乳酸钠对大鼠的致畸毒性

乳酸钠对大鼠的致畸毒性
林曦;单纯;任秀;林飞
【摘要】目的:检测乳酸钠对大鼠是否存在胚胎毒性和致畸毒性.方法:采用SD孕鼠,每组孕鼠＞12只.试验分为乳酸钠3个剂量组(750、1 500和3 000 mg/kg),阳性对照组(10 mg/kg环磷酰胺)和溶剂对照组(双蒸水),在胚胎器官形成期连续经口灌
胃给予乳酸钠10d,妊娠第20 d处死动物.剖腹取胎,检测乳酸钠对大鼠的母体毒性
和胚胎毒性,并观察胎仔骨骼发育和内脏器官发育情况.结果:与溶剂对照组比较,阳性对照组出现活胎数减少、死胎及吸收胎数增多,胎仔身长、尾长、体质量减少,骨骼
和内脏器官发育不全和畸形率升高等异常(P＜0.05).除乳酸钠1 500和3 000
mg/kg组在妊娠后期孕鼠体质量增长减慢,出现母体毒性外,其他各项指标,即黄体、着床、活胎、死胎和吸收胎的计数,子宫及胎仔的质量,身长和尾长的测量,内脏器官发育不全和畸形率,骨骼的骨化不全和畸形率等与溶剂对照组基本一致,均未见明显
异常(P＞0.05).结论:乳酸钠在＞1 500 mg/kg剂量时,对大鼠具有母体毒性,未见胚胎毒性和胎仔骨骼、内脏器官的致畸毒性.%OBJECTIVE: To investigate the teratogenesis effect of sodium lactate in rats. METHODS: Pregnant SD rats were divided into 5 groups with more than 12 rats in each group: 3 dosage groups (750, 1 500, 3 000 mg/kg sodium lactate), one positive control group (10 mg/kg cyclophosphamide), and a negative control
group(double-distilled water). The rats received drugs orally for 10 days in embryonic organ formation period, then we sacrificed the animals on the 20th day of gestation and studied the maternal and embryo toxic effects. RESULTS: Compared with the negative control group, there were fewer live embryo, more dead or absorbed embryo in the positive control group.
Otherwise, the body length, tail length, body weight of the embryo were significantly decreased while the rates of embryo bone and visceral organ deformity were significantly increased in the latter group (P<0.05). In the 1 500 mg and 3 000 mg/kg sodium lactate groups, the weight gain of the pregnant rats slowed down in the late gestation stage which indicated maternal toxicity. Beyond that, there were no significant differences in the count of corpus luteum, implantation, live embryo, dead or absorbed embryo, the weight of uterus and embryo, the length of body and tail, the rate of visceral organ and bone deformity between these 2 treated groups and negative control groups (P>0.05). CONCLUSION: At dosage>l 500 mg/kg, sodium lactate imposed maternal but not embryonic toxicity.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》
【年(卷),期】2012(024)004
【总页数】4页(P313-316)
【关键词】乳酸钠;大鼠;胚胎毒性;致畸毒性
【作者】林曦;单纯;任秀;林飞
【作者单位】北京市第六医院,北京100007;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050
【正文语种】中文
【中图分类】R965.3
林曦1/单纯2/任秀2/林飞2，*
( 1. 北京市第六医院，北京 1 00007；2. 中国食品药品检定研究院，北京
100050 )
乳酸钠是通过蔗糖发酵产生的乳酸再经中和反应制成的天然乳酸盐，具有调节PH 值、保湿保鲜、调味乳化、防冻、抗氧化、抑制细菌生长和延长产品保质期的作用，广泛应用于食品、化妆品，药品等行业。

有关乳酸钠原料及其制剂的安全性，特别是临床前毒理学试验的报道不多[1]。

本研究在乳酸钠急性毒性试验和亚慢性毒性
试验 (另文发表)的基础上，对大鼠进行了致畸毒性试验检测。

1.1 受试物
乳酸钠溶液(sodium lactate，SL)为微黄色黏稠液体，食品级，可溶于水，浓度60%，生产批号：20110302，许可证号：鲁卫食证字(2007)第370000-000131，由青岛某生物工程有限公司提供。

1.2 对照
注射用环磷酰胺 (cyclophosphamide，CP)，规格为200 mg，批准文号：国药
准字H32020857，江苏恒瑞医药股份有限公司生产。

溶剂对照为双蒸水 (double distilled water，DDW)。

1.3 动物
SPF级SD大鼠120只，体质量180～200 g，雄性40只，雌性80只，由中国
食品药品检定研究院实验动物资源中心提供，生产许可证号：SCXK(京)2009-0017。

1.4 试验方法[2-4]
1.4.1 同笼交配每笼放入雄鼠1只、雌鼠2只进行交配，连续同笼5 d，每天上午对雌鼠进行阴道涂片，在显微镜下观察到精子存在作为妊娠0 d，将孕鼠取出，另笼饲养。

未观察到精子的雌鼠在交配期结束后取出，作为同笼3 d交配鼠。

1.4.2 染毒剂量和时间乳酸钠高剂量组为3 000 mg/kg，是小鼠急性经口毒性试
验一次限量法测定的1/2，中、低剂量组分别为1 500 mg/kg和750 mg/kg，另设溶剂对照组 (DDW)和阳性对照组 (CP，10 mg/kg)。

