实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂的配制方法2×SDS gel-loading buffer10×PBS10×SDS-PAGE电泳液10×转膜液细胞裂解液□组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8),100mM DTT,2%SDS,0.1%Bromophenol blue,10%Glycerol□配制量 10ml□配制方法 DTT 0.1572g,Bromophenol blue 0.01g,Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul,10% SDS 2ml,Glycerol 1ml,超纯水定容至10ml。
分装后于4度保存。
□组分浓度 NaCl 8%,KCl 0.2%,Na2HPO4.12H2O 2.9%g,KH2PO4 0.2%g□配制量 1L□配制方法称取NaCl 80.0g,KCl 2.0g,Na2HPO4.12H2O29.0g,KH2PO4 2.0g,超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M,SDS 1%□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,SDS 10.0g,超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,超纯水定容至1L。
注意:1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液,200ml甲醇定容至1L。
□组分浓度 NaCl 150mM,NP-40 0.5%,Tris-HCl 10mM,PMSF 0.1mM, aprotimin 2ug/ml, NaN3 0.02%□配制量 100ml□配制方法称取17mgPMSF溶于1ml甲醇,2mg aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用;称取NaCl 0.88g,NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml,Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml,溶有PMSF的甲醇1ml,aprotimin储存液1ml,混匀溶解后超纯水定容至100ml。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
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实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。
3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
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实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
实验室常用试剂缓冲液配制
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实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
各种缓冲液配制方法
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各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂,可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸,加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至3.6之间,X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸,加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至3.8之间,X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法:根据上表中的数据,取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸,加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至8.0之间,具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中,正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章:柠檬酸的浓度可以用毫升表示,其浓度数据如下:9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4,其分子量为141.98,0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05,0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后,Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22,0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O,其分子量为210.14,0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据:pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L):10使用时可以每升中加入1克酚。
常用试剂及标准溶液的配制解析
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常用试剂的配制一、常用试剂的配制:1、100g/L 钼酸铵溶液:称取100 克钼酸铵于 500 毫升烧杯中加水溶液、移入 1 升,稀释至刻度,混匀。
〔如溶液浑浊,应过滤〕。
2、 200g/L 硫氰酸钾溶液:称取 200 克硫氰酸钾于 500 毫升烧杯中,溶解于水,移入 1 升容量瓶中,稀释至 1 升体积。
3、 50g/L 氯化钡溶液:称取50 克二氯化钡于 500 毫升烧杯中,溶解于水,移入 1 升容量瓶中,稀释至 1 升体积。
4、 100g/L 酒石酸溶液:称取100 克酒石酸溶于水中,移入 1 升容量瓶中,稀释至刻度。
5、 150g/L 氢氧化钾溶液:称取150 克氢氧化钾溶于水中,移入 1 升容量瓶中,稀释至刻度。
6、20g/L 二安替比林甲烷〔DAM〕溶液:称取出20 克二安替比林甲烷于烧杯中加水约200 毫升,再加1+1 盐酸333 毫升,搅拌溶解,继续加水稀至1 升,混匀,此溶液酸度为 2mol/L 。
保存于棕色瓶中。
7、氨性缓冲液〔 PH=10〕:称取 67.5 克氯化铵溶于 200 毫升水中,参加570 毫升浓氨水、稀释至 1 升。
8、醋酸——醋酸钠缓冲液〔〕。
称取无水乙酸钠 79 克〔或称取 150 克结晶醋酸钠 NaAC˙3H2O〕溶解于水,加7.7 毫升乙酸、稀至 1 升,用间隔为 0.2 的 PH试纸检验其 PH值。
9、硫酸——草酸——硫酸亚铁铵混合液:称取 30 克硫酸亚铁铵于 1 升烧杯中,加 150 毫升水,缓缓参加 166 毫升 1+1 的硫酸,搅拌使其溶解。
冷却后移入1 升的容量瓶中,再称30 克草酸于另一烧杯中,加热水溶解,冷却后移入上述容量瓶中,稀释至刻度、混匀。
10、邻菲啰啉—盐酸羟胺—醋酸—醋酸钠缓冲混合液。
称取 100 克无水醋酸钠〔或150 克结晶醋酸钠〕和5克盐酸羟胺,分别溶于水,另称 0.25 克邻啡啰啉溶于 15 毫升醋酸中,将三溶液混合,用水稀释 1 升、混匀。
实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。
下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。
配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。
-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xPBS。
配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。
- 加入0.1%(v/v)Tween-20。
-混合均匀。
配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。
-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。
-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xTBS。
2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。
配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。
