临床分支杆菌质控流程

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程1、质量的概念和质量保证影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。

具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。

第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。

现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。

无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。

这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。

第二类是鉴定细菌的实验。

通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。

对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。

第三类是药敏实验。

有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形式报告,属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。

也应以准确度和精确度衡量。

所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。

2、室内质量控制2.1在职人员2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。

2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。

2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。

2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。

因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。

2.2操作手册及参考书2.2.1细菌室可以根据自己的实际情况制订一本指导日常工作、简明扼要的操作手册,并在工作中不断完善和修改。

040分枝杆菌菌种鉴定标准规程

1.分枝杆菌菌种初步鉴定：1.1试剂：见培养基配制标准程序1.2 接种方法:与药物敏感试验相同，10-2mg／ml菌液，接种0.1ml。

37℃孵育，每周观一次，快速生长非结核分枝杆菌一周内可生长菌落，缓慢生长分枝杆菌，四周报告结果。

与药物敏感性试验同步进行。

1.3 结果与报告分枝杆菌菌种初步鉴定结果见表PNB TCH牛分枝杆菌 - -结核分枝杆菌 - +非结核分枝杆菌 + +参考文献:结核病诊断细菌学检验规程2.分枝杆菌菌种系统鉴定：临床分离分枝杆菌菌株，经PNB、TCH等鉴别培养基初步鉴定后，确定为非结核分枝杆菌者或药物敏感试验耐PAS的分离菌株，以及临床提出需作菌种鉴定的菌株，可按下列方法进行系统鉴定。

2.1 培养特性2.1.1 生长速度接种原始分离株的次级培养物10-2mg／ml菌液0.1ml于改良罗氏培养基上，分别置于37℃;45℃和28℃孵育，一周之内生长菌落者为快速生长分枝杆菌。

一周后生长者为缓慢生长分枝杆菌。

2.1.2色素产生将分离菌株接种两支改良罗氏培养基，一支用锡纸或黑纸包缠密封，另一支不包纸，二者一起放入37℃孵育，待不包纸管长出菌落时，开启包纸管观察，有色素产生为暗产色菌。

无色素者，开启试管胶塞通气，以100瓦钨灯泡在相距450cm处照射2—3h，继续放37℃孵育3天，每天观察一次，产生色素者则为光产色菌。

不论照光与否，菌落均无色素产生者为不产色菌。

2.2 生化试验2.2.2 耐热触酶试验（1）原理：有些分枝杆菌经68℃处理后，产生的过氧化氢酶仍保持活性，可分解过氧化氢。

（2）试剂：a)pH7.0 1／15M磷酸盐缓冲液(PB)b)30％过氧化氢溶液(H202)c)10％吐温一80溶液 121℃ 10min灭菌，4℃保存。

(3) 方法：取生长在改良罗氏培养基3—4周的菌落磨菌比浊制备10mg／ml 菌悬液，取0.5ml混悬于含试剂(1)1.0ml试管内，放入68℃水浴20min，待冷却后，缓缓滴加37％H202与10％吐温-80等量混合液0.5ml(此液临用前配制)。

临床微生物室内质控流程

微生物室室内质控规程1. 目的规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。

2. 适用范围微生物实验室的所有检验项目。

3. 职责实验室检验人员均须熟知并遵守本程序。

4. 程序4. 1 分析前质量管理4.1.1 检验申请单临床医生应在HIS中规范申请临床微生物检测。

口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补开检验医嘱或检验申请单。

4 .1.2 护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，填写微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确张贴于标本容器上。

4.1.3 样本采集和运输样本采集人员应遵偱《标本采集手册》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的容器或运输培养基，安全运送到微生物室。

4.1.4 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收和录入程序》、《标本拒收程序》对样本接收或拒收，并记录。

4. 1. 5 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种岗位检验人员严格按照《标本接收和录入程序》录人、核对病人信息和标本信息等资料。

4.1.6 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照各种标本的细菌学检验标准程序正确及时处理的标本。

已经检验的样本应在保证其性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，或做补充检验。

4.2 分析中质量管理4.2.,1 试剂的质量控制4.2. 1. 1 所有新购入或新配制试剂必须做质控以评估质量并记录质控结果，只有质控合格才可使用。

触酶、氧化酶每日质控；（质控菌株见各实验标准操作规程）抗血清至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控（质控菌株见各实验标准操作规程）;革兰染液每日用阴（ATCC25922）、阳（ATCC29213）性质控菌做质控;抗酸染液每周使用要求用阴（ATCC25922）、阳性（CICC偶发分枝杆菌）质控菌做质控 ;自制试剂：每配制一批新试剂做质控（质控菌株见各配制程序标准操作规程）。

