发酵复习
发酵工程复习
1发酵工程：采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
其研究内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
2种子扩大培养：是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。
这些纯种培养物称为种子。
3菌种衰退：菌种经过长期人工培养或保藏，由于自发突变的作用而引起某些优良特性变弱或消失的现象。
4前体：指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。
5促进剂：是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后可以影响微生物的正常代谢，促进中间代谢物的积累，或提高次级代谢产物的产量。
6微生物代谢的控制：指运用人为的方法对微生物的代谢调节进行遗传改造和条件的控制，以期按照人们的愿望，生产有用的微生物制品。
7生物热：生物热是生产菌在生长繁殖时产生的大量热量。
培养基中碳水化合物，脂肪，蛋白质等物质被分解为CO2, NH3时释放出的大量能量。
8发酵热：所谓发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。
在发酵过程中产生菌分解基质产生热量，机械搅拌产生热量，而罐壁散热、水分蒸发、空气排气带走热量。
这各种产生的热量和各种散失的热量的代数和就叫做净热量。
发酵热引起发酵液的温度上升。
发酵热大，温度上升快，发酵热小，温度上升慢。
9搅拌热：在机械搅拌通气发酵罐中，由于机械搅拌带动发酵液作机械运动，造成液体之间，液体与搅拌器等设备之间的摩擦，产生的热量。
搅拌热与搅拌轴功率有关。
10分批培养：简单的过程，培养基中接入菌种以后，没有物料的加入和取出，除了空气的通入和排气。
整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化。
发酵工程复习资料
第一章，绪论一、填空：微生物工程可分为发酵和提纯两部分，其中以发酵为主。
化学工程与发酵工程的本质区别在于化学工程利用非生物催化剂，发酵工程利用生物催化剂---酶。
二、判断：发酵产品是经微生物厌氧生物氧化过程获得的。
错三、课后思考题：1、发酵的定义：利用微生物的新陈代谢作用，把底物（有机物）转化成中间产物，从而获得某种工业产品。
（工业上定义、广义、有氧无氧均可）2、发酵流程：3、比拟放大的基本过程：斜面菌种－摇瓶试验(培养基、温度、起始pH值、需氧量、发酵时间)－小型发酵罐－中试－大规模工业生产4、发酵工程的发展经历了哪几个阶段？1.）自然发酵时期2）纯培养技术建立(第一个转折期)3）通气搅拌的好气性发酵工程技术建立(第二个转折期)4）人工诱变育种与代谢控制发酵工程技术建立(第三个转折期)5）发酵动力学、连续化、自动化工程技术的建立(第四个转折期)6）生物合成和化学合成相结合工程技术建立(第五个转折期)5、微生物工业发展趋势1）、几个转变分解代谢→合成代谢自然发酵→人工控制的突变型发酵→代谢控制发酵→通过遗传因子的人工支配建立的发酵（如工程菌）2）、化学合成与生物合成相结合3）、大型、连续化、自动化发酵发酵罐的容量可达500t，常用的也达20-30t。
4）、人工诱变育种和代谢控制发酵微生物潜力进一步挖掘，新菌株、新产品层出不穷。
5）、原料范围不断扩大石油、植物淀粉、天然气、空气、纤维素、木质素等6、举例说明微生物工业的范围酿酒工业（啤酒、葡萄酒、白酒）食品工业（酱、酱油、食醋、腐乳、面包、酸乳）有机溶剂发酵工业（酒精、丙酮、丁醇）抗生素发酵工业（青霉素、链霉素、土霉素等）有机酸发酵工业（柠檬酸、葡萄糖酸等）酶制剂发酵工业（淀粉酶、蛋白酶等）氨基酸发酵工业（谷氨酸、赖氨酸等）核苷酸类物质发酵工业（肌苷酸、肌苷等）维生素发酵工业（维生素B12、维生素B2等）生理活性物质发酵工业（激素、赤霉素等）名贵医药产品发酵工业（干扰素、白介素等）微生物菌体蛋白发酵工业（酵母、单细胞蛋白）微生物环境净化工业（利用微生物处理废水等）生物能工业（沼气、纤维素等天然原料发酵生产酒精、乙烯等能源物质）微生物治金工业（微生物探矿、治金、石油脱硫等）第二章发酵基础知识1、写出生产以下产品的主要菌种：啤酒（啤酒酵母）、黄酒（霉菌（根霉、曲霉）、酵母菌、细菌）、味精（谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌）、柠檬酸（黑曲霉）、食醋（霉菌、酵母菌、醋酸菌）、酸奶（乳酸菌（保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、乳酸链球菌））2、发酵工艺控制中，主要应监控温度、pH值、溶解氧、泡沫、氧化还原电位等。
食品发酵复习题及答案
食品发酵复习题及答案一、单选题（共44题，每题1分，共44分）1.大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈（）A、无色B、黑色C、紫色D、红色正确答案：D2.下述那种物质专一的抑制F0因子？A、鱼藤酮B、抗霉素AC、寡霉素D、苍术苷正确答案：C3.在下列什么时期容易染菌，通常要将培养基废掉或者重新灭菌。
（）A、发酵后期B、发酵中期C、发酵前期D、种子培养期正确答案：C4.有发酵之父之称的科学家是：（）A、Robert KochB、PasteurC、HansenD、Leeuwenhoek正确答案：B5.呼吸链的电子传递体中，有一组分不是蛋白质而是脂质，这就是A、NAD+B、FMNC、FE、SD、CoQ正确答案：D6.为了看见病毒，（）A、必须使用油浸透镜B、必须提供暗视野显微镜C、低倍物镜足够了D、需要电子显微镜正确答案：D7.病毒缺乏（）。
A、核酸B、独立代谢的酶体系C、蛋白质D、增殖能力正确答案：B8.以下哪种物质几乎不能通过扩散而通过生物膜?A、乙醇B、丙酮C、H2OD、H+正确答案：D9.一分子乙酰CoA经三羧酸循环彻底氧化后产物是：A、草酰乙酸B、草酰乙酸和CO2C、CO2+H2OD、CO2,NADH和FADH2正确答案：D10.适宜于微碱性条件下生长的微生物为（）A、霉菌B、病毒C、酵母菌D、放线菌正确答案：D11.转鼓式灭菌机适用于（）灭菌。
A、固体培养基B、种子培养基C、发酵培养基D、液体培养基正确答案：A12.配制好的盐酸溶液贮存于（）中。
A、白色橡皮塞试剂瓶B、白色磨口塞试剂瓶C、棕色橡皮塞试剂瓶D、试剂瓶正确答案：B13.从自然界分离新菌种一般包括四个步骤，下列不属于四个步骤之一的是：（）A、性能测定B、采样C、基因诱变D、增殖培养正确答案：C14.血球计数板可以用来测量（）的细胞A、诺卡式菌B、小单孢菌C、酵母D、孢囊链霉菌正确答案：C15.脱氧核糖核酸合成的途径是：A、在碱基上合成核糖B、从头合成C、核糖核苷酸还原D、在脱氧核糖上合成碱基正确答案：C16.下列代谢物中氧化时脱下的电子进入FADH2电子传递链的是A、丙酮酸B、苹果酸C、异柠檬酸D、磷酸甘油正确答案：A17.ATP从线粒体向外运输的方式是A、简单扩散B、促进扩散C、主动运输D、外排作用正确答案：C18.发酵是利用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式，通常说的乳酸发酵属于（）A、厌氧发酵B、氨基酸发酵C、液体发酵D、需氧发酵正确答案：A19.下列措施中，不可能诱发基因突变的是（）A、激素B、秋水仙素C、紫外线D、激光正确答案：A20.消毒一般只能杀死（）。
发酵工程复习知识点
.可编辑原料的定义：• 从工艺角度来看，凡是能被生物细胞利用并转化成所需的代谢产物或菌体的物料，都可作为发酵工业生产的原料• 具体：一般是含有可发酵性糖或可转化为可发酵性糖的物料，还包括前体物质等等 原料选择的原则1） 满足生产工艺要求：适合微生物需要、吸收利用、代谢产物生产 对生产中除发酵以外的其他方面，如通气、 搅拌、精制、废弃物的处理等所带来的困难最少 2） 满足管理和经济要求： 原料价格低廉（占成本的比例）• 原料资源要丰富，容易收集（60-70‘s ，石油烷烃生产谷氨酸） • 因地制宜，就地取材 • 原料要容易贮藏 3） 满足环保的要求 资源化 减少污染 常用原料种类• 薯类：甘薯、马铃薯、木薯、山药等 • 粮谷类：高粱、玉米、大米、谷子、大麦、小麦 、燕麦、黍和稷等（酒用原料） • 野生植物：橡子仁、葛根、土茯苓、蕨根、石蒜 、金刚头、香符子等• 农产品加工副产物：米糠（饼）、麸皮、高粱糠 、淀粉渣等 • 糖蜜• 非粮食生物质原料：纤维素、木质素、半纤维素等• 水果类原料：葡萄、苹果、山楂等 常用原料的化学组成• 碳水化学物：主要是单糖和双糖，发酵微 生物的碳源和能源。
