某理工大学《现代分子生物学》考试试卷(710)

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某理工大学《现代分子生物学》
课程试卷(含答案)
__________学年第___学期考试类型:(闭卷)考试
考试时间:90 分钟年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、分析题(5分,每题5分)
1. 写出从组织中抽取RNA的关键步骤,并解释如何判断RNA质量。

答案:(1)从组织中提取RNA的步骤如下:
①将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品,充分吹打混匀。

②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置
5min。

③4℃,10000g离心15min,此时RNA主要集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中,加入等体积异丙醇,室温放置10min。

⑤4℃,10000g离心10min,此时可在离心管底部观察到白色沉淀,即为RNA。

⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃上清。

⑦超净台中吹干,加入无RNase的水溶解。

(2)检测RNA质量的方法如下:
①凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后,跑琼脂糖凝胶电泳,如果28S和18S条带明亮、清晰,并且28S的亮度在18S条
带的两倍以上,则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测:使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度,若两者的比值在1.8~2.0时,可认为RNA纯
度良好,蛋白质等其他物质的污染可以接受。

解析:
2、判断题(80分,每题5分)
1. 生物体的部分组织或器官因创伤而丢失时,剩余部分的肌肉、骨骼、皮肤等组织的细胞均能继续生长,从而形成与丢失部分形态和功
能上大致相同的结构,这一过程称为再生。

()
答案:错误
解析:再生是生物体的整体或器官受外力作用发生创伤而部分丢失,
在剩余部分的基础上又生长出与丢失部分在形态与功能上相同的结构,这一修复过程称为再生。

受到创伤之后,剩余部分的细胞并不一定均
能继续生长。

2. 顺式作用元件是指调控基因表达的蛋白质。

()
答案:错误
解析:顺式作用元件指影响自身基因表达活性的DNA序列,与反式作用因子相互作用参与基因表达调节。

而反式作用因子指调控基因表达
的蛋白质。

3. 由于遗传密码子的简并性,一个氨基酸可以有几种tRNA,但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。

()
答案:正确
解析:许多氨基酸的密码子的第1和第2个碱基相同,只有第3个碱
基不同,即为密码子的简并性。

由于遗传密码子的简并性,一个氨基
酸可以有几种tRNA,但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。

4. 所有氨基酸都各自有其对应的遗传密码子。

()
答案:错误
解析:自然界存在300余种氨基酸,但组成蛋白质的编码氨基酸仅有20种,这20种氨基酸均对应各自的密码子,编码蛋白质的氨基酸均
为α氨基酸,并不是所有氨基酸都有其相对应的密码子。

5. P53蛋白参与监控细胞核DNA的损伤,因此是一个肿瘤抑制因子。

()
答案:正确
解析:P53是人体非常重要的抑癌基因,参与监控细胞核DNA的损伤,它可以通过抑制细胞周期的进展,抑制细胞增殖。

但是它的缺失会导
致细胞增殖失控(无限增殖)。

6. 病毒基因组的组成和其他生物一样都含有DNA。

()
答案:错误
解析:有一部分病毒基因组的组成只有RNA,没有DNA。

7. 微小RNA(microRNA)是通过引起DNA甲基化来调节基因表达的。

()
答案:错误
解析:
8. DNA半不连续复制是复制时一条链的合成方向是5′→3′,而另
一条链的合成方向是3′→5′。

()
答案:错误
解析:DNA的半不连续复制是指DNA复制过程中,前导链的连续复
制和后随链的不连续复制的现象。

9. cDNA文库是包含有细胞中所有mRNA,因此该文库能包含细胞所
有的遗传信息。

()
答案:错误
解析:cDNA文库不包含有细胞中所有mRNA,因此该文库也不能包含细胞所有的遗传信息。

cDNA文库只是包含有特定细胞类型和发育
时期细胞中的表达信息。

10. 增强子和沉默子是具有位置和方向效应的DNA元件。

()
答案:错误
解析:增强子和沉默子是不具有位置和方向效应的DNA元件。

11. 具有回文结构的DNA分子的碱基序列是镜像对称的。

()
答案:错误
解析:具有回文结构的DNA分子的碱基序列不是镜像对称的。

12. 恶性肿瘤的迅速增长是由于细胞周期的时间变短,细胞分裂加快。

()
答案:错误
解析:癌细胞的迅速增长是由于其可以无限增殖和丧失接触抑制造成。

13. 分化程度高的细胞由于细胞分裂能力的下降,发生改变的可能
小于分化程度低的细胞。

()
答案:错误
解析:细胞分化与细胞的分裂状态和速度相适应,分化必须建立在分
裂的基础上,即分化必然伴随着分裂,但分裂的细胞不一定就分化。

分化程度越高,分裂能力也就越差。

但是其发生改变的可能并不小于
分化程度低的细胞。

14. DNA修复系统的作用是保证DNA序列不发生任何变化。

()
答案:错误
解析:DNA修复系统的作用是修复已经出现的DNA损伤,但是不能
保证DNA序列不发生任何变化。

15. 基因组是细胞内所有基因的组合。

()
答案:错误
解析:
16. 乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制。

()[扬州大学2019研]
答案:正确
解析:乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制,分别是阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节。

3、名词解释(75分,每题5分)
1. 基因编辑技术[暨南大学2018研]
答案:基因组编辑技术是指在基因组水平上对目的基因序列甚至是单个核苷酸进行替换、切除,增加或插入外源DNA序列的基因工程技术。

基因编辑技术中,ZFN和TALEN为代表的序列特异性核酸酶技术能够高效率地进行定点基因组编辑,而CRISPRCas9系统作为最新一代基因编辑技术,能够简便高效地实现基因组精确修饰。

解析:空
2. Circular RNA[暨南大学2019研]
答案:Circular RNA的中文名称是环状RNA,指是一类特殊的非编码RNA,环状RNA分子呈封闭环状结构,与传统的线性RNA相比不受RNA外切酶影响,表达更稳定,不易降解。

环状RNA富含
microRNA(miRNA)结合位点,在细胞中起到结合miRNA的作用,进而解除miRNA对其靶基因的抑制作用,升高靶基因的表达水平。

解析:空
3. 遗传密码
答案:遗传密码又称密码子、遗传密码子、三联体密码,指将DNA
或RNA序列以三个核苷酸为一组的密码子翻译为蛋白质的氨基酸序列,决定蛋白质中氨基酸顺序的核苷酸顺序,由3个连续的核苷酸组成的
密码子所构成,以用于蛋白质合成。

几乎所有的生物都使用同样的遗
传密码,称为标准遗传密码;即使是非细胞结构的病毒,它们也是使
用标准遗传密码。

但是也有少数生物使用一些稍微不同的遗传密码。

解析:空
4. DNA文库
答案:DNA文库是指某生物基因组中所有可表达的基因片段,经mRNA反转录后获得相应的cDNA的集合,将这些cDNA的集合分
别与克隆载体重组,贮存在一种受体菌克隆子群体之中,这样群体称
为cDNA文库。

由于cDNA文库包含了该生物所有的可表达基因片段,因此可随时筛选出需要的目的基因片段。

不必再通过PCR制备,可以节省时间和成本,提高效率。

解析:空
5. 魔斑
答案:魔斑又称超级调控子,是指当细菌生长过程中,遇到氨基酸全
面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。

产生
这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。

ppGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批操纵子,所以称它们是超级调控子或称为魔斑。

解析:空
6. 抗体(antibody,Ab)
答案:抗体是指机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细
胞(浆细胞)所合成与分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免
疫功能的球蛋白。

抗体是重要的免疫分子,主要存在于血液、体液和
黏膜分泌液中,介导体液免疫效应。

抗体按其反应形式分为凝集素、
沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。

解析:空
7. 单细胞测序[暨南大学2018研]
答案:单细胞测序是指从单个细胞提取DNA或RNA样品进行DNA
或RNA的测序。

传统测序方法所展示的信息也是在多细胞水平上的平均信息,而单细胞水平上的测序则完全可以反映同一个细胞群里不同
细胞的基因组和转录组状况。

单细胞测序技术可以分析特有的细胞、
对测序细胞进行分群,在免疫学、肿瘤学、发育进程的研究中有着重
要的作用。

解析:空
8. 辅阻遏物
答案:辅阻遏物是指在可阻遏系统中,能与阻遏蛋白结合导致该操纵
子结构基因转录被阻遏的小分子物质。

若是辅阻遏物钝化了无辅基诱
导蛋白或是活化了无活性的阻遏蛋白,操纵子即转入被阻遏的状态。

与一个基因的调控序列或操纵基因结合以阻止该基因转录。

解析:空
9. 模板链
答案:模板链,又称反义链,是指DNA双链中能作为转录模板通过
碱基互补配对原则指导mRNA前体合成的DNA链。

可作为模板转录为RNA的那条链该链与转录的RNA碱基互补(AU,GC)。

在转录过程中,RNA聚合酶与模板链结合,并沿着模板链的3′→5′方向移动,按照5′→3′方向催化RNA的合成。

解析:空
10. DNA酶Ⅰ超敏感位点(DNaseⅠ hypersensitive site)
答案:DNA酶Ⅰ超敏感位是指由于对DNA酶Ⅰ和其他核酸酶的切割高度敏感而被发现的染色体上的一小段区域。

该区域可能不含有核小
体致使DNA双螺旋裸露而产生,这种区域通常很短,最长也不过几
百bp。

由于该位点含有特异的DNA序列,为特异性DNA结合蛋白
所识别,因此,它参与了基因表达的调控。

解析:空
11. 斑点杂交
答案:斑点杂交是指把待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或
尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,一般用于基因
缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交方法耗时短,可做半定量分析,
一张膜上可同时检测多个样品。

解析:空
12. Gene expression[宁波大学2019研][暨南大学2018研]
答案:Gene expression的中文名称是基因表达,是指基因经过转录、翻译,将来自基因的遗传信息合成具有特异生物学功能的蛋白质分子
或RNA分子的过程。

存储在DNA中的遗传密码通过基因表达得到“翻译”,并且基因表达的特性产生生物体的表型。

因此,基因表达
的调节对于生物体的发育至关重要。

解析:空
13. 基因芯片
答案:基因芯片又称DNA芯片,是指采用原位合成(或显微打印手段),把数以万计的DNA探针固化于支持物表面上,产生二维DNA 探针阵列,然后和标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号来实现对
生物样品并行、快速、高效地检测或医学诊断,因为常用硅芯片作为
固相支持物,且在制备过程运用了计算机芯片的制备技术。

解析:空
14. DNA甲基化
答案:DNA甲基化是指DNA甲基转移酶催化S腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,将胞嘧啶转变为5甲基胞嘧啶(mC)的一种反应,是一种表观遗传修饰。

在真核生物的DNA中,5甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基,CG二核苷酸是最主要的甲基化位点。

一般说来,DNA 的甲基化会抑制基因的表达,DNA的甲基化对维持染色体的结构、X 染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起着重要的作用。

解析:空
15. 限制与修饰系统(restrictionmodification system)
答案:限制与修饰系统是指一种存在于细菌(可能还有其他原核生物),可保护个体免于外来DNA(如噬菌体)的侵入,主要由限制内切酶和甲基化酶组成的二元系统。

在限制修饰系统中限制作用是指一定类型的细菌可以通过限制性酶的作用,破坏入侵的外源DNA(如噬菌体DNA等),使得外源DNA对生物细胞的入侵受到限制;限制修饰系统中修饰作用是指生物细胞自身的DNA通过修饰酶的作用发生甲基化,可免遭自身限制性酶的破坏。

解析:空
4、填空题(60分,每题5分)
1. 真核基因表达调控在DNA水平的调控方式包括、和等方式。

其中免疫球蛋白结构基因是方式的典型例子,非洲爪蟾的细胞中rRNA基因的变化是方式的典型例子。

答案:基因丢失|基因扩增|基因重排|基因重排|卵母|基因扩增
解析:真核基因表达调控在DNA水平的调控方式包括:①基因丢失,如人类5号染色体短臂缺失;②基因扩增,如非洲爪蟾的卵母细胞中rRNA基因的变化;③基因重排,如免疫球蛋白结构基因。