-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。
-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。
-用去离子水稀释至所需浓度。
配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。
-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。
-加入1mM十二烷基硫酸钠。
-用去离子水稀释至所需浓度。
3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。
BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。
-加入0.1M硫酸(提取液B)。
-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。
Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。
-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。
-将A液倒入B液中混合,待用。
Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.离心管清洗液配制方法:将500mL蒸馏水加入500mL乙醇中配制而成。
2.TE缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
3.LB培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过,装入含有取10g搅拌均匀的琼脂糖的培养皿中。
灭菌后冷却到45°C左右,然后再倒入培养皿中。
4. 蒸馏水(Milli-Q水)配制方法:使用商用蒸馏水设备如 Milli-Q等,生成去离子水,再通过0.22 μm的滤器进行过滤,获得蒸馏水。
5. LB/Agar培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨、15g/L 琼脂加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过。
将过滤后的溶液倒入培养皿中,灭菌后冷却到45°C 左右。
1.TBE缓冲液配制方法:将1 M Tris-Borate 溶液、0.1 M EDTA 溶液、10% (w/v) Boric acid 溶液按5:19:75的比例混合,加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
2.TAE缓冲液配制方法:将40 mM Tris、20 mM 醋酸和1 mM EDTA 按1:0.5:0.1的比例混合,加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
3. Tris-HCl缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl 溶液加入蒸馏水,调整pH值至所需范围。
4.PBS缓冲液配制方法:将0.2g/LKH2PO4、0.2g/LNa2HPO4、8.5g/LNaCl和0.2g/LKCl加入1L蒸馏水中,调整pH值至7.45. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液)配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
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实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。
配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
各种缓冲液的配制方法
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各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中,为了稳定反应介质,保持反应环境不变,在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度,
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。
因此,缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。
以下是各种缓冲液的配制方法。
一、PBS缓冲液(磷酸盐缓冲盐水)
1、配制PBS缓冲液,准备好以下试剂:
10×PBS缓冲液:NaCl 80 g,KCl 2 g,Na2HPO4 14.4 g,KH2PO4 2.4 g。
用蒸馏水调节至1 L。
2、按照以下比例制备:
0.5×PBS缓冲液:10×PBS 50 mL,蒸馏水450 mL,混合搅拌均匀即可。
二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM,EDTA pH8.0 1 mM。
Tris-HCl pH7.4,Tris-HCl pH8.0,Tris-Cl pH8.0,Tris-HCl pH8.3,Tris-HCl pH8.5,Tris-HCl pH8.8,Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5:Tris 7.4 g,NaCl 8.8 g,HCl 2 mL,蒸馏水至1 L。
MES 20 mM,NaOH 0.5 M,NaCl 100 mM。
七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M,NaOH。
HEPES缓冲液:HEPES 1 M约5 mL,NaOH 2 M溶液若干,蒸馏水至100 mL。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
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实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
Kan(卡那霉素)50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,定容至50mL。
3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone(胰化蛋白胨)10gYeast Extract(酵母提取物)5gNaCl(氯化钠)10g2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后,4℃保存。
常用电泳试剂配制方法
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常用电泳试剂配制方法电泳试剂是在蛋白质或核酸电泳实验中使用的一系列化学试剂。
常用的电泳试剂包括缓冲液、凝胶、加载缓冲液、电泳盐溶液等。
以下是常用电泳试剂的配制方法。
一、缓冲液的配制方法:1.TAE缓冲液TAE缓冲液配方:0.04M缩醛酸,0.001M乙酸,0.001MEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,加入乙酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
2.TBE缓冲液TBE缓冲液配方:0.089M缩醛酸,0.089M硼酸,0.002MEDTA,pH8.3配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.3,加入硼酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
3. Tris-EDTA缓冲液 (TE缓冲液)TE缓冲液配方:10mM缩醛酸,1mMEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,然后加入EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
二、凝胶的配制方法:1.聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶配方:30%丙烯酰胺,0.8%季铵盐,1M缓冲液,10%过硫酸铵。
配制方法:将丙烯酰胺溶解在适量的蒸馏水中,加入季铵盐,搅拌均匀后加入缓冲液,最后加入过硫酸铵,混合均匀后注射到凝胶板中,等待凝固。
2.熔融琼脂糖凝胶熔融琼脂糖凝胶配方:1%琼脂糖,1×TAE缓冲液。
配制方法:将琼脂糖溶解在适量的蒸馏水中,加热至完全融化,冷却至60-70°C后加入TAE缓冲液,混合均匀后倒入凝胶板中,等待凝固。
三、加载缓冲液的配制方法:1.6×加载缓冲液6×加载缓冲液配方:40%甘露醇,0.25%溴酚蓝,一定量的TAE或TBE缓冲液。
配制方法:先将甘露醇溶解在适量的蒸馏水中,加入溴酚蓝,搅拌均匀后加入适量的TAE或TBE缓冲液,混合均匀后即可。
四、电泳盐溶液的配制方法:1.DNA电泳盐溶液DNA电泳盐溶液配方:1×TAE缓冲液。
常用缓冲溶液的配制方法
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常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液,用于调节溶液的pH值,使其保持在特定的pH范围内。