一些多糖则需转化为单糖或双糖后才被利用• 蛋白质：蛋白质经蛋白酶分解后产生的多 肽或氨基酸，是糖化菌和酵母菌生长繁殖的氮源 • 脂肪：针对不同的发酵产品其作用有较大差别• 灰分：主要是P 、Mg 、K 、S 、Ca 等元素， 是微生物生长和代谢所必需 糖蜜：英文名称： molasses定义：工业制糖过程中 ，蔗糖结晶后，剩余的不能结晶，但仍含有较多糖的液体残留物。
玉米浆：外文名corn steep liquor ，是制玉米淀粉的副产物，原料为玉米糁、水、玉米汁。
制造玉米淀粉须将玉米粒先用亚硫酸浸泡，浸泡液浓缩即制成黄褐色的液体，叫玉米浆，含有丰富的可溶性蛋白、生长素和一些前体物质，含大约40%～50%固体物质。
味道微咸，是微生物生长很普遍应用的有机氮源，它还能促进青霉素等抗生素的生物合成。
发酵工程章节复习资料
发酵⼯程章节复习资料第⼀章绪论1、发酵及发酵⼯程的概念1、传统发酵最初发酵是⽤来描述酵母菌作⽤于果汁或麦芽汁产⽣⽓泡的现象，或者是指酒的⽣产过程。
2、⽣化和⽣理学意义的发酵指微⽣物在⽆氧条件下，分解各种有机物质产⽣能量的⼀种⽅式，或者更严格地说，发酵是以有机物作为电⼦受体的氧化还原产能反应。
如葡萄糖在⽆氧条件下被微⽣物利⽤产⽣酒精并放出CO2。
3、⼯业上的发酵泛指利⽤微⽣物制造或⽣产某些产品的过程包括：1. 厌氧培养的⽣产过程，如酒精，乳酸等。
2. 通⽓（有氧）培养的⽣产过程，如抗⽣素、氨基酸、酶制剂等。
产品有细胞代谢产物，也包括菌体细胞、酶等。
发酵⼯程（Fermentation Biotechnology）: 应⽤微⽣物学等相关的⾃然科学以及⼯程学原理，利⽤微⽣物等⽣物细胞进⾏酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的⼀门科学。
2、发酵⼯程技术的发展⼤致可分为哪⼏个阶段，每段的技术特点是什么？1. ⾃然发酵时期:嫌⽓性发酵⽤于酒类酿造，好⽓性发酵⽤于酿醋、制曲。
2. 纯培养技术的建⽴：⼈⼯控制环境条件使发酵效率迅速提⾼。
3.通⽓搅拌好⽓发酵过程技术的建⽴：从分解代谢转为⽣物合成代谢，可以利⽤微⽣物合成积累⼤量有⽤的代谢产物。
4.⼈⼯诱变育种与代谢控制发酵⼯程技术的建⽴：遗传⽔平上控制微⽣物代谢。
5. 发酵动⼒学、发酵⼯程连续化、⾃动化⼯程：以数学、动⼒学、化⼯原理等为基础，通过计算机实现发酵过程的⾃动化控制的研究，使发酵过程的⼯艺控制更为合理。
6. 微⽣物酶反应⽣物合成与化学合成反应结合⼯程技术：可⽣产许多过去不能⽣产的有⽤物质。
3、发酵⼯业的应⽤范围1. 酿酒⼯业（啤酒、葡萄酒、⽩酒）2. ⾷品⼯业（酱、酱油、⾷醋、腐乳、⾯包、乳酸）3. 抗⽣素⼯业（青霉素、链霉素、⼟霉素）4. 有机酸⼯业（柠檬酸、葡萄糖酸）5. 酶制剂⼯业（淀粉酶、蛋⽩酶）6. 氨基酸⼯业（⾕氨酸、赖氨酸）7. 核苷酸发酵⼯业(肌苷酸、肌苷)8. 有机溶剂⼯业（酒精、丙酮）9. 维⽣素⼯业(VB2、VB12)10.⽣物能源⼯业（沼⽓、⽣物柴油）11.环境保护产业（废⽔⽣物处理）12.⽣理活性物质发酵⼯业（激素）13. 冶⾦⼯业(微⽣物探矿、⽯油脱硫)14.微⽣物菌体蛋⽩发酵⼯业（酵母、单细胞蛋⽩）4、发酵⼯业的特点与化学⼯程相⽐，发酵⼯程具有以下特点：1、发酵过程是极其复杂的⽣物化学反应，与微⽣物细胞息息相关2、通常在常温常压下进⾏，反应安全，需求条件也⽐较简单3、发酵醪（包括固相、液相、⽓相，还含有活细胞体或菌丝体），属⾮⽜顿流体，其特性影响因素很多，对发酵⼯程都有关联4、具有严格的灭菌系统，以防⽌杂菌污染如空⽓除菌系统、培养基灭菌系统、设备的冲洗灭菌等5、反应以⽣命体的⾃动调节⽅式进⾏，因此数⼗个反应过程能够像单⼀反应⼀样，在同⼀发酵罐内进⾏6、后处理阶段，为了适应菌体与发酵产物的特点，需采取⼀些特殊的⼯艺措施并选⽤合适的设备。
微生物发酵复习题
一、名词解释〔共10题，每题2分，共20分〕1.发酵工程制药技术：发酵工程制药是微生物学、生物化学和化学工程学的有机结合，是利用微生物特定性状，通过现代工程技术在生物反响器中生产药用物质的一种技术，它是生物技术的支柱。
2.培养基：供微生物生长繁殖和合成各种代产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。
3.前体：是指参加到发酵培养基中的能够直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去而自身构造没有显著变化的一类小分子物质。
4.致死温度：是指杀灭微生物的极限温度。
5.热阻：微生物在某一特定条件〔一定的温度、加热方式〕的死亡时间。
6.次级代：是指微生物在一定生长时期，以初级代产物为前体，合成一些对微生物生命活动无明确功能的物质的过程。
7.液晶状态：是指某些有机物在发生固相到液相转变时的过渡状态称为液晶状态。
8.发酵热：就是发酵过程中释放出来的净热量9.种子活化：是指将保存菌种接种在固体培养基上，在适宜条件下培养，恢复其固有的生物特性。
10.分批式培养:培养液一次性装入发酵罐，一次性接种，经过一段时间培养，一次性卸出全部培养物。
11．灭菌：是指用物理或化学因子杀灭有生活能力的细菌营养体和芽孢或孢子的方法。
12．生长因子：维持微生物生长所必需的微量有机物，不起碳源和氮源作用。
13．致死时间：是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。
14．初级代：指能使营养物质转变成机体的构造物质和对机体具有生理活性作用的物质，或是为机体生长提供能量的一类代。
15．微生物发酵：微生物发酵即是指利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代途径转化为人类所需要的产物的过程。
是指利用微生物体来制得产物的需氧或厌氧的任何过程。
16．菌株〔strain〕：表示任何由一个独立别离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其一切后代〔起源于共同祖先并保持祖先特性的一组纯种后代菌群〕。
因此，一种微生物的不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
发酵复习资料
第一章绪论1、生物技术是利用生物系统、活生物体及其衍生物，为特定用途面生产或改良产品或过程的技术。
现代生物工程技术包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程。
2、发酵技术由两个核心部分组成：第一部分是涉及获得特殊反应或过程所需的最良好的生物细胞——微生物菌种（或酶）；第二部分则是选择最精良设备，开发最优技术操作，创造充分发挥微生物细胞（或酶）作用的最佳环境——发酵工艺与设备。
3、工业生产上通过“工业发酵”来加工或制作产品，其对应的加工或制作工艺被称为“发酵工艺”。
4、发酵工程解决的问题：发酵工艺的工业生产环境、设备和过程控制。
5、上游工程包括优良种株的选育，最适发酵条件（pH、温度、溶氧和营养组成）的确定，营养物的准备等。
上游加工还包括原材料的物理和化学处理、培养基的配制和灭菌等问题，这里包括有物料破碎、混合和输送等多种化工单元操作以及热量传递、灭菌动力学和设备等有关工程问题。
优良发酵生产菌的特点：①能在廉价原料制成的培养基上迅速生长。
②培养条件易于控制。
③生长速度快，产能高，发酵周期短。
④菌种纯粹，抗噬菌体，非病原菌。
6、中游工程主要指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术。
发酵过程优化的目的是：①条件和相互关系进行优化；②复杂关系尽可能简化。
7、下游工程是对目的产物的提取与精制。
这一过程困难的原因是：一方面生物反应液中目的产物的浓度是很低微的。
另一方面是因为反应液杂质常与目的产物有相似的结构，加上一些具有生物活性的产品对温度、酸碱度都十分敏感，一些作为药物或食品的产品对纯度、有害物质都有严格的要求。
8、发酵工程的一般特点为：①生产所用的原料通常以淀粉、糖蜜等碳水化合物为主，辅料包括一定的有机或无机氮源和少量无机盐。
②微生物反应过程以生命体的自动调节方式进行，数十个生化反应过程能通过单一微生物的代谢活动来完成，因而所需产品可在单一发酵设备中一次合成。
③微生物能利用简单的物质合成复杂的高分子化合物。
发酵工程复习资料
一、填空（20分）1.酶的调节控制是代谢调控最重要和最有效的调节方式，涉及酶合成的调节和酶分子催化活性的调节。
