AFLP技术在家蚕遗传育种上的应用及展望

性和 Ｐ Ｃ Ｒ 技术 的高 效 性 。该 技 术 是 利 用 不 同 的 限制 性 内切酶 分别 切 割 目的基 因组 Ｄ ＮＡ， 由于 酶
切位 点不 同 ， 基 因组 ＤＮＡ 被 切 割 形 成 分 子 量 大 小不 等 的随机 性 酶切 片段 ， 然后 在 酶 切 片 段 两端 接 上 双链 人 工 接 头 ， 作 为 ＤＮ Ａ 模板 ， 经 Ｐ Ｃ Ｒ 扩 增， 扩 增产 物经 过变 性 聚丙烯 酰胺 凝胶 电泳 检测 ，
增 多态 性 Ｄ ＮＡ（ Ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍ Ａｍｐ ｌ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｃ
ＡＦ Ｌ Ｐ技术 分 析所需 Ｄ ＮＡ 量 少 ， 重 复性 好 ，
多 态性 强 ， 分辨 率高 ， 不需 要 Ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ ｅ ｒ ｎ杂 交 ， 无 放
学研 究 、 品种 选育 、 身 份鉴 定 、 疫 病诊 断 、 基 因克 隆
等 多个领 域［ ５ ］ 。 ２ ＡＦ Ｌ Ｐ技 术在 家蚕 遗传 育种 中的应用
等＿ 】 ］ 。其 中 ，ＡＦ Ｌ Ｐ标 记 目前 已广 泛应 用 于遗 传 图谱 构 建 、 亲缘 关 系 的研究 、 基 因定 位 、 遗 传 多 样 性 分 析及分 子 标 记辅 助 育 种 等 领 域 ， 被 认 为 是 迄
形 成不 同的多态 性 片段 。
性 的评 价提 供 了新 的技 术 方法 。Ｄ ＮＡ 分 子 标 记 是基 因型在 Ｄ ＮＡ 水 平 上 的表 现形 式 ， 代 表 着 品
种 间本 质 的差别 ， 该标 记 是继 形态 学标 记 、 生 理 生
化标 记 、 细胞 学 标 记 之后 发 展 起 来 的一 种 新 的 遗 传标 记 。 目前 ， 所 采用 的分 子 标 记 主 要 有 随 机 扩
的序列 信息 ， 是 一种 半 随机 的 Ｐ Ｃ Ｒ扩增 。样 品 的
适 用性 广 。ＡＦ Ｌ Ｐ标 记在后 代 中的遗 传 和分离 中
符合 孟德 尔 式遗 传 定 律 ， 非 常 适 合 于 品种 鉴 定 等
方 面 的应 用 ， 已被 国 内外 学 者 应 用 于 动植 物 遗 传

简单 序 列 重 复 区 间扩 增 多态 性 （ Ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ Ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ Ｓ ｅ —
射 性危 害 ， 且不 需要 预先 知道 被分 析基 因组 ＤＮＡ
Ｄ ＮＡ， 简称 Ｒ ＡＰ Ｄ） 、 扩增片段长度 多态性 （ Ａ ｍ— ｐ ｌ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ Ｆ ｒ ａ ｇ ｍｅ ｎ ｔ Ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ， 简 称
ＡＦ Ｌ Ｐ ） 、 限制 性片 段长度 多 态性 （ Ｒｅ ｓ ｔ ｒ ｉ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｆ ｒ ａ ｇ ｍｅ ｎ ｔ Ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ， 简 称 ＲＦ Ｌ Ｐ） 、
ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｒ ｅ ｐ ｅ ａ ｔ ｓ ， 简称 Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ） 、 微卫 星 Ｄ ＮＡ （ Ｓ ｉ ｍ— ｐ ｌ ｅ Ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｒｅ ｐ ｅ ａ ｔ ， 简称 Ｓ Ｓ Ｒ） 、 单 核 苷 酸 多 态 性（ ｓ ｉ ｎ ｇ ｌ ｅ Ｎｕ ｃ ｌ ｅ ｏ ｔ ｉ ｄ ｅ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ， 简称 Ｓ Ｎ Ｐ）
・
综
述 ・
北方蚕业 ２ ０ １ ４ ， ３ ５ （ １ ）
ＡＦ Ｌ Ｐ技 术 在 家 蚕 遗 传 育 种 上 的应 用及 展 望
吴 凡 陈登松 李德 臣
（ 湖 北 省 农 科 院经 济作 物 研 究 所 ， 湖北武汉 ４ ３ ０ ０ ７ ０ ）
摘 要 介 绍 了 ＡＦ Ｌ Ｐ技 术 以及 在 家蚕 遗 传 育 种 中 的应 用 情 况 ， 分 析 了 ＡＦ Ｌ Ｐ技 术 在 家蚕 遗 传 育 种 上 的 应
１ ９ ９ ３年 ， 荷 兰 Ｋｅ ｙ ｇ ｅ ｎ ｅ公 司 的 Ｚ ｅ ｂ ｅ ａ ｕ和 Ｖｏ ｓ ｐ ｉ ｅ ｔ ｅ ｒ 在 Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ的基 础上 发展 出 了扩
增片 段 长 度 多 态 性 （ Ａ ｍｐ ｌ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ Ｆ ｒ ａ ｇ ｍｅ ｎ ｔ Ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ
用前景 。
关 键 词 ＡＦ ＬＰ
家蚕
遗 传 育 种 应 用
家蚕 （ Ｂ ｏ ｍｂ ｙ ｘ ｍｏ ｒ ｉ Ｌ ． ） 作 为分 类 学 上 的一
Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ， ＡＦ Ｌ Ｐ ） ， 该 标 记是 一 种 检测 Ｄ ＮＡ 多态 性 的专 利 技 术 ｌ ＿ ３ “ ］ ， 兼具 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ技 术 的 可 靠
今 为止 最有 效 的分 子标 记技术 ［ ２ ］ 。
１ ＡＦ Ｌ Ｐ 技 术 及 其 特 点
２ ． １ 家蚕 Ｄ ＮＡ 指纹 图谱 的构 建 家蚕 品种 资 源 是 蚕 业 育种 者 的“ 源头 ” ， 能 否 选育 出符 合育 种 目标 的新 品种在 很大 程度 上取 决
于掌 握 的种质 资源 是否 丰 富及对 种质 资源 的 了解 是否 深刻 。尤 其 是 在 竞 争 Ｅ ｌ 益 激 烈 的今 天 ， 知 识 产权 的保 护 尤 为重 要 。因此 ， 从 遗 传 本 质 上 对 家 蚕 品种 资 源进 行 客 观 的 描述 ， 可 以更 好 地 鉴 定 和
个 物种 ， 传 统 的分 类 学 方 法一 直是 依 据 形 态 学 标 记， 但 由于这种 标 记 方 法很 容 易受 到环 境 条 件 的 影响 ， 这在 一定 程 度 上 影 响 了 品种 遗 传 特 性 和 品 种 间遗 传差 异性 的准确评 定 。近 年来 ， 由于 Ｄ ＮＡ
分 子标 记技 术 的迅 速 发 展 ， 为 家 蚕 品种 遗 传 多 样