丙酮酸脱氢酶(PDH)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求北京赛诺浦
丙酮酸（PYR）测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清或血浆中丙酮酸的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15mL，试剂2：1×5mL；试剂1：2×30mL，试剂2：2×10mL。
试剂1：2×54mL，试剂2：2×18mL；试剂1：3×45mL，试剂2：3×15mL；试剂1：4×54mL，试剂2：4×18mL；试剂1：2×300mL，试剂2：1×200mL；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L。
校准品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
质控品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
1.2 试剂盒主要组成成分注：校准品和质控品存在批特异性，具体浓度见对应批次产品标签。
2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
质控品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度在200µmol/L附近的样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.02。
2.5 线性在（30，1200）µmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.990。
在(150，1200）µmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（30，150]µmol/L时线性绝对偏差不大于±15µmol/L。
2.6 重复性重复测试高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于8%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度与已上市产品进行比对试验，在（30，1200）µmol/L范围内，与比对系统的相关系数r不小于0.975；在（100，1200）µmol/L区间内与比对系统的相对偏差应不大于±15%，（30，100] µmol/L区间内与比对系统的绝对偏差应不大于±15µmol/L。
苯丙氨酸解氨酶试剂盒说明书（分光光度法）使用说明
苯丙氨酸解氨酶试剂盒说明书（分光光度法）使用说明苯丙氨酸解氨酶试剂盒说明书(分光光度法)使用说明货号:BC0210规格:50管/48样产品简介：PAL（EC4.315）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶，在动物体内尚未发现。
与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值，通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体40m L×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×3瓶，4℃保存，临用前每瓶加入4mL双蒸水充分溶解待用；现配现用。
试剂三：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。
操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作表：试剂名称测定管（μL）对照管（μL）样本20试剂一780800试剂二200200混匀，30℃准确水浴30min试剂三4040混匀，静置10min后，290nm处用蒸馏水调零，测定对照管吸光值A1和测定管A2，计算△A=A2-A1。
注意：对照管只用作一管。
PAL活性计算：（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白在每ml反应体系中每分钟使290nm 下吸光值变化0.1定义为一个酶活力单位。
PAL（U/mg prot）=△A×V反总（1040μL）÷V样（20μL）÷T(30min)÷0.1÷Cpr （mg/mL）=17.3×△A÷Cpr（mg/mL）（2）按样本鲜重计算：单位的定义：每g组织在每ml反应体系中每分钟使290nm下吸光值变化0.1定义为一个酶活力单位。
脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
脯氨酸脱氢酶（ProDH）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4160规格：50T/48S产品内容：提取液一：液体60mL×1瓶，4℃保存；提取液二：液体0.6mL×1支，4℃保存；试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入4mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂可分装-20℃保存，避免反复冻融。
产品说明：ProDH是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。
降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。
ProDH催化脯氨酸脱氢生成延丙酮酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的下降，测定2,6-DCPIP的还原速度，代表ProDH活性。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、丙酮、匀浆器/研钵。
操作步骤：一、样本处理：组织：按照组织质量（g）：提取液一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 样本，加入1mL 提取液一），进行冰浴匀浆，1500g 4℃离心15min，取上清液于一支新的EP 管中，加入一滴提取液二（用10μL 的枪头加入），涡旋混匀，冰浴放置30min 后，15000g 4℃离心20min，取上清置冰上待测。
细胞或细菌：按照细胞数量（104个）：提取液一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液一），冰浴匀浆，1500g 4℃离心15min，取上清液于一支新的EP 管中，加入一滴提取液二（用10μL 的枪头加入），涡旋混匀，冰浴放置30min 后，15000g 4℃离心20min，取上清置冰上待测。
丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC1070规格:50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体36mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，﹣20℃保存。
试剂四：粉剂×1支，﹣20℃保存。
混合试剂：临用前配制，将试剂三和试剂四用适量试剂二溶解后再全部转移到试剂二中备用。
试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340nm光吸收下降速率，来计算PDC 活性。
试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1、细胞或微生物样品的制备：先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。
10000rpm，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：称取约0.1g组织，加入1mL提取液，冰上充分研磨。
16000g4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、试剂一37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴提前预热30min。
3、操作表：试剂名称（μL）测定管空白管试剂一700700试剂五100100混合试剂100100样本100-蒸馏水-100迅速混匀后于340nm比色，记录10s和70s的吸光值，测定管的记为A1和A2，空白管的记为A3和A4，计算ΔA=（A1-A2）-（A3-A4）。
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求jiuqiang
丙酮酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中丙酮酸（PYR）的含量，临床主要用于糖尿病引起的酮症酸中毒的辅助诊断。
1.1包装规格包装规格见表1表1 包装规格1.2主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异，具体赋值详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.5000。
2.4 准确度回收试验：在临床样本中加入一定体积的校准品溶液，进行测定，回收率在90%～110%之间。
2.5 分析灵敏度样品浓度为200 µmol/L时，其吸光度变化在0.0400～0.1200之间。
2.6 线性区间在[30，1000]µmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[30，150]µmol/L区间内绝对偏差应不超过±15µm ol/L，在(150，1000]µmol/L区间内相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
2.9 校准品溯源性按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至Sigma公司。
DPPH 自由基清除能力检测试剂盒说明书
DPPH 自由基清除能力检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC4750 规格：50T/24S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 提取液 液体50 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂一 液体60 mL×1瓶（自备）常温保存 试剂二 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂三粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂一：无水乙醇自备；2、 试剂二：粉剂置于瓶内EP 管中。
临用前加入6.08 mL 试剂一振荡溶解，用不完的试剂可于-20℃保存1个月，建议分装保存，避免反复冻融；临用前根据试验所需量按照试剂二：试剂一（V:V ）= 4：21的比例配制成工作液，现配现用，用不完的工作液可于2-8℃保存一周；3、 试剂三：10 mg 维生素C 。
临用前加入1 mL 提取液，充分振荡溶解，配成10 mg/mL 维生素C 溶液，2-8℃保存两周；用于阳性对照。
产品说明：DPPH 自由基一种很稳定的氮中心的自由基，是样本抗氧化能力的重要指标之一，广泛应用于抗氧化类食品、保健品及药品的研究中。
DPPH 自由基有单电子，其醇溶液呈紫色，在515 nm 处有强吸收。
当有抗氧化剂存在时，DPPH 自由基被清除，其溶液颜色变浅，515 nm 的吸光度下降，在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。
本试剂盒中，通过吸光度下降的程度来反映样本清除DPPH 自由基的能力。
DPPH · DPPH ·H注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅、台式离心机、无水乙醇、研钵/粉碎机、烘干箱、30~50目筛和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的制备（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）（1）植物样本的制备：将新鲜样本置于60℃烘箱烘干至恒重，研钵研碎（或粉碎机粉碎），过30~50目筛。
NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1040规格：50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入360μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；试剂三：粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入327μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明：MDH（EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。
草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。
因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。
NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：一、样品测定的准备：1、细菌、细胞样品的制备：细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：称取约0.05g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤和加样表：紫外分光光度计提前预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零，试剂一37℃预热15min。
