两种常见天然抗氧化剂姜黄素、维生素E对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)致小鼠脾脏损伤的拮抗作用

两种常见天然抗氧化剂姜黄素、维生素E对邻苯二甲酸二丁酯（DBP）致小鼠脾脏损伤的拮抗作用
目的:天然抗氧化剂姜黄素(curcumin,Cur)、维生素E(Vitamin E,Vit E)可以清除体内含氧自由基等活性氧物质,并通过多种信号通路降低氧化损伤。

邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)是环境氧化应激原,也是一种普遍存在的对人类健康有害的环境污染物。

脾脏是人体最大的淋巴器官,在免疫系统中起着重要作用。

本研究旨在探讨Cur、Vit E对DBP致小鼠脾脏损伤的拮抗作用及其可能的分子机制。

方法:以雄性BALB/c小鼠为受试动物,随机分为6组(n=9),包括生理盐水对照组(Saline,灌胃)、DBP组(50 mg/kg/d DBP,灌胃)、Vit E组(50mg/kg/d Vit E,灌胃)、DBP+Vit E组(50 mg/kg/d DBP+50 mg/kg/d Vit E)、Cur组(2.5 mg/kg/d Cur,腹腔注射)和DBP+Cur组(50 mg/kg/d DBP+2.5mg/kg/d Cur),实验周期21天,通过检测脾脏组织匀浆活性氧(reactive oxygen species,ROS)与还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、细胞凋亡因子细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)、细胞凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Cysteine aspartic acid protease-9,Caspase-9)、细胞凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteine aspartic acid protease-3,Caspase-3)水平以反映小鼠脾脏氧化应激、炎症、细胞凋亡水平变化。

以H&E染色和甲苯胺兰染色观察脾脏组织病理学变化,以免疫组织化学技术分析脾组织氧化应激核转录因子(nuclear factor-κB,NF-κB)磷酸化以及T淋巴细胞亚群CD3~+、CD8~+表达水平。

结果:病理学观察结果显示,正常对照组小鼠脾脏红髓(RP)和白髓(WP)交界
清晰,而DBP组RP和WP交界模糊,排列较稀疏,淋巴细胞数目相对减少,且WP内肥大细胞数目显著增加。

与生理盐水对照组比较,DBP组小鼠脾脏组织的ROS、
IL-1β、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、NF-κ B p65水平升高,GSH、CD8~+水
平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);分别给予VitE、Cur处理后,与DBP
组比较,DBP+Vit E组和DBP+Cur组小鼠脾脏组织的ROS、IL-1β、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、NF-κ B p65水平降低,GSH、CD8~+水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论:(1)50 mg/kg DBP暴露可导致受试小鼠的脾脏损伤,引起脾脏CD3~+、CD8~+表达紊乱;(2)DBP的免疫损伤可能与脾脏氧化应激有关;(3)DBP可导致脾
脏氧化应激相关的炎症及凋亡因子水平的变化;(4)Vit E、Cur可拮抗DBP诱导
的脾脏氧化应激,一定程度地改善DBP暴露后脾脏的炎症及凋亡水平,从而使脾
脏组织形态趋于正常。

上述结果将有助于我们进一步认识Vit E和Cur的抗氧化作用及其可能的机制,并提示Vit E和Cur可改善DBP所致的脾脏损伤和DBP引起的免疫功能下降。