人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响申艳红
【摘要】目的:观察人中、百会穴注射香丹注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组、香丹注射液组共4组,每组15只,均用药14d后,线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血30min 后再灌注60min,测定脑匀浆中SOD活力、MDA含量、NO和NOS含量.结果:脑匀浆SOD活力、NO和NOS含量:模型组与假手术组相比明显降低(P＜0.01);对照组和香丹注射液组比模型组有不同程度的增加(P＜0.05).对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P＜0.05).脑匀浆MDA含量:模型组与假手术组相比明显升高(P＜0.01);对照组和香丹注射液组较模型组有不同程度的降低(P＜0.05);对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:人中、百会穴注射香丹注射液能够减轻再灌注期脑组织的损害,保护脑组织.
【期刊名称】《医学理论与实践》
【年(卷),期】2011(024)019
【总页数】2页(P2281-2282)
【关键词】香丹注射液;人中穴;百会穴;脑缺血再灌注
【作者】申艳红
【作者单位】南阳医学高等专科学校,河南省南阳市,473000
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
缺血性脑血管病占全部脑血管疾病的70%以上,严重威胁人类生命与健康,再灌注过程中,不可避免造成再灌注损伤,临床对于再灌注损伤治疗药物繁多,方法众多,寻找和探索更为有效的预防药物和疗法,已成为医学领域广泛关注的研究课题。

本实验通
过建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用穴位注射的方法,于人中、百会穴注射香丹
注射液,检测各组大鼠脑组织匀浆中SOD(超氧化物歧化酶)活力、MDA(过氧化脂
质的代谢产物丙二醛)含量、NO(一氧化氮)与NOS(一氧化氮合成酶)含量,探讨香丹注射液大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,为临床应用和选择治疗方式提供实验依据。

1 材料与方法
1.1 实验动物与分组清洁级SD大鼠60只,雄性,体重200～220g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供,随机分为假手术组、模型组、对照组、香丹注射液组,共4组,每组15只。

1.2 实验药物香丹注射液(江苏神龙药业有限公司生产,国药准字Z 32020159,批号101215);丹参注射液(神威药业有限公司生产,国药准字Z13020777,批号:101126)。

1.3 试剂 NO(一氧化氮试剂盒)及NOS(一氧化氮合成酶)试剂盒、SOD(超氧化物歧化酶)和MDA(过氧化脂质的代谢产物丙二醛)试剂盒,均由南京建成生物工程研究所提供。

1.4 方法 60只SD大鼠随机分为4组。

分别为:假手术组、模型组、对照组(丹参注射液组)、香丹注射液组,每组15只。

《大鼠穴位图谱的研制》定位“人中、百会”,进行穴位注射。

对照组注射丹参注射液,香丹注射液组注射香丹注射液,给药剂量均为0.1m l/次,1次/d,假手术组和模型组给予等体积生理盐水,连续注射14d。

第15天末次给药1h后,线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。

假手术组仅分离动脉而不插入线栓,其他操作步骤相同。

缺血30MIn,再灌注60MIn后,断头取脑法取出脑组织,全脑称重,冰冷生理盐水冲洗,机械匀浆机匀浆,制成10%的组织
匀浆,4 000 r/MIn离心15MIn,取上清液,分3份,按试剂盒说明书操作步骤,分别测定脑组织匀浆中 SOD活力、NO及 NOS含量、MDA含量。

1.5 统计学处理采用统计学软件SPSS17.0统计分析,所得数据采用均数±标准差表示,组间均数比较采用单因素方差分析,Q检验,P＜0.05显示差异有统计学意义。

2 结果
2.1 香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠SOD和MDA含量的影响脑匀浆SOD活力:模型组与假手术组相比明显降低(P＜0.01);对照组和香丹注射液组较模型组均有所增加(P＜0.05)。

对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

脑匀浆MDA含量:模型组与假手术组相比明显升高(P＜0.01);对照组和香丹注射液组较模型组均有所降低(P＜0.05)。

对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

见表1。

表1 香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠SOD活力和MDA含量的影响(±s)注:a:与假手术组比较,P＜0.01;b:与模型组比较,P＜0.01;c:与对照组比较,P＜0.05;d:与香丹注射液组比较,P＜0.05。

组别例数 SOD活力(u/mg Prot) MDA(nmol/mg Prot)假手术组15 28.11±3.44bc 0.78±0.07bc模型组15 13.24±1.75acd
1.95±0.25acd对照组15 24.48±
2.16abd 1.23±0.08abd香丹注射液组 15 27.64±2.24bc 0.86±0.10bc
2.2 香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠NO和NOS含量的影响脑匀浆NO、NOS 含量:模型组与假手术组相比明显降低(P＜0.01);对照组和香丹注射液组较假手术组有不同程度的降低(P＜0.05),较模型组有不同程度的升高(P＜0.05)。

对照组与香丹注射液组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

见表2。

3 讨论
脑缺血一定时间后恢复血供,其功能未能恢复反而加重,引发的脑机能障碍,称为脑缺血再灌注损伤。

目前公认损伤机制如下[1]:氧自由基的生成、细胞内钙超载、能量
代谢障碍、兴奋性氨基酸毒性等。

缺血再灌注损害严重超过缺血本身,缺血时间与再灌注后所产生的氧自由基数量呈正比关系。

缺血期脑组织缺血、缺氧,代谢率降低,酸性代谢产物堆积,储备自由基的产生底物并提供环境,由于自由基产生速率与组织的氧分压关系密切,缺氧条件限制自由基生成。

再灌流期恢复氧供,自由基产生速度加快,但前期SOD水平较低,迅速增加的氧自由基可进一步引起细胞代谢的紊乱与功能障碍,甚至细胞死亡。

脑缺血缺氧期可引起细胞外兴奋性氨基酸含量增加,刺激脑内精氨酸代谢产生NO,NO过量则导致神经毒性作用发生[2]。

NOS是NO合成的关键因素,体内NO的生物作用完全依赖于NOS活性。

NO能扩张血管并充当生物信息递质,调节神经系统,维持血管稳态。

香丹注射液由丹参、降香两味中药提取精制而成,对缺血性脑病临床疗效良好,具有扩张血管、保护脑组织缺血缺氧、清除自由基、抗衰老、改善血流变学等功效。

本实验表明人中、百会穴注射香丹注射液明显提高 SOD活力,减少M DA含量,减轻氧自由基再灌注期对脑组织的损害;可增加脑缺血再灌注大鼠脑组织中NO、NOS含量,调整血管功能,改善脑组织内环境,保护脑组织。

本实验为今后临床应用香丹注射液保护脑缺血再灌注损伤奠定可靠的实验依据和理论基础,值得临床推广。

表2 香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠NO和NOS含量的影响(±s)注:a:与假手术组比较,P＜0.01;b:与模型组比较,P＜0.01;c:与对照组比较,P＜0.05;d:与香丹注射液组比较,P＜0.05。

组别例数NO(μmol/g Prot) NOS(μmol/g Prot)假手术组 15 45.86±4.11bcd 0.27±0.04bcd模型组15 18.22±2.33acd 0.13±0.03acd对照组15 36.88±3.21abd 0.19±0.02abd香丹注射液组15 42.05±1.24abc
0.22±0.03abc
参考文献
[1] 宝鲁尔.心肌缺血再灌注损伤发生机制研究进展〔J〕.内蒙古民族大学学
报,2009,15(2):126-127.
[2] 陈利平,王发渭,韩志涛,等.苦参碱对脑缺血再灌注损伤炎性因子的影响〔J〕.中国中医急症,2010,19(12):2098-2099.。