病理切片的制作
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病例切片:
1. 取材,固定
取材---苦味酸固定12h---修改---换固定夜12h---修块---固定6-8h---流水冲洗过夜小于24h《苦味酸固定夜:75%苦味酸饱和液,25%甲醛,5%乙酸》
2.脱水
70%新酒精 2h
80%或85%旧酒精 12h左右可停
90%新酒精 2h
95%新酒精 0.5h
100%新酒精 3次 0.5h
3.透明
二甲苯新 10-50min 10min一次换液第二次10min直接取
观察透明即可取出
4.淋蜡
软蜡 3h 52度可停
液蜡 30min 60度
包埋
切片
5.染色
二甲苯脱蜡 1 2 3 至少20min
复水 100酒精 1 2 3 10min一次
95% 90% 80% 70%酒精10min一次,滴干
苏木精10min
入盆,自来水淋洗3次,入0.5-1.0%的HCLL淋1-2次,自来水清洗入1的氨水下淋1-2次,自来水淋洗3次,滴干
70% 80% 90%酒精 10min一次
醇伊红 7-10min
95%酒精洗样复色
100%酒精 1 2 3
二甲苯透明 1 2 3 4,0.5-1h,第4次可大于1h
中性树脂贴片
制片,注明标签
6.药品,器具的准备
玻片:新玻片---清洗液(硫酸,高锰酸钾)浸泡24h以上---自来水冲洗干净---95酒精浸泡24h以上---擦干,备用
蜡:软蜡 46-48度 48-52度硬蜡 58-62度
反复熬制,加热,快速冷却,5次以上
酒精二甲苯木墩包埋框
蛋白甘油(现配现用):取蛋清充分搅拌20min以上与甘油1:1混合,纱布过滤,4度保存
苏木精:1液:苏木精1g乘2 无水酒精10ml乘2
2液:钾铵明矾20g乘2 蒸馏水200ml乘2
先将1用玻璃棒使苏木精溶解,再将2煮沸溶化去水,再加入1,再去水,即加入氯化汞约0.5g,再煮沸,迅速冷却后加入冰乙酸8ml,过滤使用
醇伊红:95酒精配成1%伊红溶液
1%氨水 0.5-1%HCL
注意事项:
切片4-5nm,玻片干净,不能有纤维
样品太多时,入硬蜡时要有梯度
染色时,切片前中后各一张
酒精脱水时可在80-85%中过夜