随机分配孕鼠，每组孕鼠
＞12只。

在妊娠的第0、6、9、12、14、16、18和20天称孕鼠体质量；在妊
娠第6～15天连续10天经口灌胃染毒，阳性对照在妊娠第11天一次性腹腔注射染毒。

1.4.3 观察指标妊娠第20天处死孕鼠，剖腹取胎，计数每只孕鼠的黄体数、着床数、活胎数、死胎数、吸收胎数 (包括早期死胎)和胎仔性别；称取子宫连胎仔和卵巢质量、每个胎仔体质量；测量胎仔身长和尾长；大体观察胎仔体表畸形后，将每窝胎仔数的一半经95%乙醇溶液浸泡固定2周后，2%氢氧化钾溶液软化脱皮，茜素红应用液染色，甲、乙、丙甘油溶液透明后在大视场工作仪 (放大4～8倍)或解剖显微镜 (放大10～100倍)上检查、计数骨骼发育情况。

另一半胎仔经Bouin's
液固定2周后在大视场工作仪或解剖显微镜上检查内脏器官发育情况。

1.5 统计学方法
采用SPSS 10.0软件包，组间差异用 t 检验、χ2检验或F 检验。

2.1 受孕率
经过连续5 d的同笼交配，80只雌鼠有62只雌鼠经剖腹检查存在胚胎或吸收胎，确认已经受孕，其受孕率为77.50%。

2.2 母体毒性
溶剂对照组的孕鼠在整个妊娠期体质量增长正常。

受试物高、中剂量组在妊娠后期体质量增长减慢，与溶剂对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

详见表1。

2.3 胚胎毒性
溶剂对照组未出现胎仔生长发育障碍，黄体数、着床数、活胎数、胎仔体质量、身
长、尾长和性别等均正常，窝平均死胎和吸收胎数＜1.6%。

乳酸钠各剂量组均在正常值范围内，与溶剂对照组比较，未见显著差异 (P＞0.05)。

阳性对照组的窝平均活胎数减少36.6%，子宫连胎仔和卵巢重量降低37.0%；晚期死胎数和吸收胎数为3.4%和31.1%；胎仔尾长和质量均减少，与溶剂对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05或＜0.01)。

见表2和表3。

2.4 致畸毒性
2.4.1 体表及内脏检查溶剂对照组出现心脏小、脐疝和肾肿大，胎仔发育不全率和畸形率为1.54%和
3.08%。

阳性对照组在脑、腭、心、肾、体表等组织器官可见明显异常，其胎仔发育不全及畸形率分别高达2
4.39%和56.10%，与溶剂对照组比较，差异具有统计学意义 (P＜0.05或P＜0.01)。

乳酸钠各剂量组个别胎仔出现脑、心、肾和脐疝等组织器官异常，胎仔发育不全率＜3.40%，畸形率范围在2.74%～3.39%，与溶剂对照组比较，差异无统计学意义 (P＞0.05)。

见表4。

2.4.2 骨骼检查溶剂对照组出现第5、6胸骨缺少、后头骨小和第14肋骨，其胎仔骨化不全率和畸形率为
5.17%和3.45%。

阳性对照组在头骨、胸骨、肋骨出现发育障碍及畸形，其胎仔骨化不全和畸形率分别高达78.38%和8
6.49%，与溶剂对照组比较，差异具有统计学意义 (P＜0.01)。

乳酸钠各剂量组个别胎仔出现后头骨小、变形，第5、6胸骨缺失，胸骨扭曲、波状肋等，其胎仔骨化不全率＜
3.80%，畸形率范围在1.79%～
4.41%，与溶剂对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。

见表5。

乳酸钠呈中性(pH为6.5～7.0)，能溶于水、乙醇、甘油，能与各种食品添加剂充分混合。

已在国外替代苯甲酸钠作为防腐剂，在焙烤食品 (蛋糕、蛋卷、饼干)、肉禽食品加工业中作为乳化剂、保湿剂、风味改进剂、抑制食物内致病细菌的生长、延长产品保质期。

在化妆品中，乳酸钠能够抑制酪氨酸酶的生成，抑制或防止皮肤色素沉着，治疗老年斑和雀斑，是有效的增白因子。

它还可增加皮肤的神经酰胺水
平，治疗皮肤功能性紊乱，防止和治疗皮肤干燥病，提高皮肤防御功能。

在临床被制成乳酸钠注射液，具有扩充血容量、补充电解质及维持血液酸碱平衡的作用，可用于烧伤与脱水引起的酸中毒，心脏手术体外循环的缓冲液，溶解尿酸结石等[5]；作为一种钠盐可减少氯化钠用量，对心脏病、高血压、肾脏病患者更安全[6]。

本研究结果显示：乳酸钠在本实验条件下，除1 500、3 000 mg/kg剂量组在妊
娠后期体质量增长减慢，出现母体毒性外，其他各项指标，即黄体、着床、活胎、死胎和吸收胎计数，子宫及胎仔质量，身长和尾长，内脏器官发育不全和畸形率，骨骼的骨化不全和畸形率等与溶剂对照组比较均未见明显异常。

提示乳酸钠在＞1 500 mg/kg剂量时，对大鼠具有母体毒性；未见胚胎毒性和对胎仔骨骼、内脏器
官的致畸毒性。

【相关文献】
[1] 张小英，李国杰，桂常青. 小鼠腹腔注射乳酸钠林格液最大耐受量的研究[J]. 皖南医学院学报，2004，23(1)：6-8.
[2] 国家食品药品监督管理局食品许可司. 化妆品卫生规范[S].北京：中国标准出版社，2008：155-157.
[3] 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范[S].北京：中国标准出版社，2003：225-228.
[4] 林飞，梁怿，吕廉，等. 富硒大蒜对大鼠的胚胎毒性和致畸毒性研究[J]. 实用肿瘤学杂志，2008，22(1)：1-4.
[5] 马静. 两种方法测定乳酸钠林格注射液中乳酸钠的含量[J].安徽科技，2011，12(1)：52-53.
[6] 谷现恩. 乳酸钠静脉滴注快速溶解尿酸结石[J]. 中国临床医生，2003，31(12)：29-30.。