喉鳞癌原发灶和切缘BAG-1蛋白表达及其与术后复发的关系

１ 实验 材料 兔 抗人 Ｂ Ｇ １ ． ２ Ａ 一 多克 隆抗 体购 自武 汉 博 士 德 公 司 ，Ｖ一０ ０免 疫 组 化 检 测 试 剂 盒 及 Ｐ ９０ Ｄ Ｂ购 自北京 中山公司 ， Ａ 余试剂为 国产分析纯 。 １３ 检 测 方 法 按 照 试 剂 盒 说 明 书 所 示 操 作 步 骤 ． 进行 。 每例标本连续切片 ５张（ ． ０４ ｍ） 经二 甲苯脱 ， 蜡、 梯度酒精 、 抗原修复 、 滴加 Ｂ Ｇ １ Ａ 一 多克 隆抗体 （ ： １ １０ ，℃过夜 ，二抗处理后滴加 辣根酶标记酶 卵 白 ０ ）４ 素恒温箱 孵育 ３ ｉ、 Ａ ０ｍｎ Ｄ Ｂ显色 、 色后胶封 ， 微 染 显 镜 下 观察 结 果 。每 次 染 色均 设 空 白对 照 （Ｂ Ｐ Ｓ液代 替 抗 ） 用 已知 阳性 组 织 切 片 作 阳性 对 照 。 ， １４ 结 果 判 定 标 准 及 统 计 分 析 制 定 判 断 标 准 ： ． （ ） 照 细 胞 显 色 有 无 及 深 浅 记 分 ， 为 细 胞 无 显 １按 ０分 色 ， 分 为 浅 黄 色 ， 为 棕 黄 色 ， 为 棕 褐 色 。（ ） １ ２分 ３分 ２ 按 照 显 色 细 胞 的 比例 记 分 。 ０分 为 显 色 细 胞 ＜１％ ． ０ １ 为 １％ 一３ ％细 胞 显 色 。 分 ０ ０ ２分 为 ３ ％ 一６ ％细 胞 １ ０ 显 色 ， 为 ＞６％细 胞显 色 。每 例 得分 ＝（ ） ２ 。 ３分 ０ １ Ｘ（ ） 按 积 分 高 低 分 为 ： 性 （ ） 积 分 为 ０—２分 ； 性 阴 一， 阳 （ ）积 分 ＞２分 。 ＋， １５ 统 计 学 方 法 所 有 的 统 计 学 处 理 均 采 用 ＳＳ ． ＰＳ １． 件 进 行 。 由 于本 研 究 并 不 是 采 用 完 全 随 机 分 ５软 １ 组的方法且影响 因素众多 ，因此在分析 Ｂ Ｇ ｌ 白 Ａ —蛋 表 达 与术 后 复 发 关 系之 前 ， 先 进 行 均 衡 性 检验 。 首
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用 医学杂 志 ２０ 年第 ２ 卷第 ９ ０８ ４
喉 鳞 癌 原 发 灶 和切 缘 Ｂ Ｇ １ 白表 达 Ａ 一蛋 及 其 与 术 后 复 发 的关 系
李 贺 廖志 苏 李剑敏
摘
黄卡特 陈晓云 汪静 波 陈建福
要 目的 ： 探讨 喉鳞癌 原发 灶和切缘 Ｂ Ｇ １蛋 白表 达及 其与 术后 复发 的关 系。方 法 ： 用免疫 组化 方 Ａ 一 Ｇ １蛋 白 复 发 Ａ 一