常用缓冲溶液的配制方法有许多种,下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。
一、Tris缓冲液配制方法:Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:Tris碱(Tris base,化学名三羟基甲基氨基甲烷)。
2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱,并将其溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的Tris碱溶液。
3. 调节溶液pH值:使用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节Tris溶液的pH值。
通常,Tris缓冲液的pH范围为7-9,具体的pH值取决于实验的要求。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积,通过加入蒸馏水来调节。
二、Phosphate缓冲液配制方法:Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液,其配制方法如下:1.准备所需的试剂:磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)。
2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。
3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积。
三、Acetate缓冲液配制方法:Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液,在酶反应、DNA电泳等实验中常用,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:乙酸(Acetic acid)和醋酸钠(Sodium acetate)。
2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。
3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
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实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。
常用试剂包括化学品、酶、抗体等。
缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。
下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。
其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。
2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。
其配制方法如下:(1) 准备500ml容量瓶,称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。
3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。
其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。
4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。
其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取0.25g的碘固体,并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。
缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液,常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。
以下是几种常用缓冲液的配制方法:1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。
(2)打开pH计,将电极插入去离子水中进行校准。
(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。
(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中,搅拌溶解。
(5) 加入约5ml盐酸,搅拌均匀,并用盐酸调节溶液至所需pH值。
2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。
(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。
(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中,搅拌溶解。
(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。
3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。
超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法
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实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6,8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中,加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法
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分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法:(1)磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法:-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。
-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液,然后稀释为需要的浓度。
-例如,1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。
(2) 神经元无血清培养基(Neurobasal Medium)的配制方法:- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。
-根据制造商提供的配方,按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。
-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。
(3) 洗涤缓冲液(Washing Buffer)的配制方法:-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液(PBS)及其他添加剂。
- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。
-根据实验需求,可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。
(4) 乙醇(Ethanol)溶液的配制方法:-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。
- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。
-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。
2.常见缓冲液配制方法:(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris(三羟甲基氨基甲烷)和Tricine(三甘胺酸)等化学品。
- 根据实验要求,在一定PH范围内,按照不同比例混合Tris和Tricine,溶解于适量的蒸馏水中。
(2) 氯化钾缓冲液(KCl Buffer)的配制方法:- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。
-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。
-根据实验要求,调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。
(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。
常用试剂、溶液及缓冲液的配制