2.酶合成的调节是一种通过调节酶的合成量进而调节代谢速率的调节机制，这是一种在基因水平上（原核生物重要在转录水平上）的代谢调节。
一般将能促进酶生物合成的调节称为诱导，而能阻碍酶生物合成的调节称为阻遏。
3.酶分子催化活性调节是一种较灵敏的调节方式，而酶合成的调节是一种相对较慢的调节方式。
4.根据酶的合成是否收到环境中所存在的诱导物的诱导作用，可把酶划提成组成型酶和诱导型酶。
5.组成型酶是微生物细胞生长繁殖过程中一直存在的酶类，其合成不受诱导物诱导作用的影响。
诱导型酶是微生物细胞在诱导物存在的情况下诱导合成的一类酶。
6.阻遏作用有助于生物体节省有限的养料和能量，其类型重要有末端代谢产物阻遏和分解代谢产物阻遏两种。
7.代谢工程育种又称为第三代基因工程，是根据代谢途径进行定向选育，获得某种特定的突变株。
其重要优点是减少育种工作的盲目性，提高育种效率。
8.组成型突变株是指操纵子或调节基因突变引起酶合成诱导机制失灵，菌株不经诱导也能合成酶，或不受终产物阻遏的调节突变型。
9.抗分解调节突变株重要解决分解阻遏和分解克制问题。
在实际生产中，最常见的是解除碳源分解调节突变株和解除氮源分解调节突变株。
10.营养缺陷型是一类代谢障碍突变株，会使发生障碍的前一步中间产物积累。
在分支代谢途径中具有切除不需要的分支而使代谢流集中流向目的产物的特点。
11.渗漏缺陷型是一种特殊的营养缺陷型，是遗传障碍不完全的突变株。
其特点是酶活力下降而不完全消失。
在分支代谢途径中强调优先合成的转换。
12.抗反馈调节突变株是一种解除合成代谢反馈克制的突变株，其特点是目的产物不断积累，不会因其浓度超量而终止生产。
13.细胞膜透性突变株是指通过控制磷脂的生物合成直接改变细胞膜结构，或控制细胞壁的生物合成间接影响细胞膜的结构而达成增长细胞膜通透性，促使细胞内代谢物质往外分泌的突变型。
发酵工程复习题
发酵工程复习题库一、填空题常为括号后2－4字1. 淀粉水解糖的制备可分为 酸解法、 酶解法和酸酶结合法 三种;2. 糖酵解途径中的三个重要的关键酶是 己糖激酶、磷酸丙糖激酶、 丙酮酸激酶;3. 甘油的生物合成机制包括在酵母发酵醪中加入 亚硫酸氢钠 与乙醛起加成反应和在 碱性 条件下乙醛起歧化反应;4. 微生物的吸氧量常用呼吸强度；耗氧速率两种方法来表示,二者的关系是 ;5. 发酵热包括 生物热；搅拌热；蒸发热和 辐射热等几种热;6. 发酵过程中调节pH 值的方法主要有添加 碳酸钙法；氨水流加法和尿素流加法;7. 微生物工业上消除泡沫常用的方法有 化学消泡和 机械消泡两种;;8. 一条典型的微生物群体生长曲线可分为 迟滞期、对数期； 稳定期；衰亡期四个生长时期;9. 常用菌种保藏方法有 斜面保藏法、 沙土管保藏法、液体石蜡保藏法；真空冷冻保藏法等;10. 培养基应具备微生物生长所需要的五大营养要素是 碳源、氮源； 无机盐； 生长因子和水;11. 提高细胞膜的 谷氨酸通透性,必须从控制磷脂的合成着手或者使细胞膜受损伤;12. 根据微生物与氧的关系,发酵可分为 有需氧发酵； 厌氧发酵两大类;13. 工业微生物育种的基本方法包括 自然选育、诱变育种； 代谢控制育种； 基因重组和定向育种 等;14. 肠膜明串珠菌进行异型乳酸发酵时,产物为 乳酸； 乙醇；CO2;15. 诱导酶指存在底物时才能产生的酶,它是转录水平上调节 酶浓度的一种方式;16. 发酵工业的发展经历了 自然发酵,纯培养技术的建立, 通气搅拌的好气性发酵技术的建立,人工诱变育种 代谢控制发酵技术的建立,开拓新型发酵原料时期,与 基因操作技术相结合的现代发酵工程技术 等六个阶段;17. 去除代谢终产物主要是通过改变细胞的膜的 通透性来实现;18. 获得纯培养的方法有 稀释法, 划线法,单细胞挑选法,利用选择培养基分离法等方法;19. 生长因子主要包括 维生素, 氨基酸, 碱基,它们对微生物所起的作用是供给微生物自身不能合成但又是其生长必需的有机物质;20. 微生物生长和培养方式,可以分为 分批培养, 连续培养,补料分批培养三种类型;21. 影响种子质量的主要因素包括培养基, 种龄与 接种量,温度,pH 值,通气和搅拌,泡沫,染菌的控制和 种子罐级数的确定;22. 空气除菌的方法有加热杀菌法,静电除菌法, 介质过滤除菌法;23. 发酵产物的浓缩和纯化过程一般包括发酵液 预处理,提取,精制;24. 菌种扩大培养的目的是为每次发酵罐的投料提供 数量相当的 代谢旺盛的种子;25. 在微生物研究和生长实践中,选用和设计培养基的最基本要求是 目的明确, 营养协调,物理化学条件适宜和 价廉易得;26. 液体培养基中加入CaCO3的目的通常是为了调节 pH 值;27. 实验室常用的有机氮源有 牛肉膏,蛋白胨等,无机氮源有 硫酸铵,硝酸钠, 等;为节约成本,工厂中常用尿素、 液氨等作为氮源;28. 乳酸菌进行同型乳酸发酵时通过EMP 途径,产物为 乳酸 ,肠膜明串珠菌进行异型乳酸发酵时通过HMP 途径,产物为乳酸、 乙醇和二氧化碳 ;29. 操纵子是由 结构基因, 操纵基因和启动子组成;30. 微生物发酵培养过程方法主要有 分批 培养、 补料分批培养、连续培养、半连续 培养四种;31. 发酵过程控制的目的就是得到最大的 比生产率和 最大的得率;32. 富集培养目的就是让 目的菌 在种群中占优势,使筛选变得可能;33. 微生物的培养基根据生产用途主要分为 孢子 培养基、 种子培养基和发酵培养基;34. 常用灭菌方法： 化学灭菌、射线灭菌、 干热灭菌、 湿热灭菌35. 常用工业微生物可分为： 细菌、 酵母菌、 霉菌、 放线菌四大类; ()X c Q r O ⋅=236.发酵过程工艺控制的代谢参数中物理参数有温度、压力、搅拌转速、功率输入、流加数率和质量等37.环境无菌的检测方法有：显微镜检查法、肉汤培养法、平板培养法、发酵过程的异常观察法等38.染菌原因：发酵工艺流程中的各环节漏洞和发酵过程管理不善两个方面;39.实验室中进行的发酵菌液体发酵方式主要有四种：试管液体培养、浅层液体培养、摇瓶培养、台式发酵罐40.发酵高产菌种选育方法包括自然选育、杂交育种、诱变育种、基因工程育种、原生质体融合;41.发酵产物整个分离提取路线可分为：预处理、固液分离、初步纯化、精细纯化和成品加工等五个主要过程;42.发酵过程主要分析项目如下： pH、排气氧、排气CO2和呼吸熵、糖含量、氨基氮和氨氮、磷含量、菌浓度和菌形态;43.微生物调节其代谢采用酶活性、酶合成量、细胞膜的透性;44.工业微生物菌种可以来自自然分离,也可以来自从微生物菌种保藏机构与工业单位获取;45.发酵工业上常用的糖类主要有葡萄糖、糖蜜;46.工业发酵方式根据所用菌种是单一或是多种可以分为单一纯种发酵和混合发酵;种子及发酵液进行无菌状况控制常用的方法显微镜检测法、酚红肉汤培养基法、平板画线培养法、发酵过程的异常观察法;菌种的分离和筛选一般分为采样、富集、分离、目的菌的筛选步骤;二、单项选择题1.下列关于发酵工程的说法,错误的是 CA 发酵工程产品主要是指微生物的代谢产物、酶和菌体本身B 可以通过人工诱变选育新菌株C 培养基、发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌D 环境条件的变化既影响菌种的生长繁殖又影响菌体代谢产物的形成2.下列关于单细胞蛋白的叙述,正确的是 BA 是微生物细胞中提取的蛋白质B 是通过发酵生产的微生物菌体C 是微生物细胞分泌的抗生素D 单细胞蛋白不能作为食品3.关于菌种的选育不正确的是 CA 自然选育菌种费时且盲目性大B 诱变育种原理的基础是基因突变C 代谢控制育种方法有转化、转导及杂交D 采用基因工程的方法可构建工程菌4.培养过程中不希望培养基pH发生变化时,应该 CA 加酸B 加碱C 加缓冲液D 加无机盐5.下列营养物质中,不同时含有碳源、氮源和生长因子的是 CA 牛肉膏B 蛋白胨C 生物素D 酵母粉6.平板划线分离法不需要下面哪个物品或设备 DA 接种环B 琼脂培养基平板C 超净工作台D 电泳仪7.在培养基的配制过程中,具有如下步骤,其正确顺序为 B①溶化②调pH ③加棉塞④包扎⑤培养基的分装⑥称量A ①②⑥⑤③④B ⑥①②⑤③④C ⑥①②⑤④③D ①②⑤④⑥③8.甘油生物合成主要由下列哪种物质引起 DA 尿素B 硫酸铵C 酶D 亚硫酸盐14.常作为生产菌种和科研材料的细菌群体,应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定的;所以应选择在它的 BA 迟滞期B 对数期C 稳定期D 衰亡期15.某些放线菌产生的抗生素,是它们的 BA 初级代谢产物B 次级代谢产物 C代谢中间产物 D 代谢废物16.固体培养基中需要加入琼脂的目的是 DA为菌体提供碳源 B 为菌体提供氮源C 使培养基保持水分D 使培养基凝固17.微生物代谢的调节属于 CA 神经调节 B.