总糖测定实验报告

一、实验目的
1. 理解总糖测定的原理和方法。

2. 掌握DNS比色法测定还原糖的方法。

3. 学习如何绘制标准曲线并应用于样品中总糖的测定。

二、实验原理
总糖是指样品中所有糖类的总量，包括还原糖和非还原糖。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，如葡萄糖、果糖等。

DNS比色法是一种常用的测定还原糖的方法，其原理是在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸（DNS）发生反应，生成棕红
色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的颜色深浅
成正比关系。

通过绘制标准曲线，可以测定样品中还原糖的含量，从而推算出总糖的含量。

三、实验材料与仪器
材料：
1. 样品：不同浓度的葡萄糖溶液、果糖溶液、蔗糖溶液等。

2. 试剂：3,5-二硝基水杨酸（DNS）、氢氧化钠（NaOH）、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖、蒸馏水等。

3. 仪器：可见分光光度计、电子天平、真空干燥箱、数显恒温水浴锅、离心机、
移液器、枪头、容量瓶、试管、烧杯等。

四、实验步骤
1. 标准曲线的绘制：
- 准备一系列已知浓度的葡萄糖溶液。

- 按照DNS比色法的步骤，分别对每份溶液进行测定，记录光密度值。

- 以葡萄糖浓度为横坐标，光密度值为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品中还原糖的测定：
- 称取一定量的样品，按照DNS比色法的步骤进行测定。

- 记录光密度值，并在标准曲线上找到对应的葡萄糖浓度。

3. 总糖的测定：
- 根据还原糖的测定结果，计算样品中还原糖的含量。

- 结合样品中非还原糖的含量，推算出总糖的含量。

五、实验结果与分析
1. 标准曲线的绘制：
- 根据实验数据，绘制出标准曲线。

曲线呈线性关系，相关系数R²大于0.99，表明该方法具有较高的准确性和可靠性。

2. 样品中还原糖的测定：
- 通过测定样品的光密度值，在标准曲线上找到对应的葡萄糖浓度，计算出样品中还原糖的含量。

3. 总糖的测定：
- 根据还原糖的测定结果和非还原糖的含量，推算出样品中总糖的含量。

六、实验讨论
1. DNS比色法是一种常用的测定还原糖的方法，具有操作简便、快速、准确等优点。

2. 在实验过程中，要注意控制实验条件，如温度、pH值等，以保证实验结果的准确性。

3. 通过绘制标准曲线，可以方便地测定样品中还原糖的含量，从而推算出总糖的含量。

七、结论
本实验通过DNS比色法测定了样品中还原糖和总糖的含量，结果表明该方法具有较高的准确性和可靠性。

通过本实验，我们掌握了总糖测定的原理和方法，为今后的实验研究奠定了基础。

八、参考文献
[1] 张晓辉，李晓亮，赵红霞. DNS比色法测定还原糖的研究[J]. 分析测试技术与仪器，2017，36（4）：24-27.
[2] 王丽丽，张华，刘永亮. 还原糖和总糖的测定实验研究[J]. 化学教育，2018，39（3）：76-79.
[3] 张丽君，李春艳，王丽娜. DNS比色法测定还原糖及总糖含量实验研究[J].
食品科学与技术，2019，40（6）：187-190.。