实验一尿药法测定核黄素的生物利用度
药剂学实验指导定稿版
药剂学实验指导Experiment and Guide for Pharmaceutics 主编 王慧云副主编 张春燕王保国济宁医学院药剂教研室前言药剂学是以剂型为中心研究其配制理论、处方设计、制备工艺与设备、质量控制及合理应用等多学科渗透的综合性技术学科是药学类专业的主干专业课程。
随着药剂学研究的深入发展各个研究领域越来越系统化、明朗化逐步形成了一系列分支学科即quot工业药剂学quotquot生物药剂学quotquot药物动力学quotquot药用高分子材料学quotquot物理药剂学quotquot临床药剂学quot等。
为了帮助学生更好地理解、掌握、运用药剂学、工业药剂学、生物药剂学与药物动力学等学科的相关知识点我们根据药学类本科课程教学大纲基本要求结合医学生教学培养特点编写了本实验指导。
本实验课程主要面向药学、药物制剂专业三、四年级本、专科生开设实验内容涵盖液体制剂、固体制剂、半固体制剂等剂型的制备并结合药物检测技术使学生掌握药物制造的整个过程及质量控制为学生今后从事药品生产和科研开发作必要的准备 涵盖了药物与辅料的配伍选择、药物制剂在生物体内吸收、分布、代谢、排泄等动态过程及生物利用度、生物等效性等实验原理和方法。
同时通过实验教学培养学生严谨的科学作风和求实的工作态度。
另外书后附有单冲压片机、片剂硬度测试仪、脆碎度测试仪、崩解时限测试仪、智能药物溶出仪、澄明度测试仪、滴丸机、小型混合机、整粒机等仪器的使用说明以供参考。
参加本书编写的有王慧云、周金辉、王汀、王保国、张春燕、崔亚男、张惠平、孙珊珊、尹红霞、李涛等同志由王慧云老师主持编写和统稿。
由于编者水平有限书中难免存在错误和不足之处敬请读者批评指正。
编者2008年8月目录药剂学实验实验一低分子溶液剂的制备1 实验二高分子溶液剂及溶胶剂的制备9 实验三乳剂的制备17 实验四片剂的制备及质量检查24 实验五栓剂的制备及质量检查35 实验六对乙酰氨基酚片溶出度的测定40 实验七抗氧剂抗氧化作用的观察47 实验八硬胶囊剂的制备50 实验九膜剂的制备53 实验十微囊的制备57 实验十一软膏剂的制备62 实验十二脂质体的制备及包封率的测定71 工业药剂学实验实验一片剂的制备及其质量考察80 实验二0.5维生素C注射剂的制备及质量评价89 实验三微丸的制备97 实验四滴丸的制备104 实验五片剂薄膜包衣及质量评价108 实验六药物制剂配伍变化115 生物药剂学与药物动力学实验实验一尿药法测定核黄素片剂消除速度常数119 实验二大鼠在体小肠吸收实验127 实验三经皮渗透实验132 实验四药物动力学单隔室模型模拟实验137 实验五对乙酰氨基酚在家兔体内药物动力学研究141 附录一中国药典2005版简介151 附录二BS/BT系列电子天平155 附录三CH10型小型混合机157 附录四DP1.5、TDP5型单冲式压片机160 附录五DW1型滴丸机165 附录六ZRS8G型智能溶出实验仪167 附录七YD1型片剂硬度测试仪170 附录八BJ2型崩解时限测试仪172 附录九CS1型脆碎度测试仪174 附录十YBⅡ型澄明度检测仪176 附录十一INVT系列整粒机178 药剂学实验Experiment of Pharmaceutics济宁医学院药剂学实验指导1 实验一低分子溶液剂的制备一、实验目的1掌握溶液型液体药剂的基本制备方法。
尿药法
3
4
6
8
5
10
尿药测定记录
试管号 A1 A2 A1-A2 C
空白
1 2 3 4 5
尿药法动力学分析记录
试管 时间间隔 号 Δt 空白 1 2 3 / 2 2 2 中点时间 Δ t中 / 1 3 5 Δ xu mg / Log 平均排泄速度 Δ Xu/ Δ Xu/Δ t Δt / /
4
5
2
2
7
9
绘制尿药排泄速率曲线，及其方程 求k及t1/2 计算总排泄量（mg),排泄百分率。
注意点
每次收集尿液后，饮200ml左右水维持尿量。 试验期间（包括服药前一天）控制食谱，不能吃
含有核黄素的食物，如蛋类、牛奶、奶糖等。并
不能服用含有B族维生素的药品。
二.尿液中核黄素含量测定。
核黄素在保险粉Na2S后
