慢性自发性荨麻疹患者血清IL-12、IL-4、总IgE水平及其与病情的相关性

HEILONGJIANGMEDICINEANDPHARMACYApr.2018，Vol.41 No.2•81 •
慢性自发性荨麻疹患者血清I L - 12、I L - 4、总I g E水平
及其与病情的相关性①
庞纯,赵晓秋，朱林娜,张雁来
(佳木斯大学附属第一医院皮肤科，黑龙江佳木斯154003)
摘要：目的：探讨I- 12、IL-4及总I g E水平与慢性自发性荨麻疹发病机制的关系及其与病情的相关性。

方法：采用 E L IS A法和免疫比浊法，检测90例慢性自发性荨麻疹患者（其中病情轻中重各30例）及30例健康人血清中IL-12、IL-4和 总I g E水平。

结果：实验组I L-4、总I g E水平升高而I L-12水平降低（P均< 0.05),且与病情相关（P< 0.05)。

结论:慢性 自发性荨麻疹的发病可能与细胞免疫低下及体液免疫亢进有关。

关键词：慢性自发性荨麻疹;IL- 12;IL-4; IgE
中图分类号：R758.24文献标识码:A文章编号：1008 -0104(2018)02 -0081 -03
皮肤科最常见的疾病莫过于变态反应性疾病，而慢性自发性等麻修（chronic spontaneous urticaria，C S U)作为其中一种较为常见、不难诊断，但治疗效 果却不甚理想的病种，具有比较典型的临床表现:6口不明原因出现的风团样皮损，速起速消，伴有不同程 度的瘙痒，伴或不伴血管性水肿，持续发病大于6 周，除外慢性可诱导性荨麻疹与荨麻疹性血管炎[1]。

关于C S U的发病机制迄今尚未能完全阐明，但以自身免疫为突破口是众多学者的选择。

本文通 过测定C S U患者体内IL-12、IL-4,以及总I g E的表达并结合临床症状进行分析，探讨以上3种细胞 因子在C S U发病中的作用，现报道如下。

1资料与方法
1.1 一般资料
90例C S U患者（病情按U A S7评估法分为轻中 重，各30例）来自于2016 - 12 ~ 2017 - 05本院皮肤 科门诊的就诊患者，均符合C S U诊断标准[2]。

入选 条件:（1)1周内未使用抗组胺药物且1个月内未使 用糖皮质激素和（或）免疫抑制剂；（2)无其他免疫 相关性疾病；（3)无严重心、肝、肾等主要器官的病 变；（4)无恶性肿瘤病史。

其中男32例，女58例，年龄16 ~79岁，平均39. 2岁；病程6周~12年，平 均13. 4个月。

同时随机选取30例本院体检中心体 检结果正常，无过敏相关的疾病史、无感染、自身免 疫病和肿瘤的健康人，作为对照组;其中男11例，女 19例，年龄25 ~48岁，平均36. 8岁。

采血留样均 经过研究对象的知情同意。

1.2 病评分判定标准
采用 U A S(urticaria activity score,U A S)7 评估 法评估患者1周内风团数目和瘙痒程度（表1)评 分相加即为总分。

1〜14分为轻度；15〜29分为中 度以及30〜42分为重度[3]。

轻度C S U组评分均数 为（9 ±4)分，中度C S U组评分均数为（19. 5 ±6) 分，重度C S U组评分均数为（34.5 ±4)分。

1.3试剂和仪器
人IL- 12，IL - 4 E L I S A试剂盒均购自杭州联科生物技术股份有限公司；总免疫球蛋白E检测试 剂盒（免疫比浊法）购自贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司。

仪器:Immage 800免疫双光径比池分析 仪(美国贝克曼库尔特公司生产）。

1.4 C S U评分标准
见表1。

表1C S U评分标准
评分
风团数目
(24h)
瘙痒程度
0无无
1<20轻度，有瘙痒，不明显
220-50中度，有明显瘙痒，但不影响日常生活和睡眠
3>50重度，重^痒，不能忍受，严重影响日常生活和睡眠1.5标本的检测与收集
于清晨空腹采取受试者静脉血3m L，室温凝固 30m i n，2000r/min 离心 10m i n，取上清液 0.5m L，E P 管分装、标号，置于-80°C冰箱中冻存，待测。

测定 血清IL- 12，IL- 4及总I g E的浓度，操作步骤严格 按照E L I S A试剂盒及总免疫球蛋白E检测试剂盒 的说明书进行。

通过曲线回归方程计算出待测孔人1-12及I-4浓度;根据样本的吸光值在标准曲 线上找到相应的I g E浓度。

1.6统计学方法
采用SPSS24.0软件进行数据分析。

检验比较 实验组与对照组两独立样本数据;Spearman等级相 关检验分析IL - 12、IL - 4及总IgE二者水平与病 情严重等级之间的相关性。

2 结果
2.1 E L I S A及免疫比浊法检测结果
实验组血清中I- 12水平较对照组降低，差异 有统计学意义（F = 0.097 =0.014) ;I L-4、IgE 水平增高，与对照组比较差异有统计学意义
①作者简介:庞纯（192〜）女，湖北咸宁人，在读研士研究生。

