牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立

牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立
冯挺财;邵谱;胡珩;杨正涛;张乃生
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2008(036)018
【摘要】[目的]建立一种检测牛乳铁蛋白(LF)含量的竞争ELISA检测方法.[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体,采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价,建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法.[结果]纯化后,制备的鼠抗牛LF单抗效价达1∶1 280 000,且鉴定为IgG1.该单抗对牛乳铁蛋白具有很强的特异性.制备酶标单抗的效价为
1∶640 000.抗原包被物和酶标单抗的最适工作浓度分别为1.0 μg/ml和1∶40 000.抗原用碳酸盐缓冲液(pH值为9.6)包被先在4℃过夜、再37℃放置2 h的效果最好.采用2%牛血清白蛋白作为封闭剂的效果最好.在31.25～1 000 ng/ml浓度范围内,牛乳铁蛋白的logit (B/B0)与牛乳铁蛋白浓度的对数值呈显著的线性关系,其回归方程为 y=-1.8991x+5.043 3(R2=0.9873).[结论]该研究为研制用于奶牛乳腺炎诊断的牛LF检测试剂盒奠定基础.
【总页数】4页(P7650-7652,7761)
【作者】冯挺财;邵谱;胡珩;杨正涛;张乃生
【作者单位】吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室,吉林长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室,吉林长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室,吉林长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室,吉林长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院动物营养与中毒病研究室,吉林长春,130062
【正文语种】中文
【中图分类】S823.8
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