4.2.1.2 无厂商特别说明时，不同批号的试剂不可混用。

MRSA或非结合分枝杆菌的控制措施

MRSA或非结合分枝杆菌的控制措施一、诊断加强主动监测，临床科室应对危重病人及有相应临床表现的患者及时送检标本，及时发现、早期诊断MRSA等其他多重耐药菌感染患者和定植患者。

确诊主要依赖于病原微生物的检查。

二、报告：1、检验科微生物室一旦检测到MRSA及其它多重耐药菌感染病人时，应在化验单上敲上耐药菌印章，并于24小时内报告医院感染管理科科，报告内容包括病人姓名、住院号、科室、标本名称、采集部位、药敏学鉴定等。

2、检验科微生物室在报告感染科的同时应按危急值报告流程及时报告相应的临床科室。

3、临床科室发现MRSA及其它多重耐药菌感染时，应及时填写医院感染病例报告表，于24小时内报告医院感染管理科。

4、出现MRSA感染暴发时事件时，应根据《医院感染管理办法》和《医院感染暴发处置》的规定及时上报。

5、出现MRSA感染暴发时，医院感染管理科及时上报分管院长和医院感染管理委员会。

三、隔离：1、必须进行接触隔离，在床牌和病历卡上标贴接触隔离警示标识，以提醒医务人员以及家属。

2、患者最好进行单独隔离（如MRSA、VRE），隔离病房不足时才考虑要进行床边隔离，挂上隔离警示标识，相同感染病原体者可同住一间。

当感染较多时，应保护性隔离未感染者。

3、必须尽量减少与感染者或携带者相接触的医务人员数量。

最好限制每班诊疗病人者为一个护士、一个医生，所有诊疗尽可能由他们完成，包括标本的采集。

4、进入病人房间的人员都必须戴清洁手套，在诊疗、护理过程中，如果将与病人或其环境（包括家具、床栏杆等）有大面积接触，或病人有大便失禁的情况，工作人员要加穿隔离衣。