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求baiding
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中丙酮酸的含量。
1.1规格校准品(选配)：1×1mL；质控品(选配)：水平1：1×1mL，水平2：1×1mL。
1.2组成：注：校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。
2.1 外观2.1.1试剂1：无色液体，无浑浊，无不溶物。
2.1.2试剂2：无色液体。
2.1.3校准品：无色至淡黄色液体。
2.1.4质控品：无色至淡黄色液体。
2.1.5包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度≥0.5。
2.4 分析灵敏度样本浓度为200 μmol/L时，△A≥0.02。
2.5 线性区间在[30，1000] μmol/L范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[30，100] μmol/L时，绝对偏差不超过±10 μmol/L，测试浓度在（100，1000] μmol/L时，相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 批內精密度用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于10%。
2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度回收率在85%-115%范围内。
2.8 质控品赋值有效性测试结果在质控范围内。
2.9 瓶内均匀性校准品和质控品瓶内均匀性（CV）应不大于10%。
2.10 量值溯源校准品量值溯源至公司内部工作校准品，并与北京九强生物技术股份有限公司生产的丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)比对验证。
2.11 稳定性2.11.1校准品开瓶稳定性校准品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。
稳定期过后4小时内进行测试，测试结果与靶值的相对偏差不超过±10%。
2.11.2质控品开瓶稳定性质控品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。
丙酮酸激酶测定试剂盒使用说明
丙酮酸激酶测定试剂盒使用说明分光光度法货号:BC0540规格:50管/48样产品内容：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存；试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；临用前每支加入 1.5mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍4℃保存一周；试剂四：液体×1支，4℃保存；临用前每支加入900µL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍4℃保存一周。
产品说明：PK（EC2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK 活性具有重要意义。
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的前处理1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或者200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤及加样表：1.分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2.工作液的配置：临用前将试剂二转移至试剂一中，充分溶解待用；现配现用。
丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)
加入物(ml) ADH Lysis buffer 待测样品 PDC Lysis buffer 工作液 NADH-ADH 工作液
对照管(备选) 0.025 — 1.6 0.2
测定管 —
0.025 1.6 0.2
5、 PDC 测定：加入 PDC 启动剂，立即以分光光度计(1cm 光径比色杯)测定吸光度(记为 A0)并同时计时，每隔 30s 测定一次吸光度，其中至 1min 时 3 吸光度记为 A1，记录其 变化。Leagene 建议加入 PDC 启动剂后立即检测，加样时间越短越好，其反应基本在 1-3min 内，其后反应趋于平缓。
北京雷根生物技术有限公司
式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量) 0.01=每分钟 NADH 氧化吸光度变化 0.01 为 1 个酶活力单位 t=1=检测时间(min) 0.025=待测样品体积(ml)
组织样品 PDC(U/g·min)=ΔA/(0.01×t×W) 式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量)
组成：
编号 名称 试剂(A): PDC Lysis buffer 试剂(B): PMSF 试剂(C): ADH Assay buffer 试剂(D): NADH 试剂(E): ADH 使用说明书
TE0483 50T
Storage
250ml 4℃ 避光
1ml -20℃
100ml 4℃
1 支 -20℃
1 支 -20℃
Leagene 丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)检测原理是在弱酸条件下， 以丙酮酸为底物，催化 ADH 生成乙醛和 CO2，乙醛在 ADH 催化下被 NADH 还原为乙醇， ADH 每催化 1 分子乙醛消耗 1 分子 NADH，通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度 的变化，计算出 NADH 的消耗速率进一步推算出丙酮酸脱羧酶活性水平。该试剂盒主要用 于检测植物样本、血清等中丙酮酸脱羧酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床 诊断或其他用途。
丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0730规格:50T/48S产品内容：提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂六：液体10μL×1支，4℃保存；试剂六稀释液：液体10mL×1支，4℃保存。
