电针肾俞、膈俞、百会穴对拟血管性

电针肾俞、膈俞、百会穴对拟血管性
痴呆小鼠学习记忆影响
赵建新　田元祥　孙彦辉　吴中秋　李　乾　李学武　康锁彬
【摘要】目的　观察电针对拟血管性痴呆小鼠学习记忆障碍的影响。

方法　复制脑缺血再灌注拟血管性痴呆小鼠模型,电针肾俞、膈俞、百会穴,分别于术后7天、15天、30天,与药物喜德镇对照,采用跳台法,记录反应时间(学习成绩)、潜伏期(记忆成绩)。

结果　造模致模型动物学习与记忆能力下降,表现为反应时间延长、潜伏期缩短,并随观察时间的延长而逐渐加重。

电针和药物均可使模型动物的反应时间缩短、潜伏期延长,但电针组学习与记忆成绩均于7天和30天时,显著优于药物组,15天时的记忆成绩显著优于药物组。

结论　电针肾俞、膈俞、百会穴对模型动物学习与记忆能力下降有改善和提高作用,疗效优于喜德镇。

【关键词】　拟血管性痴呆　学习记忆障碍　电针　跳台实验
The effect of Shen shu(B L23),Geshu(B L17),Ba ihui(D U20)electropuncture on learn i ng and m e m ory of m ouse with syn thetic V D Z hao J ianx in,T ian Y uanx iang,S un Y anhu i,et a l1T1C1M1Colleg e,H e B ei M ed ica l U n iversity,S h ij iaz huang 050091
【Abstract】Objective To ob serve the effect of electropunctu re on mou se’s jump ing experi m en t of syn thetic VD learn ing dys m nesia1M ethods D up licated re2perfu si on syn thetic VD mou se model of cereb ral ischem ia,electropunctu red Shen shu, Geshu and Baihu i,compared w ith H ydergine after7days,15days and30days and then reco rded the respon se peri od(learn ing resu lt)and laten t peri od(m emo ry resu lt)1Results M odelling led to the reducti on of model an i m al’s learn ing and m emo ry ab ility,w h ich w ere reflected as the p ro longati on of respon se peri od and derease of laten t peri od,w hat’s mo re,the change degree w as gradually increased w ith the p ro longati on of ob serving ti m e1W h ile bo th electropunctu re and H ydergine cou ld sho rten the respon se peri od and p ro long the laten t peri od;on seven th day and th irtieth day,the learn ing and m emo ry resu lt in electropunctu re group w as rem arkab ly superi o r to that in m edical group;the learn ing resu lt in electropunctu re group w as rem arkab ly better than that in m edical group on fifteen th day1Conclusion s Shen shu2geshu2baihu i electropunctu re cou ld i m p rove and increase the learn ing and m emo ry ab ility of model an i m al,and its cu rative effect w as better than H ydergine1
【Key words】Syn thetic VD　L earn ing dys m nesia　E lectropunctu re　Jump ing experi m en t1
血管性痴呆(V ascu lar D em en tia,VD)是指各种脑血管病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合征,为一慢性进行性疾病[1],主要与缺血性脑血管病有关。

鉴于针刺对VD的影响,目前多开展临床研究,实验研究尚未见报道,本文复制了脑缺血再灌注拟血管性痴呆小鼠模型,并采用跳台法,观察了电针肾俞、膈俞、百会穴对模型小鼠的行为学影响,以期探讨针刺治疗血管性痴呆的作用机理。

报道如下:
Ξ材料与方法
一、动物　♂昆明小鼠,体重25～28g,由河北医科大学实验动物中心提供。

二、仪器　小鼠跳台仪,连续变倍体视显微镜(XT S20型,北京),秒表,W Q-10C型多用电子穴位测定治疗仪(北京)
三、药物　喜德镇(H ydergine,瑞士山德士药厂
与天津华津制药厂合作生产,片剂,批号:980372)
四、模型制备　将小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和药物组,分组情况见表1。