通讯作者:赵晓秋（I960 ~ )女，黑龙江佳木斯人，硕士，主任医师，教授，硕士研究生导师。

E- m ail:zhaoxiaoqiu@163. com 。

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(F = 15. 812,P = 0.021；F = 1.744,P = 0.045), 见表2。

I L-12含量随着病情的加重而减少，呈负 相关（=-0.372;P= 0.000); I L-4、IgE水平随 病情的加重而升高，呈正相关（=0.190, P = 0.037 ; = 0.354，P = 0.000)，见表 3。

表2 C S U与正常对照血清I L-12J L-4
及总I g E水平（x ± s )
组别 例数 IL-12(pg/mL)IL-4(pg/mL)IgE(IU/mL)
对照组 30 2.05 ±0.64 2.91 ±0.74 85.55 ±26.46
实验组 90 1.72±0.59* 3.37 ±1.27* 100.58 ±37.36*
注：P < 0.05 ,< 0.01
表3血清IL- 12、IL-4及总I g E水平
与C S U患者病情的相关性（x ± s
病情IL- 12( pg/mL)IL-4(pg/mL)IgE(IU/mL)
对照 2.05±0.64 2.91 ±0.7485.55±26.46
轻195 ±0.65 3.07±1.0390.94±33.98
中 1.71 ±0.56 3.50±1.3297.18±32.39
重 1.51±0.48 3.52±1.38113.62±36.83
r-0.372* *0.190*0.354**
注：*P < 0.05 ,** P < 0.01
3讨论
C S U患者用药依从性较差，病情易反复，治疗棘 手，严重影响了患者的生活质量。

在世界人群中的 发病率为0.1%，病因复杂，而自身免疫因素在C S U 发病机制中处于一个极为重要的位置[4]。

机体要 维持正常的生理功能，便要准确识别“自己”并且排 除“异己”，因此一旦免疫异常，机体内环境紊乱，便 会导致各种疾病的发生。

在C S U的发病过程中，内环境的稳态发生了变化，在各种可溶性分子的影响 下，由Th0分化而来的T h1与Th2细胞的相对平衡 状态被打破，I型速发型变态反应的增强，相关效应 细胞活化导致组胺等炎症介质的释放，均可能导致 无明显诱因的风团样皮损的出现。

其中较为具有影 响力的I- 12、IL - 4可分别促进T h1与Th2细胞 分化;I g E可介导I型速发型变态反应并活化相关 效应细胞，引起组胺等一系列炎症介质的释放。

故 本文通过检测以上三种因子，结合病情以探讨其在 C S U发病机制中的作用。

本项实验研究的结果示:相对于正常对照组，实 验组血清中I- 12水平明显降低，且病情越重其水 平越低，而I L-4水平升高，浓度越高病情越重。

IL -12是由T h1辅助细胞分泌且能促使Th0继续向 T h1分化的多功能免疫影响因子。

它的产生不仅增 加了 N K细胞的数量与其毒性，强化非特异性免疫; 又可调控特异性免疫，其中包括通过促进T h1细胞 的分化和增殖而增强的细胞免疫，和通过抑制I- 4、L-5等Th2型细胞因子的分泌以部分削弱的体 液免疫。

I-4是Th2辅助细胞产生的细胞因子中 的典型代表[5]，在其表达过程中，可刺激Th2细胞 持续表达I- 4,形成正反馈;而且还能导致已形成 的T h1型细胞因子向Th2型细胞因子模式转化[6]，以此通过对Th2细胞强有力的催化以增强体液免疫;另外IL-4还能作用于B细胞，增强I g E反应从 而进一步促进体液免疫[7]，因此是体液免疫的重要 强化因子。

还值得一提的是，I -4可通过B细胞 对T h1细胞的功能产生影响，也可以抑制T h1型细 胞因子I-12的啐受体的表达，阻断IL- 12信号 传导通路，抑制其生物学作用，以此抑制细胞免疫。

由此本文推测I- 12、IL -4 一方面可直接通过调 节细胞免疫及体液免疫以引起机体各种免疫反应异 常;另一方面还能间接通过调节T h1与Th2的分化 从而影响T h1 -Th2细胞的平衡等多方面参与C S U 发病过程。

另外，有学者报导C S U患者体内T h1型 细胞因子I-15[8]、L-2[8]的水平降低；有Th2型 细胞因子I L-4的高表达[7’9]。

可见，在C S U患者 体内普遍存在着Th0向T h1、Th2分化的失衡，可是 关于T h1 -Th2细胞失衡以及各种细胞因子的表达 异常，两者之间的影响与被影响的关系尚不明确;但 已知的是两者均可通过各种途径从某种程度上对细 胞免疫及体 免疫 生影响。