产品简介：丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中，但在植物体和大部分细菌中却不含此酶。
是供给草酰乙酸的主要补充反应，是糖异生过程的第一个限速酶。
和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸PC不可逆的催化丙酮酸、ATP、CO2和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm下测定NADH氧化速率，即可反映PC活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL提取液，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
24℃1000g离心10min。
3将上清液移至另一离心管中，4℃11000g离心15min。
4上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的PC（此步可选做，可以判断线粒体提取效果）。
5在沉淀中加入1mL提取液，超声波破碎（功率20％，超声5秒，间隔10秒，重复12次），用于PC活性测定，并且用于蛋白含量测定。
乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书
乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒说明书（乳酸→丙酮酸连续监测法）【产品名称】中文名称：乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒（乳酸→丙酮酸连续监测法）英文名称：LACTATE DEHYDROGENASE REAGENT KIT（L→P method）【包装规格】50ml/盒（R-1：40ml×1，R-2：10ml×1），240ml/盒（R-1：64ml×3，R-2：48ml×1），250ml/盒（R-1：40ml×5，R-2：10ml×5），375ml/盒（R-1：100ml×3，R-2：75ml×1），2500ml/盒（R-1：500ml×4，R-2：500ml×1）。
【预期用途】本试剂盒用以测定人血清乳酸脱氢酶(LDH)的活力。
【检验原理】乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。
通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。
LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+【主要组成成份】试剂成份含量R-1 L-乳酸锂76mmol/LR-2 NAD ≥31mmol/l *不同批号试剂盒中的各组份，经检验符合产品性能指标的，可以互换。
【储存条件及有效期】本试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
【适用仪器】本试剂适用于日立7020型、日立7060型、日立7080型、日立7150型、日立7170型、日立7180型、日立7600（D）型、日立7600（P）型自动分析仪以及奥林巴斯AU600、AU2700、东芝-雅培、BECKMAN CX系列、BECKMAN LX-20型等自动分析仪。
本试剂在日立7020自动分析仪上已通过第三方验证，并备有以上各种自动分析仪的参数可供参考。
【样本要求】空腹血清，保存于室温可稳定3小时，保存于0℃以下可稳定1周。
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶的关系一、介绍丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱氢酶（Pyruvate Dehydrogenase，简称PDH）和丙酮酸脱羧酶（Pyruvate Decarboxylase，简称PDC）都是与丙酮酸代谢相关的酶。
丙酮酸是碳水化合物代谢的中间产物，在细胞中起到重要的作用。
PDH和PDC是促进丙酮酸的利用和转化的关键酶，它们在多个生物反应中起着不可或缺的作用。
二、丙酮酸脱氢酶的功能1. 丙酮酸脱氢酶是一种重要的催化酶，它能够通过脱氢作用将丙酮酸转化为乙醛。
2. 此过程生成的乙醛能够进一步参与乳酸发酵、酒精发酵和柠檬酸回路等生物代谢途径。
三、丙酮酸脱氢酶的调控1. 丙酮酸脱氢酶的活性可以通过多种途径进行调控，包括磷酸化和去磷酸化等。
这些调控机制直接影响酶的催化活性和功能。
四、丙酮酸脱羧酶的功能1. 丙酮酸脱羧酶是解羧酶家族中的一员，它能够催化将丙酮酸转化为乙醛和二氧化碳。
2. 此过程是丙酮酸进入三羧酸循环的前提和基础。
五、PDH和PDC在细胞代谢中的配合作用1. PDH和PDC相互配合，共同参与丙酮酸的代谢过程，发挥协同作用。
2. PDH将丙酮酸转化为乙醛，而PDC则负责将乙醛进一步转化为二氧化碳，同时释放能量。
六、个人观点和理解丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶是细胞代谢过程中的重要参与者，它们共同作用于丙酮酸的转化和利用。
丙酮酸是碳水化合物代谢的中间产物，其代谢过程对于细胞能量供应和有机物的合成具有重要意义。
PDH和PDC的相互配合使得丙酮酸能够被高效地转化为能量和其他有机物。
在细胞内，PDH和PDC的活性受到多种因素的调控，这些调控机制能够使细胞能够在不同的条件下调整丙酮酸的代谢速率。
通过磷酸化和去磷酸化等调控途径的变化，细胞可以根据能量需求和代谢物的供应情况，灵活地调整PDH和PDC的活性。
丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶在细胞代谢中起着重要的作用。
它们的功能和调控机制共同参与碳水化合物的代谢过程，为细胞提供能量和原料。
丙酮酸脱氢酶(PDH)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4318
可见分光光度法丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4318规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体60mL×1瓶4℃保存试剂二液体0.6mL×1支-20℃保存试剂三液体15mL×2瓶4℃保存试剂四液体25mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×2支-20℃保存试剂六粉剂×2支4℃保存试剂七液体8mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1.试剂二：为易挥发试剂，用完后尽快密封，-20℃保存。
2.试剂六：每支试剂六加入1mL蒸馏水溶解备用。
3.工作液的配制：临用前把11.5mL试剂四、一支试剂五、0.9mL试剂六、3.5mL试剂七转移到一瓶试剂三中混合溶解待用；用不完的试剂-20℃分装保存，可以保存4周。
