cesta原理
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cesta原理
CESTA(Cellular Thermal Shift Assay)原理是基于蛋白质的热稳定性变化来检测药物与靶蛋白的结合情况。蛋白质在温度升高后会降解,但如果药物能够与靶蛋白直接结合,会提高该蛋白的热稳定性,即温度升高后减缓蛋白的降解。具体实验过程如下:
1. 从细胞中提取目标蛋白,并用药物直接处理。
2. 设置一系列温度,把蛋白均分后在不同温度下孵育。
3. 用Western blot检测目标蛋白的表达量。
4. 比较空白对照组和给药组的目标蛋白在不同温度下的表达量的变化。
通过这种方法,可以判断药物是否能够直接与细胞中的目标蛋白结合。如需更多信息,建议阅读相关文献或咨询专业人士。