紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素C
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河南师范大学化学与环境科学学院河南省环境污染控制重点实验室河南新乡453007张立科1田水泉1谢太平1张洪浩1范顺利2摘要在0450gml线性范围内以cu2作催化剂以溶解氧将还原型维生素cvc氧化为2460nm处无吸收的氧化型vc实现了样品各紫外干扰成分的本底校正建立了一种测定果蔬vc的新方法
第 ３２ 卷第 １ 期 ２００９ 年 ０１ 月
ｔ／ｍｉｎ 图 1 ＶＣ 在偏磷酸和醋酸中的稳定性
2. 2 最大吸收峰的选择 准确吸取 ２．０ ｍＬ 的 ＶＣ 标准溶液于 ５０ ｍＬ 容量
瓶中用蒸馏水定容，然后以蒸馏水作空白，在 １９０～ ４００ ｎｍ 的波长范围内多次进行光谱的连续扫描，确 定 ＶＣ 最大吸收峰在 ２４６．０ ｎｍ。 2. 3 维生素 C破坏剂的选择
Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．１ Ｊａｎ ． ２００９
紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素 Ｃ
张立科 1，田水泉 1，谢太平 1，张洪浩 1，范顺利 2
（１．河南许昌学院化学化工学院，河南 许昌 ４６１０００；２．河南师范大学化学与环境科学学院，河南省环境污染控制重点实 验室，河南 新乡 ４５３００７）
[ 摘 要] 在 ０～４５０ μｇ／ｍＬ 线性范围内，以 Ｃｕ２＋ 作催化剂，以溶解氧将还原型维生素 Ｃ（ＶＣ）氧化为 ２４６．０ ｎｍ 处无吸收的氧
完全破坏，测出的仅是 Ｃｕ２＋ 的吸光度值。本文提出了
反应中 Ｃｕ２＋ 不作氧化剂而作为催化剂来催化溶液中
的溶解氧去氧化还原型 ＶＣ，使之在 ２４６２）。Ｃｕ２＋ 的量不影响
ＶＣ 在 ２４６．０ ｎｍ 处的吸光度，Ｃｕ２＋ 本身本底吸收小。确
定 Ｃｕ２＋ 用量为 ３０ μｇ。
ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｋｅ１，ＴＩＡＮ Ｓｈｕｉ－ｑｕａｎ１，ＸＩＥ Ｔａｉ－ｐｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｈａｏ１，ＦＡＮ Ｓｈｕｎ－ｌｉ２
（１．Ｈｅｎａｎ Ｘｕｃｈａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｘｕｃｈａｎｇ ４６１０００，Ｃｈｉｎａ；２Ｈｅｎａｎ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａ－ ｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ， Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｈｅｎａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉｎｇｘｉａｎｇ ４５３００７，Ｃｈｉｎａ）
品工业科技，１９９４， （４０）：６５－６７． ［１２］李 军．紫外分光光度法测定果蔬中维生素 Ｃ［Ｊ］．河北职业技术师
范学院学报，２０００， １４（１）： ４１－４４． ［１３］谭延华．紫外分光光度法测定还原型维生素 Ｃ［Ｊ］．药物分析杂志，
１９９１，１１（１）：２８．
T he Method of Determ ination of VC in Fruits and Vegetables with Ultraviolet Spectrophotom etry
于 １０ ｍＬ 混酸，在研钵中快速捣碎离心，吸取 ２ ｍＬ 的
