组织切片石蜡切片过程
石蜡切片的主要步骤
石蜡切片的主要步骤石蜡切片是一种常用的制备薄片的技术，广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本文将介绍石蜡切片的主要步骤，并详细说明每个步骤的操作方法和注意事项。
1. 样品固定和处理在进行石蜡切片之前，首先需要对待切样品进行固定和处理。
固定样品的方法可以根据实验的需要选择，常用的有乙醛固定、冰醋酸固定和福尔马林固定等。
处理样品的方法也根据实验目的而定，可以包括染色、脱水、透明化等步骤，以便更好地观察和研究样品。
2. 包埋将处理好的样品包埋在石蜡中，以便进行切片。
首先，将样品放入石蜡溶液中，使其充分浸泡。
然后，将石蜡溶液转移到恒温水浴中，使其逐渐固化。
在固化过程中，要确保样品均匀分布在石蜡中，避免出现气泡和空洞。
3. 切片切片是石蜡切片过程中最关键的一步。
首先，将固化的石蜡块从模具中取出，并放置在切片机的夹持装置上。
然后，调整切片机的切片厚度和速度，根据需要选择合适的参数。
接下来，使用切片刀将石蜡块切割成薄片。
在切割过程中，要保持手稳定，避免切片厚度不均匀或出现断层。
4. 切片取片切片切割完成后，需要将切片从切片刀上取下。
首先，使用镊子将切片从切片刀上小心取下，避免损坏或弯曲切片。
然后，将切片放置在预先准备好的载玻片上。
在放置切片时，要注意避免气泡的产生，可以使用专门的工具如细管吸气来帮助排除气泡。
5. 去除石蜡和染色切片取片后，需要将切片上的石蜡去除，并进行染色处理。
首先，将切片放入去石蜡剂中，使其充分浸泡。
然后，将切片转移到浸泡染色剂中，进行染色处理。
在去石蜡和染色过程中，要注意时间控制和温度控制，以确保染色效果和切片质量。
6. 封片和封边染色完成后，需要将切片做成封片，以保护切片并便于保存。
首先，将切片用透明胶片或玻璃片覆盖。
然后，使用封片胶或封片胶带将切片和覆盖物固定在一起。
接下来，将切片的边缘进行封边处理，以避免切片脱落或污染。
7. 干燥和贴标封片完成后，需要将切片进行干燥处理，并进行贴标。
石蜡切片制作标准程序
动物病理组织学石蜡切片制作标准操作程序（SOP）一、\器材和试剂准备（一）载玻片和盖玻片的清洁1.载玻片和盖玻片清洗方法(1)锅内倒入适量清洗液（100 mL水+30 m L洗洁精+30 mL 84消毒液）；(2)将玻片逐片放入锅中, 加热至沸腾10 min, 停止加热, 自然冷却;(3)捞出玻片流水冲洗10min,彻底冲净泡沫（弹簧夹上后，单片过水）;(4)将玻片从水中取出, 用蒸馏水冲洗三遍（最好单片过水）;(5)将玻片放入 95%乙醇（分析纯）中浸泡；（6）取出玻片，码在切片盒，自然干燥（或无风适度高温干燥）备用；注意：由于盖玻片很薄，不能同载玻片放在一起处理；盖玻片从95%乙醇溶液中取出后要放在吸水纸上摊开，干燥后，放在小盒子中备用。
2.粘片剂（蛋白甘油）的制作及载玻片的预处理（1）蛋白甘油的制作取新鲜鸡蛋，先将其尖端用眼科剪或拨针挑破一小孔，再将蛋的另一端挑破一小孔并稍加扩大，大孔端朝下，使蛋白流入100~200毫升的烧杯中（不要蛋黄），以玻棒打拌蛋白完全变为雪花状泡沫，然后倒入垫有几层纱布的漏斗中过滤而得到透明、清凉的的蛋白液，再加入等量甘油，振摇使之充分混合，加入1%麝香草酚或樟脑防腐。
一般将其盛入滴瓶或树胶瓶中备用，不用时盖好防尘。
或1个鸡蛋的蛋清+500mL双蒸馏水，混匀，加10mL浓氨水。
（2）将蛋白甘油倒在小烧杯中，载玻片用弹簧夹夹上后侵入蛋白甘油中，贴壁刮干，放在切片盒内晾干备用。
二、石蜡组织切片的制作（一）取材注意事项：1.材料质量：材料必须新鲜，应争取在死后半小时内处理完毕。
2.取材体积：组织块力求小而薄（厚度不要超过5mm，以2mm最佳）3.取材力度：取材器具锋利。
勿使组织块受挤压，切割时不可来回挫动。
夹取组织时，切勿猛压，以免挤压损伤组织。
取材时，组织块可稍大一点，以便在固定后，将组织块的不平整部分修去。
4.固定形状：固定尽量保持组织的原有形态新鲜组织经固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
石蜡切片的制作
石蜡切片的制作石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。
石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法，它有很多优点，例如，比较省时间，容易操作，可切成极薄的切片，能制作连续切片，组织块可包埋在石蜡中永久保存等。
缺点是只能用于较小的组织块，较大的组织块不易切好容易破碎，组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆，制片时间太长。
一、石蜡切片的制作过程石蜡切片的制作过程主要是：取材→水洗→固定→水洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→染色。