两次的吸光度（λ=444nm）的差值，计算尿液 中核黄素的含量。
实验内容与操作
一.服药及尿样收集 1.服药前一天收集24h尿液，每次收集尿液后量体积， 取10ml保存，其余倒掉。 2.临服药前排空小便。
3.早餐后立即服用核黄素片三片，用温水吞服，记录
服药时间。 4.按药片服下后的第2、4、6、8、10小时收集尿液， 用量筒记录尿液体积，然后，将尿液倒入盛有0.2ml 冰醋酸的刻度试管内至20ml，摇匀，避光处保存。
尿液中核黄素的测定
1.称取核黄素对照品50mg于500ml容量瓶中，加入 0.02mol/L醋酸液稀释至300ml，置水浴加热溶解后 ，放冷至室温，继续加醋酸液至刻度，摇匀即得，得 100微克/毫升的核黄素标准液，然后加甲苯覆盖上面 ，凉暗处保存。
精密吸取0.1、0.3、0.5、1.0、2.0、3.0ml分别置于 10ml容量瓶中，用酸化蒸馏水（1ml冰醋酸→100ml 水）稀释至刻度。紫外分光光度计（λ=444nm）测 吸光度，然后每管各加3mg保险粉，摇匀，1min内 再次测定，计算两次之差，以浓度为横坐标，吸光度 差值为纵坐标，建立标曲。 尿样紫外测定带入标准曲线，算出核黄素的含量。
负荷尿核黄素测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除负荷尿核黄素测定实验报告篇一：实验六负荷尿中核黄素的测定实验六负荷尿中核黄素的测定（荧光法）（一）目的意义尿中核黄素排出量测定是评价人体核黄素营养状况的一种方法，包括负荷试验和核黄素肌酐比值测定。
（二）原理含有核黄素的溶液在紫外线下发黄绿色荧光，在稀溶液中荧光强度与核黄素浓度成正比。
核黄素又可被低亚硫酸钠还原而失去荧光，故测定还原前后的荧光强度可去除干扰性荧光物质的影响。
（三）仪器与试剂1．荧光光度计2．酸性水取浓硫酸0.3ml，加蒸馏水至200ml。
3．核黄素标准储备液精密称取25mg核黄素于1000ml容量瓶中，用酸性水稀释至刻度，移至棕色瓶内，冷藏备用。
4．核黄素标准应用液吸取上液4ml，用酸性水稀释至100ml。
临用时配制。
5．低亚硫酸钠（na2s2o4）（四）操作步骤1．样品取尿样lml加酸性水19ml于一具塞试管内，混匀，在激发波长420nm和发射波长530nm处测定荧光强度。
记下读数（A）后，取10mg低亚硫酸钠直接加人比色杯内，摇匀，立即测定荧光强度并读数（b）。
2．内标准取尿样1.0ml加核黄素标准应用液1.5ml，加酸性水17.5ml，混匀，在同样情况下测定荧光强度，记下读数（c），取10mg低亚硫酸钠直接加入比色杯内，摇匀，立即测定荧光强度并读数（D）。
（五）结果计算（六）说明1．所有操作需在暗室内进行。
2．作内标准的目的是除去尿样中可能存在的有荧光的物质。
3．使用荧光光度计是需用荧光红钠校正。
荧光红钠溶液的配制：溶解25.0mg荧光红钠（sodiumfluorescein）于少量水中，搅拌使其溶解后加水至250ml，此液为储备液。
取储备液0.25ml加水稀释成250ml，为工作液。
校正步骤：现选择所需激发波长和发射波长，校正仪器零点，然后以荧光红钠工作液校正荧光计使指针在某一刻度，在测定样品的荧光强度。
4.如遇尿样混浊，难以直接读数，可将尿液按食品中核黄素测定方法稀释后，过硅镁层析柱再进行测定。
尿药法测定人体口服核黄素的PK参数及F
一、实验目的
• 掌握尿药法测定药物制剂的动力学参数及 生物利用度的方法
• 了解口服核黄素在体内的过程。
二、实验原理
• 核黄素异咯嗪环上发色基团中的活泼双键, 在444nm有 可见吸收，在保险粉( 连二亚硫酸钠) 作用下, 能还原为 无色双氢核黄素，在此波长无吸收。
• 空白尿：△A1 (内源性VB2的吸收)=A1(内源性VB2和非
VB2的吸收)-A2(非VB2的吸收)
• 含药尿样：△A2 (外内源性VB2的吸收)=A1(外内源性
VB2和非VB2的吸收)-A2(非VB2的吸收) • 则外源性VB2的吸收值应为：△A=△A1-△A2
二、实0.5= Xu∞=∑∆Xu＋ （∆Xu/ ∆t）14-16／k
F= (Xu∞ ∕ X0） ×100%
五、实验讨论
1. 2. 3.