澄清液于 ５０ ｍＬ 的容量瓶中加入 １ ｍＬ 混酸以蒸馏水
定容。取 ２ 份上述定容液样品，在相同条件下，每份样
品各测定 ６ 次，测定吸光度值，精密度及回收率满足
要求（表 ４、表 ５）。
表 4 精密度
样品编号
１２
３
４
５
６ 平均值 ＲＳＤ／％
还原型维生素 Ｃ＝（Ｃ×Ｖ２×１ ０００）／（Ｖ１×Ｗ×１００）
式中 Ｃ—— —由标准曲线上计算还原型ＶＣ的含量，μｇ／ｇ； Ｗ— ——样品重，ｇ； Ｖ１— ——测定用样液的体积，ｍＬ； Ｖ２— ——样液定容后的体积，ｍＬ。
2 结果与讨论 2. 1 提取剂的选择
ＶＣ 不稳定［１１］，为延长 ＶＣ 的稳定时间，实验采用 偏磷酸和醋酸混酸溶液作提取剂。ＶＣ 在偏磷酸和醋 酸 （体积比为 ３∶７） 混酸溶液中具有较好的稳定性 （图 １）。
[ 基金项目] 许昌学院科研基金计划预研项目（２００８０６８） [ 收稿日期] ２００８－１０－０７ [ 作者简介] 张立科（１９７９－），男，讲师，研究方向为环境分析。
吸光度
５００ ｍＬ 的容量瓶中。试剂均为分析纯，实验室用水均 为二次蒸馏水。 1. 2 测定方法
以蒸馏水作空白试剂，在 ２４６．０ ｎｍ 下测定吸光 度，以样品溶液与经加 Ｃｕ（Ⅱ）并加热处理后的样品 溶液的吸光度之差做标准曲线，由标准曲线计算 ＶＣ 的含量。
ｔ／ｍｉｎ 图 3 时间对反应的影响
吸光度
2. 6 干扰因素对实验的影响
葡萄糖、柠檬酸、酒石酸的存在影响维生素 Ｃ 的
测定，上述 ３ 种物质 １００ 倍于维生素 Ｃ 时的影响见表
３。加入 Ｃｕ２＋ 后，吸光度值有所增加，这是由于干扰物
质的吸收与 Ｃｕ２＋ 的吸收叠加所引起的，实验条件下，
１００ 倍干扰物质对测定无影响。
中维生素 Ｃ［Ｊ］．１９９９，６（６）． ［９］陈秋丽，甘振威，张娅捷，等．电位滴定法测定蔬菜和水果中的维生
素 Ｃ［Ｊ］．吉林大学学报（医学版），２００４，３０（５）：８２１－８２２． ［１０］耿立威．西红柿中维生素 Ｃ 的分光光度法测定［Ｊ］．吉林师范大学
学报，２００３，９１－９２． ［１１］叶在荣，周开志，叶 红，等．测定维生素 Ｃ 的提取剂的研究［Ｊ］．食
Abstract：Ｔｈｅ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ ｈａｓ ｍａｘｉｍｕｍ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｔ ２４６．０ ｎｍ． Ａ ｌｉｎｅｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０～４５０ μｇ／ｍＬ ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ｙ＝０．１１２ ６ ｘ ＋ ０．００２ ４ ｗｉｔｈ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ０．９９９ ８． Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ，ｕｓｉｎｇ Ｃｕ２＋ ａｓ ｃａｔａｌｙｓｔ ，ｔｈｅ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ （ＶＣ） ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｉｎｔｏ ｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｌ ＶＣ ｂｙ ｓｏｌｖｅｎｔ ｏｘｙｇｅｎ ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｎ ｕｌｔｒａ－ ｖｉｏｌｅｔ ｂａｎｄ ｏｆ ｄｉｓｔｕｒｂｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ， ａ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｔｙｐｅ ＶＣ ｉｎ ｆｒｕｉｔｓ ａｎｄ ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ． Ｕｓｉｎｇ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ，ｔｈｅ ＲＳＤ％（０．３２％～０．８９％）ｆｏｒ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ． Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ０．２７９ μｇ／ｍＬ， ｓｏｍｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ９７．６％～１００．８％．
１．２８０
标准 ＶＣ 加入 量 ／μｇ·ｍＬ－１
２．０１６
测定值 ／μｇ·ｍＬ－１
３．２４３
回收率 Ｒ／％
９８．４
西红柿 ０．６６３
２．０１６
２．６８４ １００．２
3结论
测定维生素 Ｃ 时，稳定剂和破坏剂的选择是关
键。若稳定剂选得不合适，维生素 Ｃ 就不能稳定存在，
容易被氧化并且稳定剂本身也有吸收，影响维生素 Ｃ
第１期
张立科等：紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素 Ｃ
·５１·
还原 ＶＣ 的破坏是关键，前人使用 ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ２、 Ｆｅ（ＮＯ３）３ 等破坏还原 ＶＣ［１３］，并对其破坏性进行研究。 本文以 Ｃｕ２＋ 作为破坏剂，观察 Ｃｕ２＋ 的量对还原 ＶＣ 的
破坏作用（表 １），发现加入破坏剂后还原 ＶＣ 已经被
表 1 不同用量 Ｃｕ２＋ 破坏 ＶＣ 后的吸光度值
Ｃｕ２＋／μｇ ５０
１５０
２５０ ３５０
４５０
ＶＣ／ｍＬ ０．５
０．５
０．５ ０．５
０．５
ＡＢＳ ０．０００ ７ ０．０００ ９ ０．００１ １ ０．０００ ８ ０．００１ ０
Ｃｕ２＋／μｇ
表 2 不同用量 Ｃｕ２＋ 的吸光度值
３０
５０
２００ ４００
表 3 干扰因素对实验的影响
干扰
干扰物质的 ０．３ μｇ Ｃｕ２＋＋２ ｍＬ 干扰
物质
吸光度
物质的吸光度
Ｇｌｕｃｏｓｅ ／ 葡萄糖
０．０８６
０．０９８
Ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ／ 柠檬酸 ０．２６９
０．２８０
Ｔａｒｔａｒｉｃ ａｃｉｄ ／ 酒石酸 ０．３０４
０．３２１
2. 7 样品测定
称取香蕉 ４．９３６ ２ ｇ、西红柿 ５．２８２ １ ｇ 分别溶
由图 ２ 可知 １００ ℃时吸光度又有所增加，这可能是
氧化后的 ＶＣ 被氧化为古洛糖酸的缘故。故选择实验
最佳温度为 ７０ ℃。
吸光度
Ｔ／℃ 图 2 温度对反应的影响
2. 5 时间对反应的影响 加热时间对反应影响较大，实验发现加热时间在
１９～２２ ｍｉｎ 之间时吸光度值基本稳定，说明此时 ＶＣ 已被完全破坏，而 ２２ ｍｉｎ 后吸光度值又开始回升（图 ３），是氧化型 ＶＣ 进一步转化成了古洛糖酸，选择加热 时间为 ２０ ｍｉｎ。
／μｇ·ｍＬ－１
香蕉 ／μｇ·ｍＬ－１ １．２８２ １．２９１ １．２９８ １．２９３ １．２８５ １．２８１ １．２８０ ０．８９
西红柿／μｇ·ｍＬ－１ ０．６６２ ０．６５９ ０．６６２ ０．６６４ ０．６６４ ０．６６３ ０．６６３ ０．３２
表 5 回收率
样品 香蕉
样品中 ＶＣ 含 量 ／μｇ·ｍＬ－１