2. 在通用遗传密码表中遗传密码有64个,其中个是编码氨基酸的
密码,有个终止密码子,个起始密码子。

普通密码子变成终止密码子
的突变叫作突变。

答案:61|3|1|无义
解析:遗传密码是一组规则,将DNA或RNA序列以三个核苷酸为一组的密码子转译为蛋白质的氨基酸序列。

在通用遗传密码表中遗传密
码有64个,其中61个编码氨基酸的密码。

有3个终止密码子,分别为UAA、UAG、UGA。

1个起始密码子AUG;无义突变是指由于某
个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子,从而使
肽链合成提前终止。

3. 果蝇的早期胚胎发育由三类不同的基因调控:母性影响基因、、。

答案:分节基因|同源域基因
解析:控制果蝇发育的三组基因:母体影响基因,分节基因和同源域
基因。

其中的一组调节另外两个中的一组基因和编码结构基因的靶基因。

调节基因之间的相互作用是通过分析其他基因发生突变时相应基
因的表达改变来确定的。

但目前只鉴别出少数几个结构靶基因,三组
调节基因作用在靶上,使得身体的各部分产生分化。

4. 在切口移位标记探针时,DNaseI处理DNA的温度应控制在,温度过高会使,不利于标记。

答案:14~16℃|DNaseⅠ的活性增强、导致切口过多、使DNA探针的长度变短
解析:切口平移法是合成探针标记的方法之一,即利用微量的DNaseI 使待标记的双链DNA分子产生若干切口,然后利用DNaseI的5′→3′外切酶活性从切口的5端除去核苷酸;同时DNaseI还有5′→3′的聚合酶活性可将反应体系中的核苷酸底物连接到切口的3′羟基末端。

由于在切去核苷酸的同时又在切口的3′端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,此时若反应体系中含有标记的核苷酸,它们就会掺入到新合成的链中,获得带有标记的DNA探针。

在此过程中需要注意DNaseI处理DNA的温度应控制在14~16℃,温度过高会使
D NaseⅠ的活性增强、导致切口过多、使DNA探针的长度变短,不利于标记。

5. ρ因子催化和。

答案:NTP水解|RNA释放
解析:
6. 在Southern杂交中DNA转移的速度取决于和。

答案:DNA大小|琼脂糖的浓度和胶的厚度
解析:Southern杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。

包括两个主要过程:①将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹;②固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,
即分子杂交过程。

杂交中DNA转移的速度取决于DNA大小、琼脂糖的浓度和胶的厚度。

7. 蛋白质生物合成可以分为五个阶段,它们是、、、、。

答案:氨基酸的活化|肽链合成的起始|肽链的延伸|肽链合成的终止|蛋
白质前体的加工
解析:
8. 对于低丰度mRNA的cDNA克隆的分离,一种办法是构建的cDNA
文库,另一种方法是。

答案:富含目的基因序列|扣除杂交
解析:mRNA丰度,指一种特定的mRNA在某个细胞中的平均分子数,低丰度mRNA即在细胞中的平均分子数小。

对于低丰度mRNA
的cDNA克隆的分离,一种办法是构建富含目的基因序列的cDNA文库,另一种方法是扣除杂交。

9. 核糖体上可区分出五个功能活性位点,其中A位点主要在上,而
P位点主要在上。

答案:50S亚基|30S亚基
解析:原核细胞由两个亚基构成,一个为大亚基50S,一个为小亚基
30S。

核糖体至少包括5个活性中心:50S亚基上有两个tRNA位点:氨酰基位点(A位点)与肽酰基位点(P位点),mRNA结合部位,
肽基转移部位以及肽键的形成部位。

10. tRNA的氨基酸臂的主要功能是;反密码环的功能是;Tpc环的
功能是。

答案:接受氨基酸|识别密码子|与核糖体大亚基结合
解析:tRNA的二级结构为“四叶草”状,为“四环一臂”结构:①氨基酸接受臂,其主要功能是接受氨基酸;②反密码子环,其主要功能
是识别mRNA上的密码子;③Tpc环,其主要功能是与核糖体的大亚基结合;④二氢尿嘧啶环(D环),与核糖体的结合有关;⑤可变环,它的大小决定着tRNA分子大的种类。

