紫外分光光度法快速测定伊马替尼含量

紫外分光光度法快速测定伊马替尼含量
柴培;刘瑜;刘哲鹏
【摘要】To establish a method for rapid determining the content of imatinib.Imatinib dissolved in ace-tonitrile with 1‰ TFA were measured by ultraviolet spectrophotometry at 272 nm.Results showed that the concentration of imatinib showed a good linear relationship with optical density within 1.5 ~15.0 μg/mL (R2 =0.999 73).The average recovery rate was 100.20%(RSD =0.11%,n =9).This method for the determination is rapid,simple,accurate and repeatable.It can be used for the quality control of formula-tion of imatinib.%建立一种快速检测和定量测定伊马替尼含量的方法。

以含1‰三氟乙酸的乙腈溶液溶解伊马替尼碱后，采用紫外分光光度法，在272 nm 处对溶液中伊马替尼含量进行测定。

结果表明，伊马替尼浓度在1．5～15．0μg／mL范围内，与吸收值的线性关系良好（R2＝0．99973），平均加标
回收率为100．20％（RSD ＝0．11％，n ＝9）。

该方法快速、简便、准确、重现性好，可用于伊马替尼产品的质量控制。

【期刊名称】《应用化工》
【年(卷),期】2016(045)008
【总页数】3页(P1583-1585)
【关键词】伊马替尼;紫外分光光度法;含量测定
【作者】柴培;刘瑜;刘哲鹏
【作者单位】上海理工大学医疗器械与食品学院，上海200093;复旦大学药学院，上海 201203;上海理工大学医疗器械与食品学院，上海 200093
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.7;R927
伊马替尼是一种多靶向酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，用来作为分子靶向治疗不同类型
的癌症。

它通过与受体酪氨酸激酶(PTK)的ATP结合位点的竞争性抑制作用，从而阻断自身磷酸化和随后的细胞内信号传导[1]。

伊马替尼易溶于极性有机溶剂，微
溶于低极性有机溶剂，难溶于水[2]。

目前，伊马替尼的分析方法主要以高效液相色谱(HPLC)法[1,3-5]居多，但此法用
时较长、成本较多，操作繁琐。

为了建立一种快速检测和定量测定伊马替尼含量的方法，本实验中，采用紫外分光光度法，在272 nm处对溶于含1‰三氟乙酸(TFA)的乙腈溶液中的伊马替尼进行含量测定。

尚未发现采用该法测定伊马替尼含
量的专题报道。

1.1 材料与仪器
伊马替尼碱(美仑生物公司，批号：20131029，含量>99%，规格1 g/瓶)；甲磺
酸伊马替尼片(诺华制药有限公司，批号：S0155、S0159、S0160，规格100
mg/片)；三氟乙酸、乙腈为色谱纯；甲醇、三氯甲烷、氯化钠、磷酸氢二钠、磷
酸二氢钠均为分析纯。

UV-2401PC紫外可见分光光度计；Waters2695 型高效液相色谱仪；Welch Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm) ；BT 25 S电子分析天平；SG3200HD超声波清洗仪；RV10数显型旋转蒸发仪。

1.2 溶液的制备
1.2.1 对照品溶液的制备精密称取伊马替尼碱干燥品2 mg于50 mL茄型瓶中，
加入1 mL三氯甲烷溶液使其完全溶解，于36 ℃下减压旋转蒸发20 min后置于真空干燥箱中，室温下真空干燥过夜，以完全除去残留的三氯甲烷，备用。

向干燥好的茄型瓶中加入适量含1‰TFA的乙腈溶液溶解，将溶液移至100 mL 容量瓶中，并用乙腈(1‰TFA)多次洗涤茄型瓶中的伊马替尼至容量瓶中，补足乙腈(1‰TFA)至刻度，即得20 μg/mL的标准溶液。

1.2.2 供试品溶液的制备参考Ramazani等[1]的方法从甲磺酸伊马替尼片中获取伊马替尼碱。

将片剂研磨成粉，干燥至恒质量。

精密称取适量粉末(约含伊马替尼碱20 mg)溶于去离子水充分混溶，在10 000 r/min下离心5 min取上清，向沉淀中加入3 mL去离子水后离心取上清，如此往复共洗涤沉淀3～5次。