激素调节 C．酶的调节 D.基因调节18.关于微生物代谢产物的说法中不正确的是 DA 初级代谢产物是微生物生长和繁殖所必须的B 次级代谢产物并非是微生物生长和繁殖所必须的C 初级代谢产物在代谢调节下产生D 次级代谢产物的合成无需代谢调节19.在发酵中有关氧的利用正确的是 BA 微生物可直接利用空气中的氧B 微生物只能利用发酵液中溶解氧C 温度升高,发酵液中溶解氧增多D 机械搅拌与溶氧浓度无关22.发酵过程中,不会直接引起pH变化的是 CA 营养物质的消耗B 微生物呼出的CO２C 微生物细胞数目的增加D 代谢产物的积累23.关于灭菌和消毒的不正确的理解是 BA 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B 消毒和灭菌实质上是相同的C 接种环用烧灼法灭菌D 常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法24.加热灭菌时,一般营养细胞的致死温度是多少度 BA 32℃B 60℃C 100℃D 120℃29.使用高压锅灭菌时,打开排汽阀的目的是 DA 防止高压锅内压力过高,使培养基成分受到破坏B 排尽锅内有害气体C 防止锅内压力过高,造成灭菌锅爆炸D 排尽锅内冷空气30.巴斯德效应是指 DA 乳酸对微生物的抑制B 酒精对葡萄糖分解的抑制C 氧气对呼吸作用的抑制D 氧气对发酵作用的抑制31.微生物群体生长状况的测定方法可以是 B①测定样品的细胞数目②测定次级代谢产物的总含量③测定培养基中细菌的体积④测定样品的细胞重量A．②④ B．①④ C.①③ D.②③32.酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而会抑制微生物的生长,原因是BA．碳源供应太充足 B．细胞会发生质壁分离C．改变了酵母菌的pH值 D．葡萄糖不是酵母菌的原料34.通过影响微生物膜的稳定性,从而影响营养物质吸收的因素是 BA.温度B. pHC.氧含量D．前三者的共同作用36.实验室常用的培养细菌的培养基是 AA 牛肉膏蛋白胨培养基B 马铃薯培养基C 高氏一号培养基D 麦芽汁培养基37.在实验中我们所用到的淀粉水解培养基是一种 AA 基础培养基B 富集培养基C 选择培养基D 鉴别培养基38.下列物质属于生长因子的是 DA．葡萄糖 B．蛋白胨 C．NaCl D．维生素39.1摩尔葡萄糖通EMP和TCA循环彻底氧化共产生多少摩尔ATP CA 34B 36C 38D 3940.下列抗生素作用机制中,抑制细胞壁合成的是 DA 利福霉素B 四环素C 氯霉素D 青霉素41.实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是 CA 135℃—140℃,5—15秒B 72℃、15秒C 121℃,30分钟D 100℃,5小时42.出于控制微生物的目的,灭菌一词指的是 CA 除去病原微生物B 降低微生物的数量C 消灭所有的生物D 只消灭体表的微生物43.紫外线辐射主要作用于微生物的 CA 糖类B 酶类C 核酸D 细胞壁44.发酵工程是生物技术实现以下哪项的关键环节 AA 产业化B 商品化C 社会化D 安全化45.酶活性调节速度比酶合成调节速度 AA 快B 慢C 相等D 无法比较46.受反馈调节的酶一般是 CA 同功酶B 组成酶C 变构酶D 激酶47.通气搅拌技术的建立是发酵技术进步的 CA第一个转折期 B 第二个转折期 C 第三个转折期 D 第四个转折期48.酵母菌的Ⅲ型发酵的产物是 BA 酒精B 甘油C 乳酸D 丙酸49.目前发酵工业常用的处理菌体、固形物杂质和悬浮物等固体物质,保证处理液澄清的主要方法为AA 离心和过滤B 离心和萃取C 蒸馏和萃取D 离子交换和过滤50.抗生素的合成是在微生物生长的 CA 延滞期B 对数生长期C 稳定期D 衰亡期51.发酵液中含量最高的成分为 AA 水分B 蛋白质C 发酵产物D 菌体52.连续发酵中的恒浊培养所控制的对象为 BA 培养液流速B 菌液密度C 生长速度D 发酵液体积53.诱变处理时所用的出发菌细胞应处于 BA 延迟期B 对数生长期C 稳定期D 衰亡期54.实验室常用的培养放线菌的培养基是 CA 牛肉膏蛋白胨培养基B 马铃薯培养基C 高氏一号培养基D 麦芽汁培养基55.酵母菌适宜的生长pH值为 AA 3.8-6.0B 3.0-4.0C 8.0-9.0D 7.0-7.557.如果发酵工程生产的产品是菌体,菌体分离采用的方法是 BA．蒸馏 B．过滤 C．萃取D．离子交换58.下列关于生长因子的说法中,不正确的一项是 BA．是微生物生长不可缺少的微量有机物B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等D．是微生物自身不能合成的59.下列对连续培养优点的叙述,不正确的是 BA．能及时补充微生物所需的营养物质,提高产量B．有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中C．能消除不利于微生物生长的某些环境因素D．能提高发酵设备的利用率61.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种;消灭杂菌,获得纯种的方法不包括CA．根据微生物对碳源需求的差别,使用含不同碳源的培养基B．根据微生物缺乏生长因子的种类,在培养基中增减不同的生长因子C．根据微生物遗传组成的差异,在培养基中加入不同比例的核酸D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异,在培养基中加入不同的抗菌素63.在微生物生长的过程中,细胞形态最多和数目最多的时期是BA.对数期、稳定期B.衰亡期、稳定期C.迟滞期、衰亡期D.衰亡期、对数期64.在实际生产中,对数期的长短取决于 A①培养罐的大小②接种量的大小③培养基的多少④代谢产物合成的多少A.②③ B．②④ C．①②D．①③66.下列属于微生物不可缺少的微量有机物是 D①牛肉膏②蛋白胨③氨基酸④维生素⑤碱基⑥生物素A．①②③B．②③④C．②③④⑤ D．③④⑤⑥67.下列不属于发酵工程应用的是 CA. 生产抗生素、维生素、药用氨基酸等B．生产啤酒、果酒和食醋等C．用于化学检测和水质监测D．生产各种各样的食品和添加剂68.大多数芽孢细菌形成芽孢在哪个时期 CA 调整期B 对数期C 稳定期D 衰亡期69.下列有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的叙述,错误的是 BA.组成酶是维持菌体基本生活的必要条件B.菌体能合成各种生长因子,无需从外界补充C.发酵液pH呈酸性时,不会生成乙酰谷氨酰胺D.细胞膜透性的改变,可解除代谢产物对有关酶活性的抑制三、判断题1.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造;.×2.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取出来的;×3.精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基,称为天然培养基;×4.环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖,也会影响微生物的代谢途径;√5.发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关;√6.微生物的最适生长繁殖温度就是积累代谢产物的最适温度;×7.通过调节基础培养基的配方和补料控制可以调控发酵醪的pH值;√8.灭菌就是杀死一定环境中所有微生物的营养细胞、孢子和胚芽;×9.巴斯德消毒法能杀死牛奶或奶制品中存在的所有微生物;×10.发酵产物的提取和精制过程也就是产物浓缩和纯化过程;√11.细菌分裂繁殖一代所需时间为代时;√12.凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子;√13.在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,因此生产单细胞蛋白的发酵温度应选择最适生长温度;×14.参与淀粉酶法水解的酶包括淀粉酶、麦芽糖酶和纤维素酶等;×15.EMP和HMP代谢途径往往同时存在于同一种微生物的糖代谢中;×16.同功酶是行使同一功能、结构不同的一组酶√17.最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度;×18.微生物的次级代谢产物是初级代谢不畅通时,由支路代谢产生的;×19.