（一）取材及水洗根据实验要求选取材料来源及部位，取要求部位的小块组织成为组织块，组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。
切去组织块时动作要轻，切忌用力牵引或挟持，以免组织内部发生变化。
由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24小时，因此一般情况下，将动物处死后立即取需要的材料。
组织块取下后，先用相应的生理盐水漂洗以洗去血液、污渍以及粘液等。
如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。
（二）固定材料由动物体取下后应当迅速固定，固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部，将组织固定以保持其原有的结构。
不同的组织应选用适当的固定液。
固定液的用量与组织块体积之比一般在20:1，不应使组织块贴于容器壁上。
材料固定完毕后，保存于严密紧塞或加盖的容器里，同时在容器外上标签，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。
固定的时间长短依据材料大小而定。
固定液有许多种，在固定的过程中应该根据需要选取合适的固定液，一般固定液都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，以免引起化学变化而失去固定作用。
有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早固定时就没有作用了。
（三）水洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。
，主要目的是洗去固定液的颜色以便后续的染色。
石蜡切片的原理和基本步骤
石蜡切片的原理和基本步骤石蜡切片是一种常用于生物医学和生物化学实验中的技术。
通过使用石蜡作为嵌入剂，将组织标本固定在特定位置，并以薄片的形式制备，方便进一步的显微镜观察。
这篇文章将介绍石蜡切片的原理和基本步骤。
石蜡切片的原理主要涉及组织标本的固定、去水、脱脂、渗透、嵌入、切割和染色等步骤。
下面将逐步详细介绍每个步骤。
第一步是组织样本的固定。
固定是将生物组织中的蛋白质和核酸固定住，防止组织变性和腐败。
常用的固定剂包括乙酸乙酯、福尔马林和缓冲盐水。
在固定过程中，组织样本通常需要用切片器切割成较小的块。
第二步是去水。
在固定样本中，常常会有一些水分存在。
水分对之后的处理步骤会造成影响，所以需要进行去水处理。
去水可以通过渐进浓度的有机溶剂（例如乙醇）进行。
通常从浓度较低的乙醇开始，逐渐提高乙醇浓度，直至100%乙醇。
第三步是脱脂。
脱脂是为了去除溶剂和固定剂中的脂类物质。
脂类物质在之后的步骤中会妨碍切片的制备。
脱脂一般使用有机溶剂（如苯和二甲苯）进行处理。
第四步是渗透。
渗透是将脱脂样本置于石蜡中，使其被石蜡渗透。
石蜡具有良好的透明性和稳定性，可以保持组织样本的形状并方便切割。
渗透一般在60-65°C的温度下进行。
第五步是嵌入。
嵌入是将渗透好的样本放入预先制备的模具中，加热使其固化。
嵌入后的样本与石蜡牢固结合，形成坚固的石蜡块，有利于后续切割操作。
第六步是切割。
切割是将嵌入好的组织样本切割成非常薄的片。
常用的切片工具有旋转式切片机和滑动切片机。
切割时，需要将石蜡切割成5-10微米厚度的切片。
最后一步是染色。
染色是为了使细胞结构更清晰可见。
常用的染色剂有血红蛋白染剂和亚甲基蓝染剂等。
染色可以根据需要选择染色时间和染色剂。
石蜡切片的制备过程需要一定的实验技巧和仪器设备。
为了获得高质量的切片，需要注意固定、去水和渗透的处理时间和温度，以及切割的速度和厚度。
切割后的切片需要进行适当的质控，确保切片的质量并方便进一步的显微镜观察。
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序可以概括为以下几个步骤：
1. 准备样品：选择需要切片的样品，如组织样本、细胞样品等，并采取相应的固定、处理和染色等预处理步骤，以保证样品的稳定性、可观察性和对比度。
2. 材料准备：准备好所需的石蜡、切片盒、切片刀、载玻片等材料，并进行清洁和消毒处理，以避免污染和交叉感染。
3. 石蜡浸透：将处理好的样品转移到石蜡中进行浸透。
首先将样品置于温度逐渐升高的浸透剂（如正己烷）中，以去除组织内水分和其他溶质，然后置于石蜡中进行浸透。
4. 切片制备：将石蜡浸透的样品固定于切片盒中，将石蜡块剪碎成适当大小，并放置在切片刀的刀脊上。
调整切片机参数（如温度、角度、速度等），并逐个切割出薄片。
5. 切片贴片：将切好的薄片浮于温水中或使用其他方法，如电离子器、热平台等，以使切片展平并附着于载玻片上。
6. 干燥固定：将切片连同载玻片一起进行干燥固定处理，以去除水分并保持切片的形态稳定。
7. 切片染色：根据实验需求，对切片进行适当的染色处理（如组织学染色、免疫组化染色等），以增强样品的可视化效果和区分感兴趣的结构。