北方园艺，１９９５，２：７－９． ［６］ＧＢ／Ｔ ６１９５／８６． ２，６－ 二氯靛酚滴定法［Ｓ］．北京：中国标准出版社，
１９８６－０１－１８． ［７］周晓霞．用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定饮料中维生素 Ｃ 的含量［Ｊ］．
饮料工业，２００３，６（１）：４３－４６． ［８］黄宝华，罗宗铭．铁（Ⅱ）－ 邻菲罗啉 －ＢＰＲ 体系分光光度法测定果蔬
６００
ＶＣ／ｍＬ ０
０
０
０
０
ＡＢＳ ０．０００ ７ ０．０００ ７ ０．０００ ８ ０．０００ ９ ０．０００ ９
2. 4 温度对反应的影响
实验考察了温度对催化反应的影响（图 ２），发现
在 ６０～８０ ℃之间吸光度较低，为 Ｃｕ２＋ 的吸光度值；
而 ２０ ℃时吸光度很大，常温下 ＶＣ 不能很快被破坏，
化型 ＶＣ，实现了样品各紫外干扰成分的本底校正，建立了一种测定果蔬 ＶＣ 的新方法。方法 ＲＳＤ 在 ０．３２％～０．８９％之间，实际测定
了香蕉、西红柿等样品中的 ＶＣ 的含量，检出限为 ０．２７９ μｇ／ｍＬ，加标回收率在 ９７．１６％～１００．１８％之间。
[ 关键词] 维生素 Ｃ；紫外分光光度法；果蔬
１９８７，３２３－３２６． ［２］Ａ．Ｈ．恩斯明格．食物与营养百科全书［Ｍ］．北京：北京农业出版社，
１９８６，７３－１４８． ［３］孙振艳， 赵中一． 荧光分析法测定维生素 Ｃ ［Ｊ］． 化学分析计量，
２００６，４（４）．
·５２·
河北化工
第１期
［４］王美荣．直接碘量法定量测定维生素 Ｃ［Ｊ］．阴山学刊，２００６，４（３）． ［５］林桂荣，郭 泳，付亚文，等．新鲜果蔬维生素 Ｃ 测定方法研究［Ｊ］．
溶液状态 ＶＣ 不稳定易氧化，研究以 Ｃｕ２＋ 作为催 化剂，加速了溶解氧对还原型 ＶＣ 的氧化。极微量 Ｃｕ２＋ 催化效果就相当明显，加热条件下，反应速度快，无需 加掩蔽剂。方法简便、快速、准确，测定了香蕉、西红 柿［１０］等果蔬中的 ＶＣ 含量，结果令人满意。 1 实验部分 1. 1 主要仪器及试剂
Ｔ ６ 普析通用紫外可见分光光度计（北京普析通 用仪器有限公司）；０４１２－１ 型高速离心机 （２２０ Ｖ， ５０ Ｈｚ， ４０ Ｗ），ＢＳ ２２４ Ｓ 电子天平（北京赛多利斯仪 器系统有限公司）。
３５％ ＨＰＯ３，３６％ ＨＡｃ，葡萄糖，ＥＤＴＡ，Ｆｅ（ＮＯ３）３，ＨＣｌ， ＣｕＣｌ２，酒石酸，柠檬酸，维生素 Ｃ；１０％的盐酸溶液；３％ 的 ＨＰＯ３；８％的 ＨＡｃ；混酸：３ ｍＬ ３％ ＨＰＯ３＋７ ｍＬ ８％ ＨＡｃ 稀释定容至 ５０ ｍＬ 容量瓶；维生素 Ｃ 标准溶液：称取 ０．０５０ ４ ｇ 抗坏血酸，以 １０ ｍＬ 混酸溶解，并以蒸馏 水定容到 ５００ ｍＬ 容量瓶；ＣｕＣｌ２ 溶液 （１００ μｇ／ｍＬ）： 称 取 ＣｕＣｌ２ ０．６７６３ ｇ， 以 蒸 馏 水 溶 解 并 定 容 到
的准确测定。因此，通过实验本文选用偏磷酸和醋酸
３∶７ 的混酸溶液作稳定剂和稀释液，可以延长维生
素 Ｃ 的稳定时间，提高维生素 Ｃ 的提取率。通过本实
验，建立了一个简单、快速测定维生素 Ｃ 含量的方法，
其方法的精密度、准确度均符合要求。适用于水果和
蔬菜中维生素 Ｃ 含量的测定。
[ 参 考 文 献]
［１］王喜生． 人体营养状况的评价方法 ［Ｍ］． 天津： 天津科学出版社，
[ 中图分类号] Ｏ ６５７．３２
[ 文献标识码] Ｂ
[ 文章编号] １００３－５０９５（２００９）０１－００５０－０３
维生素 Ｃ 又称抗坏血酸，是人体正常生理代谢不 可缺少的一类有机物［１］，ＶＣ 缺乏会导致坏血病［２］。ＶＣ 在人体内不能合成。目前 ＶＣ 的测定方法有荧光分析 法［３］、碘量法［４］、２，４－ 二硝基苯肼法［５］、２，６－ 二氯酚靛 酚法［６］、高效液相色谱法［７］、铁（Ⅱ）－ 邻菲罗啉 －ＢＰＲ 体 系分光光度法［８］、电位滴定法［９］。这些方法各有特点， 但其操作过程复杂、实验条件难以掌握且准确度欠 佳。还原型 ＶＣ 在紫外区 ２４６．０ ｎｍ 处有最大吸收，且 线性良好。但果蔬中其他成分在紫外区也有吸收，干 扰较大，需进行本底校正。