当可能产生气溶胶的操作（如吸痰或雾化治疗等）时，医务人员还应当戴上标准外科口罩和防护眼镜。

并在离开房间前脱去手套和隔离衣至黄色垃圾袋中。

脱去手套后必须进行手清洗和手消毒。

5、在隔离房间门口放置一警示牌防止无关人员进入，并提醒进入者应注意预防隔离并在出病室前做好手卫生。

手卫生是接触传播最重要的环节，接触患者必须戴手套，操作完成后要及时脱去手套，并按洗手六步法洗手或快速手消毒。

细菌分枝杆菌和真菌检测的质量控制流程

细菌分枝杆菌和真菌检测的质量控制流程1.质量控制样品选择选择适当的质量控制样品是质量控制流程的第一步。

质控样品应该代表实际样品中可能出现的各种细菌、分枝杆菌和真菌，并且应该包括正样品和负样品。

2.制备质量控制样品制备质量控制样品是确保样品一致性和准确性的关键步骤。

选择适当的培养基和生长条件来培养相关的细菌、分枝杆菌和真菌。

确保质控样品的纯度和浓度，并使用适当的方法进行冻存和保存。

3.质量控制样品测试在每次实验过程中，将质量控制样品与待测样品一同进行测试，以评估实验室仪器和方法的性能。

确保在每个批次或每个运行期间都有质量控制样品的测试。

4.数据分析和评估对质量控制样品的测试结果进行数据分析和评估。

将质量控制样品的结果与已知结果进行比较，以评估实验室方法的准确性和结果的可靠性。

使用统计学方法来分析和评估结果，以确定任何偏差或错误。

5.结果记录和存档记录质量控制样品的测试结果，并存档以备将来进行分析和复核。

确保结果的可追溯性和可复现性，并记录任何问题或异常结果。

6.质量控制教育和培训对实验室人员进行质量控制教育和培训，以确保他们了解和遵守质量控制流程。

培训应包括样品准备、实验方法、数据分析和结果评估等方面。

7.定期验证和审核定期验证和审核质控流程的有效性和准确性。

根据实验室的需要，制定一定的验证计划，并定期进行内部和外部审核。

解决任何问题或改进措施，并持续改进质量控制流程。

8.外部质量评估参加外部质量评估计划，例如与其他实验室共享质控样品，或参与认证和资质认可计划。

通过与其他实验室进行比较和评估，进一步确保检测结果的准确性和可靠性。

以上是细菌、分枝杆菌和真菌检测的质量控制流程。

通过选择适当的质量控制样品，制备样品，测试样品，分析评估结果，并持续进行教育、培训和验证，实验室可以保证检测结果的可靠性和准确性，并持续改进质量控制流程。

质量控制流程对于确保实验室的信誉和提供可靠的检测结果非常重要。

结核分枝杆菌的分离鉴定程序

结核分枝杆菌的分离鉴定程序介绍结核病是一种由结核分枝杆菌引起的传染病，其传播速度快、危害大，给人们的健康带来了很大的威胁。

因此，对结核分枝杆菌的分离鉴定程序非常重要。

本文将详细介绍结核分枝杆菌的分离鉴定程序，包括样本采集、试管培养、生化鉴定、药敏试验等环节。

样本采集结核分枝杆菌主要通过呼吸道传播，因此，样本采集通常采用痰液、支气管灌洗液等。

采样前需要对患者进行相关的禁忌症评估。

在采样时，应确保样本的纯净度和有效性。

试管培养试管培养是结核分枝杆菌分离鉴定的最基本步骤。

通常使用低松散沙状固体培养基如LJ和7H11等进行培养。

试管培养过程中，需要进行严格的无菌操作，避免外界细菌或真菌的污染。

培养基的制备、接种、培养条件和培养时长等都需要严格控制。

试管培养基的制备1.准备所需材料：含有生长因子的结核分枝杆菌缓冲液、各种试剂和培养基。

2.按照制剂说明书将试管培养基制备好。

3.使用无菌仪器将制备好的培养基分装到试管中，每支倒数0.5毫升。

4.将试管培养基密封并进行无菌处理，以确保培养基的无菌。

接种培养1.取出一支含有菌株的试管培养基。

2.打开培养基容器盖子，用铸菌环将菌株转移到培养基上。

3.将铸菌环放回到试管中，盖好试管盖。

培养条件1.放置到恒温培养箱中，设置适宜的温度（通常在37摄氏度）。

2.培养箱中的湿度应控制在80%以上，以保持培养基的湿润。

3.培养时间通常为3至6周，根据菌株的生长情况进行观察。

生化鉴定生化鉴定是结核分枝杆菌分离鉴定的一种常用方法。

通过对菌株的代谢产物进行观察和检测，可以确定其是否为结核分枝杆菌。

常用生化鉴定试验1.尼舍氏染色法：染色后，结核分枝杆菌呈红色，而其他细菌不变色或呈蓝色。

2.热力酸快速试验（TCH）：结核分枝杆菌可产生热力酸，使培养基产生颜色变化。

3.尼氏-约翰逊快速鉴定法：通过对结核菌产生的色素进行观察来进行鉴定。

4.结晶胶凝酶试验：通过观察菌株是否产生结晶胶凝酶来进行鉴定。

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程1、质量的概念和质量保证影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。

具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。

第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。

现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。

无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。

这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。

第二类是鉴定细菌的实验。

通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。

对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。

第三类是药敏实验。

有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形式报告,属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。

也应以准确度和精确度衡量。

所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。

2、室内质量控制2.1在职人员2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。

2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。

2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。

2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。

因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。

2.2操作手册及参考书2.2.1细菌室可以根据自己的实际情况制订一本指导日常工作、简明扼要的操作手册,并在工作中不断完善和修改。

结核分枝杆菌完整鉴定流程

结核分枝杆菌完整鉴定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!结核分枝杆菌完整鉴定流程1. 样本收集：首先，需要从患者或疑似感染对象处收集样本。

分枝杆菌实验室的标准化操作

前处理的步骤：前处理的步骤：
2ml痰标本至前处理管取1－2ml痰标本至前处理管视标本性状加入1－2倍体积的4％氢氧化钠视标本性状加入1 倍体积的4 震荡30－60秒至标本完全液化震荡30－60秒至标本完全液化 30 室温静置15分钟（整个处理时间不得超过20分室温静置15分钟（整个处理时间不得超过20分 15分钟 20 钟）
分枝杆菌培养
• • • • 培养基质控前处理接种和孵育结果和报告
标本前处理
原理：分枝杆菌对酸碱有相对强的耐受力。原理：分枝杆菌对酸碱有相对强的耐受力。目的：液化标本、去除杂菌、分离出分枝杆菌目的：液化标本、去除杂菌、原则：原则：
- 尽可能杀灭标本中的杂菌 - 尽可能保存标本中的分枝杆菌
菌落生长不足斜面面积1/4者报实际菌落数。菌落生长不足斜面面积1/4者，报实际菌落数。 1/4
结果报告的注意事项：结果报告的注意事项：
必须记录生长过程, 必须记录生长过程,不得只记录最终结果不得打开培养管进行操作发现可疑分枝杆菌生长时尽快送药敏试验室阴性培养管也要高压后丢弃
培养的质量控制：培养的质量控制：
染色(2)
脱色：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
轻缓冲洗
沥水。沥水。滴加脱色液，保持1分钟。滴加脱色液，保持1分钟。如不彻底，重复。如不彻底，重复。
特别说明：脱色时出现油状物时，特别说明：脱色时出现油状物时，可能
复染滴加亚甲蓝复染液，保持30秒钟滴加亚甲蓝复染液，保持30秒钟 30 流水冲洗，沥去玻片上的水。流水冲洗，沥去玻片上的水。玻片干燥后镜检
孵育的注意事项：孵育的注意事项：
接种后斜面向上孵育24小时接种后斜面向上孵育24小时 24 之后培养基直立继续孵（检查瓶盖是否拧之后培养基直立继续孵（紧）温度监测光线的影响－避免使用可视窗的温箱光线的影响－

