芦丁的提取及抑菌活性研究进展
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芦丁的提取及抑菌活性研究进展
王金宏;潘琪;石铄桐;彭晓丹;于宛鑫;祖晓宁
【摘要】目的:综述芦丁的多种提取方法以及其具有的抑菌活性.方法:采用碱提酸沉法、超声波提取法、连续萃取法、微波提取法、酶法提取、内部沸腾法、超临界流体萃取法等来提取芦丁;用芦丁稀土钐配合物及芦丁铬配合物来研究芦丁抑菌活性.结果:目前共有7种成熟的实验方法用来提取芦丁,芦丁中芦丁稀土钐配合物及芦丁铬配合物的抑菌活性最好.结论:通过研究芦丁的提取分离方法和抑菌活性进展情况,不仅为芦丁的工业化生产和芦丁的实验室研究提供了理论依据,而且丰富和提升了中药现代化剂型的研究基础.
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2018(031)001
【总页数】3页(P22-24)
【关键词】芦丁;提取;抑菌
【作者】王金宏;潘琪;石铄桐;彭晓丹;于宛鑫;祖晓宁
【作者单位】哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院哈尔滨150076
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
芦丁(Rutim)亦称芸香甙(Rutinoside)、紫槲皮苷、维生素P、芸香叶苷、路丁及络通。
芦丁广泛存在于植物中,现已发现含芦丁的植物至少70种以上,如槐花、荞麦和蒲公英均含有,槐米含量较高,不少于20.0%[1]。
芦丁,化学名称为5,7,3’,4’-四羟基-3-芸香糖黄酮,分子式为C27H30O16·3H2O,相对分子质量为610.51,其结构是由槲皮素C3位上的羟基和芸香糖结合而形成的双糖,其性
状为黄色结晶粉末或无晶形粉末,常含有3个结晶水,味苦,置空气中颜色变深,熔点176-178℃。
芦丁略溶于水,易溶于甲醇,能够溶于吡啶、碱性溶液、沸水,不溶于苯、醚、氯仿、石油醚等物质[2]。
本文对芦丁的提取方法及抑菌活性的研
究现状进行总结概述,旨在为芦丁的进一步研究提供参考。
1 芦丁的提取方法
1.1 碱提酸沉法
洪军等[3],采用碱提酸沉法,取槐米适量于圆底烧瓶中,加入一定量饱和氢氧化
钙和少量硼砂,将pH调至8-9后,再煮沸并过滤,滤渣重复上述操作,合并滤液,盐酸调pH至4,静置4h,过滤沉淀吸除上清液,将沉淀物反复水洗至中性,经干燥得芦丁粗提物。
此法具有装置简单、操作方便、高效、费用和成本低等特点。
1.2 超声波提取法
付起凤[4]等利用正交试验的方法来优选出提取槐米中芦丁的最佳工艺,研究发现
超声法提取槐米中芦丁是最佳工艺,在固定料液比是1:20,超声频率为40kHz,
提取温度为70℃,提取时间为20min,提取功率为400 W的条件下,提取效果
最佳。
1.3 连续萃取法
李玉山等[5]将槐米用碳酸氢钠和烷基酚环氧乙烷处理后,蒸煮杀酶,用石灰水提取,收率可达22%,含量达98%。
芦丁与芸香酶共同存在于槐米中,芸香酶具有
特异性催化作用,高温可促使其失活,从而避免提取过程中芦丁的水解。
芦丁有4个酚羟基,所以显弱酸性,用碱性较强的饱和石灰水作为溶媒,有利于芦丁成盐溶解,而且还可除去槐米中的大量多糖黏液质。
连续萃取法提取芦丁的新工艺已经应用于工业化生产。
生产实践证明,此法工艺流程短、操作简单、提取率高、含杂质少、残渣少、耗能小、经济和社会效益显著。
但是萃取液的体积较大,后处理费用较高。
1.4 微波提取法
舒俊翔[6]等精密称取槐米细粉1g,加蒸馏水100ml浸泡30min,置于微波炉内加热至沸,再以功率450W的条件下提取10min,待样品温度冷却至室温后再次提取,提取3次,合并提取液,过滤并浓缩定容到100mL。
此法槐米中所提取的芦丁含量高达14.66%。
利用微波提取,其时间远远比传统提取时间短,提取率高且含量也高。
1.5 酶法提取
舒俊翔[6]等用放射元素Co-60产生放射线M照射,使槐米中的酶灭活,使用的缓冲剂为硼砂,亚硫酸氢钠为抗氧化剂,使用饱和石灰水为溶剂提取。
此法芦丁的含量大于95%,提取率达85%。
此工艺产品不需用乙醇或者热水重结晶,质量即可符合标准。
1.6 内部沸腾法
张艳丽[7]等采用内部沸腾法提取槐米中的芦丁,单因素实验结果得到内部沸腾法的提取条件为:乙醇体积分数为80%,液料比为2.4 mL/g,提取30min,提取剂乙醇体积分数为10%,液料比为16 mL/g。