8. 封片封装：将切片封装至封片盖玻片上，使用透明化导电胶或其他封片剂固定切片，并尽量排除气泡、保证封片质量。
9. 切片质控：对制备好的切片进行质量控制，使用显微镜观察和评估切片的清晰度、结构完整性、染色效果等。
最后，制备完成的石蜡切片可以用于显微镜观察、组织形态分析、病理学研究等应用。
需要注意的是，在整个制备过程中，应遵循标准实验操作规程、注意安全，以及依据实验要求进行相应的优化和调整。
石蜡切片流程范文
石蜡切片流程范文石蜡切片是一种常见的组织学技术，用于制备生物组织薄片，使其可以在显微镜下观察和分析。
下面是石蜡切片制备的详细流程。
1.组织固定：首先，需要选择适当的方法将生物组织进行固定，以保持其形状和结构。
最常用的方法是使用福尔马林溶液进行组织固定。
将组织样品置于福尔马林溶液中，通常需要固定24至48小时。
2.去水：固定完毕后，需要将组织中的水分除去，以便进行后续的处理。
通过逐渐提高样品中酒精浓度（例如70％、80％、95％和100％构成的酒精梯度）来逐步去除水分，通常每次浸泡20至30分钟。
3.清洁：去水后，通常需要对样品进行清洁，以去除可能存在的污物和其他杂质。
可以用清洁的醇溶液（例如100％酒精）浸泡样品数分钟，然后用去福尔马林等溶液洗涤样品。
4.浸渍：在石蜡切片制备过程中，需要将组织样品浸泡在石蜡中，以使其渗透并得到支撑。
选择适当的石蜡类型和温度很重要。
通常使用低熔点石蜡（例如58℃石蜡），在60至65℃的恒温水浴中加热并溶解石蜡。
5.渗透：将组织样品从酒精中转移到融化的石蜡中，通常需要经历多个步骤的渗透过程。
首先将样品浸泡在75％酒精中，然后再依次转移到浓缩的酒精溶液中（例如85％、95％和100％）和石蜡中，每次浸泡时间约为1小时。
6.包埋：当样品完成渗透后，需要进行包埋，即将渗透后的组织样品放置在切片模型中，并用石蜡封住。
将切片模型倒置，将溶解的石蜡缓慢倒入模型直到完全覆盖组织样品。
然后将切片模型固定在冷却装置中，等待石蜡冷却和固化。
7.切片：当石蜡块完全固化后，可以将其切割成所需的薄片。
通常使用旋转切片机或手动切片机进行切片。
将切片机的刀片调整到所需厚度（通常为3至5微米），将石蜡块放置在切片机上，并逐渐将刀片与石蜡块接触，以制备薄片。
8.制片：将切好的石蜡薄片静置在温水中，让其自然展开，并将其转移到预涂有胶水的载玻片上。
轻轻将玻片压在石蜡薄片上，以确保两者之间有良好的接触。
然后将载片放置在恒温台上，以便胶水干燥。
石蜡切片步骤
石蜡切片基本步骤（一）取材和固定根据实验目的选择材料。
将整个虫体或虫体的内部器官（如肠道、马氏管、唾液腺等）取出后，立即投入固定液。
取材大小：0.5cm×0.5 cm×0.2或者1.0 cm×1.0 cm×0.2，厚度不宜超过3mm。
固定液：2.5%的戊二醛固定液，Bouin氏液，10%甲醛等。
固定时间：4ºC固定24小时。
注意事项：取材：1．勿使组织块受挤压切取组织块所用刀、剪要锋利，切割时不可来回切割。
夹取组织时，镊子要轻，切勿挤压，以免损伤组织。
取材时，组织块可稍大一点，以便在固定后，将组织块的不平整部分修去。
2.选好组织块的切面应熟悉器官组织的组成，并根据观察目的来确定纵切或横切。
3．保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物等，先用生理盐水冲洗干净，再入固定液。
4．切除（清除）不需要的部分特别是组织周围的脂肪等，应尽可能清除掉，以免影响以后的程序和观察。
固定：1．材料新鲜取出组织后须立即固定。
否则时间相隔过久，体积就要收缩变形或发生自溶现象。
2．抽气生物组织常有气体的存在，使材料不能沉入固定液中，抽气使得固定液有效渗入。
真空泵抽气或者用空针管抽气。
昆虫整体固定，固定前用解剖针刺数个小孔，以利用固定液渗透。
3．固定剂用量一般为组织体积的10~20倍。
勿使组织贴于瓶底或瓶壁，以免影响固定剂的渗入。
4．避免阳光尽可能避免接触阳光以免失去固定作用。
5．加速固定轻轻摇动盛器使组织移动有利于固定液渗入，对长期固定的标本可经常更换固定液。
（二）洗涤2.5%戊二醛固定液固定的组织：0.2M, pH7.2磷酸缓冲液漂洗三次，每次10minBouin氏固定液固定的组织：直接入70%酒精更换数次即可脱水，注意苦味酸。
甲醛固定的组织：直接投入50%或70%酒精脱水，不经水洗。
但如果在甲醛中时间过长，则仍应当用流水冲洗。
陈旧性标本和混合性固定液应及时洗涤，有利于脱水、切片和染色。
石蜡切片试验过程
试验过程：1.取材：蹄部、乳腺、子宫2.固定：10%甲醛或BOUN`S液蹄部2周、乳腺24-48小时。
3.浸洗：自来水冲洗24小时（冲洗时水流不宜过大以防将组织快弄碎）4.脱水：将组织快依次放入不同浓度的酒精中脱水（注：每次换取时必须吸干组织块，脱水要完全，否则透明不好）5.透明: 用二甲苯及无水乙醇(注意：每次换取透明剂时吸干组织快，若透明时有浑浊（乳白色雾状）说明脱水不干净，需要再退回原酒精95%乙醇中重新脱水)6.浸蜡：腊块熔点55摄氏度，（56-58）恒温箱唯独56-58 浸蜡过程中腊必须溶化状态。