底物水平磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP;×20.分批培养时,细菌首先经历一个适应期,此期间细胞处于代谢活动的低潮,所以细胞数目并不明显增加;√21.化能异养菌以有机物作为呼吸底物,以O2作为最终电子受体进行有氧呼吸作用产生能量;√四、名词解释1.发酵工程：是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,或直接把微生物应用于工业生产过程,为人类生产有用产品的一种技术;2.代谢控制发酵：人为地改变微生物的代谢调控机制,使有用中间代谢产物过量积累,这种发酵称为代谢控制发酵;3.次级代谢产物是指微生物在一定生长时期,以初级代谢产物为前体物质,合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质过程,这一过程的产物,即为次级代谢产物;4.营养缺陷型突变株：指某一菌株丧失了合成某种营养物质的能力,在培养基中若不外加这种营养成分就不能正常生长的变异菌株;5.酶合成调节：酶合成的调节是通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制,这类调节在基因转录水平上进行;酶合成调节主要有酶的诱导和酶的阻遏两种类型;6.酶活性调节：通过改变酶分子的活性来调节代谢速度的调节方式称为酶活性的调节,是发生在蛋白质水平上的调节;7.初级代谢产物是指微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢,生成维持生命活动所需要的物质和能量的过程;这一过程的产物即为初级代谢产物;8.产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物,又非前体,但加入后却能提高产量的添加剂;9..DE值葡萄糖值：表示淀粉水解程度及糖化程度,指葡萄糖所有测定的还原糖都当作葡萄糖来计算占干物质的百分率;10.前体指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去,而其自身的结构并没有多大变化,但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高;11.培养基广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料;同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件;12.发酵生长因子从广义上讲,凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质,如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子13.临界氧浓度：微生物的耗氧速率受发酵液中氧的浓度的影响,各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最低要求,这一溶氧浓度叫做临界氧浓度;14.介质过滤除菌：是使空气通过经高温灭菌的介质过滤层,将空气中的微生物等颗粒阻截15.发酵热：引起发酵过程温度变化的原因是发酵过程所产生的热量,称为发酵热;发酵热包括生物热、搅拌热、蒸发汽化热和辐射热等;16.分批培养：简单的过程,培养基中接入菌种以后,没有物料的加入和取出,除了空气的通入和排气;整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化;五、简答题1.种子扩大培养：指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程;这些纯种培养物称为种子;2.实罐灭菌：实罐灭菌即分批灭菌将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后维持一定时间,在冷却到接种温度,这一工艺过程称为实罐灭菌,也叫间歇灭菌;3.染菌率：总染菌率指一年发酵染菌的批次数与总投料批次数之比的百分率;染菌批次数应包括染菌后培养基经重新灭菌,又再次染菌的批次数在内在介质层中,而达到除菌的目的;4.初级代谢产物：微生物细胞在其对数生长期所产生的产物,往往是细胞生长和繁殖中所必需的物质,如糖、氨基酸、脂肪酸、核苷酸以及由这些化合物聚合而成的高分子化合物,如多糖、蛋白质、脂类和核酸等,这些化合物称为初级代谢产物;5.培养基：是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质;根据微生物对营养的要求,培养基都基本包括碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分,此外,还应根据微生物的要求,有一定的酸碱度和渗透压;6.发酵：指微生物在无氧条件下,分解各种有机物质产生能量的一种方式;或者更严格地说,发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应;如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出二氧化碳,同时获得能量;7.酵母的第三型发酵,又称碱法甘油发酵;即在碱性条件下pH7.6,2分子乙醛发生歧化反应,生成1分子乙醇和1分子乙酸,而磷酸二羟丙酮则还原为甘油;总反应式：2葡萄糖 + H2O 2甘油 + 乙醇 + 乙酸 + 2CO28.补料分批培养：在分批培养过程中补入新鲜的料液,以克服营养不足而导致的发酵过早结束的缺点;在此过程中只有料液的加入没有料液的取出,所以发酵结束时发酵液体积比发酵开始时有所增加;在工厂的实际生产中采用这种方法很多;9.发酵热：所谓发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量;什么叫净热量呢在发酵过程中产生菌分解基质产生热量,机械搅拌产生热量,而罐壁散热、水分蒸发、空气排气带走热量;这各种产生的热量和各种散失的热量的代数和就叫做净热量;发酵热引起发酵液的温度上升;发酵热大,温度上升快,发酵热小,温度上升慢;10.11.简述发酵热产生的原因：.答：微生物分解有机物释放的能量,一部分用于合成ATP,另一部分散发到培养基中时,会引起发酵温度升高生物热；机械搅拌也会产生一部分热量引起温度升高搅拌热;此外,发酵罐壁散热辐射热、水分蒸发蒸发热会带走部分热量,使发酵温度降低12.简述发酵过程进行中间补料的原则：.答：菌体生长代谢需要一个合适的浓度,过高的浓度对菌体生长有抑制作用,过低,不能满足产物合成的需要;中间补料的原则是使生产菌在分泌期有足够多而不过多的养料,使代谢活动朝着有利于合成产物的方向发展;六、问答题1简述菌种保藏的基本原理及措施：答：菌种保藏的基本原理主要是根据菌种的生理生化特点,人工地创造条件,使菌种的代谢活动处于不活泼状态,同时,使菌种避免污染、死亡和变异;保藏菌种时首先要挑选优良纯种,最好是它们的休眠体孢子、芽胞等；其次,要创造一个有利于休眠的环境条件,如低温、干燥、缺氧和缺乏营养物质等,即可以达到降低其代谢活动,延长保存期的目的;2.简述温度对发酵的影响答：温度对发酵的影响是多方面的,对菌体生长和代谢产物形成的影响是由各种因素综合表现的结果;1 温度升高,酶促反应速度加大,生长代谢加快,产物生成提前;但温度愈高酶失活愈快,菌体易于衰老影响产物生成;2 温度通过影响发酵液中溶解氧从而影响发酵;3 温度能影响生物合成方向;4 温度能影响微生物酶系的组成及酶的特性;5 同一种生产菌,菌体生长和积累代谢产物的最适温度往往不同;3.简述大规模发酵生产对菌种选择的要求1)能够利用廉价的原料,简单的培养基,大量高效地合成产物2)有关合成产物的途径尽可能地简单,或者说菌种改造的可操作性要强3)遗传性能要相对稳定4)不易感染它种微生物或噬菌体5)产生菌及其产物的毒性必须考虑在分类学上最好与致病菌无关6)生产特性要符合工艺要求84.简述发酵生产中如何调节pH值答：在实际发酵生产中,调节pH值的方法应根据具体情况加以选用;1 调节培养基的初始pH值;初始pH值是指发酵液配制完毕后、灭菌前的pH值注意：灭菌前与灭菌后pH 值有所不同;或加入缓冲剂如磷酸盐制成缓冲能力强、pH值改变不大的培养基;2 在发酵过程中加弱酸或弱碱进行pH值的调节,合理地控制发酵条件,如添加CaCO3;或调节通气量来控制pH值;3 进行中间补料是调节pH值较好的办法,既调节培养液的pH值,又可补充营养,如氨水、尿素流加法等;通过补料调节pH值来提高发酵产率已在酶制剂发酵和抗生素发酵生产上取得明显的效果;5.简述发酵工业经历的几个不同阶段答：发酵工业经历了以下几个不同阶段：1 自然天然发酵时期2 纯培养技术的建立3 通气搅拌好气性发酵工程技术的建立4 人工诱变育种与代谢控制发酵工程技术的建立5 开拓新型发酵原料时期6 与基因操作技术相结合的现代发酵工程技术阶段6.简述发酵醪的一般特征答：发酵醪的一般特征是：1 发酵醪大部分是水；2 发酵醪中发酵产物浓度较低；3 发酵醪中的悬浮固体物主要含有菌体和蛋白质胶状物；4 培养基残留成分中含有无机盐类、非蛋白质大分子杂质及其降解产物；5 除发酵产物外,伴有一些代谢副产物；6 发酵醪中含有色素、热原质、毒性物质等有机杂质;7.简述泡沫给发酵造成的影响。