通过对内部沸腾法提取动力学的研究表明,其提取过程是吸热熵增加的过程,G小于零,为自发过程,综上所述,此方法大大降低了乙醇水溶液的用量,并且芦丁的本质是以对流传质的方式进行的,所以在提取过程中减少了能量的消耗。
1.7 超临界流体萃取法
超临界流体(supercritical fluid,SF)是指某种气体(液体)或气体(液体)混合物在操作压力及温度均高于临界点时,使其密度接近液体,而其扩散系数和黏度均接近气体,其性质介于气体和液体之间的流体。
从超液体中萃取出某些有效组分,并进行分离的一种技术就是超临界流体萃取法。
此法具有萃取和分离的双重作用,物料无相变过程因而节能明显,工艺流程简单,萃取效率高,无有机溶剂残留,产品质量好,无环境污染。
首先将适量槐米装入萃取器中,然后抽真空达到脱氧的目的,在适宜的压力、温度和二氧化碳的条件下,进行萃取,然后进行分离,最后得到目标提取物。
2 芦丁及其配合物抑菌活性
2.1 芦丁抑菌活性
王亚男等[8]通过凝集试验和蛋白结合试验对芦丁的抑制活性进行菌体内评价,还
通过蛋白免疫印迹观察芦丁是否在抑制SrtA活性的同时影响SrtA的表达。
结果
表明芦丁可以通过抑制SrtA的活性显著抑制金黄色葡萄球菌的凝集反应。
蛋白结合试验结果表明,不同浓度的芦丁对金葡菌的黏附具有抑制作用,呈剂量依赖关系。
金葡菌在64μg/mL芦丁作用下,对纤维蛋白原和纤连蛋白的黏附率分别下降了72.03%和65%,进一步验证了芦丁的抑菌活性。
赵强等[9]通过正交试验优选了紫花苜蓿中芦丁的提取工艺,并进行了体外抑菌活
性测定。
试验表明,紫花苜蓿芦丁提取液对大肠埃希氏杆菌的MIC为
0.40mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC为0.70mg/mL,抑菌效果较为明显。
2.2 芦丁稀土钐配合物的抑菌作用
林建原等[10]选用大肠杆菌(革兰氏阴性菌)、金黄色葡萄球菌(革兰氏阴性菌)进行
抑菌实验,实验发现,稀土钐芦丁配合物的抑菌效果随着配合物浓度的增加抑菌活性明显增大,MIC可达2.6x10-3mg/mL。
2.3 芦丁铬配合物的抑菌作用
李艾华等[11]合成芦丁铬配合物,通过UV、IR和TGDTA等方法对合成产物的结构进行了表征。
主要对芦丁铬+鱼腥草提取物的抑菌作用进行了研究,结果:芦丁铬组合物的抑菌作用最强,并且联合抑菌有增效作用,同时抑菌作用随浓度增大而增强;抑菌效果在pH为6时最佳。
近年来抗菌药物的耐药性日益严重,必须加快新型抗菌药的开发和应用。
作为一种具有广阔开发前景的药用植物活性成分—芦丁的药理活性强,毒性低,广泛存在于植物界,储量大。
相信随着天然药学药物化学和现代制剂技术的快速发展,会有更为广阔的应用前景。
参考文献
[1] 国家药典委员会编.中国药典[S].中国医药科技出版社,2015第一部:354.
[2] 尤洁.槐米中芦丁的提取条件研究[J].亚太传统医药,2016,12(13):43-44.
[3] 洪军,胡晓稳,王佩,李丹丹.槐米中芦丁的提取及抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2015,(15):16-18.
[4] 付起凤,王德娟,孟凡佳.正交法优化槐米中芦丁的超声提取工艺[J].中医药信息,2012,29(6):49-52.
[5] 李玉山.芦丁的提取纯化及其衍生物的制备工艺研究[J].中国药
房,2014,(27):2587-2590.
[6] 舒俊翔,王峥.槐米中芦丁提取纯化工艺研究进展[J].湖南科技学院学
报,2016,37(05):44-46.
[7] 张艳丽,符华林,卢朝成,等.内部沸腾法提取槐米中的芦丁及其动力学和热力学研究[J].中成药,2015,37(4):895-898
[8] 王亚男,柳秉润,邓旭明,等.芦丁对金黄色葡萄球菌SortaseA的抑制作用[J].吉林农业大学学报,2013,35(3):303-307.
[9] 赵强,赵海福.紫花苜蓿中芦丁的提取及抗菌活性研究[J].中国奶牛,2013,20:25-27.
[10] 林建原,陆兴.芦丁稀土钐配合物的自由基清除及抑菌作用[J].天然产物研究与开发,2013,25(10):1334-1338,1356.
[11] 李艾华,郭艳华,张玉敏,等.芦丁铬配合物的合成及组合物的抑菌作用研究[J].天然产物研究与开发,2016,28(4):551-555,541.。