第 ３２ 卷第 １ 期 ２００９ 年 ０１ 月
ｔ／ｍｉｎ 图 1 ＶＣ 在偏磷酸和醋酸中的稳定性
2. 2 最大吸收峰的选择 准确吸取 ２．０ ｍＬ 的 ＶＣ 标准溶液于 ５０ ｍＬ 容量
瓶中用蒸馏水定容，然后以蒸馏水作空白，在 １９０～ ４００ ｎｍ 的波长范围内多次进行光谱的连续扫描，确 定 ＶＣ 最大吸收峰在 ２４６．０ ｎｍ。 2. 3 维生素 C破坏剂的选择
Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．１ Ｊａｎ ． ２００９
紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素 Ｃ
张立科 1，田水泉 1，谢太平 1，张洪浩 1，范顺利 2
（１．河南许昌学院化学化工学院，河南 许昌 ４６１０００；２．河南师范大学化学与环境科学学院，河南省环境污染控制重点实 验室，河南 新乡 ４５３００７）
[ 摘 要] 在 ０～４５０ μｇ／ｍＬ 线性范围内，以 Ｃｕ２＋ 作催化剂，以溶解氧将还原型维生素 Ｃ（ＶＣ）氧化为 ２４６．０ ｎｍ 处无吸收的氧
完全破坏，测出的仅是 Ｃｕ２＋ 的吸光度值。本文提出了
反应中 Ｃｕ２＋ 不作氧化剂而作为催化剂来催化溶液中
的溶解氧去氧化还原型 ＶＣ，使之在 ２４６２）。Ｃｕ２＋ 的量不影响
ＶＣ 在 ２４６．０ ｎｍ 处的吸光度，Ｃｕ２＋ 本身本底吸收小。确
定 Ｃｕ２＋ 用量为 ３０ μｇ。
ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｋｅ１，ＴＩＡＮ Ｓｈｕｉ－ｑｕａｎ１，ＸＩＥ Ｔａｉ－ｐｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｈａｏ１，ＦＡＮ Ｓｈｕｎ－ｌｉ２
（１．Ｈｅｎａｎ Ｘｕｃｈａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｘｕｃｈａｎｇ ４６１０００，Ｃｈｉｎａ；２Ｈｅｎａｎ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａ－ ｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ， Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｈｅｎａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉｎｇｘｉａｎｇ ４５３００７，Ｃｈｉｎａ）
品工业科技，１９９４， （４０）：６５－６７． ［１２］李 军．紫外分光光度法测定果蔬中维生素 Ｃ［Ｊ］．河北职业技术师
范学院学报，２０００， １４（１）： ４１－４４． ［１３］谭延华．紫外分光光度法测定还原型维生素 Ｃ［Ｊ］．药物分析杂志，
１９９１，１１（１）：２８．
T he Method of Determ ination of VC in Fruits and Vegetables with Ultraviolet Spectrophotom etry
于 １０ ｍＬ 混酸，在研钵中快速捣碎离心，吸取 ２ ｍＬ 的
澄清液于 ５０ ｍＬ 的容量瓶中加入 １ ｍＬ 混酸以蒸馏水
定容。取 ２ 份上述定容液样品，在相同条件下，每份样
品各测定 ６ 次，测定吸光度值，精密度及回收率满足
要求（表 ４、表 ５）。
表 4 精密度
样品编号
１２
３
４
５
