菌 产 纤 维 素 酶

菌 种 组 合
优秀菌株的获得
分离 筛选：纤维素选择培养基法、滤纸底物和纤 维素天青培养基法、半固体纤维素天青试管 法、《P2N》法和纤维素刚果红培养基法 。 纯化：单菌落反复划线纯化，显微镜检，直 得纯菌株 诱变育种 ：紫外线诱变 、原生质体融合 、 利用基因工程技术构建纤维素降解菌。（诱 变菌株高产菌株筛选及其稳定性试验）
菌株产酶条件研究
培养温度对产酶的影响 培养基初始p H 值对产酶的影响 接种量对产酶的影响 菌龄对产酶的影响
酶活的测定
酶活：国际单位为依据，定义每分钟催化纤维素水 解生成 1 μmol 葡萄糖的酶量为个酶活力单位（IU）。 测定纤维素酶活力时，常以CMC 酶活力和FPA 表 示 。其中PFA 可表征菌株分解纤维素的能力及其纤维素 酶系的协同作用 。
菌产纤维素酶
纤维素酶的获得：固体发tate Fermentation，SSF）是指 利用不溶性原料作为固体支持物和营养物质， 体系无 自由流动液体，在其上进行的任何发酵过程。具有能 耗小、成本低等优点。 液体发酵：实验过程中多用摇瓶液体发酵获得酶 液用以检测酶活以达到检测菌株产酶的能力。
内切纤维素酶活 (CMC 酶活) 内切纤维素酶活（Cx 酶 ） 滤纸酶活 (FPA 酶活)
形态学和生理生化特征：微生物分类和鉴定 的重要依据之一。原因：一是易于观查和比 较；二是许多形态学特征依赖于多基因的表 达，具有相对稳定性。 血清试验与噬菌体分型 ：血清试验—包括凝 集反应、沉淀反应、补体结合、免疫荧光抗 体技术、酶联免疫以及免疫组织化学等方法 。 噬菌体分型 —噬菌体对宿主的感染和裂解作 用常具有高度的特异性 。 氨基酸顺序和蛋白质分析 核酸的碱基组成和分子杂交
菌种鉴定
工业化生产
高产菌株从实验室走向工业化、产业化， 其生产条件的优化仍需大量工作！
谢 谢！
菌产纤维素酶降解 秸秆纤维素
邓 晨 李旭婷 麻贝贝 张娟娟
生 物 系
08 级 4 班
秸秆与纤维素
纤维素是由D-葡萄糖以β-1,4 糖苷键结合起来的链状 高分子化合物，基本重复单位为纤维二糖，具有不 溶性的刚性结构，在常温下不溶于水、也不溶于稀 酸和稀碱，在自然条件下分解缓慢 秸秆主要组分包括纤维素、半纤维素和木质素,其中 纤维素是制约秸秆降解的重要因素. 秸秆利用预处理：粉碎与研磨、高压蒸汽爆破、热 解、碱处理、酸处理、氧化处理、生物处理以及几 种方法的联合。
真菌
所有能分解晶体纤维素的真菌，均能或多 或少地分泌纤维素酶，所以纤维素酶的真菌源 非常广泛。
目前研究和生产中采用的菌种大多是木 霉、曲霉和青霉等。 制成酶制剂的有绿色木霉、黑曲霉、镰 刀霉、拟青霉和斜卧青霉等的纤维素酶。
混合菌种组合 ：利用单菌或单酶对未经处
理的纤维素材料进行降解非常困难。因此,在自 然状态下彻底降解纤维素,要充分重视多种微生 物之间的协同作用 。 里氏木霉+黑曲霉 木霉+黑曲霉 绿色木霉+产朊假丝 木霉+青霉 酵母 细菌+放线菌 绿色木霉+黑曲霉 细菌+细菌 黑曲霉+烟曲霉+酵 母
纤维素酶
纤维素酶分类 ：根据酶功能分为3 大类：葡 聚糖内切酶、葡聚糖外切酶、β-葡萄糖苷酶。 纤维素酶作用机理：C1-Cx假说 、 协同理论、 原初反应假说、短纤维形成理论和其他理论。 纤维素酶的来源： ①真菌 ②细菌 纤维素酶的应用：青贮饲料、反刍动物生产、 猪、禽、水产养殖、 食品加工及酿造业等。 纤维素酶的应用前景。
纤维素
纤维素是由D-葡萄糖以β-1,4 糖苷键结合起 来的链状高分子化合物，其基本重复单位为纤 维二糖，具有不溶性的刚性结构，在常温下不 溶于水、也不溶于稀酸和稀碱，在自然条件下 分解缓慢。
秸秆利用
秸秆是一种丰富的纤维素可再生资源，我国 农作物秸秆年产量逾6 亿t，除少量被用于造纸、 纺织等行业或用作粗饲料、薪柴外，大部分以 堆积、荒烧等形式直接倾入环境，造成极大的 污染和浪费。能源紧张、粮食短缺及环境污染 日趋严重是目前世界各国所面临的难题。而可 再生资源的转化利用，能在有利于生态平衡的 条件下缓解或解决问题。
产纤维素酶菌种
菌种来源：菜园土、森林土、稻田土、朽木、 腐烂秸秆和牛粪堆肥等。 产纤维素酶主要菌种 ：①细菌②真菌 降解纤维素菌种组合：获得混合菌种的方法 主要有两种：一种是直接筛选复合菌剂，另 一种是选取一些功能菌株进行组合。
细菌
目前为人们研究较多的微生物中， 细菌类有红黄纤维弧菌、普通纤维弧菌、 纤维单胞菌属瘤胃球菌、镰状纤维菌和 嗜纤维菌、多囊粘细菌、假单胞菌、荧 光极毛杆菌。 此外,放线菌中的黑红旋丝放线菌、 玫瑰色放线菌和纤维放线菌。