超声波提取海带多糖及抗辐射作用研究

超声波提取海带多糖及抗辐射作用研究
摘要超声波细胞破碎仪对过40目筛的海带细粉破碎提取海带多糖，并与酸提取法进行比较。

超声波处理20分钟得到的海带多糖量最多。

与酸提取法相比，
超声波法得到的海带多糖总糖含量增高(分别为189%和273%，P＜001)。

用提取得到的海带多糖配制成水溶液对经5Gy 60Co-r射线的小鼠经口自由饮水。

结果：海带多糖水溶液为12mg/ml以上剂量时可以显著提高小鼠的平均体重(P
＜005)，对增加外周血液中白细胞含量效果极其显著(P＜001)，说明海带多
糖经口给药有辐射保护作用。

关键词海带多糖抗辐射白细胞超声波提取
本文对海带多糖经口给药进行了继续研究，为褐藻酸钠在“抗放”方面的应用发展奠定理论基础。

材料和方法
材料：海带多糖样品，市售鲜海带，日光下晒干，粉碎过40目筛。

01mol/L
HCL和甲醛破壁，1%Na2CO3沉淀，用离心机(江苏产802型)4000rmp离心，上清液用HCL调pH=2，NaOH溶解，漂白，乙醇洗涤，Sevag法去蛋白，干燥，得精品褐藻酸钠。

实验动物：健康昆明种小鼠，雌雄各半，共40只，体重15～18g。

实验方法：用超声波清洗仪(上海产DS6150型)超声波分别处理10分钟、20分钟、30分钟。

按上述方法提取多糖。

硫酸-苯酚法测多糖含量［8］。

每组10只小鼠，分4mg/ml，8mg/ml，12mg/ml 3个给药组和水为对照组4组。

经口自由饮水。

给药前每组均以5Gy 60Co-r射线照射5分钟。

在7天后采取尾血［2］，观察白细胞计数。

结果与分析
(1)超声处理时间对海带多糖提取的影响：称取相同质量干海带粉3份，分别加入蒸馏水适量后分别用一定频率超声波处理10分钟、20分钟、30分钟，提取精品多糖，烘干后称量。

超声提取20分钟得到的海带多糖量最高，提出率可达395%。

而后随时
间延长，海带多糖的提出率反而下降。

超声波法提取是利用空化现象。

空化中产生的极大压力造成被破碎物细胞壁破裂，整个破裂过程在瞬间完成，同时超声波
产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解［3］。

海带细胞壁壁厚、韧性大，需破碎时间较长，故4分钟未完成破裂，处理20分钟时提取率最大。

随处理时间的延长，提高率反而下降。

(2)海带多糖对小鼠体重的影响：取40只小鼠，随机分成4组，每10只一组，在未给药前对每只小鼠进行称重，并一一记录。

记录后对第一组小鼠不给药，饲养7天后，对每只小鼠进行称重，并一一记录；对第二组小鼠给药量为4mg/ml，饲养7天，對每只小鼠进行称重，并一一记录；对第三组小鼠给药量为8mg/ml，饲养7天后，对每只小鼠进行称重，并一一记录；对第四组小鼠给药量为12mg/ml，对每只小鼠进行称重，并一一记录。

通过记录的数值计算出增重量，从中得出海带多糖与小鼠体重的关系。

见表1。

有研究证明，辐射破坏造血系统及免疫系统，导致脾脏重量、脾细胞数、脾淋巴细胞转化功能明显降低；骨髓细胞凋亡。

多糖具有提高和调节免疫能力，能在多个层面、多条途径对免疫系统发挥调节作用，包括对各类免疫细胞的调节、对细胞因子的调节、对补体的调节等。

从而达到抗辐射的作用。

海带多糖是一种免疫调节剂，其作用强度与香菇多糖和枸杞多糖相近，证明它是1种对巨噬细胞、T细胞有直接作用的免疫调节剂［1］。

免疫调节作用随给药剂量的增大有所增强与小鼠体重呈正相关。

(3)海带多糖对小鼠外周血中白细胞含量影响：取40只小鼠，随机分成4组，每10只一组，在未给药前对每只小鼠进行称重，并一一记录。

记录后对第一组小鼠不给药，饲养7天后，对每只小鼠进行称重，并一一记录；对第二组小鼠给药量为4mg/ml，饲养7天，对每只小鼠进行称重，并一一记录；对第三组小鼠给药量为8mg/ml，饲养7天后，对每只小鼠进行称重，并一一记录；对第四组小鼠给药量为12mg/ml，对每只小鼠进行称重，并一一记录。

通过记录的数值计算出增重量，从中得出海带多糖与小鼠外周血中白细胞含量的关系。

空白组小鼠经大剂量照射后白细胞计数降到很低水平，褐藻酸钠对受辐射小鼠白细胞的下降具有对抗作用，4 mg/ml的给药组效果已极其显著。

三组给药组进行显著性水平比较8mg/ml的剂量组与4mgml比较(P>005)白细胞增加差
异不显著。

12mg/ml的剂量组与4mg/ml比较(P＜001)白细胞增加差异极显著。

表明褐藻酸钠对小鼠受辐射保护作用与给药剂量呈正相关。

讨论
超声波法提取海带多糖时，时间不宜过长，超声处理20分钟时提取率达到最大，提取率达到395%。

随着处理时间延长，提取率反而下降。

原因可能是超声波较强的机械剪切力作用破坏了多糖结构。

海带多糖可提高小鼠平均体重，提高外周血中的白细胞含量。

经口给药效果极其显著。

辐射保护作用在一定程度上与给药剂量呈正相关。

参考文献
1 钱风云,傅德贤,欧阳藩.海带多糖生物功能研究进展.中国海洋药物,2003,1(总91期).
2 陈立初,吴瑞生.实验动物学.长沙:湖南科学技术出版社,2002,3.
3 赵兵,王玉春,欧阳藩,等.超声波在植物提取中的应用.中草药,1999:30.。