发酵复习资料 -
☆要实现发酵过程并得到发酵产品，必须具备的条件：①要有某种适宜的微生物；②要保证或控制微生物进行代谢的各种条件（培养基组成、温度、溶解氧浓度、碱度等）；③要有进行微生物发酵的设备；④要有将菌体或代谢产物提取出来，精制成产品的方法和设备。
发酵生产过程是利用生物体的生命活动来获取产品的，与化学生产过程相比其特点为：1、生产过程通常都是在常温下进行，一般操作条件比较温和，各种设备不必考虑防爆问题，可能使一种设备有多种用途。
2、生产所用的原料常以淀粉、糖蜜等碳水化合物为主，并加入少量的有机和无机氮源，原料只要不含对生物有害的物质，一般不需对原料进行预处理。
3、生产过程中的反应是以生命体的自动调节方式进行的，因此数十个反应过程能够像单一的反应一样，在单一的生物反应器中进行。
4、能够很容易地生产复杂的高分子化合物，其中酶、光学活性体等的生产是发酵生产过程中最有特色的领域。
5、利用生命体特有的反应机制，能够高选择性地进行复杂化合物在特定部位上的氧化、还原、官能团导入等反应。
6、生产产品的生物体有时也是产物，其富含维生素、蛋白质、酶等；除特殊情况外，生物体的培养液一般不会对人和动物造成危害。
7、发酵生产过程中最需要注意的是防止杂菌污染，尤其是噬菌体的侵入危害很大，有时甚至是致命的，因此，生产过程的灭菌十分重要，它决定着生产的成败。
8、通过改良生物体的生产性能，可在不增加设备投资的条件下，利用原有的生产设备使生产能力上升。
发酵工业的优缺点：优点：1.产物结构复杂性和特异性： 2. 过程安全性：水相、常温、常压、中性、不燃不爆3.主要原料可再生性：阳光和土地4.原料可替换性5.反应自控性6.设备通用性7.副产物可综合利用性8.生产能力可提高性：突变与基因扩增9.产物类型可塑性：突变与转基因缺点：1.副产物多，分离精制困难2.反应速度慢3.原料转化率低4.反应浓度低5.生产稳定性差6.设备庞大，辅助设备多，投资大7.废水、废渣排放量大，处理费用高8.生产过程容易受到其他微生物的污染9.通气、搅拌、冷却等能耗大☆发酵工业对微生物菌种的要求1.能在廉价原料制成的培养基上迅速生长和生成所需的代谢产物,产量高的菌种。
发酵工程深刻复习资料
发酵工程复习资料第一章绪论1、发酵及发酵产品各包括哪些类型？答案要点：一）发酵的类型：按发酵原料分类：糖类物质发酵、石油发酵、废水发酵；按发酵形式分类：固体发酵、液体发酵；按发酵工艺流程分类：分批发酵、连续发酵、流加发酵；按发酵过程对氧的需求分类：厌氧发酵、通风发酵；按发酵产物分类：氨基酸发酵、有机酸发酵、抗生素发酵、酒精发酵、维生素发酵、酶制剂发酵二）发酵产品的类型：以菌体为产品、以微生物的酶为产品、以微生物的代谢产物为产品、生物转化过程2、了解发酵工程的组成、基本要求及主要特点。
答案要点：一）组成：上游工程：菌种选育、种子培养、培养基设计与制作、接种等。
发酵工程：发酵培养。
下游工程：产物的提取纯化、副产品的回收、废物处理等。
二）基本要求：发酵设备、合适的菌种、合适的培养基、有严格的无菌生长环境三）主要特点：1）发酵过程一般来说都是在常温常压下进行的生物化学反应，反应安全，要求条件简单；2）发酵所用的原料主要以再生资源为主；3）发酵过程通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单一的代谢产物；4）获得按常规方法难以生产的产品；5）投资少，见效快，经济效率高；6）维持无菌条件是发酵成败的关键；7）环境污染小。
3、为什么说发酵工程在国民经济中有着重要的地位？答案要点：因为发酵工程在医药、食品、能源、化工、冶金、农业、环境保护等方面均有着十分重要的作用，例如：抗生素的生产；饮料食品等的制造；沼气、微生物采油、生物肥料、生物农药以及三废处理等方面都有很重要的应用。
所以说发酵工程在国民经济中有着重要的地位。
4、了解发酵工业的类型及必备条件。
答案要点：一）发酵工业类型：食品发酵工业：食品、酒类1）传统分类非食品发酵工业：抗生素、有机酸、氨基酸、酶制剂、核苷酸、单细胞蛋白酿造业：利用微生物生产具有较高风味要求的发酵食品。
2）现代分类发酵工业：经过微生物纯种培养后，提炼、精制而获得成分单纯、无风味要求的产品。
发酵工程原理复习
发酵工程原理及应用一、填空1. 技术的建立是发酵技术发展的第一个转折时期。
2. 技术的建立时发酵工业发展史上的第二个转折点。
3. 技术的建立，是发酵技术发展的第三个转折点。
4.浅盘固体发酵的厚度一般为 cm。
5. 按发酵工艺流程分为、和连续发酵。
6.就类型来说，发酵罐是指带有通气和机械搅拌装置的发酵罐，是工业生产中最常用的发酵罐。
7.常用的轴封有和轴封两种。
8.空气分布器两种分别是和。
9.发酵罐放大方法有经验放大法、、、数学模型法。
10.空气流量放大，以VVM相等的原则放大，ws2/ws1比值是。
11.空气流量放大，以Ws相等的原则放大，VVM2/VVM1等于。
12.空气流量放大，以KLa相等的原则放大， VVM2/VVM1等于。
13.发酵设计时，非几何放大多用于菌株对敏感的发酵放大设计。
14. 分批发酵、连续发酵、补料发酵比较，当发酵采用的微生物不受底物抑制，具有较强的基质转化能力和生产效率时，可采用发酵。
15.分批发酵、连续发酵、补料发酵比较，发酵微生物能高效地利用基质、菌种遗传性能稳定及抗杂菌污染能力强，可采用发酵。
16.分批发酵、连续发酵、补料发酵比较，以发酵后处理成本为主的发酵可采用发酵。
17.生产效率有和两种表示方法。
18.从土壤中分离出的固氮菌，用技术判断这类菌是否有荚膜。
19.发酵过程的溶氧参数，生长阶段要求，生产阶段满足。
20.酶的调节控制有两种方式分别是和。
21.酶合成的调节分为和。
22.酶活性调节分为和。
23.酶活性的抑制主要是反馈抑制，受反馈抑制的调节酶一般是有。
24.细菌转导的类型有和。
25.F因子的四种细胞结构分别是F+、F-、和菌株。
26.F因子的四种细胞结构中，菌株没有性菌毛。
27.Hfr×F-杂交后的受体细胞(或接合子)大多数仍然是。
28.CM培养基又叫培养基，MM培养基又称培养基。
29.对菌株进行诱变时，诱变剂的选择，对于低产或野生菌，往往是首选。
30. 常用在酵母发酵产地和抗生素生产过程中作为碳源。
发酵工程简答题期末复习
发酵工程复习1.什么是微生物工程？微生物工程也称之为微生物发酵工程。
微生物工程学是以微生物学、生物化学和生物工程学为基础，又与工程技术紧紧联系在一起而建立的一个完整的科学与工程技术体系。
它是研究利用微生物（包括“工程微生物”在内）及其代谢产物与工艺生产过程原理的科学。
2.了解微生物工程发展的4个阶段及每个阶段的特点？（1）微生物工程的孕育时期——天然发酵（或自然发酵）；（2）第一代微生物发酵技术——纯培养技术的建立，柯赫，发明固体培养基建立了纯培养；（3）第二代（近代）微生物发酵技术——深层培养技术，如抗生素工业生产带动了生化工程的建立；（4）第三代微生物发酵技术——微生物工程，主流发展方向为工程菌；（5）第四代微生物发酵技术——微生物工程。
3.微生物代谢产物的三种类型？（1）初级代谢产物：微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质。
（2）次级代谢产物：微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该微生物无明显生理功能，或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质。
（3）转化产物：以外源物质为底物，通过微生物细胞的酶或酶系对底物某一特定部位进行化学反应，使它转变成结构相类似但更具有经济价值的化合物。
4.工业菌种必须满足的条件是什么？（1）生产力：能在廉价的培养基上迅速生长，所需的代谢产物的产量高，其它代谢产物少（2）操作性：培养条件简单，发酵易控制，产品易分离（3）稳定性：抗噬菌体能力强，菌种纯粹，不易变异退化（4）安全性：是非病源菌，不产有害生物活性物质或毒素5.掌握实验室及工厂常用的微生物培养方法。