7.包埋：（恒温箱中进行）需要担制备纸槽腊块56摄氏度左右，温度不宜过高，记录放置材料的方向和位置8.切片：切片厚度（材料不同厚度不同？）一般6-8微米，子宫切片8微米及5微米，乳腺切片为5微米。
9.贴水，展片：在载玻片上涂一层甘油，滴上一些蒸馏水将材料放置其上在酒精夜上展平。
10.烤干：在恒温箱内烤干，温度一般50摄氏度24-48小时乳腺材料固定包埋整个过程用10%的甲醛PBS(固定24小时)-------流水（冲洗24小时）------（1-12小时）-----70%乙醇----（1小时）-----75%乙醇-----（1小时）----80%乙醇-----（1小时）------85%乙醇----（1小时）------90%乙醇----（1小时）------95%乙醇{第一次}-----（1小时）-------95%乙醇｛第二次｝----100%乙醇｛第一次｝------（20分）-----100%乙醇｛第二次｝------(20分)-----100%乙醇｛第三次｝-----（30分）-----1/3二甲苯+2/3无水乙醇----（20分）-----1/2二甲苯+1/2无水乙醇-----(20分)------2/3二甲苯+1/3无水乙醇---（20分）----纯二甲苯（第一次）---(30分)---纯二甲苯（第二次）-----（30分）-----1/2石蜡+1/2二甲苯---（30分）-----2/3石蜡+1/3二甲苯---（30分）----纯石蜡（第一次）----（30分）----纯石蜡（第二次）----(30分)---包埋。
石蜡切片的基本操作流程
石蜡切片的基本操作流程石蜡切片是一种常用的组织学技术，用于制备组织切片，以便进行显微镜观察和研究。
以下是石蜡切片的基本操作流程：1. 组织固定：首先，将待切片的组织标本进行固定，以保持组织结构的完整性和稳定性。
常用的固定剂包括福尔马林、酒精和乙醛等。
固定时间的长短取决于组织的大小和类型，一般为数小时至数天。
2. 组织去水化：固定后的组织需要去除固定剂并脱水，以防止切片过程中的破损和变形。
通常采用逐渐增加乙醇浓度的脱水步骤，常见的乙醇浓度为70%、80%、90%和100%。
3. 组织浸渍：脱水后，组织需要进一步浸渍到石蜡中，以增加组织的硬度和支持性。
首先将组织放入浸渍剂中，如甲醛或乙醇中的苯麻油，然后逐渐增加石蜡浓度，常见的石蜡浓度为50%、70%和100%。
4. 组织包埋：在组织浸渍后，将组织放入包埋模具中，然后倒入熔化的石蜡，使其完全包裹住组织。
包埋完成后，将模具放入冷却台或冷冻器中，使石蜡迅速固化。
5. 石蜡切片：将冷却固化的石蜡块从模具中取出，使用切片机将其切割成薄片。
切片机通常配有刀片、切片夹和切片盒等工具，切片时需要注意切片的方向和角度，以获取最佳的切片效果。
6. 切片染色：切片完成后，可以对切片进行染色，以便更好地观察和分析组织结构和细胞形态。
常用的染色方法包括血液染色、组织染色和免疫组化染色等。
7. 切片封片：染色后，将切片放置在载玻片上，并使用透明的封片剂将其覆盖。
封片剂可以保护切片，防止切片脱落和变形，并提高显微镜观察的清晰度。
8. 切片观察：最后，将封片的切片放置在显微镜下进行观察和分析。
可以使用不同的显微镜镜头和放大倍数来观察组织细节和细胞结构，同时可以使用图像分析软件对切片图像进行处理和测量。
总体而言，石蜡切片的基本操作流程包括组织固定、去水化、浸渍、包埋、切片、染色、封片和观察等步骤。
每个步骤都需要严格控制条件和操作技巧，以确保获得高质量的组织切片用于研究和诊断。
《病理检验技术》课件——石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
石蜡切片和免疫组化 步骤整理
一：步骤石蜡切片（骨组织）1：PFA固定，4℃冰箱过夜后，用10%的EDTA脱钙，时间3-5周，鉴定脱钙完成的标志是：用细针可以刺进骨头。
脱钙完成后开始做实验前需要把骨头放到70%的酒精24h。
2：脱水：70％酒精（1h）→ 80％酒精（30min）→ 95％酒精Ⅰ（20min）→无水乙醇Ⅰ（15min）→无水乙醇Ⅱ（15min）。
3：透明：二甲苯（15min）（如果组织小（例如小鼠和大鼠的组织）就15min，如果透明时间过长组织易脆，如果组织大（例如兔子、人、狗等)时间就可以稍微长一些。
4：浸蜡：恒温56℃～58℃（不超过60℃）。
→石蜡Ⅰ（1-2h）→石蜡Ⅱ（1-2h）。
（如果组织大浸蜡时间可以延长，可以达6-8h。
）5：包埋：待石蜡稍微凝固以后放到4℃冰箱过夜。
6：切片与展片：切片的时候要保持包埋好的蜡块的硬度，如果蜡块软的话切片的时候组织就会碎，所以要把蜡块放在冰上。
在42℃温水中展片（如果组织太脆，就先把组织浸泡在甘油中，几分钟？后在把组织放在冰块上，一段时间后再取出来重新切片。
）7：捞片：捞片时，载玻片45°倾斜，然后将片置于载玻片2/3处。
