绵羊肺炎支原体的培养和PCR鉴定

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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｏａｔ；Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｏｖｉｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；ｃｕｌｔｕｒｅ；ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ
绵羊肺炎支原体可引起绵羊和山羊发生以患
摘要：安徽省３个山羊场有羊只发生肺炎症状，用支原体培养基对病料进行病原分离，经传代和纯化后分离到３株支原体，随后对分离到的支原体进行了形态学观察、ＰＣＲ鉴定和序列比对，结果显示分离到的支原体均为绵羊肺炎支原体。
１．２病料
安徽省某３个羊场发病羊只的肺组织。取肺组织样品剪碎并用液体培养
羊被毛粗乱，食欲减少，体温升高，咳嗽、喘气和间
质增生性肺炎为特征的慢性呼吸道传染病。成年羊
１．３病原分离
基进行匀浆，随后进行１０倍梯度稀释至１０，３７℃ 恒温培养５～７ｄ后进行传代，直至培养物颜色变黄。当培养基由红色变为黄色时，取液体培养物接
有一定的抵抗力，羔羊发病率和死亡率较高，呈现
关键词：山羊；绵羊肺炎支原体；培养；鉴定中图分类号：￥８５８．２７２．６２文献标识码：Ａ文章顺序编号：１６７２ — ５１９０（２０１６）１１－００９７ — ０２
ＣｕｌｔｕｒｅａｎｄＰＣＲＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭｙｃｏｐｌａｓｍａｏｖｉｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ
固体培养基。重复２～３次，得到分离纯化的培养物。
１．４病原鉴定
行。研究表明，在我国引起山羊和绵羊发生羊支原体性肺炎的主要病原是ＭＯ。如冷清文等［１在新疆
地方性流行。绵羊肺炎支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ０１）ｉｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，ＭＯ）已在世界许多国家和地区流
种于固体培养基进行观察。置于湿盒中３７℃培养。生长４ — ５ｄ后，挑取单个特征明显的菌落接种于液体培养基继续培养．待培养基颜色变黄后再次接种
ＨＯＵＨｏｎｇ－ｙａｎ，ＨＵＩＷｅｎ－ｑｉａｏ，ＺＨＡＮＧＤａｎ－ｊａｎ，ＨＵＸｉａｏ－ｍｉａｏ，ＺＨＡＯＲｕｉ — ｈｏｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＡｎｈｕｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｅｆｅｉ２３００３１，Ｃｈｉｎａ）
畜牧与饲料科学
ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＦｅｅｄＳ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｉｅｎｃｅ
绵羊肺炎支原体的培养和ＰＣＲ鉴定
侯宏艳，惠文巧，张丹俊，胡晓苗，赵瑞宏
（安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，安徽合肥２３００３１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＰｎｅｕｍｏｎｉａｓｙｍｐｔｏｍｓｏｆｇｏａｔｓａｐｐｅａｒｅｄｉｎｔｈｒｅｅｇｏａｔｆａｒｍｓｉｎＡｎｈｕｉＰｒｏｖｉｎｃｅ．Ｔｈｅｍｙｅｏｐｌａｓｍａｉｓｏｌａｔｅｗａｓｃｕｌｔｉｖａｔｅｄａｎｄｐｕｉｒｉｆｅｄｆｒｏｍｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｓａｍｐｌｅｏｆｇｏａｔｓｕｓｉｎｇｍｙｃｏｐｌａｓｍａｍｅｄｉｕｍ．Ｔｈｅｍｙｃｏｐｌａｓｍａｉｓｏｌａｔｅｗａｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙ
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ，ＰＣＲｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｔｈｅｍｙｅｏｐｌａｓｍａｉｓｏｌａｔｅｂｅｌｏｎｇｓｔｏＭｙｃｏｐｌａｓｍａｏｖｉｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ．