尿路感染细菌学检查规范

尿路感染细菌学检查规范

一、相关临床知识

(一)概述

尿道感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿路炎症。从肾脏排泌出来的尿液正常情况下是无菌的。如果在尿液中分离出细菌(排除污染因素)即称为菌尿，同时伴有感染症状者称为尿路感染。尿路感染并非是一种单一的疾病，而是一种临床综合症。根据感染部位可分为上尿路感染(肾盂肾炎)及下尿路感染(膀胱炎)，男性还可出现前列腺炎。不同部位同时感染也很常见。

(二)易感人群

尿路感染是人类最常见的感染之一，可发生于各个年龄段的人群，好发于女性，男：女之比为1：10。

(三)发病机理及常见致病菌

1、上行感染：肠道菌群逆行感染是泌尿系感染最常见的方式。女性尿道宽而短，且尿道口距肛门较近而常被粪便细菌污染，故更易感染；此外，女性阴道菌群也是尿路感染病原菌的又一个主要来源。这种方式引起的感染多为单一细菌感染，大肠埃希菌是主要致病菌，其次是克雷伯菌属和变形杆菌属(后两者远远少于前者)，有时也会发生混合感染。

2、泌尿系统解剖结构和生理功能改变引起的感染：如留置导尿管，肾盂造瘘术，尿路结石，尿路重建、前列腺肥大，膀胱排空能力受损等，不仅有利于微生物的粘附和侵入，使感染易发，而且改变了尿路感染的致病菌范围，其感染菌除上述的大肠埃希菌、克雷伯菌属和变形杆菌属以外，其他革兰阴性杆菌如肠杆菌属，普罗威登菌属、沙雷菌属、不动杆菌属、假单胞菌属也是常见的致病菌；此外，由血浆凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌和酵母菌等引起的感染也很常见；并且容易发生多种微生物的混合感染，易被误认为标本污染。

3、血行感染：是一种比较少见的感染方式。菌血症病人，血液中的细菌可通过血流进入肾脏，引起感染。常见的病原菌有葡萄球菌、伤寒沙门菌、念珠菌和结核分枝杆菌等。

4、直接感染：外伤或肾周围器官发生感染时，细菌可直接侵入肾脏引起感染。

5、淋巴管感染：更为少见，当盆腔器官炎症、阑尾炎和结肠炎时，细菌可经淋巴管引起肾盂肾炎。

(四)临床表现

尿路感染典型的临床表现是发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛。可因患者的年龄和健康情况而不同，新生儿尿路感染的症状往往是非特异性的、模糊的，可表现有厌食，呕吐，倦怠，无发热的菌血症等；婴儿期直到2岁，常有高热；2岁以后的尿路感染才会有典型的临床表现；老年患者的尿路感

染常缺乏明显的症状，更易造成菌血症和急性肾功能衰竭。

(五)尿培养检查的临床指征(有下列情况之一者，应进行尿培养)

(1)有典型的尿路感染症状；

(2)肉眼脓尿或血尿；

(3)尿常规：白细胞和／或亚硝酸盐阳性；

(4)不明原因的发热，无其他局部症状；

(5)留置导尿管的病人出现发热；

(6)泌尿系统疾病手术前。

二、标本采集和运送

(一)容器：

l、由不与尿液成份发生反应的惰性材料制成；

2、洁净、无菌、加盖、密封、防渗漏；

3、不含防腐剂和抑菌剂，一次性使用；

4、容积应>50ml、开口—直径应>4cm、具有较宽的底部、盒盖易于开启。

(二)标本采集方法

注意尽量采集晨尿标本，应保证尿液在膀胱内停留4h以上。

1、清洁中段尿

是最常用获得尿培养标本的方法(该方法很难使尿标本做到不被污染，需对结果进行合理评价)。

留取标本前须向病人详细说明标本留取的方法和注意事项：

(1)睡前少饮水，以免稀释尿液

(2)女性病人用手分开大阴唇，男性病人翻上包皮，用肥皂将会阴部仔细清洗，然后以清水冲洗尿道口周围。

(3)前段尿排去，将中段尿约10/20ml直接排入专用的无菌容器中。

2、耻骨上膀胱穿刺法

严格按无菌操作，使用注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱，吸取尿液。该方法是评估膀胱内细菌感染的“金标准”。

3、直接导尿法

按常规方法局部消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本污染，准确地反映膀胱感染情况。但因导尿管的使用，可引入下尿道细菌，导致继发感染，应慎重使用。

4、小儿收集包

对于无自控能力的小儿可应用收集包收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染尿液而产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用其他方法如耻骨上膀胱穿刺或导尿法进行复检。

5、留置导尿

利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器通过导尿管吸取尿液，操作时注意防止混入消毒剂。不能采集收集袋中的尿液。

6、其他方法

收集特定部位的尿标本可以通过侵入的方式如膀胱镜或手术中进行采集。

(三)标本运送

标本采集后应及时送检，2h内进行接种，否则应置4～8℃冰箱保存，冷藏保存标本时间不得超过8h。

三、实验室检查

(一)标本的验收

1、工作人员应首先检查化验单所提供的信息，信息应包括：标本收集时间、标本收集方式、病人是否已使用抗生素等。对信息不全者应设法和临床医师取得联系，在没有获得可靠信息之前，任何标本都不能随意丢弃。

2、根据标本采集时间、所用容器确定标本是否合格。

3、对不合格的标本注明原因，退回，并做记录。

(二)培养基选择和标本接种

根据标本来源及临床诊断选择适合的培养基和培养条件。

1、一般培养：将收集标本的容器轻轻旋转混匀，用定量接种环或无菌微量加样器取尿液0.00lml 接种于血平板和麦康凯平板或中国兰平板，35-37℃培养18～24h。对导尿、耻骨上膀胱穿刺、已使用抗生素治疗的病人的标本应增加一个0.01ml接种量。

2、特殊培养：对怀疑有苛氧菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺法或导尿法采集样本，加种一块巧克力平板，置5％CO2环境中培养48h。对临床要求真菌、淋病奈瑟菌及结核杆菌培养者，可参照有关章节选择接种相应的特殊培养基进行培养。

3、经18～24h培养无菌生长者，应将所有培养基继续培养24h。

(三)结果观察和结果解释

1、菌落计数：(1)采用0.001ml接种量者，将平板菌落数乘以103(CFU／m1)；(2)采用0.01m1接种量者，将平板菌落数乘以102(CFU／m1)。

2、一般解释标准：单种细菌苗落数>105CFU／ml可能为感染；<104CFU／ml可能为污染，在两者之间需要根据病人的临床表现进行评估。

3、不同来源标本结果解释(见表1)