六、思考题
1. 用尿药法测定生物利用度时集尿时间应多长？ 2. 尿药速度法和亏量法的区别？ 3. 尿药法能求哪些药动学参数？
2.尿药实验 2.1 服药及尿样收集：早起排空小便，服用3片，共
15mg核黄素，按下表时间收集尿液。避光保存。 2.2空白尿样中核黄素VIS测定：△A1=A1-A2 2.3含药尿样中核黄素VIS测定： △A2 =A1-A2 2.4 外源性核黄素的VIS： △A=△A1-△A2
四、实验结果
时间（h) 累积空白尿量（ml) 24h核黄素 平均每h核 总量 黄素总量
t 中 尿量 △A2
ml
0.5 1.5 3 5 7 9 11 13 15
尿药浓度 ∆X ∆Xu/∆
mcg/ml u t (ug)
t中/h
0.5 1.5 3 5 7 9 11 13 15
3-药动学实验讲义(尿药法测定核黄素片剂消除速度常数)
实验三 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数【实验目的】1、 熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用2、 掌握尿药法计算消除速度常数等动力学参数的方法【实验原理】药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等过程既有区别，又有联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识到另一方面的情况，所以药物在体内的速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。
在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测定方法较易建立，而且取样方便，受试者可免收多次抽血的痛苦。
因此，在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度，可用下列微分式表示：X K dtdX e u= （1） Ke 为表观一级排泄速度速度，Xu 为t 时间尿中原形药物的累计排泄量，X 为t 时间体内存有的药量。
在静脉给药时，体内药量的经时过程可由下式表示：kt o e X X -= （2）Xo 为给药剂量，K 为表观一级消除速度常数。
将（2）式中X 值代入（1）式后得：kt o e e X K dtdXu-= （3） 两边取对数得：303.2log logKtX K dt dX o e u -= （4） 由（4）式可见，原形药物排泄速度得对数对时间作图为一直线，其斜率为-K/2.303，与血药浓度的对数对时间作图所求的斜率相同。
（4）式适用于静脉给药后求算消除速度常数。
若口服给药，则体内药量经时过程可由下式表示：)(t K Kta o a a e e KK F X K X ----=（5）Ka 为表观一级吸收速度常数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度可由（5）式代入（1）式得：)(t K Kta o a e u a e e KK FX K K dt dX ----= （6） 当Ka>K ，t 充分大时，则e -Kat →0，（5）式简化为：Kta o a e u e KK FX K K dt dX --= （7） 两边取对数得：303.2log logKtK K FX K K dt dX a o a e u --= （8） 由上述关系式可见，若以logXu/dt 对t 作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线得斜率可求出一级消除速度常数K 。
实验八.尿药法测定核黄素片剂消除速率常数
1
一、实验目的
1、熟悉尿药法在生物药剂实验中的
应用。 2、掌握尿药法在计算消除速度常数 等动力参数的方法。
2
二、实验原理
药物在体内的吸收、分布、代谢、等过程中既有区 别，又有联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识 另一方面的情况，所以药物在体内的速度过程变化规律， 既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。 在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分 析精密度好，测定方法较易建立，而且取样方便，受试 者可免受多次抽血的痛苦。因此，在体内药物大部分以 原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度 常数、生物半衰期等动力学参数。尿中原形药物的瞬时 排
三、实验内容与操作
(—)服药及尿样收集 1、临服药前排空小便。 2、早餐后立即服用核黄素三片（5mg/片）， 用温水250ml吞服不咀碎，记录服药时间。 3、按服下药片后的第0、0.5、1、1.5、2、 2.5、3、 4、5、6、8、10小时收集尿液， 记录尿液重量（按密度为1折算药液体积）， 然后，将尿液倒入盛有0.1mL冰醋酸的刻度 试管内至10mL，摇匀，于阴凉避光处保存。
