生存素的表达与非小细胞肺癌生物学特征及预后的关系

生存素的表达与非小细胞肺癌生物学特征及预后的关系
吕喜英;张秀琴;李青山
【摘要】@@ 生存素(survin)足最近发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的新成员,可通过与凋亡途径中的终末效应酶、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-7阻断细胞凋亡途径,从而抑制细胞凋亡[1],但生存素与家族中其他成员不同,生存素基因蛋白在大多数肿瘤中表达而在成人正常组织不表达或低表达[2],这一特点为肿瘤的诊断和治疗提供r新的靶点;本研究采用免疫组化技术对70例非小细胞肺癌(NSCILC)组织中生存素基因表达的情况进行检测,并比较生存素的表达与肺癌患者生物学特征及预后的关系.
【期刊名称】《临床荟萃》
【年(卷),期】2010(025)001
【总页数】2页(P60-61)
【关键词】癌;非小细胞型;凋亡调节蛋白类;病理学;临床
【作者】吕喜英;张秀琴;李青山
【作者单位】承德医学院附属医院肿瘤放化疗科,河北承德067000;承德医学院附属医院肿瘤放化疗科,河北承德067000;承德医学院附属医院肿瘤放化疗科,河北承德067000
【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
生存素(survivin)是最近发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的新成员,可通过与凋亡途径中的终末效应酶、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-7阻断细胞凋亡途径,从而抑制细胞凋亡[1],但生存素与家族中其他成员不同,生存素基因蛋白在大多数肿瘤中表达而在成人正常组织不表达或低表达[2],这一特点为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点;本研究采用免疫组化技术对70例非小细胞肺癌(NSCLC)组织中生存素基因表达的情况进行检测,并比较生存素的表达与肺癌患者生物学特征及预后的关系。

1 资料与方法
1.1 研究对象 2001年1月至2004年12月我院接受手术的NSCLC患者70例,所有患者的诊断均经病理检查证实,男39例,女31例,年龄29～67岁,中位年龄51岁;对照组为试验组肺癌患者的术后癌旁正常组织。

1.2 实验方法链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法免疫组化染色。

标本中所有癌组织和癌旁组织经中性甲醛固定,石蜡包埋,制成5 μ m 的厚切片,进行抗原修复,免疫组化染色,以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照,用已知的阳性乳腺癌切片作为对照,增加结果的准确性,生存素检测试剂盒和SP试剂盒均购于北京中山生物技术公司,操作步骤严格按照说明书进行。

1.3 结果判定组织切片染色后高倍镜下观察,肿瘤细胞胞浆或胞核有棕黄色颗粒沉着为生存素阳性,连续观察5个高倍视野,各计数100个细胞,根据阳性肿瘤细胞所占比例判断,无阳性细胞表达为阴性(-),阳性细胞＜30%为弱阳性(+),阳性细胞30%～50%为中等强度阳性(++),阳性细胞＞50%为强阳性(+++)。

1.4 病例随访所有病例4年或直到死亡,生存时间的计算是从手术日期起到随访日期或由于复发、转移而死亡的日期为止计算,随访方式包括电话、通信、再次住院等,随访结果包括死亡或存活,失访者按死亡计算。

1.5 统计学方法应用SPSS 11.0统计软件进行统计学处理,计数资料采用χ2检验,采用 Kaplan-Meier法做生存分析,预后因子多因素采用Cox回归分析,P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 生存素在肺癌组织中的表达 70例中生存素阳性52例(74.3%),生存素阴性 18例(25.7%),生存素在NSCLC中的表达主要位于癌细胞的细胞浆和(或)细胞核,阳性细胞内见棕褐色,阳性率为74.3%,对照组中无1例阳性表达,病例组明显高于对照组(χ2=56.355,P ＜0.01)。