６ 平均值 ＲＳＤ／％
还原型维生素 Ｃ＝（Ｃ×Ｖ２×１ ０００）／（Ｖ１×Ｗ×１００）
式中 Ｃ—— —由标准曲线上计算还原型ＶＣ的含量，μｇ／ｇ； Ｗ— ——样品重，ｇ； Ｖ１— ——测定用样液的体积，ｍＬ； Ｖ２— ——样液定容后的体积，ｍＬ。
2 结果与讨论 2. 1 提取剂的选择
ＶＣ 不稳定［１１］，为延长 ＶＣ 的稳定时间，实验采用 偏磷酸和醋酸混酸溶液作提取剂。ＶＣ 在偏磷酸和醋 酸 （体积比为 ３∶７） 混酸溶液中具有较好的稳定性 （图 １）。
[ 基金项目] 许昌学院科研基金计划预研项目（２００８０６８） [ 收稿日期] ２００８－１０－０７ [ 作者简介] 张立科（１９７９－），男，讲师，研究方向为环境分析。
吸光度
５００ ｍＬ 的容量瓶中。试剂均为分析纯，实验室用水均 为二次蒸馏水。 1. 2 测定方法
以蒸馏水作空白试剂，在 ２４６．０ ｎｍ 下测定吸光 度，以样品溶液与经加 Ｃｕ（Ⅱ）并加热处理后的样品 溶液的吸光度之差做标准曲线，由标准曲线计算 ＶＣ 的含量。
ｔ／ｍｉｎ 图 3 时间对反应的影响
吸光度
2. 6 干扰因素对实验的影响
葡萄糖、柠檬酸、酒石酸的存在影响维生素 Ｃ 的
测定，上述 ３ 种物质 １００ 倍于维生素 Ｃ 时的影响见表
３。加入 Ｃｕ２＋ 后，吸光度值有所增加，这是由于干扰物
质的吸收与 Ｃｕ２＋ 的吸收叠加所引起的，实验条件下，
１００ 倍干扰物质对测定无影响。
中维生素 Ｃ［Ｊ］．１９９９，６（６）． ［９］陈秋丽，甘振威，张娅捷，等．电位滴定法测定蔬菜和水果中的维生
素 Ｃ［Ｊ］．吉林大学学报（医学版），２００４，３０（５）：８２１－８２２． ［１０］耿立威．西红柿中维生素 Ｃ 的分光光度法测定［Ｊ］．吉林师范大学
学报，２００３，９１－９２． ［１１］叶在荣，周开志，叶 红，等．测定维生素 Ｃ 的提取剂的研究［Ｊ］．食
Abstract：Ｔｈｅ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ ｈａｓ ｍａｘｉｍｕｍ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｔ ２４６．０ ｎｍ． Ａ ｌｉｎｅｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０～４５０ μｇ／ｍＬ ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ｙ＝０．１１２ ６ ｘ ＋ ０．００２ ４ ｗｉｔｈ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ０．９９９ ８． Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ，ｕｓｉｎｇ Ｃｕ２＋ ａｓ ｃａｔａｌｙｓｔ ，ｔｈｅ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ （ＶＣ） ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｉｎｔｏ ｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｌ ＶＣ ｂｙ ｓｏｌｖｅｎｔ ｏｘｙｇｅｎ ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｎ ｕｌｔｒａ－ ｖｉｏｌｅｔ ｂａｎｄ ｏｆ ｄｉｓｔｕｒｂｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ， ａ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｔｙｐｅ ＶＣ ｉｎ ｆｒｕｉｔｓ ａｎｄ ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ． Ｕｓｉｎｇ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ，ｔｈｅ ＲＳＤ％（０．