参考文献[2],将动物用水合氯醛350m g kg腹腔注射麻醉,消毒,颈正中切口,体视显微镜下分离双侧颈总动脉,套“4”号丝线扣备用。

拉紧丝扣,阻断血流20m in,同时在距尾尖1c m处剪断放血约013m l,热凝止血。

松开丝扣灌注10m in后,再次阻断血流20m in,第2次再灌后观察30m in,缝合皮肤。

术后每日肌注青霉素012万u,连续3天。

其中假手术组只分离颈总动脉,套丝扣,但不阻断血流,尾部不放血,观察时间等与其它组相同。

五、实验方法　手术当天动物苏醒后,进行治
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·Ch inese Journal of Behavi o ralM edical Science9(2),2000
Ξ作者单位:050091河北医科大学中医学院(赵建新　田元祥
　孙彦辉　吴中秋　李乾　康锁彬);北京中医药大学(李学武)
疗。

电针组参照全国针灸学会实验针灸研究会制定的“实验动物针灸穴位图谱”,选取百会、肾俞、膈俞穴,30号015寸毫针刺入,接电针仪(与百会穴形成环路的另一电极外包湿纱布,固定于动物一侧前肢),采用连续波,频率3次 秒。

强度以针柄颤动,但能使动物不挣扎嘶叫,保持安静为度。

每次10m in,每日1次,直至检查。

药物组用喜德镇灌胃0177m g kg 日。

除电针组外,其余各组也均采用同一体位固定10m in。

除药物组外,其余各组也均灌胃等量生理盐水。

六、检测方法[3]　实验装置是一10×10×60c m 的小鼠跳台反应箱,分为五间,箱底为可通36v连续电刺激的铜栅。

每间右后角置一直径和高均为415 c m的橡皮垫,作为小鼠回避电击的安全区。

实验时先将小鼠置于跳台仪中,适应环境3m in,然后底部铜栅通以36v交流电,记录动物受到电刺激后跳上橡皮垫的反应时间,作为学习成绩。

24h后将小鼠置于跳台仪中适应3m in,再将其置于橡皮垫上,记录第一次跳下橡皮垫的潜伏期,作为记忆成绩。

七、显著性检验　用方差分析、N ewm an2Keu ls 检验。

结 果
电针对不同时段小鼠跳台实验的影响,结果见表1、表2、表3。

表1　术后7天四组小鼠跳台成绩的组间比较(x±s)
组　别n
学习成绩记忆成绩
反应时间(s)潜伏期(s)假手术组1216175±1014433238137±7214333
模型组1050134±1716665191±34179
电针组1034106±121913△168181±4510333△
药物组1048121±12187117138±33160
F　值1314223170
P　值<0101<0101
注:与模型组相比3　P<0105 33　P<0101
与药物组相比△P<0105
由表1可见,术后7天的学习成绩:模型组较假手术组反应时间延长,有显著性差异(P<0101),显示模型动物的学习成绩下降;电针组较模型组反应时间缩短,具有统计学差异(P<0105),即电针可提高模型动物的学习成绩。

药物组与模型组相比未见明显统计学差异(P>0105),可能尚未起到治疗意义。

记忆成绩:模型组较假手术组潜伏期缩短,有显著性差异(P<0101),显示模型动物的记忆成绩下降;电针组、药物组分别与模型组相比均有统计学意义(P<0101及P<0105),电针组较之药物组潜伏期延长,提示电针与药物均能提高模型动物记忆成绩,且电针作用优于喜德镇。

