花粉活力测定的3种方法

试验16 花粉活气的测定在作物杂交育种.作物壮实机理和花粉心理的研讨中,常涉及花粉活气的判定.控制花粉活气快速测定的办法,是进行雄性不育株的选育.杂交技巧的改进以及揭示表里身分对花粉育性和壮实率影响的基本.
一.花粉萌发测定法
【道理】
正常的成熟花粉粒具有较强的活气,在合适的造就前提下便能萌发和发展,在显微镜下可直接不雅察盘算其萌发率,以肯定其活气.
【器材与器具】
载玻片;显微镜;玻棒;恒温箱;造就皿;滤纸.
【试剂】
造就基：10%蔗糖,10mg/L硼酸,0.5%的琼脂.称10g蔗糖.1mg 硼酸.琼脂与90ml水放入烧杯中,在100℃水浴中融化,冷却后加水至100ml备用.
【方法】
1.将造就基融化后,用玻棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有潮湿试纸的造就皿中,保湿备用.
2.收集丝瓜.南瓜或其他葫芦科植物刚凋谢或将要凋谢的成熟花朵,将花粉洒落在涂有造就基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的造就皿中,在25℃阁下的恒温箱（或室温20℃前提下）中孵育,5~10min后在显微镜下检讨5个视野,统计其萌发率.
【留意事项】
1.不合种类植物的花粉萌发所需温度.蔗糖和硼酸浓度不合,应依植物种类而转变造就前提.
2.此法也可用于不雅察花粉管在造就基上的发展速度以及不合蔗糖浓度,离体时光,情况前提等身分对花粉活气的影响.
3.不是所有植物的花粉都能在此造就基上萌发,本法实用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活气的测定.
二.碘- 碘化钾染色测定法
【道理】
多半植物正常的成熟花粉粒呈球形,积聚较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色.发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积聚淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色.是以,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活气.
【器材与器具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;
天平.
【试剂】
I2-KI溶液：取2g KI溶于5～10ml蒸馏水中,参加1g I2,待完整消融后,再加蒸镏水300ml.贮于棕色瓶中备用.
【办法】
收集水稻.小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1～2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下不雅察.凡是被染成
蓝色的为含有淀粉的活气较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒.不雅察2～3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率暗示花粉的育性.
【留意事项】
此法不克不及精确暗示花粉的活气,也不实用于研讨某一处理
对花粉活气的影响.因为三核期退化的花粉已有淀粉积聚,遇碘呈
蓝色反响.别的,含有淀粉而被杀逝世的花粉粒遇I2-KI也呈蓝色.
三.氯化三苯基四氮唑（TTC）法
【道理】
具有活气的花粉呼吸感化较强,其产生的NADH2或NADPH2可将无色的TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）还原成红色的TTF（三苯基甲）而使其本身着色,无活气的花粉呼吸感化较弱,TTC的色彩变更不显著,故可依据花粉接收TTC后的色彩变更断定花粉的生涯气.
【器材与器具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平.
【试剂】
0.5%TTC溶液：称取0.5g TTC放入烧杯中,参加少许95%酒精
使其消融,然后用蒸馏水稀释至100ml.溶液避光保管,若发红时,
则不能再用.
【办法】
收集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后
镜检,凡被染为红色的花粉活气强,淡红次之,无色者为没有活气
或不育花粉.不雅察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率暗示花粉的活气百分率.。