工作报告之电渗电泳实验报告
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
电渗电泳实验报告
【篇一:电渗_电泳_-_环境科学与工程学院】
实验五电泳电渗
二、原理
电渗属于胶体的电动现象。
电动现象是指溶胶粒子的运动与电性能之间的关系。
一般包括电泳、电渗、流动电位与沉降电位。
电动现象的实质是由于双电层结构的存在,其紧密层和扩散层中各具有相反的剩余电荷,在外电场或外加压力下,它们发生相对运动。
电渗是指在电场作用下,分散介质通过多孔膜或极细的毛细管而定向移动的现象。
若知道液体介质的粘度
,介电常数
,电导率,只要测定在电场作用下通过液体介质的电流强度i,和单位时间内液体流过毛细管的流量v
,可根据下式求出电势。
操作步骤:
(一)具体操作方法
1 按照实验装置图所示安装电渗仪。
2 测定电渗时液体的流量v和电流强度i。
反复测量正、反向电渗时的流量v值各三次,同时记录各次的电流值。
3 测定液体的电导率。
(二)注意事项
计算sio2
对水的
中不应有4。
(三)提问:
固体粉末样品粒度太大,电渗测定的结果重现性差,其原因何在?
四、总结
(一)数据处理
计算各次电渗测定的v/i
值,取其平均值,将液体的电导率和v/i的平均值代入上式,可求得sio2
对水的电势。
电势时,注意各物理量的单位。
在法定计量单位实行之后,计算公式
1.实验目的
(2)加深理解电泳是胶体中液相和固相在外电场作用下相对移动而产生的电性现象。
(3)通过电渗法测定sio2
对水的电势,
掌握电渗法测定电势的基本原理和技术。
2 加深理解电渗是胶体中液相和固相在外电场作用下相对移动而产生的电性现象。
2.实验原理
(1)电泳公式的推导
当带电的胶粒在外电场作用下迁移时,若胶粒的电荷为q,两电极之间的电位梯度为w,则胶粒受到的静电力为:
球形胶粒在介质中运动受到的阻力按斯托克斯定律为:
若胶粒运动速率u达到恒定,则有
(2)电渗公式的推导
当液体在毛细中流动时,界面单位面积上所受的阻力为
当液体匀速流动时f=f,即
c=q
式中 q-电荷量
s-面积
由此可得
将式( ii .199)代入式( ii .200)中,得
若毛细管的截面积为a,单位时间内流过毛细管的液体量为v,则式中i-通过二电极间的电流
r-二电极间的电阻
k-液体介质的电导率。
3.仪器和试剂
恒温水浴;
停表、滴管、锥形瓶(100ml);
胶棉液、kcl辅助溶液(0.024mol.l-1)、 10%fecl3溶液。
4.实验步骤
(1)析半透膜的制备
在预先洗净并烘干的150ml锥形瓶中加入约10ml胶棉液(溶剂为1:3乙醇—乙醚),小心转动锥形瓶,使胶棉液在瓶内壁形成一均匀薄膜,倾出多余的棉胶液。
将胶形瓶倒置于铁圈上,使乙醚发挥完毕。
此时如用手指轻轻触及胶棉应无粘着感。
然后将蒸馏水注入
胶膜与瓶壁之间,小心取出胶膜,将其置于蒸馏水中浸泡待用,同时检查是否有漏洞。
(2) fecl3胶体溶液的制备
取锥形瓶1个,加95ml蒸馏水煮沸,再取5ml10% fecl3 溶液搅拌滴加于沸腾的水中,著沸约2-3分钟,溶液变成棕红色,停止加热。
冷却至室温待用。
(3)溶
胶的纯化
将锥形瓶中已制好的溶胶,小心倒进步骤(1)预先制备好的半透膜袋中,用线栓住袋口,置于盛有蒸馏水的大烧杯中,进行渗析。
为了提高渗析速度,可以将水加热至60-700c。