表2　术后15天四组小鼠跳台成绩的组间比较(x±s)
组　别n
学习成绩记忆成绩
反应时间(s)潜伏期(s)假手术组1214128±914933246134±7615533
模型组1057155±1516358106±30171
电针组1027145±1015633187170±4311333△△
药物组938156±1212433107197±361113
F值2310928169
P值<0101<0101
注:与模型组相比3　P<0105　33　P<0101
与药物组相比△△P<0101
由表2可见:术后15天时,学习成绩:模型组的反应时间延长,与假手术组相比有显著性差异(P <0101),显示模型动物的学习成绩下降;电针组、药物组分别与模型组相比均有显著性差异(P< 0101),但前两者相比未见明显统计学意义(P> 0105),提示电针与喜德镇均可提高模型动物的学习成绩,且作用相当。

记忆成绩:模型组的潜伏期缩短,与假手术组相比有显著性差异(P<0101),显示模型动物的记忆成绩下降;电针组、药物组分别与模型组相比均有统计学意义(P<0101及P<0105),且前两者相比有显著性差异(P<0101),提示对本阶段模型动物的记忆成绩,二者均有提高作用,且以电针为优。

表3　术后30天四组小鼠跳台成绩的组间比较(x±s)
组　别n
学习成绩记忆成绩
反应时间(s)潜伏期(s)假手术组1212199±1012833240114±6311233
模型组859131±1614151133±34164
针刺组819184±1216433△201120±5517233△
药物组832126±1018833146139±351943
F值2310025119
P值<0101<0101
注:与模型组相比3　P<0105　33　P<0101
与药物组相比△P<0105
由表3可见:术后30天的学习成绩:模型组学习成绩,较之假手术组,结果与7天、15天一致。

电针组、药物组较之模型组反应时间缩短,均具有显著性差异(P<0101),电针组与药物组相比也有统计学意义(P<0105),表明两组均有提高模型动物学习成绩的作用,且电针作用优于药物。

记忆成绩:与假手术组相比,模型动物的记忆成绩下降,结果与7天、15天一致。

电针组、药物组分别与模型组相比均有统计学意义(P<0101及P<0105),且二者间相比也有统计学差异(P<0105),提示电针与药物
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中国行为医学科学2000年第9卷第2期
均能提高模型动物的记忆成绩,但以电针作用为优。