注意点： 1、每次收集尿液后饮150～200mL左右水以维持 尿量。 2、大便时收集小便，切勿损失。 3、试验期间（包括服药前一天）控制食谱，不能 吃含有核黄素的食物，如：蛋类、牛奶、麦乳精、 奶糖等。并不得服用含有B族维生素的药物。
（二）尿液中核黄素含量的测定 1、原理： 核黄素的异咯嗪环上具有活泼的双键，能接 受和放出氢原子，在保险粉（连二亚硫酸钠）的 作用下，能还原为无色双氢核黄素，利用这一特 性，可以由加入保险粉前后二次测得的吸收度 （核黄素在波长444nm处有吸收）的差值，来计 算尿液中核黄素的含量。
实验一尿药法测定核黄素的生物利用度
实验一尿药法测定核黄素的生物利用度公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]实验一尿药法测定核黄素的生物利用度一、实验目的1.熟悉尿药法实验的取样方法及注意事项。
2.掌握尿药法计算消除速度常数及生物利用度的方法。
二、实验原理药物的体内过程是由吸收、分布、代谢、排泄等过程组成的，大多数药物均有部分的原形经尿排除，常可用血药法和尿药法来估测药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度。
采用血药法测定药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度时，由于多次采血，不易接受，对于药物大部分以原形从尿中排除的情况下，尿药浓度高于血药浓度，测定方法易建立，取样方便，本实验采用尿药法测定核黄素的生物利用度。
单室模型单剂量口服给药的尿排泄速率法基本公式为？ka>>k, t 较大时，e-Kat → 0。
以曲线后项dxu/d t 的对数对t回归可得一条直线。
？由公式可见，若以ln dxu/d t对t作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线的斜率可求出一级消除速度常数k。
由于尿中原形药物排泄速度的瞬时变化率是不可能用实验方法求算的。
通过实验可求出平均排泄速度，设在一时间Δt内药物的排泄量为ΔXu，则平均排泄速度记为ΔXu/Δt，这样上式可改写如下：？集尿经历的时间通常只需半衰期的3~4倍即可。
由于实验中采用平均排泄速度代替瞬时排泄速度，求得的消除速度常数K会出现一些误差。
但若以恒定的时间间隔集尿，其时间间隔不大于一个药物的半衰期，则仅发生2%以内的偏差。
生物利用度是生物药剂学的一个重要参数，它反映药物在体内吸收的程度与吸收速率。
可分为相对生物利用度与绝对利用度。
当药物的口服制剂与静脉注射剂相比，则可得到绝对生物利用度。
测定生物利用度常用方法除用血药法外还可用尿药法，尿药法即从累积尿药量来计算生物利用度。
生物利用度是指服药后药物吸收进入大循环的速度和程度，以静脉注射为参考标准得到是绝对生物利用度用其他制剂为参考标准得到的是相对生物利用度。
生物药剂学与药物动力学实验
生物药剂学与药物动力学实验目录一、基本知识与基本技能二、验证性实验实验一磺胺嘧啶在体小肠吸收实验实验二磺胺类药物的组织分布实验实验三血浆蛋白结合率测定实验四尿药法测定核黄素片剂药动学参数实验五卡马西平血药浓度监测实验六苯酰甲硝唑分散片人体生物等效性试验实验七 TD X监测环孢素A血药浓度三、设计性实验实验一血药浓度测定与药动学研究实验二制剂生物利用度实验实验三阿司匹林缓释片体内外相关性实验实验四氨茶碱血药浓度的监测和治疗方案设计实验五重复一点法测定药动学参数四、综合性实验实验一对乙酰氨基酚溶出度测定及溶出参数的计算实验二对乙酰氨基酚血药浓度测定与药物动力学研究实验三阿司匹林肠溶片的血药浓度测定五、附录一、基本知识与基本技能生物药剂学是研究药物及其剂型在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程，阐明药物的剂型因素，机体生物因素和药物疗效之间相互关系的一门学科；药物动力学是应用动力学原理与数学处理方法，定量描述药物在体内动态变化规律的学科。
生物药剂学与药物动力学是药学专业的一门主要专业课程。
使学生在掌握生物药剂学和药物动力学的基本概念、基本理论和研究方法基础上，能初步应用有关知识正确评价药物制剂质量，设计合理的剂型、处方及生产工艺，并为临床合理用药提供科学依据，也能应用药物动力学的原理进行药物制剂生物等效性评价、给药方案设计及临床药物治疗方案的个体化等。
实验课是生物药剂学与药物动力学课程中必不可少的重要实践环节。
通过实践教学，学习生物药剂学与药物动力学实验的设计及数据的处理方法，熟悉生物样品处理与检测的方法，能进行临床药代动力学实验的设计及数据的处理，掌握实验方法在临床合理用药方案设计中的应用，掌握专业实验技能，培养学生独立思考和独立工作能力以及科学的工作态度和习惯。
生物药剂学与药物动力学的实验对象常为动物或人，通常通过给予受试对象药物或制剂后，检测不同时间生物样品中药物与代谢物的浓度变化来了解药物在体内吸收、分布、代谢与排泄规律。
实验一、尿药法测定核黄素的生物利用度
实验一尿药法测定核黄素的生物利用度一、实验目的1.熟悉尿药法实验的取样方法及注意事项。
2.掌握尿药法计算消除速度常数及生物利用度的方法。
二、实验原理药物的体内过程是由吸收、分布、代谢、排泄等过程组成的，大多数药物均有部分的原形经尿排除，常可用血药法和尿药法来估测药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度。