生存素的表达与性别、年龄、分化程度、病理分型无关(P ＞0.05),但随着临床分期的增加,生存素阳性率增加(P＜0.01),见表1。

表1 生存素在N SCLC组织中的表达性别男 39 26(66.7) 2.677 ＞0.05女 31
26(83.9)年龄＜51岁 40 32(80.0) 1.595 ＞0.05≥51岁 30 20(66.7)分化程度高30 21(64.9)中 27 20(70.6) 1.294 ＞0.05低 13 11(84.6)病理分型鳞 39 30(73.3) 1.899 ＞0.05腺 31 22(70.9)临床分期Ⅰ 26 15(57.7)Ⅱ 34 28(82.4) 0.201 ＜0.01Ⅲ 10 9(90.0)
2.2 生存素的表达与生存时间的关系应用Kaplan-Meier法计算患者的生存时间与生存素表达之间的关系,结果显示生存素阴性表达者生存时间(38.2±11.6)个月明显长于阳性表达者(25.3±9.3)个月(t=4.753,P ＜0.01),到随访结束,70例NSCLC患者共失访3例(4.2%),70例共存活2例。

详见图1。

图1 生存率曲线
2.3 NSCLC患者生存时间与多因素的关系应用Cox回归分析性别、年龄、分化程度、临床分期、病理类型、生存素的表达与NSCLC患者的生存时间的关系,显示生存素与NSCLC的预后有关(P ＜0.01),见表2。

表2 NSCLC患者生存时间与多因素的Cox回归结果性别 0.702 0.382 1.288 ＞0.05年龄 1.018 0.991 1.407 ＞0.05分化程度 0.947 0.651 1.377 ＞0.05病理类
型 1.165 0.689 1.969 ＞0.05临床分期 1.309 0.875 1.959 ＞0.05生存素 4.023 1.732 9.394 ＜0.01
3 讨论
凋亡是一种正常的生理过程,凋亡减少和增殖旺盛是肿瘤形成的重要条件,凋亡的抑
制是肿瘤形成过程中的一个重要机制,是通过延长积累有基因突变的细胞寿命而导
致肿瘤的发生。

生存素是一种新近发现的结构独特的IAP成员,主要功能是通过抑
制 caspase-3、caspase-7而阻断细胞凋亡[1];生存素的表达具有细胞周期依赖性,以严格细胞周期调控方式在有丝分裂过程中表达,在体外将Hela细胞阻断在G1期、S期、G2/M 期,检测细胞内源性生存素mRNA的表达,发现在G1期检测不到,在S 期增加6～7倍,在 G2/M 期表达上调 40倍[2],所以在细胞周期调控中起重要作用,对很多肿瘤生存和预后有重要意义[3]。

生存素在大多数肿瘤组织中的表达[4],肺癌组织中生存素基因的表达水平显著高于
癌旁组织和良性病变组织,与肺癌浸润预后有关[5]。

本研究采用SP免疫组化技术
对70例NSCLC患者的病理组织进行检测,生存素蛋白的阳性染色定位于NSCLC
癌细胞的胞浆和(或)细胞核,总阳性率为74.3%,该阳性结果与姚峰等[6]应用原位分子杂交法检测生存素mRNA结果阳性率74.1%报道相同,故该方法较为可靠。

生存素在肺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度、病理类型无关,而与临床分期情
况有关,与王靖华等[7]报道结果一致,在对照组中无1例阳性表达。

Kren等[8]研究
了102例NSCLC组织标本中生存素表达与患者生存率之间的关系,结果表明,生存
素是一个独立的预后判断因素。

本研究对肺癌组织中生存素的表达与生存时间进行比较,结果显示生存素表达阳性患者生存时间明显短于表达阴性的患者,生存素的表
达与生存时间有很大的关系,应用Cox回归分析性别、年龄、分化程度、临床分期、病理类型、生存素的表达与NSCLC患者的生存时间的关系,更进一步证明生存素的表达可以作为预测肺癌预后的一项指标。

综上所述,生存素在肺癌组织中高表达,生存素蛋白可能通过抑制肺癌细胞凋亡参与了肺癌的发生、发展,生存素与肺癌组织的肿瘤临床分期有关,可作为预测肿瘤预后的有效指标。

根据生存素在肺癌组织中表达而在正常组织中不表达或低表达的特性,有望成为肺癌治疗的新靶点。

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