结核分枝杆菌完整鉴定流程

结核分枝杆菌完整鉴定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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进行结核分枝杆菌鉴定的第一步是准确采集样本。

(完整版)临床分支杆菌质控流程

临床分枝杆菌检验的质量控制流程1、质量的概念和质量保证影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。

详尽采用哪一种指标,应根据实验的性质决定。

2、室内质量控制2.1在职入员2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物安全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。

2.1.2工作人员必须具有严格的工作态度。

技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。

2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。

2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议专业培训班,获取新信息。

因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更严重。

2.2操作手册及参考书2.2.1细菌室可以根据自己的实际情况制订一本指导日常工作、简明扼要的操作手册,并在工作中不断完善和修改。

2.2.2细菌室应准备一些专业分枝杆菌参考书。

3、设备质量控制3.1温箱、冰箱每日工作开始,在打开温箱或冰箱等控温设备前,以及下午下班前须观察当时设备的温度并记录3.2高压灭菌器须定期检查灭菌器的灭菌效果,至少每月1次。

测试方法可用留点温度计回嗜热芽孢菌等,并建立定期维修。

3.3生物安全柜新安装必须由生产厂家提供安装检测报告,以后每年必须检测一次,若须更换滤网,须由专门技术人员进行,并提供检测报告。

工作时检测气流、紫外灯正常与否,可用营养琼脂检测空气中细菌的沉降数,紫外线必须有使用记录,每3个月检查一次性能3.4接种环要求长5-8cm,环直径约3mm；接种针长5-8cm。

3.5显微镜应做好常规的纯洁和保养。

所有的技术人员必须对显微镜的对光、应用和纯洁的正确步骤掌握。

3.6细菌鉴定仪应及时更新系统操作软件。

定期纯洁仪器的探测部位,并用标准模板进行校正。

有必要时按照菌株对每批号的鉴定卡、条、板进行一次测定,并核对每个反应和药敏试验的结果。

分枝杆菌分离培养及质量控制

分枝杆菌属种类
结核分枝杆菌复合群
结核分枝杆菌牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌
光产色分枝杆菌暗产色分枝杆菌不产色分枝杆菌迅速生长分枝杆菌
分枝杆菌属
非典型分枝杆菌
麻风分枝杆菌
结核分枝杆菌生物学特性

形态

直或销弯曲、两端钝圆的杆菌，菌体长1-4um，宽0.3-0.6um，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，经抗酸染色后菌体呈红色杆状，单个散在或呈“人、 V、T、Y”形排列。
分枝杆菌种类
类别 Rubyun分群对人致病的分枝杆菌人型、牛型、非洲型堪萨斯、海、猿瘰疠鸟-胞内、蟾偶发、龟
缓结核分枝杆菌复合群慢非结核分枝杆菌Ⅰ群生非结核分枝杆菌Ⅱ群长非结核分枝杆菌Ⅲ群快速生长非结核分枝杆菌Ⅳ群
分枝杆菌属主要特点

是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用抗酸染色。专性需氧营养要求特殊，大多数生长缓慢。不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质，所致疾病呈慢性。
包括细胞壁、细胞膜、细胞质核质。

结构

结核分枝杆菌的生长和营养
1. 专性需氧菌(<50% O2); 8% CO2 可促进基础生长 2. 营养要求: - C 源: 甘油, 有机酸 (丙酮酸盐, 柠檬酸, 棕榈酸盐), 葡萄糖 - N 源: 天(门)冬酰胺, 谷氨酸, 等 - 鸡蛋或血清蛋白: 保护 MTB 拮抗毒素 (油酸,毒素但在血清蛋白存在的情况下可促进结核菌的生长) 3 . 环境： • - 生长最适温度为35-37 ℃ • - 最适PH为6.8-7.2
分枝杆菌菌种初步鉴定