11. 技术可以用来鉴定DNA分子中和DNA结合蛋白相互作用的特定
序列。

答案:DNaseⅠ足迹
解析:DNaseⅠ足迹试验是一种鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上结合位点的方法,它不但可以找到和特异性DNA结合的目标蛋白,而且可以告知目标蛋白结合在哪些碱基部位。

12. 由于不同构型的DNA插入的EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电
泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度,OC DNA泳动速度,L DNA
居中。

通过凝胶电泳和EB染色的方法可把不同构型的DNA分开。

答案:最快|最慢
解析:溴化乙锭(EB)是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂
糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。

不同构型的DNA插入的EB的量不同,在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同,SC DNA的泳动速度最快,
OC DNA泳动速度最慢,L DNA居中。

因此,通过凝胶电泳和EB染色的方法可把不同构型的DNA分开。

5、简答题(50分,每题5分)
1. 肽链延伸包括哪些基本过程?
答案:肽链延伸包括的基本过程如下:
(1)后续氨酰tRNA与核糖体结合:氨酰tRNA首先必须与GTP及EFTu复合物相结合,形成AAtRNA·EFTu·GTP复合物并与核糖体的A位点相结合。

此时GTP被水解释放,形成EFTu·GDP复合物,进入新一轮循环。

(2)肽键生成:肽键形成之初,两个氨基酸仍然分别与各自的tRNA相结合,仍然分别位于A位点和P位点上。

A位点上的氨基酸(第二个氨基酸)中的仅一氨基作为亲核基团取代了P位点上的tRNA,并与起始氨基酸中的COOH基团形成肽键。

本反应可能由肽基转移酶催化。

(3)移位:核糖体向mRNA的3′方向移动一个密码子,使得带有第二个氨基酸(现已成为二肽)的tRNA从A位进入P位,并使第一个tRNA从P位进入E位。

此时模板上的第三个密码子正好在A位上。

EFG是核糖体的移位所必需的蛋白质因子,移位的能量来自另一分子GTP的水解。

解析:空
2. 简述病毒、原核、真核基因组的特点。

答案:(1)病毒基因组的特点:
①种类单一;
②单倍体基因组:每个基因组在病毒中只出现一次;
③形式多样;
④大小不一;
⑤基因重叠;
⑥噬菌体(细菌病毒)不含内含子序列,而真核细胞病毒的基因是不连续的,含有内含子;
⑦具有不规则的结构基因;
⑧基因编码区无间隔,通过宿主及病毒本身酶切;
⑨无帽状结构;
⑩结构基因没有翻译起始序列。

(2)原核基因组的特点:
①为一条环状双链DNA;
②只有一个复制起点;
③具有操纵子结构;
④绝大部分为单拷贝;
⑤可表达基因约50,大于真核生物小于病毒;
⑥基因一般是连续的,无内含子;
⑦重复序列很少。

(3)真核基因组的特点:
①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;
②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;
③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;
④基因组中非编码区多于编码区;
⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;
⑥存在大量的重复序列;
⑦功能相关的基因构成各种基因家族;
⑧存在可移动的遗传因素;
⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体。

解析:空
3. 简述原核与真核细胞染色体结构。

答案:(1)以大肠杆菌为例说明原核生物染色体结构如下:大肠杆菌的染色体DNA呈环状,游离的大肠杆菌染色体DNA不是形成无规则的螺旋,而是聚集在一起,在细菌细胞内形成一个较为
致密的区域,称为类核。

