丙肝检测操作规程

标题：丙型肝炎病毒抗体（胶体金法）检测作业指导书

文件编号：MY2019002 版本号：第一版页数：2

编写日期：2018.01.09 编写人：

审核生效日期：2018.01.22 审核人：王立宁

丙型肝炎病毒抗体（胶体金法）检测作业指导书

1.检测目的

定性检测人全血、血清或血浆样本中的丙型肝炎病毒（HCV）抗体。

2.测定原理

采用高度特异性的抗体抗原反应原理及胶体金标记免疫层级分析技术，试剂含有预先固定于膜上检测区（T）的包被用HCV重组抗原。

3.标本要求

1.试剂适用于检测全血、血清或血浆样本，检测时应使用未溶血的样本。

2.样本应收集于清洁、干燥的容器中，可采用肝素、EDTA或柠檬酸三钠作为抗凝剂。

3.样本收集后应尽可能马上使用，不可再室温长时间存放。血清血浆样本可在2-8℃冷藏存放一周，长期保存需冷冻于-20℃。冷藏或冷冻样本应在检测前恢复到室温并充分混均，样本禁止反复冻融。

4.试剂

艾博生物医药（杭州）有限公司

5.操作步骤

5.1 使用前将试剂板和血清／血浆标本恢复至室温。从原包装铝箔袋中取出试剂盒(注意：在扣开铝箔前应先恢复至室温)，在1小时内应尽快地使用。

5.2将试剂置于干净平坦的台面上，用25ul吸管垂直滴加2滴（约50ul）于加样孔（S）内，随后加入1滴缓冲液（约30ul）。

5.3加样后立刻开始计时等待红色条带的出现，在15分钟时读取测试结果。20分钟后读取的结果无效。

6.结果判定

6.1 阳性（+）：两条紫红色条带出现。一条位于检测区（T）内，另一条位于质控区（C）。

6.2 阴性（-）：近质控区（C）出现一条紫红色条带，在检测区（T）内务紫红色条带出现。

6.3 无效（×）：质控区（C）未出现紫红色条带，标本不正确操作过程或试剂已变质损坏。

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7.质量控制

7.1 请控制判读时间，测试结果应在测定开始后15-20分钟读取，20 分钟后读判定无效。

7.2 质控区内(C区)一条红色条带的出现是试验结果可靠的前提。质控内(C)所显现的红色条带是判定标本是否足够，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

8.注意事项

8.1 胶体金法丙肝检测试剂板(血清／血浆)只是定性的筛选乙肝病毒血清标志物的存在，不能确定血样中病毒的含量。

8.2 由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在的干扰物质，检测结果可能有错误。对可疑结果应作相应的进一步检测。

8.生物安全防护

8.1 在检测前，所有标本均应视为“阳性”标本即生物危险品。

8.2 如操作中不慎洒落血液，要及时对污染台面消毒处理。

8.3 操作前一定要做好自身防护(穿白大衣、带口罩、白帽、胶皮手套)。

8.4 HBV对低温、干燥、紫外线、70％乙醇均有耐受性。煮沸 100℃10分钟、高压蒸汽灭菌121℃15 分钟或加热160℃2 小时均可灭活HBV。5～10g／L次氯酸钠30分钟，1：4000福尔马林37℃72小时，0.5％过氧乙酸15分钟均可破坏其传染性。

9.参考文件

丙型肝炎病毒抗体检测试剂（胶体金法）盒说明书。

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