8：收片子，37℃保存。
HE染色1：脱蜡和脱水：二甲苯，10min×3（不常换，脱蜡用），酒精5min（100%Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ；95%；70%），蒸馏水Ⅰ，Ⅱ5min（如果在夏天，室温较高，脱蜡试剂也新鲜，则脱蜡时间不需很多，3-5分钟就已足够。
如果在冬天，室温较低，脱蜡试剂也较陈旧，则脱蜡时间需要延长，10-20分钟或更长）2：染色：苏木精-2-3min3：蒸馏水冲洗（起反蓝的作用）：大概1h-2h4：伊红染色-2min4:脱水 70%→80%→95%Ⅰ→100%ⅠⅡ、Ⅲ酒精各一分钟5：二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各3min（脱水用，最好是用一次换一次，脱水用的二甲苯要透明干净，质量才好）6：封片用树胶∶二甲苯=3:1（1∶1，3∶2）{现配现用}，树胶多一些，用铅笔或者其他工具赶气泡。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告一、实验目的本次实验旨在研究石蜡切片的制备方法及其在显微镜下的观察。
二、实验原理石蜡是一种固体烷基烃化合物，常用于组织学中的切片制备。
在制备石蜡切片时，需将所需组织样本固定于载玻片上，并使用石蜡作为嵌塑剂进行与样本的包埋。
待到石蜡固化后，便可使用石蜡切片机或手动微调器进行切片。
切片后，可对切片进行染色及显微镜观察。
三、实验步骤1、取一张干净的载玻片，涂上少量的胶水并晾干。
2、取所需组织样本进行处理。
如为植物组织，可直接在生长期较长的表皮或叶片上进行取样；如为动物组织，可通过手术操作或解剖等方法获取所需组织。
取出组织样本后，清洗干净并切成合适大小。
3、将固定好的组织样本倒入石蜡中，将组织样本包埋于石蜡内。
4、等待石蜡凝固，调整切片机或手动微调器，进行切片。
5、将石蜡切片玻片用甲苯或二甲苯进行脱蜡。
6、选择所需颜色及染料进行染色。
7、将染色后的玻片用苏木精固定，晾干后进行显微镜观察和取像。
四、实验结果通过本次实验，成功制备出石蜡切片，并选择了适合的颜色进行染色。
显微镜观察后，能够清楚地看到组织细胞、细胞核等结构，对于组织学研究具有很大的帮助。
五、实验结论本次石蜡切片实验证明了石蜡作为组织学研究中的嵌塑剂是非常重要的。
选择合适的嵌塑剂与染料，在切片之后可以得到良好的显微镜照片，有助于对细胞和组织的进一步分析和研究。
总之，石蜡切片制备是组织学研究的一个重要方法，这个实验的成功进行，不仅让我们深入理解了组织切片的制备过程，也提高了我们对组织细胞结构的深入认识。
石蜡切片流程
石蜡切片流程一、引言石蜡切片是生物学、医学和材料科学等领域中常用的一种实验技术，用于制备样品的薄片，以便进行显微观察和分析。
本文将介绍石蜡切片的流程及其关键步骤。
二、材料准备1. 石蜡：选择适合的石蜡材料，常见的有硬质石蜡和软质石蜡。
2. 样品：根据需要选择合适的样品，可以是生物组织、细胞、材料等。
3. 切片刀：选择切割尖锐且锋利的切片刀，常见的有玻璃刀片和钢刀片。
4. 切片机：使用专业的切片机设备，保证切片的精准度。
三、石蜡切片流程1. 固定样品：将样品进行固定处理，常用的方法有福尔马林固定、乙醛固定、冷冻固定等。
固定的目的是保持样品的形态结构和生物活性。
2. 除去水分：将固定后的样品通过醇溶液逐渐去除水分，一般采用浓度逐渐降低的醇溶液，如75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇等。
3. 渗透石蜡：将去水后的样品用石蜡进行渗透处理。
首先将样品置于较低融点的石蜡中，然后逐渐转移到较高融点的石蜡中，这样可以保证样品逐渐与石蜡融合。
4. 包埋：将渗透后的样品放入石蜡模具中，待石蜡凝固后，取出石蜡块。
5. 切片：使用切片机将石蜡块切割成薄片，切片的厚度根据需要进行调整，一般为4-10微米。
6. 切片处理：将切好的薄片浸泡在温水中，使其展平，并将薄片转移到载玻片上。
7. 固定薄片：将载玻片放入烘箱中，以适当的温度和时间使薄片与载玻片充分固定。
四、注意事项1. 操作环境：保持实验室的清洁和安静，避免灰尘和噪音对实验结果的影响。
2. 刀片处理：在使用切片刀前，先将其清洗干净并消毒，以防止样品污染。
3. 温度控制：石蜡切片的各个步骤中，温度的控制非常重要，可以根据不同的样品选择适当的温度。
4. 切片厚度：不同的样品需要不同的切片厚度，要根据实验需要进行调整。
5. 质量控制：在每个步骤结束后，要对样品的质量进行严格检查，确保切片的质量。
6. 保存条件：切好的石蜡切片应妥善保存，防止受潮或受到外界环境的污染。
五、总结石蜡切片是一种常用的实验技术，通过固定、去水、渗透石蜡、切片等步骤，可以制备出精细的样品薄片，用于显微观察和分析。
石蜡切片程序及注意事项总结
石蜡切片程序及注意事项
取样：在同一部位取1厘米左右的肠段，一定要将食糜冲洗干净，否则会影响切片质量，并会损伤刀片，但不要将滴管插进肠管以免损伤绒毛