向收集的上清液中加入适量三羟甲基氨基甲烷使完全溶解，滴加盐酸调节pH至9.0，涡旋10 min。

加入10 mL三氯甲烷作为萃取剂，将伊马替尼碱从甲磺酸盐中分离出来，反复萃取3次。

所得溶液装入茄型瓶中，于36 ℃下减压旋转蒸发20 min后置于真空干燥箱中，室温下真空干燥过夜，以完全除去残留的三氯甲烷，备用。

按照1.2.1节方法，将茄型瓶中的伊马替尼碱溶解后移至100 mL容量瓶并定容，即得理论值为200 μg/mL的供试品溶液。

2.1 测定波长的选择
将1.2.1节制备的伊马替尼标准溶液用乙腈(1‰TFA)溶液稀释2倍，采用紫外可见分光光度计在200～500 nm范围内作波长扫描，测得吸收光谱见图1。

由图1可知，伊马替尼在271.80 nm处有最强吸收峰0.739 0 L/(g·cm)，故采用特征吸收波长λ=272 nm为测定波长。

2.2 线性关系考察
标准浓度梯度按4∶3的比例用乙腈(1‰TFA)溶液稀释1.2.1节制备的伊马替尼标准溶液取点，得浓度为15.00，11.25，8.44，6.33，4.75，3.56，2.67，2.00，1.50 μg/mL系列溶液。

以乙腈(1‰TFA)为空白，测定不同浓度的溶液在272 nm
下的吸收值(A)。

测定结果见图2。

以A对质量浓度(C)进行回归得标准曲线方程为：A=0.074 84C -0.014 87(R2 =0.999 73)。

结果表明，伊马替尼标准溶液吸收值A与质量浓度C在1.5～15.0 μg/mL范围内线性关系良好。

2.3 精密度实验
取1.2.1节中20 μg/mL的标准溶液稀释，得到浓度为15,10,2 μg/mL的待测溶液作为高、中、低3个质量浓度，在272 nm下分别测其吸收值，各自连续测6次，考察仪器精密度,结果见表1。

由表1可知，RSD值均低于0.8%，说明仪器精密度良好，符合含量分析要求。

2.4 加标回收率测定
精密量取1.2.2节制备的供试品溶液1 mL至50 mL容量瓶中，加入乙腈(1‰ TFA)混匀后定容，在272 nm下测得其吸收值为0.283 7 L/(g·cm)，代入标准曲线方程可知其浓度为3.99 μg/mL。

精密移取供试品溶液5.0 mL 9次，分别置于9个10 mL离心管中，并将其分为3组，分别加入质量浓度为10 μg/mL的对照品溶液2.0，3.0，4.0 mL，密封并超声混匀。

分别测定吸收值，按照公式计算加标回收率。

加标回收率=
由表2可知，平均加标回收率为100.20%，RSD值为0.11%，说明该方法加标回收率良好。

2.5 样品测定
取3批甲磺酸伊马替尼片(批号：S0155、S0159、S0160)粉末适量，分别按照1.2.2节方法制备供试品溶液，在272 nm下测其吸收值，根据线性回归方程得出样品的伊马替尼含量计算药品含量。

参照赵海桥等[6]的方法，精密称取甲磺酸伊马替尼片粉末适量(约含伊马替尼碱
20 mg)于100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，超声5 min使其完全溶解，放冷至室温，补足甲醇至刻度。

采用高效液相色谱法，测定含药量。

色谱条件为：Welch Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以含0.04%辛烷
磺酸钠的20 mmol/L磷酸二氢钠溶液(磷酸调至pH 2.5)-甲醇(40∶60)为流动相，流速1 mL/min，检测波长268 nm，柱温30 ℃。

每批样品制备3份，结果见表3。

由表3可知，本法测定的不同批次甲磺酸伊马替尼片的伊马替尼含量之间无明显
差异，方法重现性较好。

此外，本法测定的含量与HPLC法结果无明显差异，具
有可靠性。

本实验所需溶液现配为宜，同时需要及时密塞，避免因溶剂挥发而造成误差。

在供试品伊马替尼碱与甲磺酸盐分离过程中，称量时需研细，否则药品分布不均，误差较大。

根据文献报道，伊马替尼的检测方法主要有HPLC法、液质联用法、毛细管电泳法、差示扫描量热法等[1,3-10]方法，这些方法不仅操作繁琐，而且用时较长、成本较多。

本实验中，根据伊马替尼紫外吸收特点，采用紫外分光光度法建立了该物质含量的测定方法，从实验结果来看，该方法快速、简便、准确、重现性好，可用于伊马替尼产品的质量控制。

【相关文献】
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