３２％～０．８９％）ｆｏｒ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ． Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ０．２７９ μｇ／ｍＬ， ｓｏｍｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ９７．６％～１００．８％．
１．２８０
标准 ＶＣ 加入 量 ／μｇ·ｍＬ－１
２．０１６
测定值 ／μｇ·ｍＬ－１
３．２４３
回收率 Ｒ／％
９８．４
西红柿 ０．６６３
２．０１６
２．６８４ １００．２
3结论
测定维生素 Ｃ 时，稳定剂和破坏剂的选择是关
键。若稳定剂选得不合适，维生素 Ｃ 就不能稳定存在，
容易被氧化并且稳定剂本身也有吸收，影响维生素 Ｃ
第１期
张立科等：紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素 Ｃ
·５１·
还原 ＶＣ 的破坏是关键，前人使用 ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ２、 Ｆｅ（ＮＯ３）３ 等破坏还原 ＶＣ［１３］，并对其破坏性进行研究。 本文以 Ｃｕ２＋ 作为破坏剂，观察 Ｃｕ２＋ 的量对还原 ＶＣ 的
破坏作用（表 １），发现加入破坏剂后还原 ＶＣ 已经被
表 1 不同用量 Ｃｕ２＋ 破坏 ＶＣ 后的吸光度值
Ｃｕ２＋／μｇ ５０
１５０
２５０ ３５０
４５０
ＶＣ／ｍＬ ０．５
０．５
０．５ ０．５
０．５
ＡＢＳ ０．０００ ７ ０．０００ ９ ０．００１ １ ０．０００ ８ ０．００１ ０
Ｃｕ２＋／μｇ
表 2 不同用量 Ｃｕ２＋ 的吸光度值
３０
５０
２００ ４００
表 3 干扰因素对实验的影响
干扰
干扰物质的 ０．３ μｇ Ｃｕ２＋＋２ ｍＬ 干扰
物质
吸光度
物质的吸光度
Ｇｌｕｃｏｓｅ ／ 葡萄糖
０．０８６
０．０９８
Ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ／ 柠檬酸 ０．２６９
０．２８０
Ｔａｒｔａｒｉｃ ａｃｉｄ ／ 酒石酸 ０．３０４
０．３２１
2. 7 样品测定
称取香蕉 ４．９３６ ２ ｇ、西红柿 ５．２８２ １ ｇ 分别溶
由图 ２ 可知 １００ ℃时吸光度又有所增加，这可能是
氧化后的 ＶＣ 被氧化为古洛糖酸的缘故。故选择实验
最佳温度为 ７０ ℃。
吸光度
Ｔ／℃ 图 2 温度对反应的影响
2. 5 时间对反应的影响 加热时间对反应影响较大，实验发现加热时间在
１９～２２ ｍｉｎ 之间时吸光度值基本稳定，说明此时 ＶＣ 已被完全破坏，而 ２２ ｍｉｎ 后吸光度值又开始回升（图 ３），是氧化型 ＶＣ 进一步转化成了古洛糖酸，选择加热 时间为 ２０ ｍｉｎ。
／μｇ·ｍＬ－１
香蕉 ／μｇ·ｍＬ－１ １．２８２ １．２９１ １．２９８ １．２９３ １．２８５ １．２８１ １．２８０ ０．８９
西红柿／μｇ·ｍＬ－１ ０．６６２ ０．６５９ ０．６６２ ０．６６４ ０．６６４ ０．６６３ ０．６６３ ０．３２
表 5 回收率
样品 香蕉
样品中 ＶＣ 含 量 ／μｇ·ｍＬ－１
北方园艺，１９９５，２：７－９． ［６］ＧＢ／Ｔ ６１９５／８６． ２，６－ 二氯靛酚滴定法［Ｓ］．北京：中国标准出版社，
１９８６－０１－１８． ［７］周晓霞．用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定饮料中维生素 Ｃ 的含量［Ｊ］．