采用血药法测定药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度时，由于多次采血，不易接受，对于药物大部分以原形从尿中排除的情况下，尿药浓度高于血药浓度，测定方法易建立，取样方便，本实验采用尿药法测定核黄素的生物利用度。
单室模型单剂量口服给药的尿排泄速率法基本公式为ka>>k, t 较大时，e-Kat → 0。
以曲线后项dxu/d t的对数对t回归可得一条直线。
由公式可见，若以ln dxu/d t对t作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线的斜率可求出一级消除速度常数k。
由于尿中原形药物排泄速度的瞬时变化率是不可能用实验方法求算的。
通过实验可求出平均排泄速度，设在一时间Δt内药物的排泄量为ΔXu，则平均排泄速度记为ΔXu/Δt，这样上式可改写如下：集尿经历的时间通常只需半衰期的3~4倍即可。
由于实验中采用平均排泄速度代替瞬时排泄速度，求得的消除速度常数K会出现一些误差。
但若以恒定的时间间隔集尿，其时间间隔不大于一个药物的半衰期，则仅发生2%以内的偏差。
生物利用度是生物药剂学的一个重要参数，它反映药物在体内吸收的程度与吸收速率。
可分为相对生物利用度与绝对利用度。
当药物的口服制剂与静脉注射剂相比，则可得到绝对生物利用度。
测定生物利用度常用方法除用血药法外还可用尿药法，尿药法即从累积尿药量来计算生物利用度。
生物利用度是指服药后药物吸收进入大循环的速度和程度，以静脉注射为参考标准得到是绝对生物利用度用其他制剂为参考标准得到的是相对生物利用度。
核黄素的异咯嗪环上具有活泼的双键，能接受和放出氢原子，在连二亚硫酸钠（保险粉）的作用下，能还原为无色的双氢核黄素，利用这一性质，可由加入保险粉的前后测得吸收度的差值，计算尿中核黄素的含量（444 nm）。
实验一、尿药法测定核黄素的生物利用度资料
实验一、尿药法测定核黄素的生物利用度资料
本实验采用尿药法测定核黄素的生物利用度，通过测定注射核黄素钠对小鼠体内核黄素的利用率，可以评估核黄素的生物利用度。
实验方法如下：
实验材料：
1.核黄素钠注射液
2.无菌生理盐水
3.白色雄性小鼠
实验步骤：
1.将小鼠随机分为两组，每组10只，分别标记为实验组和对照组。
2.实验组小鼠口服100ug核黄素钠注射液，对照组小鼠口服等量的生理盐水。
3.记录实验组与对照组小鼠在24小时内进食、饮水和排尿的情况。
4.24小时后将小鼠放入代表性细囊及毛细管的尿收集装置内，以便收集24小时尿液。
5.收集24小时后的小鼠尿液。
6.测定小鼠尿样中核黄素的含量，以评估核黄素的生物利用度。
实验结果：
实验组小鼠的尿样中核黄素含量为50ug/L，对照组小鼠的尿样中核黄素含量为
10ug/L。
实验分析：
通过比较实验组小鼠与对照组小鼠的尿样中核黄素含量，可知在实验组中口服的核黄素钠被小鼠体内充分利用，并转化成核黄素以供小鼠在生理活动中使用。
而对照组中口服的生理盐水中并不含有核黄素，因此对照组小鼠的尿样中核黄素含量很低，几乎是没有吸收的。
实验三 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数
实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数一、实验目的1、熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用。
2、掌握尿药法在计算消除速度常数等动力参数的方法。
二、实验原理药物在体内的吸收、分布、代谢、等过程中既有区别，又有联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识另一方面的情况，所以药物在体内的速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。
在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测定方法较易建立，而且取样方便，受试者可免受多次抽血的痛苦。
因此，在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度，可用下列微分式表示：KeX dtdXu =（1） Ke 为表现一级排泄速度常数，Xu 为t 时间尿中原形药物的累计排泄量，X 为t 时间体内存有的药。
在静脉给药时，体内药量经时过程可由下式表示：O X X =kt e -（2）X O 为给药剂量，K 为表现一级消除速度常数。
将（2）式X 值代入（1）式后得：kt o e e X K dtdXu -=（3） 两边去代数得：303.2log log Kt X K dt dXu o e -=（4） 由（4）式可见，原形药物排泄速度的对数对时间作图为一直线，其斜率为303.2K -。
与血药浓度的对数对时间作图所求的斜率相同。
（4）式适用于静脉给药后求算消除速度常数。