结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制

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结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
培养基制备注意事项
• 无菌试验后，虽然没有发现有可见菌落出现，但培养基已经变蓝色或变黄色，与蓝绿色或黄绿色有明显区别时，应视为污染弃去。
• 每批培养基应作无菌试验。
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结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
质量控制内容
• 颜色 • 质地 • 湿度 • 匀质性 • 无菌性 • 敏感性
培养基制备需要的试剂
• 2% 孔雀绿溶液，单独配制
n孔雀绿染料
2g
灭菌去离子水
100 ml
使用无菌技术溶解染料于灭菌去离
子水中（放置于37°C温箱中１－２小时）或者在水浴中加热。配制好的溶液
储存于深色瓶中。此溶液长时间放置并
不稳定，如果发生沉淀，应丢弃并重新配制。
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结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
器内。
• 记录批号的信息（看下边信息）。
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结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
培养基制备注意事项
• 培养基制备最好在专用“培养基制备间”内进行，制备培养基时应有相应制作过程的记录。
• 培养基制备前“培养基制备间”的空气、台面等应进行消毒。
• 制备培养基的所有物品用具应高压灭菌。
结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
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2020/12/12
结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
内容
• 培养基制备需要的仪器 • 培养基制备需要的试剂 • 培养基制备步骤和方法 • 培养基制备注意事项
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结核分枝杆菌培养基制备、保存、质量控制
培养基制备需要的仪器、耗材

微生物检验实验室分枝杆菌属检验标准操作规程

微生物检验实验室分枝杆菌属检验标准操作规程微生物检验实验室分枝杆菌属检验标准操作规程1. 概述分枝杆菌属是一类细长的、具有分枝生长趋势的需氧杆菌，因具有耐受或抵抗酸和乙醇脱色的特点，又称为耐酸或抗酸菌。

分枝杆菌属至今已发现80多个种，除结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌外，其他分枝杆菌，如堪萨斯分枝杆菌、耻垢分枝杆菌等，统称为非结核分枝杆菌。

2. 标本类型痰液、体液（包括脑脊液、腹水、胸水）组织，粪便等标本。

3. 鉴定3.1 形态与染色：菌体细长，或稍弯曲，两端钝圆，大小为（0.2~0.5um）×（1~5um）。

革兰染色不易着色，抗酸染色呈红色。

以痰液直接涂片，结核分枝杆菌多为单个存在，有时呈V、Y、人字形排列，痰菌量多时可排列为束状或集聚成团。

荧光染料金胺“O”染色，在荧光显微镜下观察呈金黄色荧光。

3.2 培养特性：结核分枝杆菌生长缓慢，繁殖一代约需18h，因此在罗氏固体培养基上需要培养2~6星期方可见到菌落。

菌落多为粗糙型，不透明，乳白为米黄色，呈干燥颗粒状，形似菜花。

液体培养基中结核分枝杆菌生长较快，可形成表面菌膜或沉于管底。

3.3 生化反应：不发酵糖类，耐热触酶、耐热磷酸酶和吐温80水解试验均阴性，尿素酶、中性红、结核分枝杆菌烟酸、烟酰胺酶和硝酸盐还原试验均阳性。

3.4鉴别要点：3.4.1 本菌特征：菌体细长，抗酸染色呈红色；生长缓慢，菌落乳白或米黄色，呈干燥颗粒状，形似菜花状；不发酵糖类，尿素酶、中性红试验阳性。

3.4.2 与牛分枝杆菌的鉴别：结核分枝杆菌菌体细长，烟酸、烟酰胺酶、硝酸盐还原试验均为阳性；牛分枝杆菌菌体较短、较粗，烟酸、烟酰胺酶、硝酸盐还原试验均为阴性。

3.5 操作步骤3.5.1 中性培养基3.5.1.1 标本的处理痰液：挑取约5ml痰液至已标记的50ml离心试管中，加等量的2%N-乙酰半胱胺-氢氧化钠前处理液（去污染）；漩涡振荡20秒；静置15分钟，勿超过20分钟；加无菌PBS（pH6.8）至约50ml,盖紧盖子；离心3000r/min，15分钟；倒掉上清液；添加1-3mlPBS(pH6.8)以中和pH至6.8.体液（包括脑脊液、腹水、胸水）：无菌体液直接接种；标本量>10ml,离心3000r/min，15分钟，取沉淀物接种；污染标本，须同痰液处理方法后再接种。