固定：固定时间可能会影响切片质量和染色效果，固定时间太长可能会导致组织变硬，切片时易碎
修样：脱水包埋前要将组织两头多余的部分切掉，保留5毫米左右，两端尽量切平并与肠段垂直以便包埋
冲洗：脱水前用流水冲洗组织将固定液洗去
脱水：脱水、透明和浸蜡是影响切片质量的关键步骤，但合适时间难以摸索，大批量做之前最好做预试验
包埋：包埋要迅速以免组织与石蜡结合不紧密，组织要垂直立在石蜡中，尽量靠近中间以便修蜡块。
修蜡块：组织样周围要留1-2毫米厚的蜡以防切到组织样，而且尽量修成矩形切片：最关键的一步，切片质量主要受组织前处理效果的影响，如果切片出现刀痕应移动刀片架更换切片位置。
切片厚度一般5-7μm，如果切片太薄易碎，可适当增加切片厚度。
每个组织一般取3-5张切片，取样时不要连续取样，而是间隔尽量远的距离，否则拍的照片是一样的，没有测量意义了
染色封片：苏木精和伊红染色时间要根据样品质量而适当调整，最好先做预试验观察效果。
封片时树胶不要滴太多以防溢出。
拍照：根据组织大小选择合适的放大倍数，需要将整个绒毛及隐窝拍下来，选择尽量直并且完整的肠绒毛拍照。
山西中学组织学石蜡切片制作过程
山西中学组织学石蜡切片制作过程山西中学组织学石蜡切片制作过程石蜡切片制作是生物学实验中常用的技术手段之一，它可以将生物样品制作成薄片，以便进行显微镜观察和研究。
下面将详细介绍山西中学组织学石蜡切片的制作过程。
一、收集和处理样品1. 样品的选择：在进行石蜡切片制作之前，首先需要选择合适的组织样品。
山西中学通常会选择动植物的组织器官，如根、茎、叶、肌肉等。
2. 样品的固定：在采集到样品后，需要对其进行固定处理，以保持其原有的形态结构和细胞组织。
常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。
3. 样品的脱水：固定后的样品需要将其中的水分逐渐去除，以便后续的浸渍和包埋。
脱水过程通常采用乙醇梯度浓度法，逐渐提高乙醇浓度，如70%、80%、90%和100%。
4. 样品的浸渍：脱水后的样品需要进行浸渍处理，以使其充分吸收石蜡。
浸渍一般采用二氯甲烷和石蜡的混合物，常用比例为1:1。
二、制作石蜡块1. 准备模具：将石蜡切片制作时需要的模具准备好，一般为方形或圆形的塑料模具。
2. 熔化石蜡：将石蜡块放入石蜡熔化器中，加热至石蜡完全熔化。
3. 倒入模具：将熔化的石蜡倒入模具中，待石蜡凝固成块后取出。
三、制作切片1. 切片机的准备：将石蜡块固定在切片机的切片台上，并调整切片机的切片厚度。
2. 切片：将切片刀沿着石蜡块的平面切割，得到薄片。
3. 转移切片：用切片刀将切下的薄片转移到水中，静置片刻，使其展开。
四、薄片处理1. 涂片：将展开的切片用刷子轻轻涂上一层胶水，以固定切片。
2. 干燥：将涂上胶水的切片放置在通风处自然晾干，使胶水完全干燥。
3. 上浆：将干燥的切片放入浆液中，使其充分吸收浆液。
4. 固化：将上浆后的切片放置在烘箱中加热，使浆液固化。
五、染色和封片1. 染色：将固化后的切片放入染色液中浸泡，使其染色。
2. 清洗：将染色后的切片用水冲洗，去除多余染色剂。
3. 脱水：将清洗后的切片依次放入乙醇梯度浓度的溶液中，使其脱水。
4. 封片：将脱水后的切片放入透明胶片中，再用热源加热胶片，使其封住切片。
组织切片石蜡切片过程
石蜡切片过程一、石蜡包埋:1.脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70% →80% →90% →95%→100%酒精（无水乙醇）→100%酒精，各级酒精脱水时间30-45 min。
（注意：80%酒精内组织可留之较久，当天如果来不及做完就可以暂时保存一晚上，次日再继续做下去。
70%的酒精可作为更久的保存剂。
）2.透蜡：脱水后组织：50%酒精+50%二甲苯30 - 45min.二甲苯（组织透明即可停止) 15min.50%二甲苯+50%石蜡20-30min.纯石蜡1 45min.纯石蜡2 45min.（透腊之前做好准备工作：准备腊杯，烘箱温度保持55—60℃左右，使石腊熔化，温度不宜过高，以免使组织发脆。
）3.包埋：a.折好纸盒，准备小镊子、酒精灯、解剖针、冷水等。
b.用温热吸管吸取石蜡注入纸盒。
等待底稍微凝固，温镊子夹住样品放入盒子中央，面朝底(可以将蜡一次倒入纸盒，然后待蜡表面起膜后，用温镊子夹住样品放入蜡中，待冷却即可，整个操作过程中，切勿让蜡中起气泡)。
c.两手拿着两端，入冷水一半，吹气，使表面石蜡形成移较厚腊层，然后急速全部进入冷水中3分钟。
d.修正蜡块（上下两个面一定要平行并且光滑）e.固着蜡块二、切片1.切片（切片时，可以在刀片以及刀片周围涂上一点甘油）2.贴片烤片（甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清）（在贴片时，用细吸管取一点点甘油蛋白（越少越好）于载玻片上，然后用手抹匀，手一定要干净。
将切片放在载玻片（光亮面朝向下），然后滴几滴冷水使切片悬于水上。