饮料工业，２００３，６（１）：４３－４６． ［８］黄宝华，罗宗铭．铁（Ⅱ）－ 邻菲罗啉 －ＢＰＲ 体系分光光度法测定果蔬
６００
ＶＣ／ｍＬ ０
０
０
０
０
ＡＢＳ ０．０００ ７ ０．０００ ７ ０．０００ ８ ０．０００ ９ ０．０００ ９
2. 4 温度对反应的影响
实验考察了温度对催化反应的影响（图 ２），发现
在 ６０～８０ ℃之间吸光度较低，为 Ｃｕ２＋ 的吸光度值；
而 ２０ ℃时吸光度很大，常温下 ＶＣ 不能很快被破坏，
化型 ＶＣ，实现了样品各紫外干扰成分的本底校正，建立了一种测定果蔬 ＶＣ 的新方法。方法 ＲＳＤ 在 ０．３２％～０．８９％之间，实际测定
了香蕉、西红柿等样品中的 ＶＣ 的含量，检出限为 ０．２７９ μｇ／ｍＬ，加标回收率在 ９７．１６％～１００．１８％之间。
[ 关键词] 维生素 Ｃ；紫外分光光度法；果蔬
１９８７，３２３－３２６． ［２］Ａ．Ｈ．恩斯明格．食物与营养百科全书［Ｍ］．北京：北京农业出版社，
１９８６，７３－１４８． ［３］孙振艳， 赵中一． 荧光分析法测定维生素 Ｃ ［Ｊ］． 化学分析计量，
２００６，４（４）．
·５２·
河北化工
第１期
［４］王美荣．直接碘量法定量测定维生素 Ｃ［Ｊ］．阴山学刊，２００６，４（３）． ［５］林桂荣，郭 泳，付亚文，等．新鲜果蔬维生素 Ｃ 测定方法研究［Ｊ］．
溶液状态 ＶＣ 不稳定易氧化，研究以 Ｃｕ２＋ 作为催 化剂，加速了溶解氧对还原型 ＶＣ 的氧化。极微量 Ｃｕ２＋ 催化效果就相当明显，加热条件下，反应速度快，无需 加掩蔽剂。方法简便、快速、准确，测定了香蕉、西红 柿［１０］等果蔬中的 ＶＣ 含量，结果令人满意。 1 实验部分 1. 1 主要仪器及试剂
Ｔ ６ 普析通用紫外可见分光光度计（北京普析通 用仪器有限公司）；０４１２－１ 型高速离心机 （２２０ Ｖ， ５０ Ｈｚ， ４０ Ｗ），ＢＳ ２２４ Ｓ 电子天平（北京赛多利斯仪 器系统有限公司）。
３５％ ＨＰＯ３，３６％ ＨＡｃ，葡萄糖，ＥＤＴＡ，Ｆｅ（ＮＯ３）３，ＨＣｌ， ＣｕＣｌ２，酒石酸，柠檬酸，维生素 Ｃ；１０％的盐酸溶液；３％ 的 ＨＰＯ３；８％的 ＨＡｃ；混酸：３ ｍＬ ３％ ＨＰＯ３＋７ ｍＬ ８％ ＨＡｃ 稀释定容至 ５０ ｍＬ 容量瓶；维生素 Ｃ 标准溶液：称取 ０．０５０ ４ ｇ 抗坏血酸，以 １０ ｍＬ 混酸溶解，并以蒸馏 水定容到 ５００ ｍＬ 容量瓶；ＣｕＣｌ２ 溶液 （１００ μｇ／ｍＬ）： 称 取 ＣｕＣｌ２ ０．６７６３ ｇ， 以 蒸 馏 水 溶 解 并 定 容 到
的准确测定。因此，通过实验本文选用偏磷酸和醋酸
３∶７ 的混酸溶液作稳定剂和稀释液，可以延长维生
素 Ｃ 的稳定时间，提高维生素 Ｃ 的提取率。通过本实
验，建立了一个简单、快速测定维生素 Ｃ 含量的方法，
其方法的精密度、准确度均符合要求。适用于水果和
蔬菜中维生素 Ｃ 含量的测定。
[ 参 考 文 献]
［１］王喜生． 人体营养状况的评价方法 ［Ｍ］． 天津： 天津科学出版社，
[ 中图分类号] Ｏ ６５７．３２
[ 文献标识码] Ｂ
[ 文章编号] １００３－５０９５（２００９）０１－００５０－０３
维生素 Ｃ 又称抗坏血酸，是人体正常生理代谢不 可缺少的一类有机物［１］，ＶＣ 缺乏会导致坏血病［２］。ＶＣ 在人体内不能合成。目前 ＶＣ 的测定方法有荧光分析 法［３］、碘量法［４］、２，４－ 二硝基苯肼法［５］、２，６－ 二氯酚靛 酚法［６］、高效液相色谱法［７］、铁（Ⅱ）－ 邻菲罗啉 －ＢＰＲ 体 系分光光度法［８］、电位滴定法［９］。这些方法各有特点， 但其操作过程复杂、实验条件难以掌握且准确度欠 佳。还原型 ＶＣ 在紫外区 ２４６．０ ｎｍ 处有最大吸收，且 线性良好。但果蔬中其他成分在紫外区也有吸收，干 扰较大，需进行本底校正。