（1）固体培养实验室常见的固体培养方法；生产中常见的固体培养基：小麦麸皮（2）液体培养实验室常见的液体培养：试管液体培养，浅层液体培养，摇瓶培养，发酵罐培养；生产中常见的液体培养：浅盘培养，发酵罐深层培养，连续培养（恒化培养：通过控制培养基中营养物的浓度，使微生物在低于最高生长速率的条件下生长繁殖；恒浊培养：可控制微生物在最高生长速率与最高细胞密度的水平上生长繁殖，达到高效率培养的目的；多级连续培养；固定化细胞连续培养），补料分批培养，混合培养。
第1章 发酵工程 期末复习知识点总结【新教材】人教版高中生物选择性必修三
第1章发酵工程1.1传统发酵技术的应用一、发酵与传统发酵技术1. 发酵: 人们利用微生物, 在适宜的条件下, 将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物。
2. 传统发酵食品——腐乳:(1) 原料: 豆腐。
(2) 参与发酵的微生物: 酵母、曲霉和毛霉等, 起主要作用的是毛霉。
(3) 物质变化: 蛋白质小分子的肽和氨基酸。
毛霉是怎样将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸的?提示: 毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解。
3. 传统发酵技术:(1) 概念: 直接利用原材料中天然存在的微生物, 或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。
(2) 特点: 以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主, 通常是家庭式或作坊式的。
4. 下列食品是传统发酵食品的是②③④⑥⑦⑧⑨。
①豆腐②腐乳③酱油④香醋⑤豆油⑥泡菜⑦豆豉⑧馒头⑨米酒⑩豆浆酸奶米饭二、尝试制作传统发酵食品(一) 制作泡菜1. 菌种来源: 植物体表面天然的乳酸菌。
2. 原理: 无氧的情况下, 乳酸菌将葡萄糖分解为乳酸。
反应简式: C 6 H 12 O 6 2C 3 H 6 O 3 (乳酸) +能量。
3. 方法步骤:4. 结果分析与评价:判一判: 结合泡菜的制作原理和过程, 判断下列实验分析的正误:(1) 用水密封泡菜坛可以保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境。
(√)(2) 随着发酵时间的延长, 泡菜中乳酸含量逐渐增加, 所以泡菜腌制时间越长越好。
(×)提示: 当乳酸含量为0. 4%～0. 8%时, 泡菜的口味、品质最佳, 如果发酵时间过长, 乳酸含量过高,口味不佳, 还需考虑亚硝酸盐含量的问题。
(3) 制作泡菜时配制的盐水可以直接使用。
(×)提示: 盐水应该煮沸冷却后再使用。
(4) 蔬菜和香辛料不能装满泡菜坛, 只能装八成满。
(√)蔬菜中含有较多的硝酸盐, 试从泡菜的制作过程分析亚硝酸盐产生的原因。
提示: 泡菜是新鲜蔬菜经过乳酸菌等微生物的发酵制作而成的, 蔬菜中的硝酸盐在某些微生物的作用下被还原成亚硝酸盐。
发酵技术专题复习资料
发酵及发酵工业广义——通过微生物的培养使某种特定代谢产物或菌体本身大量积累的过程。
狭义——厌氧微生物或兼性厌氧微生物在无氧条件下进行能量代谢并获得能量的一种方式。
发酵工业：（巴斯德）经纯种培养和提炼精制获得的成分单纯、无风味要求的产品的生产过程叫发酵工业。
如酒精、抗生素、柠檬酸、氨基酸、酶、维生素、某些色素等。
酿造(brewing)：我国人们对一些特定产品发酵生产的特殊称法，是未知的混合微生物区系参与的一种自然发酵。
酿造工业：经自然培养、不需提炼精制、产品由复杂成分构成并对风味有特殊要求的食品或调味品的生产过程。
如黄酒、清酒、葡萄酒、酱油、醋、腐乳、豆豉、面酱等。
1836-1837年Larkutzing发现在啤酒的发酵中存在活的生物体，但并未发现发酵与微生物的关系。
发酵是由微生物进行的一种化学变化，不同类型的发酵是由形态可以区别的各种特殊的微生物所引起的。
1870年，Pasteur发现了微生物之间有相互抑制的作用。
即拮抗作用。
其间1804年，法国厨师阿卑特（Appert）发明了瓶装罐头）科赫的功绩发明培养基并用其纯化微生物等一系列研究方法的创立证实炭疽病因—炭疽杆菌发现结核病原菌—结核杆菌科赫法则1880年，发现可以通过稀释把多种微生物分离开来，建立了单种微生物的分离和纯培养技术。
建立了研究的微生物一系列方法，把早年在马铃薯块上的培养技术改为明胶平板（1881）和琼脂平板（1882）显微镜技术：包括细菌鞭毛在内的许多染色方法、悬滴培养法以及显微摄影技术。
利用平板分离方法找到并分离许多传染病的病源菌（炭疽、结核、链球、）1884年提出了科赫法则（Koch’s ostulates）：病原微生物存在与病体而非健康体；可纯培养；纯培养物接种后染病；可重新分离再培养(Joseph Lister,1827~1912)首创用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具以防术后感染，为防腐、消毒，以及无菌操作奠定了基础。
1878年，李斯特分离乳酸链球菌时用注射器和酒杯培养装置1897年，Buchner（布赫纳）阐明了发酵的化学本质。
发酵工程复习
连续发酵：指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基，同时以相同速度流出培养液，从而使发 酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。
巴斯德效应：在厌氧条件下，向高速发酵的培养基中通入氧气，葡萄糖消耗减少，抑制发酵产物 积累的现象称为巴斯德效应，即呼吸抑制发酵的作用。
比生长速率：每小时单位质量的菌体所增加的菌体量称为菌体比生长速率。
它是表征微生物生长 速率的一个参数，也是发酵动力学中的一个重要参数。
产物促进剂：是指那些非细胞生长所必须的营养物质， 又非前体，但加入却能提高产量的添加剂。
产物得率系数：可用于对细胞反应过程中碳源等物质生成细胞或其它产物的潜力进行定量评价, 最常用的得率系数有对底物的细胞得率 Yx/s ，对碳的细胞得率Yc 等。
反馈抑制：是指最终产物抑制作用，即在合成过程中有生物合成途径的终点产物对该途径的酶的 活性调节，所引起的抑制作用。
(反馈抑制与反馈阻遏的区别在于：反馈阻遏是转录水平的调节，产生效应慢，反馈抑制是酶活 性水平调节，产生效应快。
此外，前者的作用往往会影响催化一系反应的多个酶，而后者往往只 对是一系列反应中的第一个酶起作用。
)分解代谢物阻碍：分解代谢物抑制作用(catabolite rep ressi on )又称代谢物阻遏作用，是葡萄糖或代谢物或葡萄糖的降解产物对一个基因或操纵子的阻遏作用。
分批培养：分批培养是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后，接入少量微生物菌种进 行培养，接种量是指移入的种子悬浮液体积和接种后培养液体的体积的比例。
种子罐中培养的菌体从开始接种至移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。
空消：发酵罐未装入培养基的情况下进行的灭菌，也即是对发酵罐进行的灭菌。
细胞得率系数：菌体生长量相对于基质的消耗量的收得率，称为生长得率，其定义为：以消耗基 质为基准的细胞得率系数。
两步法发酵：第一步、属有机酸发酵或氨基酸发酵。
第二步、是在微生物产生的某种酶作用下，把第一步的产物转化为所需的氨基酸, 这种生产方法又称为酶转化法。
发酵工艺原理复习题答案
发酵工艺原理复习题答案一、选择题1. 发酵的定义是什么？A. 微生物生长的过程B. 微生物代谢产物的积累过程C. 微生物的繁殖过程D. 微生物的代谢过程答案：B2. 发酵过程中，微生物主要进行哪种代谢？A. 有氧代谢B. 无氧代谢C. 光合作用D. 化学合成答案：B3. 以下哪个不是发酵过程中常用的微生物？A. 酵母菌B. 乳酸菌C. 曲霉D. 蓝藻答案：D4. 发酵过程中，pH值对微生物的生长和代谢有何影响？A. 无影响B. 促进生长和代谢C. 抑制生长和代谢D. 影响微生物的酶活性答案：D5. 发酵工艺中，温度控制的重要性是什么？A. 影响微生物的生长速度B. 影响微生物的代谢产物C. 影响微生物的酶活性D. 所有以上选项答案：D二、填空题6. 发酵罐中常用的搅拌方式包括_________、_________和_________。
答案：机械搅拌、气流搅拌、磁力搅拌7. 发酵过程中，_________是影响微生物生长和代谢的重要因素之一。