若口服给药，则体内药量经时过程可由下式表示：)(Kat Kt e e KKa KaXoF X ----=（5） Ka 为表现一级吸收速度常数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度可用（5）式代入（1）式得：)(Kat Kt e e KKa KeKaFXo dt dXu ----=（6） 当Ka ＞K ，t 充分大时，则0→-Kat e ，（5）式简化为：Kt e kKa KeKaFXo dt dXu --=（7） 两边取代数得：303.2log log Kt K Ka KeKaFXo dt dXu --=（8） 由上述关系式可见，若以Xu log ／dt 对t 作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线的斜率可求出一级消除速度常数K.。
实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数
实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数实验三尿药法测定核黄素片剂消除速度常数一、实验目的1、熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用。
2、掌握尿药法在计算消除速度常数等动力参数的方法。
二、实验原理药物在体内的吸收、分布、代谢、等过程中既有区别，又有联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识另一方面的情况，所以药物在体内的速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。
在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测定方法较易建立，而且取样方便，受试者可免受多次抽血的痛苦。
因此，在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度，可用下列微分式表示：K e X dtdXu =（1）Ke 为表现一级排泄速度常数，Xu 为t 时间尿中原形药物的累计排泄量，X 为t 时间体内存有的药。
在静脉给药时，体内药量经时过程可由下式表示： O X X =kte-（2）X O 为给药剂量，K 为表现一级消除速度常数。
将（2）式X 值代入（1）式后得：kto e eX K dtdXu -=（3）两边去代数得：303.2l o g l o gKt XK dtdXu oe -=（4）由（4）式可见，原形药物排泄速度的对数对时间作图为一直线，其斜率为303.2K -。
与血药浓度的对数对时间作图所求的斜率相同。
（4）式适用于静脉给药后求算消除速度常数。
若口服给药，则体内药量经时过程可由下式表示：)(K a tKteeKKa KaXoF X ----=（5）Ka 为表现一级吸收速度常数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度可用（5）式代入（1）式得：)(K a tKteKKa KeKaFXo dtdXu ----=（6）当Ka ＞K ，t 充分大时，则0→-Kat e ，（5）式简化为：KtekKa KeKaFXo dtdXu --=（7）两边取代数得：303.2l o gl o g Kt KKa KeKaFXo dtdXu --=（8）由上述关系式可见，若以Xu log ／dt 对t 作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线的斜率可求出一级消除速度常数K.。
尿药数据法测定核黄素的生物利用度和消除速度常数.
尿药数据法测定核黄素的生物利用度和消除速度常数.
尿药数据法测定核黄素的生物利用度和消
除速度常数
[适用对象]药学和药物制剂专业
[实验学时] 9学时
一、实验目的
1、掌握用尿药数据法测定制剂生物利用度和消除速度常数的实验设计和方法。
2、熟悉单室模型口服给药尿药浓度数据处理方法，掌握半衰期，相对生物利用度等参数的求算方法。
二、预习与参考
预习生物药剂学与药物动力学有关知识，以及生物利用度的相关知识。
参考数理统计学方法进行数据处理与分析内容。
三、实验内容
（一）尿样收集
（二）尿液中核黄素含量测定
1、标准溶液的制备
2、标准曲线的绘制
3、核黄素片含量测定
4、尿液中核黄素含量测定
（三）实验数据记录及数据处理
四、主要仪器设备功能和材料清单
冰箱，721紫外分光光度计，容量瓶等
五、实验要求
分成4组，一组绘制标准曲线，三组对尿液中药物含量进行测定计算平均值，通过线性回归得出回归方程，求出消除速度常数K，再求出体内生物利用度。
六、实验报告要求
1、写出实验目的与原理
2、写出实验操作过程及结果
3、对实验中出现的问题进行分析
七、思考题
1、何谓消除速度常数，尿药法测定消除速度常数实验应注意哪些问题？
2、何谓生物利用度？如何设计生物利用度实验？与生物利用度有关的主要参数有哪些？
八、实验成绩评定办法
主要评分点：原理描述5分、实验流程40分、数据记录20分、解决问题的能力10分、实验结果与实验效果共25分。
ww实验二十四 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数
log ΔXu =logKeXo— K t 中
Δt
2.303
（9）
log ΔXu =log KeKaXoF − K t 中
Δt
Ka − K 2.303
（10）
由于实验中采取平均排泄速度代替瞬时排泄速度，求得的消除速度常数 K 会出
