视黄醇结合蛋白试剂盒标准操作程序

视黄醇结合蛋白试剂盒标准操作程序
1.摘要
本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中视黄醇结合蛋白的含量。

2.适用范围
程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清或血浆中视黄醇结合蛋白的含量。

3.职责
使用日立7600自动生化分析仪进行测定视黄醇结合蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法
上海科华生物工程股份有限公司生产的视黄醇结合蛋白试剂盒采用的是免疫比浊法。

5.原理
待测样本中的视黄醇结合蛋白（RBP）与试剂中的RBP抗体结合，形成不溶性免疫复合物，在RBP抗体足量的情况下，其浊度与样本中RBP含量成一定比例关系，与相同条件下操作的校准品比较，通过剂量/反应曲线求出样本中RBP的含量。

6.仪器
日立7600自动生化分析仪
7.试剂
7.1试剂来源：
上海科华生物工程股份有限公司提供
7.2试剂瓶内主要成分：
R1：缓冲液、PEG、防腐剂；
R2：缓冲液、抗视黄醇结合蛋白抗体、防腐剂；
校准品：PBS缓冲液、视黄醇结合蛋白、防腐剂
7.3试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年。

开瓶后存放在生化分析仪
试剂仓中可稳定35天。

8.标准品和质量控制
8.1校准程序：
使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：
某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

8.3质控数据管理：
按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则：
按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》
8.5室间质评：
分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

9.标本
9.1标本要求：
、肝素钠抗凝的血浆样本，避免溶血。

样本于2～8℃可稳新鲜血清，或采用EDTA·Na
2
定7天，-20℃冻存（避免反复冻融）可稳定3个月。

9.2标本拒收：
由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单不符状况，一律要求重新留取标本。

9.3标本处理：
收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。

10.测定程序：
10.1分析参数：
详见参数表。

10.2操作步骤：
签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。

10.3获取结果：
在日立7600仪器上或日立7600传送的中文系统电脑上查找相应结果。

10.4结果报告：
对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。

可报告的结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。

11.计算
标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。

无需手工计算，每个标本的结果自动打印。

12.废液处理
参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。

13.操作性能：
13.1可报告范围：
0～150mg/L；若样本含量超过线性范围，请用生理盐水稀释样本后再测定，结果乘以稀释倍数。

13.2特异性/干扰：
样本中胆红素≤600mg/L，乳糜≤10mmol/L，血红蛋白≤5g/L，Vc≤600mg/L，RF因子≤100KU/L对测定结果的影响可忽略。

13.3精密度：
批内CV≤8%
批间相对极差≤15%
13.4准确度：
相对偏差≤±15%
14.注意事项：
14.1此试剂为体外诊断用。

14.2试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。

避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适，应前往医院诊治。

14.3试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

15.参考范围：
血清（血浆）: 26～60mg/L。

各实验室应有自己的参考值范围。

16.临床意义：
人视黄醇结合蛋白（Retinol binding Protein , RBP）分子量约21,000 ，半衰期3~12h，等电点pI4.4~4.8，由肝细胞合成，分布在人的血清、脑脊液、尿液等。

在血液中，RBP
同视黄醇（Vit.A）、甲状腺素转运蛋白按1：1：1结合，以复合物形式存在，能携带90%视黄醇，从肝脏向周围组织运送，当视黄醇与靶细胞受体结合后，视黄醇即进入细胞内，RBP便与甲状腺素转运蛋白分离。

游离RBP经肾小球滤出，被近端肾小管上皮细胞重吸收分解，少量由尿液排出，因此肝脏和肾脏疾病均可影响RBP在血清中浓度。

慢性肾脏疾病将导致RBP显著升高。

此外，肝胆系统疾病、甲状腺功能亢进、吸收不良综合症均可引起血中RBP降低。

当体内锌、铁、维生素A缺乏及严重感染等疾病能降低RBP的生物合成，引起血清中RBP降低。

17.支持性文件：
17.1日立7600自动生化分析仪使用说明书。

17.2日立7600自动生化分析仪分析参数。

17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。

用户可根据自身情况添加支持性文件。

18.参考文献
1. R Beetham et al .A radioimmunoassay for retinol-binding protein in serum and urine. Clin. Chem..
1985(31): 1364 – 1367
2. MT Parviainen and P Ylitalo. Immunonephelometric determination of retinol-binding protein in serum and
urine. Clin. Chem.. 1983(29): 853 - 856
3. AB Pereira, et al .Monoclonal antibody-based immunoenzymometric assays of retinol-binding protein.
Clin. Chem.. 1993(39): 472 - 476。