答案：氧气供应8. 发酵工艺中，常用的灭菌方法有_________、_________和_________。
答案：干热灭菌、湿热灭菌、过滤灭菌9. 发酵过程中，微生物的_________和_________是影响发酵效率的关键因素。
答案：生长速率、代谢途径10. 发酵工艺中，_________是控制微生物生长和代谢的重要手段。
答案：营养供应三、简答题11. 简述发酵工艺中常用的几种微生物及其应用。
答案：酵母菌常用于酒精发酵和面包制作；乳酸菌用于酸奶和泡菜的制作；曲霉用于酱油和酶制剂的生产。
12. 描述发酵过程中pH值和温度对微生物生长和代谢的影响。
答案：pH值和温度直接影响微生物的酶活性和代谢途径，适宜的pH值和温度可以促进微生物的生长和代谢，反之则抑制。
四、论述题13. 论述发酵工艺在食品工业中的应用及其重要性。
答案：发酵工艺在食品工业中具有广泛的应用，如在乳制品、酿酒、酱料、面包等行业中，通过发酵可以生产出具有特定风味和营养价值的产品。
发酵复习
名词解释发酵工程：利用微生物，通过工程技术手段生产特定有用物质的生物工程技术体系。
厌氧发酵：不通空气条件下的微生物发酵。
深层培养：在液体深层培养基进行微生物发酵的纯种培养方法。
微生物转化产物：微生物代谢中，通过酶或酶系的生化反应，由某种化合物转化形成的含特殊功能基团的产物。
1. 实现生物细胞产物的工业化，必须经过〔〕阶段。
A.人化学工程B.发酵工程C.信息工程D.基因工程复习：1-22. 1928年弗莱明发现了能抑制葡萄球菌生长的（），但直到第二次世界大战期间才形成工业化规模的生产，被视为真正意义的现代（）工业。
3. 早期氨基酸的制造是用〔〕法。
1964年我国利用（）法生产〔〕并实现大规模生产，被认为是现代发酵工业的重大突破。
A.人蛋白质水解B.谷氨酸C.发酵D.转化4. 发酵产物主要分以下几类：起催化作用的（）、与细胞生长代谢相关联的（）、可以用休眠细胞反应来获得的（），以及微生物本身的（）。
5. 尽管人们很早就使用发酵产品，但现代发酵工业建立的标志，却是上世纪40年代开始的〔〕生产。
复习：1-36.判断( ) 深层培养是厌氧培养的一种形式。
( ) 微生物菌体本身不属于发酵产物。
( ) 酶固定化技术的应用得益于微生物转化技术的兴起。
( ) 发酵工程的下游加工是由多种化工单元操作组成的。
( ) 推动现代发酵工程的所谓定向育种，是指包括杂交育种、基因工程、细胞工程等在内的、按照预先设想，利用某种方法得到所需要特定性状的微生物或动植物细胞产品。
( )法国人巴斯德最早用显微镜证实了活酵母引起酒精发酵的现象，使人们用肉目艮看到了微生物的存在。
1.B2.青霉素、发酵3.A、C、B4.酶、代谢产物、转化产物、菌体/细胞5.抗生素6. ××√√√×名词解释原生质体：脱去细胞壁的细胞，是重要的细胞工程、基因工程等技术操作的工具。
细胞膜：位于细胞壁内侧，包裹于细胞质外面的半渗透膜。
荚膜：某些细菌的细胞壁外包绕的一层粘液性物质，有着明显的边界。
发酵工程期末复习题
七. 种子质量的判断
1、细胞或菌体
2、生化指标
通常测定的参数有：
1）pH
2）培养基灭菌后磷、糖、氨基氮的含量变化
3）菌体形态、菌体浓度和培养液外观（色素、颗粒等）
4）其它参数，如某种酶的活力
3、产物生成量
4、酶活力
第四章 发酵工业原料及其处理
..
一. 培养基基本要求： 1)都必须含有作为合成细胞组成的原料。 2)满足一般生化反应的基本条件，如碳源、氮源、无机盐、生长因子； 3)一定的 pH 等条件。 4）工业生产培养基所用的原材料必须来源丰富、价格低廉、质量稳定。
..
优点： 1.产物结构复杂性和特异性： 手性或光学活性 2. 过程安全性：水相、常温、常压、中性、不燃不爆 3.主要原料可再生性：阳光和土地 4.原料可替换性 5.反应自控性 6.设备通用性 7.副产物可综合利用性 8.生产能力可提高性：突变与基因扩增 9.产物类型可塑性：突变与转基因
..
自然选育的一般程序： 制备单孢子（单细胞）悬液 ∨ 适当稀释 ∨ 在固体平板上分离 ∨ 挑取部分单菌落进行生产能力测定 ∨ 经反复筛选以确定生产能力更高的菌株替代原来的菌株 七.诱变育种
表型迟延现象： 遗传物质经诱变处理后发生的突变，必须经复制才能表现出来。
..
第三章 种子扩大培养
一. 种 子 扩 大 培 养： 定义：菌种的扩大培养就是把保藏在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产 菌种接入试管斜面活化，再经过扁瓶或摇瓶和种子罐，逐级扩大培养后达到一定 的数量和质量的纯种培养过程。这些纯种的培养物称为种子。
二. 尽管工业用微生物菌种多种多样，但作为大规模生产，选择菌种应遵循以 下原则： 1、能在廉价原料制成的培养基上迅速生长，并形成所需的代谢产物，产量高； 2、培养条件易于控制； 3、生长速度和反应速度较快，发酵周期较短； 4、满足代谢控制的要求； 5、选育抗噬菌体和杂菌能力强的菌株； 6、菌种纯粹，不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定性。 7、菌种不是病原菌，不产生有害的生物活性物质和毒素，以保证安全。 8、发酵过程中产生的泡沫少，有利于提高装料系数和单罐产量，降低生产成本； 9、对需要添加的前体物质有耐受能力，且不能将前体物质作为碳源使用。
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而是防止菌种退化，他们一方面利用低温，例如液氮，来保存菌种，减少菌的传代代数，另一方面，还要定期作菌种恢复，利用一些生化手段，有目的性的杀死基因突变和衰老的菌个体，来保证菌群的整体健康。
诱变育种利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，促进其突变率大幅度提高，然后设法采用简便、快速、高效的筛选方法，从中挑选少数符合目的的突变株，以供生产科研之用。
主要包括碳源、氮源、无机盐和微量元素、生长因子、前体和产物促进剂、水等。
碳源作用:提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分；
提供合成目的产物所必须的碳成分。
来源:糖类、油脂、有机酸、正烷烃。
氮源:主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。
常用的氮源可分为两大类：无机氮源和有机氮源。
无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水。
特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。
但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化
常用的有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟。
成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机盐及生长因子
生长因子从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子
前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。
产物促进剂所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。
常用的灭菌的方法：化学物质灭菌、辐射灭菌、热灭菌和过滤介质灭菌化学物质灭菌原理：化学物质与生物细胞中的某些物质发生生物化学反应，如蛋白质变性、酶失活、改变细胞膜的通透性
辐射灭菌原理：利用光波照射菌体后，菌体吸收了他们的高能量，引起菌体内的水和有机物产生强烈的离子化反应，形成OH-、过氧化氢等强氧化物。
这些氧化物能阻碍微生物的代谢活动从而导致菌体的死亡。
干热灭菌原理：在高温条件下，微生物细胞内各种与温度有关的氧化反应速度增加，使微生物致死率迅速增高的过程
湿热灭菌原理：蒸汽冷凝时释放出大量的潜热，热使蛋白质变性。
滤过灭菌原理：膜的分子筛原理和吸附原理
当环境温度超过维持生命活动的最高限温度时，微生物就会死亡，杀死微生物的极限温度称为致死温度。
在致死温度下，杀死全部微生物所需要的时间成为致死时间。
b) 对数残留定律
t=(1/K)*ln(N0/Nt)
=(2.303/K)*logN0/Nt t ：灭菌时间（ｓ）
N0:灭菌开始时原有菌数（个）Nt：灭菌结束时残留菌数（个），工业要求：Nt=0.001K:反应速率常数（菌比死亡率），1/S,，与灭菌温度，菌种有关。