渗析20min中换一次水,换两次后将渗析水分别至于两个小试管中,再分别用agno3和kcns溶液检验渗析水中的cl-及fe3+
的含量。
渗
【篇二:电泳法实验报告】
毛细管电泳和毛细管电色谱实验报告
一.实验目的
1. 了解毛细管电泳实验的原理、分离模式及应用。
2. 掌握毛细管电泳仪的操作方法。
3. 学会处理实验数据,分析实验结果。
二.实验原理
毛细管电泳又称高效毛细管电泳( high performance capillary electrophoresis, hpce) 是一种仪器分析方法。
通过施加10-40kv 的高电压于充有缓冲液的极细毛细管,对液体中离子或荷电粒子进行高效、快速的分离。
现在,hpce已广泛应用于氨基酸、蛋白质、多肽、低聚核苷酸、dna等生物分子分离分析,药物分析,临床分析,无机离子分析,有机分子分析,糖和低聚糖分析及高聚物和粒子的分离分析。
人类基因组工程中dna的分离是用毛细管电泳仪进行的。
毛细管中的带电粒子在电场的作用下,一方面发生定向移动的电泳迁移,另一方面,由于电泳过程伴随电渗现象,粒子的运动速度还明显受到溶液电渗流速度的影响。
粒子的实际流速 v 是泳流速度vep 和渗流速度 veo的矢量和。
即:v = vep + veo
在典型的毛细管电泳分离中,溶
质的分离基于溶质间电泳速率的差异。
电渗流的速率绝对值一般大
于粒子的电泳速率,并有效地成为毛细管电泳的驱动力。
溶质从毛
细管的正极端进样,带正电的粒子最先流出,中性粒子次之,带负
电的粒子在中性粒子之后流出。
溶质依次通过检测器,得到与色谱
图极为相似的电泳分离图谱。
三.实验仪器与试剂
仪器:毛细管电泳仪
试剂:缓冲液:20mmol/l硼砂溶液,1mol/l naoh溶液,二次去离
子水,未知样(苯甲酸溶液,苯酚溶液)
四.实验步骤
1. 仪器预热和毛细管冲洗
打开仪器和配套的工作站。
工作温度设为30℃,不加电压,冲洗毛
细管,顺序依次是:1mol/l naoh溶液2min,二次去离子水2min,
缓冲液4min。
2. 数据采集
打开色谱工作站软件。
把电压上升到20kv,立即点击主界面的绿色
图标—谱图采集,开始谱图采集。
在进样之前把屏幕调到色谱工作
站的主界面。
点击主界面的红色图标—手动停止,可以停止谱图采集。
然后将文件起名并保存在指定的文件夹。
3. 本实验进样条件为0.5psi压力,5s时间。
4.电泳运行条件为20kv,35min,在启动高压的同时,色谱工作站的
记录系统也触发开始。
5.电泳结束后,在计算机色谱工作站软件内保存好色谱图。
6.实验结束对仪器进行冲洗,1mol/l naoh溶液2min,二次去离子水
2min,缓冲液4min。
五.数据处理
缓冲溶液:20mm 硼砂缓冲溶液
样本:10 mm 苯酚和苯甲酸
检测波长为190-600nm
定性分析
打开苯甲酸标准样品、苯酚样品、混合物样品这三个谱图。
点击窗
口中的水平平铺。
通过谱图比较,能够确定哪一个峰是苯甲酸的峰。
苯酚
从图中可以看出苯酚的保留时间为6min。
苯甲酸
从图中可以看出苯甲酸的保留时间为9min。
苯酚和苯甲酸
从图中可以看出混合样品中两组份的保留时间分别为6min,11min。
结合单组份谱图可知,此混合物为苯酚和苯甲酸的混合物。
六.注意事项
1.冲洗毛细管时禁止在毛细管上加压,不允许更改给定的电压和进样时间。
