳性标本，可按1∶2、1∶4…进行倍比稀释作半定量试验，抗ANA的滴度为呈阳性反应的血清最高稀释度。
2 结果IIFA和胶乳法检测结果比较以IIFA和胶乳法检测50例临床确诊或疑似为AID的患者血清ANA，IIFA法检测阳性、弱阳性及阴性例数分别为34，4及12例，阳性率为76%，乳胶法检测阳性、弱阳性及阴性例数分别为28，1及21例，阳性率为58%，差异有统计学意义（P＜0.01），见表1。
3 讨论抗核抗体是最常出现于自身免疫性风湿病（结缔组织病）患者血清中的一组自身抗体的总称。
在各类型的自身免疫性疾病患者的细胞中，ANA均显示不同程度的阳性。
在风湿性疾病中，ANA检测是临床鉴别和诊断的重要依据。
ANA 的检测在临床上作为自身免疫疾病的筛查检测项目早已得到公认。
大量文献报道间接免疫荧光法是检测总的抗核抗体的经典实验方法[3-5]，由于ANA的靶分子是细胞内特有的抗原性物质，因目前技术水平所限，这些抗原成分依然难以实现人工复制，因此在人工提纯过程中可避免其他核抗原所引起的假阴性。
而Hep-2细胞核质丰富，经过提纯可以提高ANA检测的灵敏性[6-7]，此外抗核抗体的荧光模型对AID的临床分类有密切关系，滴度的高低与临床症状有关，可用于临床治疗的动态监测。
但在实际操作中，由于缺乏适合的参考标准物，造成实验室检测缺乏参考标准，尤其对临界滴度标本的检测最具争议。
另外，且受到阅片人的知识技术的影响，使检测结果的正确性和精确度产生差异。
胶乳法简便快速，便于观察，但敏感性差。
从表中可以证实，胶乳法与IIFA法在检测滴度为1∶100ANA时检测的结果符合率较低。
说明IIFA法的敏感性明显高于胶乳法，很大程度上提高了检出阳性率，可以作为主要几种ANA成分的筛查方法，在获得荧光核型信息同时观察抗体滴度的变化情况，指导临床治疗。
现已证实抗核抗体（ANA）的检测在自身免疫性疾病的临床诊断中具有一定的价值。
但由于自身免疫性疾病类型不同，因此ANA的灵敏度和特异度存在差异，因此在临床中也具有不同的应用价值。
在不同自身免疫性疾病中，特别是风湿性疾病，其抗体谱有一定的特征性。
几乎所有的SLE患者抗核抗体呈阳性[8]，故ANA常作为SLE 诊断的一项实验室指标；药物性SLE、混合性结缔组织病（MCTD）ANA阳性率为95%～100%；干燥综合症（SS）阳性率为70%～80%；进行性全身性硬化症（PSS）阳性率为85%～95%；其他如类风湿性关节炎、皮肌炎及多发性肌炎、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎等也有20%～50%的检出率，常在其他的如儿童慢性关节炎、抗心磷脂抗体综合征等自身免疫性疾病中，临床上病情监测以及预后判断均将ANA检测作为重要指标[9]。
但需注意的是，在这些疾病中，ANA 检测并非作为临床诊断依据，ANA阳性仅提示预后较差，对于病情监测和预后具有重要价值。
而甲状腺疾病、盘状红斑狼疮、RA、多发性硬化症、ITP及部分感染性疾病、恶性肿瘤等疾病以及乳房硅胶填充术者中，ANA也呈较高的阳性率，明显高于普通人群。
[参考文献][1] Clinical and Laboratory Standsrds Institute.EP15-A2 Verification of performance for precision and trueness[S].Wayne，PA，USA：CLIS，2006.[2] 刘淑梅.抗核抗体的检测间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验法的比较[J].医学检验与临床，2007，18（4）：43-45.[3] CharkED，Orloff MI，Nishiuchi E，et al. Somatic hypcrmutations confer rheumatoid factor activity in hepatitis C virus-associated mixed （ryoglohulincmia[J].Arthritis Rhcum，2013，65（9）：2430-2440.[4] 万本愿，李胜远，姜青龙. 自身抗体检测的临床应用与质量控制[J]. 实验与检验医学，2013，31（1）：52-55.[5] 张萍，李晓军.自身抗体检测在临床诊断中的应用特点[J]. 中国实验诊断学，2014，26（6）：1036-1039.[6] Gxrxzzino S，Calitri C，Vcrsace A，et al. Natural history of vertically acquired HCV info（lion and associated autoimmunc phenomena[J].Eur J Pcdiatr，2014，173（8）：1025-1031.[7] Marconcini ML，Fayad L，Shiozawa MB，et al. Autoantihody profile in individuals with chronic hepatitis C[J].Rev Soc Bras Med Tr-op，2013，46（2）：147-153.[8] Suare-Almazor ME，Gonzales - Lopez L，Gamez - Nava J I，et al. Utilization and predictive value of laboratory tests in panents reterred torheumatologists by primary care physiciams[J]. J Rheumatol，1998，25（10）：1980-1985.[9] 叶应妩，王毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006.（收稿日期：2016-06-26）。