现一些误差。但若以恒定的时间间隔集尿，其时间间隔不大于一个药物的半衰期时，
然后，在每管中各加保险粉约 3 毫克，摇匀。在一分钟内再次测定吸收度。两次测
定值之差，即为核黄素的吸收度，以此值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
110
（3） 尿样中核黄素含量测定 尿样测定照标准曲线制备项下的方法。从“以酸化蒸馏水作空白”起，依法测
定吸收度，以两次测定值之差，从标准曲线上查出尿液中核黄素的含量。 以上操作步骤，均须注意避光。
dXu = KeKaFXo （e-Kt—e-Kat） dt Ka − K 当 Ka>K，t 充分大时，则 e-kat→0，（5）式简化为：
（6）
dXu = KeKaFXo e-Kt dt Ka − K 两边取对数得：
（7）
log dXu =log KeKaFXo — Kt
dt
Ka − K 2.303
时间体内存有的药量。
在静脉给药时，体内药量的经时过程可由下式表示：
X=Xoe-kt
（2）
Xo 为给药剂量，K 为表观一级消除速度常数。
将（2）式中 X 值代入（1）式后得：
dXu =KeXoe-kt dt 两边取对数得：
（3）
log dXu =logKeXo- Kt
dt
2.303
（4）
由（4）式可见，原形药物排泄速度的对数对时间作图为一直线，其斜率为
ww实验二十四 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数
形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参
数。尿中原形药物的瞬时排泄速度，可用下列微分式表示：
dXu =KeX dt
（1）
Ke 为表观一级排泄速度常数，Xu 为 t 时尿中原形药物的累计排泄量，X 为 t
时间体内存有的药量。
ห้องสมุดไป่ตู้
在静脉给药时，体内药量的经时过程可由下式表示：
积，然后，将尿液倒入盛有 0.2 毫升冰醋酸的刻度试管内至 20 毫升，摇匀，于阴 凉避光处保存。
5． 注意点：
（1）每次收集尿液后饮 200 毫升左右水以维持尿量。 （2）每次大便时收集小便，切勿损失。 （3）试验期间（包括服药前一天）控制食谱，不能吃含有核黄素的食物，如：蛋 类、牛奶、麦乳精、奶糖等。并不得服用含有 B 族维生素的药品。
X=Xoe-kt
（2）
Xo 为给药剂量，K 为表观一级消除速度常数。
将（2）式中 X 值代入（1）式后得：
dXu =KeXoe-kt dt 两边取对数得：
（3）
log dXu =logKeXo- Kt
dt
2.303
（4）
由（4）式可见，原形药物排泄速度的对数对时间作图为一直线，其斜率为
-K ， 2.303
二、实验原理
药物在体内过程是一个整体，吸收、分布、代谢、排泄等过程既有区别，又有
联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识另一方面的情况，所以药物在体内的
速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。
在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测定方法较易建
立，而且取样方便，受试者可免受多次抽血的痛苦。因此，在体内药物大部分以原
（6）
3-药动学实验讲义(尿药法测定核黄素片剂消除速度常数)
实验三 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数【实验目的】1、 熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用2、 掌握尿药法计算消除速度常数等动力学参数的方法【实验原理】药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等过程既有区别，又有联系，观察一个方面的变化，常可间接地认识到另一方面的情况，所以药物在体内的速度过程变化规律，既可用血药法来估算，也可用尿药法来估算。
在多数情况下，尿药浓度高于血药浓度，定量分析精密度好，测定方法较易建立，而且取样方便，受试者可免收多次抽血的痛苦。
因此，在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下，通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度，可用下列微分式表示：X K dtdX e u= （1） Ke 为表观一级排泄速度速度，Xu 为t 时间尿中原形药物的累计排泄量，X 为t 时间体内存有的药量。
在静脉给药时，体内药量的经时过程可由下式表示：kt o e X X -= （2）Xo 为给药剂量，K 为表观一级消除速度常数。
将（2）式中X 值代入（1）式后得：kt o e e X K dtdXu-= （3） 两边取对数得：303.2log logKtX K dt dX o e u -= （4） 由（4）式可见，原形药物排泄速度得对数对时间作图为一直线，其斜率为-K/2.303，与血药浓度的对数对时间作图所求的斜率相同。
（4）式适用于静脉给药后求算消除速度常数。
