2024-中药鉴定学实验指导

3．材料 制作徒手切片和表征制片，可选用新鲜药 材；制作粉末片，选用枯燥药材的粉末。
三、实验内容
1.生物显微镜的使用
生物显微镜由光学局部和机械局部组成。光学 局部包括成像系统——目镜和物镜，照明系统—— 聚光器、可变光栏和反射镜。物镜将标本作第一次 放大，目镜将第一次放大的像作第二次放大，两者 相乘即是观察到的放大倍数。机械局部包括镜座、 镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器或压 夹。使用生物显微镜时，利用反射镜将外来光线导 入聚光镜中，由聚光镜将光线会聚在标本上，用光 栏调节光线强度。观察时视野范围内应均匀明亮， 先用低倍镜观察，如需要放大，可将目的物调至视 野中央，然后转换成高倍镜，仔细观察。
❖ 特别坚硬的药材可用锉刀将其锉成粉末。
粉末制片
❖ 一般制片：取粉末少许，置于洁净的载玻片上，滴加1～2滴蒸馏水或 甘油醋酸试液，用解剖针混合均匀，然后将盖玻片一侧边沿轻轻压在 粉末旁载片上，慢慢放下，如果盖下后润湿剂未充满盖片，那么可在 一侧滴加少量润湿剂，使之充满盖片；如果润湿剂过多而溢出盖片外， 那么用滤纸屑从侧面将过多的润湿剂吸去，保持制片清洁，即可置显 微镜下观察。可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素 颗粒等。凡含淀粉粒的粉末进行鉴定时，必须先按此法进行装片。
使用显微镜注意点
① 取拿显微镜时，必须一手握住镜臂，一手托住镜座，轻 取轻放，防止因撞击使镜头内各组透镜脱胶而影响观察的 清晰度。
② 每次观察标本片时，必须先用低倍镜观察，看清物象后， 再换高倍镜。
③ 要注意保持显微镜的枯燥和清洁，使用前后，均需将显 微镜擦干净，注意镜头要用擦镜纸或绸巾单向擦拂，切勿 用手、手帕或纸片等去擦，观察临时制片时，要防止水分 或药液外溢以致沾污镜头及其他局部。
❖ 水合氯醛处理制片：取粉末少许，置于洁净的载玻片上， 滴加水合氯醛试液1～2滴，混合后在小火焰上来回加热， 并以解剖针搅拌〔切勿使溶液蒸干〕，补充2～3次水合氯 醛试液，然后将处理的粉末集中一处，为防止水合氯醛结 晶析出，滴加稀甘油混合后盖上盖玻片，用滤纸屑清洁盖 玻片周围的多余药液，即可置显微镜下观察。水合氯醛试 液可除去细胞中的淀粉，油脂等，增加细胞壁的折光率， 还能使萎缩的细胞壁膨胀，从而使细胞的形态更加清晰。
低倍镜的操作方法
① 将显微镜放置离桌缘约10cm处，镜臂应靠近胸前。 ② 对光。上升聚光镜到载物台水平，翻开光栏至最大限度，再将低倍镜转至镜筒
的正下方，使对准载物台上的透光孔〔转动时，听到“得〞一声，即已对正〕 然后用二手转动反光镜，同时从接目镜向下看，直至镜中出现一明亮而均匀的 视野为止。 ③ 装片。将欲观察的标本片从镜前方横置于载物台上，〔注意盖玻片应向上〕使 标本对准透光孔的中央。 ④ 调节焦距。从侧面注视接物镜与标本片之间的距离，旋转粗调节手轮，使镜筒 慢慢下降〔或使载物台慢慢上升〕，直至物镜几乎与标本片相接触，但切勿触 及标本片，以免造成镜头与标本片的损坏。自目镜向下观察，同时旋转粗调节 手轮，使物镜慢慢上升〔或使载物台慢慢下降〕，直至在视野中看到物象为止。 ⑤ 看到物象后，如果观看局部不在视野中心，那么慢慢移动载片，使之适中，再 转动细调节手轮，直至看到最清楚的物象为止。
3．组织简图绘制要领
❖ 常用的各种组织简图代表符号
(1)绘图的一般原那么：
❖ ①一切结构均用线条来表示。线条要求粗细均匀，圆滑，明暗一致。
1．仪器 生物显微镜、酒精灯、盖玻片、载玻片、 镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅 笔(HB、2H、4H)、直尺和橡皮，以上都是每次 实验必备品。另需单〔双面〕刀片或剃刀、徒手 切片器、培养皿。
2．试剂 甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、 间苯三 酚试液、浓盐酸，以上都是实验室必备 试液。
注意在显微镜中看到的是实物倒像。如果观察过程中发现清晰的图像逐渐 模糊，说明调节手轮失灵，应进行检修。
高倍镜的操作方法
应先在Leabharlann Baidu倍镜下选择物像，移至视野中心，换转高倍 镜，应能看到欲观察之物像，转动 细调节手轮使之图像清晰。更换高倍镜时如出现镜头触及载玻片现象，那么要检查标本切片是 否放反，或上下倍镜是否配套。高倍镜头观察物象时，只能用细调节手轮调节焦距。
中药鉴定学实验
总论
❖ 一、中药鉴定的法定依据 ❖ 二、药材鉴定取样法 ❖ 三、药材来源鉴定法 ❖ 四、药材性状鉴定法 ❖ 五、药材显微鉴定法 ❖ 六、药材理化鉴定法
各论
实验一 组织制片技术
一、 目的要求
(1)掌握徒手制片、粉末制片和表征制片的 方法。
(2)熟悉生物显微镜使用方法及作图要领。
二、仪器、试剂及材料
2 粉末制片法
此法是鉴定生药最常用的方法之一，简 便快速，主要鉴别细胞的形态特征。
粉末的制备
❖ 选择具有代表性的样品适量，置粉碎器中，粉碎，使之全 部样品通过0.17～0.25mm孔径的筛子〔相当于药典4～5 号筛〕，中成药那么应通过0.15mm孔径的筛子〔相当于 药典6号筛〕，装于瓶中备用。
❖ 注意：如果有较多的组织〔如纤维等〕不能通过筛子，而 作为残渣〔头子〕遗去，就会影响该药材特征的检出，造 成结果判断的困难。
光源的调节
观察不同的对象要使用不同强弱的光线，如观察 无色的薄壁细胞、淀粉粒的层纹、细小的草酸钙晶体 等需要较暗的光线；组织较厚的、有色的厚壁细胞等 就需要较强的光线。
调节光源有几种方法： ① 转动反光镜，凹面光强，平面光较暗〔带电光源的 显微镜可直接调节光线的明暗〕。 ② 升降聚光器，上升光强，下降光暗。 ③ 调节光栅，开大光强，关小光弱。
低倍镜下观察到的物象转至高倍镜下观察时，通常视野转暗，可调节聚光器和光栅以增加 亮度。
上下倍镜视野中心的校正：由于显微镜使用过久或使用 不当，有时出现上下倍镜视野中心 不重合的现象，影响工作效率，因此使用前应事先校对上下倍镜视野中心。方法是先在高倍镜 中寻找一物，移至视野中心，转过低倍物镜，观察此物在低倍镜视野中所在的部位，记下座标 位置，以后凡在低倍镜视野中找到的物体就移动至所记录的座标位置，转过高倍镜，正置视野 中心。