2.naoh,二次水,缓冲液,样品等之间的切换是自动的,在实验过程中要时刻注意是否放在正确位置。
3.冲洗毛细管对于实验结果的准确性至关重要,务必认真完成每一次冲洗,不允许缩短冲洗时间或不冲洗。
4.塑料样品管里面容易产生气泡,轻敲管壁排除气泡以后方可放入样品盘。
【篇三:实验35电渗】
实验35 电渗
一、目的
②观察电渗现象,了解电渗法实验技术概要。
二、基本原理
电渗的实验方法原则上是要设法使所要研究的分散相质点固
u,则界面单位面积上所受的电力为 l
当液体在毛细中流动时,界面单位面积上所受的阻力为
当液体匀速流动时f=f,即
液体中平板电容器上的电荷分布,其电容为
c=q
式中 q-电荷量
s-面积
由此可得
将式( ii .199)代入式( ii .200)中,得
若毛细管的截面积为a,单位时间内流过毛细管的液体量为v,则式中i-通过二电极间的电流
r-二电极间的电阻
k-液体介质的电导率。
在上述推导过程中,忽略了毛细管壁的表面电导。
事实上,毛细管壁的表面电导不能忽略,所以应将k换成(k+kss),其中s为毛细管壁的a
圆周长度,ks为毛细管壁单位圆周长度的表面电导率。
但将式
三、仪器与试剂
电渗仪1台,停表1块,直流毫安表1块,高压直流电源(200~1000v)(也可用b电池串联代替)1台。
石英粉(80?100目a.r.)。
四、操作步骤
1.安装电渗仪
电渗仪的结构如图ii.98所示。
刻度毛细管d(可用1ml移液管改制)通过连通管c分别与铂丝电极
它e、f相连(为使加于样品两端之电场均匀,最好用二铂片电极)。
k
为多孔薄瓷板,a管内装粉末样品,在毛细管的一端接有另一根尖嘴
形的毛细管g,g的上端装一段乳胶管h,乳胶管只可用一弹簧夹i夹紧。
通过g管可将一个测量流速用的空气泡压人毛细管d中。
2装入样
品
将80 ~100目的sio2粉与蒸馏水拌和的糊状物用滴管注入a
管中,盖上瓶塞b。
水份经k滤出,拔去钼电极e、f,从电极管口注
入蒸馏水,至钼丝电极能浸入水中为止。
检査不漏水后,插上铂电极。
用吸耳球从g管压入一小气泡至d的一端,夹紧螺夹i。
将整个电渗
仪浸入恒温槽(20、25、35℃)中,恒温10min以待测定。
3测定v、i和k值
在电渗仪的两钼丝电极间接上200~1000 v的直流电源,中间串一
毫安表、耐高压的电源开关k和换向开关如图ii.99所示。
调节电源
电压,使电渗时,电渗仪毛细管d中气泡从一端刻度至另—端刻度
行程时间约20 s左右。
然后正确测定此时间,求出单位时间内毛细
管中气泡所移动过的体积,此体积即为液体介质(水)在单位时间内通过
a室的体积。
利用换向开关,可使e、f二电极的极性倒向,而使电
渗方向倒向。
由于电源电压较高,操作时应先切断电源开关,然后
改换换向开关,再接上耐高压的电源开关,反复测量正、反向电渗
时流量v值各5次,取平均值,求出液体流量v值。
同时,在测量时调
节电压,保持i值恒定。
由毫安表读下i值。
改变电源电压,使d管中气泡行程时间改为15、25s。
测定相应的
流量v和电流i 值。
拆去电渗仪电源,用电导仪测定电渗仪中蒸馏水
的电导率k值。
注意:由于使用高压电源,操作时应注意安全。
六、思考题
①为什么毛细管d中气泡在单位时间内所移动过的体积就是单位时
间内流过试样室a的液体量?
②固体粉末样品颗粒太大,电渗测定结果重演性差,可能的原因是什么? vlvl。