若口服给药，则体内药量经时过程可由下式表示：)(t K Kta o a a e e KK F X K X ----=（5）Ka 为表观一级吸收速度常数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度可由（5）式代入（1）式得：)(t K Kta o a e u a e e KK FX K K dt dX ----= （6） 当Ka>K ，t 充分大时，则e -Kat →0，（5）式简化为：Kta o a e u e KK FX K K dt dX --= （7） 两边取对数得：303.2log logKtK K FX K K dt dX a o a e u --= （8） 由上述关系式可见，若以logXu/dt 对t 作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线得斜率可求出一级消除速度常数K 。
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实验一尿药法测定核黄素的生物利用度
一、实验目的
1.熟悉尿药法实验的取样方法及注意事项。
2.掌握尿药法计算消除速度常数及生物利用度的方法。
二、实验原理
药物的体内过程是由吸收、分布、代谢、排泄等过程组成的，大多数药物均有部分的原形经尿排除，常可用血药法和尿药法来估测药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度。
采用血药法测定药物在体内的速度过程变化规律及生物利用度时，由于多次采血，不易接受，对于药物大部分以原形从尿中排除的情况下，尿药浓度高于血药浓度，测定方法易建立，取样方便，本实验采用尿药法测定核黄素的生物利用度。
单室模型单剂量口服给药的尿排泄速率法基本公式为
？
ka>>k, t 较大时，e-Kat → 0。
以曲线后项dxu/d t 的对数对t回归可得一条直线。
？
由公式可见，若以ln dxu/d t对t作图，可得到一条二项指数曲线，从其后段直线的斜率可求出一级消除速度常数k。
由于尿中原形药物排泄速度的瞬时变化率是不可能用实验方法求算的。
通过实验可求出平均排泄速度，设在一时间Δt内药物的排泄量为ΔXu，则平均排泄速度记为ΔXu/Δt，这样上式可改写如下：
？
集尿经历的时间通常只需半衰期的3~4倍即可。
由于实验中采用平均排泄速度代替瞬时排泄速度，求得的消除速度常数K会出现一些误差。
但若以恒定的时间间隔集尿，其时间间隔不大于一个药物的半衰期，则仅发生2%以内的偏差。
生物利用度是生物药剂学的一个重要参数，它反映药物在体内吸收的程度与吸收速率。
可分为相对生物利用度与绝对利用度。
当药物的口服制剂与静脉注射剂相比，则可得到绝对生物利用度。
测定生物利用度常用方法除用血药法外还可用尿药法，尿药法即从累积尿药量来计算生物利用度。
生物利用度是指服药后药物吸收进入大循环的速度和程度，以静脉注射为参考标准得到是绝对生物利用度用其他制剂为参考标准得到的是相对生物利用度。
核黄素的异咯嗪环上具有活泼的双键，能接受和放出氢原子，在连二亚硫酸钠（保险粉）的作用下，能还原为无色的双氢核黄素，利用这一性质，可由加入保险粉的前后测得吸收度的差值，计算尿中核黄素的含量（444n m）。
三、仪器与材料
1.仪器：721分光光度计
2.材料：核黄素及片剂、保险粉、冰醋酸
四、实验内容
（一）尿样收集
1.服药前一天收集24小时尿液。
每次收集尿液后量体积，取20ml于阴凉避光处保留，其余倒掉。
2.服药前排空小便。
早餐后立即吞服核黄素片（5 mg/片）6片，记录服药时间。
3.服药后，在第2、4、6、8、10、12小时取尿样，用量筒量取并记录尿样体积，留20 ml 倒入盛有 ml冰醋酸的刻度试管内，摇匀，于阴凉避光处保存。
以下操作步骤，均须注意避光。
（二）标准曲线制备
精密称取核黄素10 mg 于100 ml量瓶中，加 mol/L的醋酸液稀释至刻度，摇匀。
精密吸取标准溶液、、、、、 ml ，分别置于10 ml的量瓶中，用酸化蒸馏水（每100 ml蒸
馏水中含1 ml冰醋酸）稀释至刻度，摇匀，以酸化蒸馏水作为空白，在444 nm测定吸收度。
然后在每管中加保险粉约3 mg，摇匀，在一分钟内测定吸收度，两次吸收度差值即为核黄素吸收度，以A对C进行回归，求出标准曲线。
（三）尿液中核黄素含量的测定
取尿样20 ml，测定照标准曲线项下方法，“以酸化蒸馏水作为空白”起，依法测定，根据标准曲线计算尿药浓度。
五、试验结果与讨论
1.原始记录
受试者：服药时间：
药物：批号：剂量：
服药前一天空白尿液总体积：
表1.空白尿液测定数据
24小时空白尿液中排泄核黄素的总量：
平均2小时排泄核黄素的量为：
表2. 服药后尿样的原始记录
表3.尿药测定结果
表4.尿药法数据分析
2.
3.以曲线后段直线部分计算斜率,从而计算消除速率常数k及生物半衰期t1/2。
4.计算Xu∞及尿排泄百分率。
5.计算核黄素片的绝对生物利用度.据文献报道,核黄素静脉注射后尿中总排泄量为给药剂量的97%。
六.思考题
1.以尿药速率法计算动力学参数和生物利用度与血药浓度法相比,有何优缺点
2.尿药速率法计算生物利用度误差的主要来源有哪些
七.实验注意事项
1.每次收集尿液后饮200 ml水以维持一定尿量。
2.服药前一天至实验结束应控制食谱，不吃富含核黄素的食物，如蛋类、牛奶、奶糖等，。