C S U患者首次接触过敏原后刺激机体体液免疫产 生I E，其作为肥大细胞的重要活化因子之一，可与细 胞膜表面上的高亲和力受体(FcsI)结合，使机体致敏; 当同种过敏原帮欠侵入机体便可刺激效应细胞迅速脱 颗粒，引起包括组胺、白三烯等在内的一系列炎症介质 的释放，然后作用于全身皮肤黏膜处的血管，使血管通 透性增强、毛细血管扩张，引起真皮水肿而临床表现为 风团样皮损，导致C S U的发病。

本实验中，实验组IgE 水平明显高于对照组，提示C S U患者体内存在着高水 平的I g E，但也有部分研究表示并不是所有的C S U患 者体内均存在的I g E的高表达，猜测可能与其只影响 疾病的某 分发病过程有 ，不 IgE 在 C S U 发病过程中的作用。

I-4作为I g E的主要调控因子 之一，可以上调机体血清中的总IgE水平，它对I g E的调节包括转换抗体的类别，即诱导B细胞分泌IgG，而 后向IgE特异性转变。

而IL-12可从某种程度上可抑 制B细胞分泌IgE，有学者[10]认为哮喘发作期患者的 高IgE水平是由于IL-12减少所致。

因而IgE作为体 液免疫的重要参与因子，I-4作为体液免疫应答的主 要促进因子，两者的高表达提示着体液免疫的亢进，而 低浓度的I-12从一定的程度上代表着细胞免疫应答 的功能低下。

所以笔者认为在C S U发病过程中，细胞 免疫低下与体液免疫亢进可能互为因果的影响着C S U 的病情发展经过。

但两者之间的始动关系还有待学者 们的进一步研究。

另外，本项实验还观察到实验组血 清中总IgE与IL-4的表达随着病情程度的加重而增 加，@C S U患者病情发展变化与血清I g E及IL-4 的表达密切相关，这与K essel等人[11]研究结果相符，这 也为评估患者的预后提供了一定的参考依据。

基于 I g E可能参与C S U的发病并且加重病情这一理论，S i l­va等[12]研究奥马珠单抗 (抗 IgE抗体) 在临床上治疗 性慢性荨麻疹的疗效，得到了肯定的答案，表明拮抗
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IgE，有利于C S U患者病情的恢复;也从某种程度上提 示着高水平的I E可能在部分C S U患者的发病过程中 占主导地位。

综上，以IL - 12为代表调节的细胞免疫低下，以及以IL-4为代表调节的、I g E介导参与的体液免 疫亢进，对于C S U的病情演变过程有着一定程度的 影响。

在C S U患者的发病过程中，细胞因子之间极 为复杂的调控与被调控机制形成了一个庞大的网络 结构;在这个网络结构中，各种细胞因子之间互相关 联互相影响;相信随着各项研究的推进，这个网络关 系会逐渐明朗。

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(收稿日期:2017 -07 -16)
Serum levels of IL -12, IL - 4, total IgE in
with chronic spontaneous urticaria
and their association with severity of disease
PANG C h u n，ZHAO Xiao~q iu，ZH U Lin~n a，ZHANG Yan~lai
(Department of Skin，the First Afiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi154003，China) Abstract：Objective：To investigate the relationship between the levels of IL- 12, IL-4 and total IgE and the pathogenesis of chronic spontaneous urticaria and i t s correlation with the severity of the disease.M e t h o d:The levels of serum I L-12, IL-4 and total IgE in90 patients with chronic spontaneous uricara(30 cases with mild and moderate weight)and30 healthy subjects were detected by ELISA and turbidimetric immunoassay.Result：The level of IL-4^total I gE i n the experimental group were selevated and I L-12 were decreased (P〈0.05). They were related to the disease(P < 0.05). Conclusion:The pathogenesis of chronic
be related to cellular immunity and humoral immune hyperfunction.
K e y w o r d s:chronic spontaneous urticaria;Interleukin-12; Interleukin- 4; IgE
(80 )
The exploration of the association
of SCN9 A gene polymorphism with partial seizure
F E N
G Y a n1，LI Li-h u a1，Z
H U J in-ling1
(1.People s Hospita in Lixia District of Jinan，Jinan250014 ,China；2.Basic Medicine Department of Jiamusi University,Jiamusi154007 ,China)
Abstract：Objective：To investigate the relationship between the polymorphisms of rsl2477229 and rs6746030 and parial seizure.M e t h o d s: 53 cases of peripheral bloodand58 normal partial seizure were selected.Genomic
D N A by kit was extracted.Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (P C R - R F L P) method and sequencing method were used to detect the polymorphism of two sites.Statistical analysis was used to analyze whether there were significant differences between the two sites in the case group Results:rsl2477229 and rs6746030 polymorphismloci of S C N9A g e n e have significant differences between the ep­ilepsy group and control group(P < 0.05). Conclusion：rsl2477229 and rs6746030 sites of S C N used as potential genetic markers for partial seizure.
K e y w o r d s:partial seizure;S C N9A;S N P s;genetic susceptibility。