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常用试剂、溶液及缓冲液的配制1常用试剂、溶液及缓冲液的配制1.基本要求分子生物学所用试剂必须是分析纯或分子生物学试剂级。
溶液配制水尽可能使用灭菌、蒸馏、去离子水(建议用Milli-Q过滤系统或类似系统进行过滤)。
除非有特殊的说明,大部分配制的溶液需用0.22um孔径滤膜过滤除菌或者高压灭菌(15psi,121℃,20~30min)。
使用高压灭菌的水、灭过菌的容器以及灭过菌的贮液来配制溶液,会延长所配制溶液的使用时间。
用干燥的化学试剂和无菌水配置的溶液一般都不需要在灭菌;有些酸、碱和一些有机化合物溶液也不需要灭菌,因为微生物不能在这些溶液中生长。
制备的溶液应该分成小分保存。
如果没有特别说明,则所有贮液和缓冲液至少能在室温下贮存六个月。
作为贮液应贮存在4℃或-20℃,使用时取出到达到室温后再开启,以防止试剂内的缩合作用,以确保度数精确。
以质量浓度表示的溶液浓度是指在100ml溶液中溶质的质量,质量单位为g;以体积分数表示的溶液浓度是指总体积为100ml溶液中各组分成分的体积,体积单位为ml。
缓冲液的ph为25℃是溶液的ph。
2.浓酸及碱的摩尔浓度溶液质量分数/% 浓度/mol/L冰乙酸甲酸盐酸硝酸磷酸硫酸氢氧化铵氢氧化钾氢氧化钠 90~100903670859528(NH3)505017.423.411.615.714.61814.813.519.13.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(spermidine)溶解2.55g亚精胺(相对分子质量为254.6)于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份。
贮存于-20℃.不须将溶液灭菌1mol/L精胺(spermine)溶解3.48g精胺(相对分子质量为348.2)于足量水中,使终体积为10ml,分装为小份贮存于-20℃.不须将溶液灭菌。
10mol/L乙酸铵(ammonium acetate)将77.1g乙酸铵(相对分子质量为77.1)溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。
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实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl (pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL 的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 □配制量1L□配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。
NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵□配制量100mL□配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL 的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。
同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。
因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。
所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。
从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。
②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。
该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。
有助于方便识别有机相。
③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。
④重复操作步骤③。
⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。
⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。
⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。
⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
8、苯酚/氯仿/异戊醇□配置方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。
氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
9、10%(W/V)SDS□组份浓度10%(W/V)SDS□配制量100mL□配置方法1.称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL 的去离子水,68℃加热溶解。
2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。
10、2 N NaOH□组份浓度2N NaOH□配制量100mL□配置方法1.量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。
4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。
11、2.5 N HCl□组份浓度2.5 N HCl□配制量100mL□配置方法1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸(11.6N),均匀混合。
2. 室温保存。
12、5 M NaCl□组份浓度5 M NaCl□配制量1L□配置方法1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后,4℃保存。
13、20%(W/V)Glucose□组份浓度20%(W/V)Glucose□配制量100mL□配置方法1. 称取20g Glucose置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水后,搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100mL。
3. 高温高压灭菌后,4℃保存。
14、Solution I□组份浓度25 mM Tris-HCl(pH8.0),10mM EDTA,50mM Glucose(质粒提取用)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1M Tris-HCl(pH8.0)25mL0.5 M EDTA(pH8.0) 20mL20%Glucose(1.11M) 45mLdH2O 910mL2. 高温高压灭菌后,4℃保存。
3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A (20mg/mL)。
15、Solution II□组份浓度250mM NaOH,1%(W/V)SDS (质粒提取用)□配制量500mL□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。
10%SDS 50mL2N NaOH 50mL2. 加灭菌水定容至500mL,充分混匀。
3. 室温保存。
此溶液保存时间最好不要超过一个月。
注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。
16、Solution III□组份浓度3M KOAc,5M CH3COOH (质粒提取用)□配制量500mL□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。
KOAc 147gCH3COOH 57.5mL2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500mL。
4. 高温高压灭菌后,4℃保存。
17、0.5M EDTA□组份浓度0.5 M EDTA (pH8.0)□配制量1L□配置方法1. 称取186.1g Na2EDTA•2H2O,置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值值8.0(约20g NaOH)。
注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1L。
5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。
6. 室温保存。
18、1 M DTT□组份浓度1 M DTT□配制量20mL□配置方法1. 称取3.09g DTT,加入到50mL塑料离心管内。
2. 加20mL的0.01 M 的NaOAc(pH5.2),溶解后使用0.22μm 滤器过滤除菌。
3. 适量分成小份后,-20℃保存。
19、10mM ATP□组份浓度10mM ATP□配制量20mL□配置方法1. 称取121mg Na2ATP•3H2O,加入到50mL塑料离心管内。
2. 加20mL的25mM Tris-HCl(pH8.0),搅拌溶解。
3. 适量分成小份,-20℃保存。