接着将载玻片放在37℃上烘烤。
常见问题分析：1.切片分离不能形成蜡带：?室温过低，蜡过硬。
2.蜡带弯曲：?蜡块口下面不平行，或蜡块不与刀刃平行所致。
3.切片厚薄不一: ?切片刀或蜡块未固定紧。
4.切成片后，组织与蜡块脱离：?脱水不干净等。
5.蜡片易粘在切片上或蜡片萎缩：?室温太高或蜡太软或刀的角度太小。
6.切片破裂：?浸蜡不足或浸蜡温度过高，或在脱水剂、透明剂中时间过长，引起组织发脆或有杂质，材料脱钙不完全，此种无法补救。
医院快速石蜡切片操作规程
快速石蜡切片操作规程
快速石蜡切片操作步骤：
1、接到标本后快速取材固定；
2、快速脱水、透明、浸蜡、包埋；
3、迅速切片、染色；
4、封片时不得有气泡，不得有树胶外溢；
5、标签必须贴于玻片左侧，编号字迹必须清楚；
6、制片后剩余组织应做常规石蜡包埋切片染色，进一步诊断。
快速石蜡切片相关要求：
1、制片工作一般应在10—20分钟内完成，诊断报告应在30分钟内出具。
2、为了尽量缩短制片时间，必须预先做好有关准备工作。
3、用于组织固定、脱水、透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、更换。
*注：丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物，进行上述各项流程时，2米距离内不得存在明火；加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱，不得使用干烤箱操作。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告实验目的：熟悉石蜡切片技术的操作方法，了解石蜡切片制备的过程，并观察切片的结构。
实验原理：石蜡切片是一种常用的组织学检查方法，常用于生物组织的切片制备。
石蜡可以通过渗透，浸渍和固化来固定生物组织，并使其变硬，便于切割。
切片制备过程中，石蜡会填充生物组织的间隙，使组织保持形状和结构，便于显微镜下的观察。
实验材料：1. 组织样本：动物组织片或植物组织片2. 10% 罗丹明B 染液3. 显微镜玻片和盖玻片4. 切片刀、切片夹、玻璃棒5. 石蜡实验步骤：1. 取出石蜡块并加热至熔化状态。
注意，石蜡的熔点通常在60-65°C。
2. 取出组织样本，并用10% 罗丹明B 染液浸泡片段10-15分钟，以染色组织。
3. 将熔化的石蜡倒入切片模具中，随后将组织样本放入石蜡中，确保完全浸没。
4. 将切片模具放入冷却器中，降温至室温，使石蜡凝固。
5. 取出切片模具，用切片刀将切片切下。
切割时，角度和刀的质量对切片质量都有影响，所以操作要尽量快速、准确。
6. 将切片用切片夹固定在显微镜玻片上。
7. 用玻璃棒平均地将切片摊开，以避免切片叠合。
8. 将切片放入加热板上烘干至石蜡融化。
9. 取出加热板，用盖玻片覆盖在切片上。
实验结果：通过显微镜观察切片，可以清晰地看到组织的细胞结构和细胞器，以及组织之间的关系。
切片的质量和染色效果会受到操作技术和实验条件的影响。
实验总结：本实验通过熟悉石蜡切片技术的操作方法，使我了解了石蜡切片制备的过程，并通过观察切片的结构，加深了对生物组织的了解。
同时，实验也提示了切片制备中的一些注意事项，例如切割角度和切片刀的质量对切片质量的影响等，这将为今后的实验操作提供有益的参考。
石蜡切片的操作方法
石蜡切片的操作方法石蜡切片是一种常用的组织切片制备方法，用于细胞学和组织学的研究。
下面是石蜡切片的操作方法：1. 收集样本：选择要制备切片的组织样本或细胞样本。
样本可以是动物组织、植物组织或细胞培养物。
2. 选择合适的浸渍剂：石蜡切片需要将样本浸渍在石蜡之中，以固定和保护样本。
常用的浸渍剂包括甲醇、乙醇和二甲苯。
3. 固定样本：将样本固定在固定剂（如甲醛）中，以保持其形态结构。
固定时间根据样本的类型和大小而定，一般在4C下静置数小时或过夜。
4. 脱水：在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中，将固定的样本从水中脱水，使其逐渐转移到纯度较高的乙醇中。
5. 渗透：将脱水的样本浸渍在二甲苯或其他有机溶剂中，使其渗透并置换乙醇。
浸渍时间根据样本的大小和组织特性而定，一般在一到数小时之间。
6. 包埋：将渗透后的样本置于石蜡中，使其完全浸润。
石蜡块可以预先加热至液态，然后将样本放入其中，或者将样本以及适量的石蜡放入模具中，然后通过加热使其固化。
7. 切片：将制备好的石蜡块放入石蜡切片机中，使用旋转切片刀将其切成薄片。
切片厚度一般为4-10微米。
8. 取片：用切片刀或镊子将切好的石蜡切片取出，并放置在清洁的显微镜载玻片或切片架上。
9. 脱脂：将石蜡切片置于加热的二甲苯或其他脱蜡剂中，使其脱去石蜡。
10. 染色：根据需要，可对石蜡切片进行染色，例如常用的血液和组织标本染色方法如伊红染色(H&E染色)。
11. 干燥：将染色的切片在室温下晾干或在加热台上加热至干燥。
最后，将切片用显微镜载玻片覆盖，并封口保存。
