HPLC法测定阿莫西林胶囊含量方法的改进

HPLC法测定阿莫西林胶囊含量方法的改进
摘要：阿莫西林胶囊原有检测方法采用流动相
（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾调pH至5.0）―乙腈（97.5：2.5））溶解样品，此方法溶解速度较慢。

本实验采用0.1摩尔每升盐酸溶液溶解样品，解决了原有方法溶解速度慢的问题。

本法简便、重现性好、回收率高，可用于阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量测定。

关键词：阿莫西林胶囊；阿莫西林；测定
阿莫西林别名为阿莫灵、阿莫仙、阿莫新、安福喜、奥纳欣、弗莱莫星、奈他美、羟氨苄青霉素、强力阿莫仙、特力士、再林、维克阿莫西等。

阿莫西林化学名为（2S，5R，6R）-3，3-二甲基-6-[（R）-（-）-2-氨基-2-（4-羟基苯基）乙酰氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸三水合物[1-3]。

阿莫西林是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素[4-7]。

阿莫西林胶囊原有检测方法采用流动相（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾调pH至5.0）一乙腈（97.5：2.5））溶解样品，此方法溶解速度较慢。

本实验采用0.1摩尔每升盐酸溶液溶解样品，并对测定方法进行考察。

1 仪器与试药
SL-GDH高精度恒温水槽（南京顺流仪器有限公司）；
UPLC 超高效液相色谱系统（沃特世科技（上海）有限公司）；08890-xx超声波清洗器（北京中科科尔仪器有限公司）；TGL-16台式高速冷冻离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；XYJ-H帕恩特实验室中央超纯水系统（北京湘顺源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）。

甲醇（北京红星化工有限责任公司）、磷酸（江西省华南化工有限公司）、醋酸（山东高密高源化工有限公司）、磷酸二氢铵（江西省华南化工有限公司）、冰乙酸（北京红星化工有限责任公司）、乙腈（盖州市鹏圣化工有限公司）、盐酸（北京红星化工有限责任公司）。

2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。

色谱柱为依利特hypersil BDS C18 色谱柱
（4.6*250*5u ）；0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾调pH至5.0）一乙腈（97.5：2.5）为流动相；检测波长为254nm；流速1.0mL?min-1；柱温：30℃。

理论板数按阿莫西林峰计算应不得低于2000。

2.2 供试品溶液的制备
取阿莫西林胶囊内容物适量，研细，精密称定至容量瓶内，0.1摩尔每升盐酸溶液适量超声溶解，放凉，0.1摩尔每升盐酸溶液定容，过0.45 μm的滤膜，即得。

2.3 对照品溶液的制备
精密称取阿莫西林对照品约5mg，置5毫升棕色容量瓶中，用0.1摩尔每升盐酸溶液超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含阿莫西林1mg）。

2.4 阴性干扰试验：按方中比例取阿莫西林胶囊辅料，按照制备工艺方法制成阴性制剂，按色谱条件测定。

结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与阿莫西林相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。

2.5 标准曲线的制备
精密称定阿莫西林对照品15mg置5ml量瓶中加0.1摩尔每升盐酸溶液定容，再分别量取1，2，3，4，5mL置5ml 量瓶中，加入0.1摩尔每升盐酸溶液稀释至刻度，分别精密上述溶液5μl注入液相色谱仪，记录色谱，以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

试验表明，阿莫西林对照品在0.6～3.0mg/mL范围内内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验
精密吸取阿莫西林对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为053%。

结果表明，本实验精密度良好。

2.7 重现性试验
分别称取同批阿莫西林胶囊样品6份，分别制备成供试品，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.52%，
结果表明，此含量测定方法的重现性良好。

2.8 稳定性试验
取供试品溶液，分别在0，1，2，3h精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品阿莫西林峰面积积分值的RSD为0.56%。

结果表明阿莫西林至少在3h内稳定。

2.9 准确度试验
取对照品适量，精密称取已知纯度的原料9份，置量瓶中，分别精密加入阿莫西林对照品，按项下方法制备成80% 100%、120%。

取模拟样品照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.3%，RSD为0.86%。

2.10 最低检出限与定量
采用2.1项下色谱条件，对样品测定，当信噪比为10时，定量限为2.5ng；当信噪比为3时，最低检出限为0.6ng。

2.11 样品含量测定
采用不同方法对不同厂家的阿莫西林胶囊进行测定。

武汉健民集团随州药业有限公司新方法测定含量为99.5%，原有方法测定含量为99.6%；哈药集团三精明水药业有限公司新方法测定含量为99.6%，原有方法测定含量为99.6%；上海现代哈森（商丘）药业有限公司新方法测定含量为99.7%，原有方法测定含量为99.6%；河南凤凰制药股份有限公司新方法测定含量为99.5%，原有方法测定含量为99.3%；哈药集团制药总厂新方法测定含量为99.5%，原有方法测定含量
为99.6%；河南凤凰制药股份有限公司新方法测定含量为99.5%，原有方法测定含量为99.5%；哈高科白天鹅药业集团有限公司新方法测定含量为99.6%，原有方法测定含量为99.6%；湖南中和制药有限公司新方法测定含量为100.5%，原有方法测定含量为100.6%；湖南尔康湘药制药有限公司新方法测定含量为100.1%，原有方法测定含量为99.9%；贵州百灵企业集团天台山药业有限公司新方法测定含量为
99.9%，原有方法测定含量为100.3%。

实验结果表明两种方法测定的含量无明显差别，新方法溶解样品的时间明显短于原有方法。

本实验方法是一种简便、准确、安全的测定阿莫西林胶囊含量的方法。

参考文献
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