喉 癌 是 头 颈 部 常 见 的 恶 性 肿 瘤 ［２ 虽 然 近 年 来 １］ －， 治 疗 方 法 不 断 改 进 ， 术 技 巧 不 断 完 善 ， 喉 癌 术 后 手 但 复发 率 仍 居 高不 下 。了解 喉癌 的生 物 学 行 为 ， 寻 喉 探 癌 术 后 复 发 的 相关 因 素 ，是 临 床 耳 鼻 喉 头 颈 外 科 医 生 努 力 的方 向之 一 。 细 胞 凋 亡 调节 障 碍 在 肿 瘤 的发 生 、发 展 中具 有 重 要 意 义 。 Ａ 一 基 因 ， Ｂ ｌ２ 合 抗 凋 亡基 因 ， Ｂ Ｇ１ 即 ｅ 结 一 其 可 以通 过 与 多 种 靶 蛋 白结 合 而 发 挥 抑 制 细 胞 凋 亡 的 作 用 。Ｂ Ｇ １在 乳 腺 癌 、 癌 、 颈 部 鳞 癌 等 癌 肿 部 Ａ 一 肺 头 位 的 表 达及 作 用 已有 所研 究 ， 到 人 们 日益 重 视 。国 受 内外 对 Ｂ 一 复 发性 喉 癌 中 的表 达 与作 用 鲜 见 报 ＡＧ １在 道 。 们 采 用 免疫 组织 化 学 染 色 法 。 我 检测 了 ２０ ０ ２年 ４ 月至 ２０ ０ ７年 ７月 间 本 科 收住 的 ３ １例 复 发 性 喉癌 患 者组 织 中 的 Ｂ Ｇ １表 达 ，对 照 初 次 手 术 时 的相应 病 Ａ 一 理资 料 。回顾性 分 析 喉癌 术 后 复 发 与 Ｂ Ｇ １表 达 的 Ａ 一
法检 测 ３ 例 资料 齐全 的复发性 喉癌 患者 的原发 灶、 １ 复发 灶及切 缘 Ｂ Ｇ １蛋 白表 达情 况 ， 以 加 例 喉癌 术后 随 Ａ一 并
访 满 ５年 以上 至 今 未 复 发 者作 为 对 照 组 进 行 比较 分 析 。 结 果 ：３ １例 复 发 性 喉 癌 的 原 发 灶 和 复 发 灶 的 Ｂ Ｇ １ Ａ 一蛋
白阳性表 达 分别 为 ７ ．％、 ７７ ４２ ６ ．％， 两者 差 异没 有 显 著性 ；０例 对 照组 喉 癌 原发 灶 的 Ｂ Ｇ １ 白 阳性 表 达 为 ２ Ａ 一蛋 ７ ．％． 复发 组喉 癌原 发 灶的 Ｂ Ｇ １蛋 白阳性表 达 率相 比 ， ５０ 与 Ａ一 两者 差异也 没 有显 著性 ； １ 复发 组 喉癌 手术切 ３例 缘及 ２ ０例 对照 组喉 癌 手术 切缘 Ｂ Ｇ １蛋 白阳性 表 达分 别 为 ４ ．％、５０ Ａ一 １９ １ ．％，两 者之 间 差异 有显 著性 。 结论 ： Ｂ Ｇ １蛋 白在 常规 阴性病理 切缘 的表 达与喉癌 术后 复发有 关 ， Ａ一 为今后 筛选 预测 术后肿 瘤局部 复发 的高危病例提
相关 性 ， 现报 告 如 下 。 １ 资 料 与 方 法 １１ 一般 资料 人 选冬 件 ：１２０ ． （）０２年 ４月 至 ２０ ０７年 ７月间 收住本 科 的 复发性 喉 癌 病例 ，人 院后 接 受再 次
手术治疗 ； ２不论初 次手术在本院或外院 ， 以收集 （） 可 到完整的临床资料及获取病理标本 ；３ 初次手术的术 （） 式 不 限 ， 必 须是 根治 性 的切 除 手术 。 术后 切 缘病 理 但 且 报告 阴性 。最后 得符 合 条件 的病 例 ３ 例 作 为复 发组 。 １ 随机 选取 １９ ９ ９年 ２月至 ２０ ０２年 ５月 间 收住 本科 手 术 的 喉癌 患者 经 随 访 满 ５年 以上 至今 未 复发 者 ２ ０例 作 为对 照组 ， 并且 有术 中切 缘病 理检 查 可供 对照 。 另随 机 选取本科手术的声带息 肉组织标本 １ 例 。 ０