实验室常用显色剂
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碘:适用于不饱和或者芳香族化合物
配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶
高锰酸钾:适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +200mL 水. 使用期3 个月
磷钼酸(PMA):广谱
配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇
紫外灯:适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物
硫酸铈::生物碱
配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁:苯酚类化合物
配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮):广谱, 有荧光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮:适用于氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP):适用于醛和酮
配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL乙醇
香草醛(香兰素):广谱
配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸
溴甲酚绿:适用于羧酸,pKa<=5.0
配制方法:在100ml 乙醇中,加入0.04g 溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH 水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈:广谱
配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1:广谱
配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2:适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)
实验室最常用的显色剂及配制方法
(1)硫酸(sulphuri acid)通用显色剂。
试液:
a、5%浓硫酸乙醇或乙酐溶液
b、浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合
c、15%浓硫酸正丁醇溶液
方法:用以上任一试液喷洒或浸湿晾干,于110摄氏度加热至呈色,或达最强荧光。
(2)碘(iodine)通用显色剂。
试液:
a:0.5%碘的氯仿溶液。
喷后处理:待薄层上过量碘挥散,喷1%淀粉溶液,斑点转为兰色,如有过量碘留在薄层上,则背景也呈兰色。
b:碘蒸气:将少许碘晶体放入一密闭的容器内,使之充满饱和碘蒸气,将薄层放入容器片刻或数分钟即显色。
有时在容器内放一小杯水增加湿度,可提高显色的灵敏度,可提高显色的灵敏度。
在化合物斑点处显黄-棕色。
(3)磷钼酸(molybdophosphoric acid)用于还原性化合物、类脂、甾体化合物等。
试液:5%或10%磷钼酸乙醇溶液喷或浸后处理:于120摄氏度加热至最佳颜色形成,如将薄层放入含25%氢氧化铵溶液的容器内,可使背景颜色消退。
(4)香草醛-硫酸(vanillin-sulphuric acid)用于精油、高级醇、酚等
试液:香草醛1g溶于100ml硫酸或香草醛0.5g溶于100ml硫酸-乙醇(1:1)溶液。
喷或浸后处理:于120摄氏度加热至颜色最深。
(5)三氯化铁(ferric chloride)用于酚类、羟酰胺酸。
试液:1%~5%三氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。
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注:酚类呈兰色或绿色,羟酰胺酸呈红色。
(6)三氯化铝(aluminium chloride)用于黄酮类化合物。
试液:1%三氯化铝乙醇溶液,紫外光长波下斑点显黄色荧光。
(7)碘化铋钾试剂(dragendorff reagent)用于生物碱和某些含氮化合物。
试液:a:次硝酸铋0.85g溶于10ml冰乙酸与40 ml水中。
b:碘化钾8g溶于20ml水中。
方法:试液a和b等量混合,置棕色瓶保存试液。
用前将试液1ml加2ml冰乙酸和10ml水混合。
注:显色斑点呈橙红色。
(8)茚三酮(ninhydrin)用于氨基酸、胺与氨基糖类
试液:茚三酮0.2g溶于乙醇100ml或溶于100ml正丁醇,加乙酸3ml。
喷或浸后处理:于110摄氏度加热至最佳颜色出现。
(9)邻苯二甲酸苯胺用于还原糖。
试液:苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml以水饱和的正丁醇中。
喷或浸后处理:于105摄氏度加热10min,醛己糖及甲基戊糖呈棕色,醛戊糖呈樱桃红色。