以上就是石蜡切片的一般操作方法，每个实验室可能会根据具体需求进行微调。
在操作过程中要注意安全，避免接触有毒溶剂和使用锋利的刀片时的切割操作。
简述常规石蜡切片检查的流程
简述常规石蜡切片检查的流程
1. 取材呀！这就好比去果园摘果子，得挑那些长得好又有代表性的果子。
比如要检查肝脏，那就从肝脏上取下一小块合适的组织。
2. 固定呢！可以想象成给取下的组织“定个型”，让它保持原本的形态。
就像用胶水把纸模型粘住一样，把组织固定好，常用的就是福尔马林啦。
3. 脱水啦！哎呀，这就像把湿衣服弄干一样。
组织里有水分可不行呀，得通过一系列酒精把水分慢慢赶跑。
4. 透明呀！这一步很关键呢，就好像给组织罩上一层透明的纱。
让组织变得更清晰可见，方便后面的操作呀。
5. 浸蜡哟！可以类比成给组织穿上一件“蜡衣”。
让组织能更好地被处理和切片。
6. 包埋啦！这就像是给组织做一个小“床”，把它安稳地放在里面。
用蜡把组织包起来，形成一个蜡块。
7. 切片呀！哈哈，这就是真正开始“切菜”啦！用切片机把蜡块切成薄薄的一片片，薄得像纸一样呢。
8. 展片呢！就像是把皱巴巴的纸铺平一样，把切好的片子展开，平平整整的放在玻片上。
9. 烤片咯！给片子“加热”一下，让它更好地贴在玻片上，就像把贴纸贴牢一样。
10. 染色啦！这可是让组织“大放异彩”的时候呀！通过各种染料，把不同的结构染上不同的颜色，这样就能清楚地看到组织的各种细节啦，比如细胞核染成蓝色呀，细胞质染上其他颜色呀。
最后，就可以在显微镜下观察啦，哇，你能看到一个神奇的微观世界呢！你说是不是很有趣呀？。
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石蜡切片过程
一、石蜡包埋:
1.脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70% →80% →90% →95%→
100%酒精（无水乙醇）→100%酒精，各级酒精脱水时间30-45 min。
（注意：80%酒精内组织可留之较久，当天如果来不及做完就可以暂时保存一晚上，次日再继续做下去。
70%的酒精可作为更久的保存剂。
）
2.透蜡：脱水后组织：50%酒精+50%二甲苯30 - 45min.
二甲苯（组织透明即可停止) 15min.
50%二甲苯+50%石蜡20-30min.
纯石蜡1 45min.
纯石蜡2 45min.（透腊之前做好准备工作：准备腊杯，烘箱温度保持55—60℃左右，使石腊熔化，温度不宜过高，以免使组织发脆。
）
3.包埋：
a.折好纸盒，准备小镊子、酒精灯、解剖针、冷水等。
b.用温热吸管吸取石蜡注入纸盒。
等待底稍微凝固，温镊子夹住样品放入盒子中央，面朝底(可以将蜡一次倒入纸盒，然后待蜡表面起膜后，用温镊子夹住样品放入蜡中，待冷却即可，整个操作过程中，切勿让蜡中起气泡)。
c.两手拿着两端，入冷水一半，吹气，使表面石蜡形成移较厚腊层，然后急速全部进入冷水中3分钟。
d.修正蜡块（上下两个面一定要平行并且光滑）
e.固着蜡块
二、切片
1.切片（切片时，可以在刀片以及刀片周围涂上一点甘油）
2.贴片烤片（甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清）（在贴片时，用细吸管取一点点甘油蛋白（越少越好）于载玻片上，然后用手抹匀，手一定要干净。
将切片放在载玻片（光亮面朝向下），然后滴几滴冷水使切片悬于水上。
接着将载玻片放在37℃上烘烤。
常见问题分析：
1.切片分离不能形成蜡带：☞室温过低，蜡过硬。
2.蜡带弯曲：☞蜡块口下面不平行，或蜡块不与刀刃平行所致。
3.切片厚薄不一: ☞切片刀或蜡块未固定紧。
4.切成片后，组织与蜡块脱离：☞脱水不干净等。
5.蜡片易粘在切片上或蜡片萎缩：☞室温太高或蜡太软或刀的角
度太小。
6.切片破裂：☞浸蜡不足或浸蜡温度过高，或在脱水剂、透明剂
中时间过长，引起组织发脆或有杂质，材料脱钙不完全，此种无法补救。
7.蜡片上卷，切过刀口即破裂：☞刀口太钝或沾有石蜡或刀的角
度过大或蜡太硬。
*：包埋时，时间长会使标本变质，过短则石蜡不能透进标本。
石蜡包埋过程中，注意控制温度保持在58-60℃，石蜡不能融化。
三、染色
二甲苯脱蜡（1） 10----15分钟
二甲苯脱蜡（2） 10----15分钟
1/2 二甲苯+1/2 100% 酒精 3-----5分钟
100% 酒精 10分钟
95%酒精 10分钟
80%酒精 10分钟
70%酒精 10分钟
50%酒精 10分钟
蒸馏水洗 1-------3分钟
苏木精染色 10-------15分钟
自来水冲洗 3-------5分钟或者更长
伊红（曙红）复染色 3-------5分钟或者1---2 分钟
70%酒精 1-------2分钟
80%酒精 1------2分钟
95%酒精（1） 1------2分钟
95%酒精（2） 1-------2分钟
100%酒精（1） 1-------2分钟
100%酒精（2） 1--------2分钟
二甲苯（1） 5
二甲苯（2） 5
封片。