讨 论
一、组方依据
VD属于祖国医学“遗忘”、“健忘”、“善忘”、“呆病”、“文痴”范畴。

针灸单穴及复方治疗在古代文献已有记载。

据临床验证,针灸疗法对VD的智能及社会活动功能康复确有积极作用,其疗效肯定。

从临床来看,中风痴呆证患者肾虚者可占80%以上[4],以肾虚、痰瘀内阻为证候基本特征[5],故该研究以益肾填髓,醒脑启智,佐涤痰化瘀立法选穴。

结合经络理论,《难经·二十八难》云:“督脉者……上至风府,入属于脑。

”周莉等[6]观察到针刺百会可提高人的即时记忆能力及小鼠的学习成绩和记忆再现能力,故针刺百会可通督醒脑。

肾俞、膈俞均属膀胱经,而“膀胱足太阳之脉,起于目内眦,上额交巅。

其直者,从巅入络脑”(《灵枢·经脉》),肾俞可益肾填髓充脑,膈俞为八会穴之一,可活血化瘀。

因此,选用这组穴位,以百会通督醒脑,肾俞益肾填髓充脑,膈俞活瘀祛痰。

二、脑缺血再灌与学习记忆障碍
学习和记忆属于高级神经活动或脑的高级功能,它是高等动物和人类最具特色的生理特性之一。

学习主要是指人或动物通过神经系统接受外界环境信息而影响自身行为的过程,记忆是指获得的信息或经验在脑内贮存和提取(再现)的神经活动过程,二者密切相关[7]。

学习记忆能力是思维活动的基本环节,是智力结构中诸多要素(观察力、注意力、记忆力、判断力、想象力等)的重要成分。

记忆通常可分为瞬时记忆、短时记忆、长时记忆和永久记忆。

长时记忆定位于新皮层,而学习和短时记忆则与内侧颞叶(包括海马结构及其相关皮层区:内嗅区、嗅旁区、海马旁区)功能有关[8]。

血管性痴呆患者早期的核心症状是记忆力衰退,逐渐出现注意力不集中,计算力、定向力、理解力的不同程度减退。

改善记忆力,阻止智能衰退是治疗的当务之急。

因此本实验参照文献复制不完全性反复前脑缺血再灌流小鼠模型,造成明显额叶皮层和海马损伤,学习记忆障碍显著,可模拟人的脑缺血性痴呆。

通过对动物学习与记忆行为的观察,来反映电针的确切疗效。

三、电针对模型小鼠学习记忆障碍的影响
跳台实验是常用学习记忆测定法。

从实验结果来看:造模导致了模型动物学习与记忆能力下降,表现为反应时间延长,潜伏期缩短,且随着观察时间的延长,这种改变逐渐加重。

电针和药物均可使模型动物的反应时间缩短,潜伏期延长,但电针组学习成绩与记忆成绩于7天和30天时,显著优于药物组,15天时的记忆成绩显著优于药物组。

可见电针肾俞、膈俞、百会穴对模型动物学习与记忆能力下降有改善和提高作用。

实验结果证实了电针该组穴位对拟血管性痴呆小鼠的学习记忆障碍有显著改善作用,为探讨针刺治疗血管性痴呆的作用机理提供了实验依据。

参考文献
1　黄红莉,陈保健,周昊1血管性痴呆1基础医学与临床,1998,18
(5):26～301
2　李巍,严徽谨,赵惠敏1脑缺血再灌对小鼠学习记忆的影响及药物防护1中国康复医学杂志,1995,10(2):67～691
3　张均田,斋藤洋1十二种化学药品破坏小鼠被动回避性行为—跳台试验和避暗试验的作用的比较观察1药学学报,1986,21(1): 12～191
4　林水淼,杨柏灿,林松华1对进行性隐匿型痴呆症的中医学研究1上海中医药杂志,1994,(10):9～111
5　王永炎,刘金民,谢映贞1中风病智能障碍的中医康复1北京中医药大学40周年校庆论文集1北京:学苑出版社,1996:561～5661
6　周莉,裴廷辅,杜旭,等1针刺百会穴对记忆影响的实验观察1黑龙江中医药,1992,(3):41～43,471
7　吴馥梅,萧信生1学习记忆及其脑内突触机制1自然杂志,1991, 14(10):746～7511
8　Squire L R,Zo la2M o rgan S1M edial tempo ral lobe m emo ry system1Science,1991,253:1380～13861
(收稿日期:1999-07-22　编辑、校对:林　立)
(上接155页)
状态变化、缺乏心理问题急诊服务的状态急需改善。

随着生活水平的提高,心理咨询、心理援助或危机干预的需求将逐渐增加。

应借鉴国外经验[3,4],及早组建危机干预中心、昼夜急诊服务,应付紧急事件以拯救人命;加强以社区为基础的干预服务系统,以消除滋生自我毁灭行为的过程、环境条件和社会结构;建立危机和危机干预资料库,并逐渐网络化,探讨D SH前的预警症状,开展合同电话咨询和心理援救工作,以求最大可能的帮助求询者。

参考文献
1　Pattison E M,Kahan J1T he deliberate self2harm syndrom e1Am J P sych iatry,1983,140(7):867～8721
2　姜佐宁综述1自杀与非致死性蓄意自伤1国外医学精神病学分册,1984,11(2):73～761
3　翟书涛主编1危机干预与自杀预防1北京:人民卫生出版社, 1997:26～39,309～3171
4　郭超浩译1社区在自杀评估、干预和预防中的作用1国外医学精神病学分册,1992,19(3):163～1671
(收稿日期:1999-05-18　编辑:校对:张　信)
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·Ch inese Journal of Behavi o ralM edical Science9(2),2000。