大肠杆菌的染色体 DNA形成50~100个环(loop),每个环的长度是50~100kb。

环的两端以某种方式固定
在蛋白质核心上,因此每一个环在拓扑学上是一个独立的结构域。


些环上的DNA也不是完全裸露的,而是与一种基础蛋白质结合在一起。

(2)真核生物的染色体结构如下:
真核生物的基因组DNA被包装成具有一定形态结构的棒状染色体,每一个染色体具有一条巨大的线性DNA分子。

在真核生物的染
色体中,DNA与组蛋白组成核小体,由DNA和组蛋白构成的复合体
称为染色质。

染色质经过一系列的折叠和螺旋,形成棒状的染色体结构。

染色体中包括长臂、短臂、随体、端粒及着丝粒。

解析:空
4. 简述基因可变剪接的生物学意义。

[暨南大学2018研]
答案:可变剪接是一种在转录后RNA水平调控基因表达的重要机制。

一个基因通过可变剪接产生多个转录异构体,各个不同的转录异构体编码结构和功能不同的蛋白质,它们分别在细胞个体分化发育不同阶段,在不同的组织,有各自特异的表达和功能。

其主要的生物学意义有:
(1)提高蛋白质的多样性,蛋白质的多样性与多细胞高等生物的复杂性相适应,是生物进化的结果。

(2)可变剪接多发生在参与信号传导和表达调控等复杂过程的基因上,如受体,信号传导通路,转录因子等。

对个体分化发育和一些关键的细胞生理过程如凋亡、细胞兴奋等的精确调控有重要意义,是基因表达调控的重要环节。

(3)可变剪接可导致多种人类疾病,因此在药物设计中,许多作为药物靶点的基因也具有多种剪接模式。

对可变剪接的研究有助于疾病的诊断和防治。

解析:空
5. 举例说明什么是C值悖论。

答案:(1)C值即一种生物的单倍体基因组的DNA总量。

它是每一种活生物的一个性质。

C值悖论指物种的C值与生物结构或组成的复杂性或生物在进化
上所处地位的高低不一致的现象,C值与其进化复杂性之间无严格对
应关系。

基因组中编码序列的选择压力大,而真核生物中不编码蛋白
的序列很多,发生变异的概率增加,因此基因组大小会出现很大的变化,在长期的进化过程中,基因组的大小不能完全代表生物进化程度。

(2)举例如下:
①人类和两栖类有非常接近的C值,表明并非越高等的生物遗传
复杂性越高。

②两栖类生物中最小的基因组不足,109Mbp,最大的则达
1011Mbp,家蝇和果蝇,二者的C值相差近6倍。

则表明表现复杂
度没有明显变化的一定物种中,C值却有很大变化。

解析:空
6. 何为安慰诱导物(gratuitous inducer),你知道有些什么安慰
诱导物?与应用真正的诱导物相比,应用安慰诱导物进行试验的好处
有哪些?
答案:(1)安慰诱导物定义
安慰诱导物是指一种与天然诱导物结构相似的化合物与转录中实
际诱导物相似,但不是该诱导酶的底物。

(2)我知道的安慰诱导物
①含硫的乳糖类似物异丙基巯基半乳糖苷(IPTG)。

②巯甲基半乳糖苷(TMG)。

③在酶的活性分析中,常用显色底物O硝基半乳糖苷(ONPG)。

(3)应用安慰诱导物进行试验比应用真正的诱导物的好处
①真正的诱导物乳糖会被诱导合成的β半乳糖苷酶所催化降解,
从而使其浓度发生变化。

②而安慰诱导物由于本身不被降解所以浓度不会发生变化,可以
持续的诱导基因表达。

解析:空
7. 限制性核酸内切酶有哪几种类型?哪一种类型的限制酶最适合于
基因工程,为什么?请简要说明理由。

答案:(1)按照限制酶的组成、与修饰酶活性关系、切断核酸的情况不同,限制性核酸内切酶分为三类:
①Ⅰ类限制性核酸内切酶:由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶
活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合特定的
DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在识别位点周围400~700bp。

这类酶的作用需要Mg2+,S腺苷甲硫氨酸及ATP。

②Ⅱ类限制性核酸内切酶:与Ⅰ类酶相似,是多亚基蛋白质,既
有内切酶活性,又有修饰酶活性,切断位点在识别序列周围25~
30bp范围内,酶促反应除Mg2+外,也需要ATP供给能量。

③Ⅲ类限制性核酸内切酶:只由一条肽链构成,仅需Mg2+,切割DNA特异性最强,且在识别位点范围内切断DNA,是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。

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