产品说明：PDH（EC4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。
PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致605nm光吸收的减少。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一和10μL试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4℃11000g 离心10min，取上清，置冰上待测。
细胞或者细菌样本：先收集500万细胞到离心管内，离心后弃上清；之后加入1mL试剂一和10μL试剂二，冰浴超声波破碎细菌（功率20%或200W，超声3s，间隔7s，总时间5min）；然后11000g，4℃，离心10 min，取上清置于冰上待测。
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3310规格：50T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂35mL×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入35mL试剂一溶解。
可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。
试剂三：液体45μL×1支，4℃避光保存；临用前加入蒸馏水按体积比1：120稀释，现用现配；试剂四：液体155μL×1支，4℃避光保存；临用前加入蒸馏水按体积比7：250稀释，现用现配；试剂五：粉剂×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解；可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。
产品说明：PEPCK（EC 4.1.1.32）广泛存在于动物、开花植物、藻类、部分真菌和细菌中。
该酶催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的第一限速酶。
，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4344
紫外分光光度法乙醛脱氢酶（ALDH）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4344规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存试剂三液体1mL×1支4℃保存试剂四液体2mL×1瓶4℃保存试剂五液体3mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入6mL蒸馏水溶解，-20℃分装保存；2、试剂五：沸点低，在使用时保持低温以保证正确的吸取量。
产品说明：乙醛脱氢酶(EC1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。
在辅酶I的存在下，它催化乙醇在内的某些一级或二级醇、醛或酮的脱氢反应。
在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注；同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心20min，取上清置于冰上待测。
细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心20min，取上清置于冰上待测。
脱氢酶试剂盒说明书
脱氢酶（dehydrogenase, DHA）试剂盒说明书分光光度法50管/48样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶，催化底物通过细胞色素系统被氧化，释放的能量供机体使用，是生物体取得能量的一种方式。
测定原理：在细胞呼吸过程中，氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脱氢酶作用下接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈现红色，在波长485nm处有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得脱氢酶活性。
自备实验仪器及用品：筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸馏水、甲醇（不允许快递，请用户自备）。
试剂的组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存试剂一：粉剂×1瓶，使用前加10mL试剂二溶解，4℃避光保存（尽量现配现用）。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：甲醇，自备。
样品处理：1. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
2. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心20min。
3. 液体：直接检测。
测定步骤和操作表：空白管测定管样品（μL）150蒸馏水（μL）150试剂一（μL）150试剂二（μL）150充分混匀，37℃培养24h试剂三（μL）1350 1350振荡1h，8000g，25℃，离心5min，取1mL上清于比色皿，测定A485，△A=A测定-A空白管。
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丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0380
规格:50T/48S
产品内容：
试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体1mL×1支，-20℃避光保存；
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支，4℃保存；
试剂五：粉剂×1支，-20℃保存；
试剂六：粉剂×1支，4℃保存；
试剂七：粉剂×1支，4℃保存；
工作液的配制：临用前把试剂四、五、六、七转移到试剂三中混合溶解待用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：
PDH（EC4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。
PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致605nm光吸收的减少。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本的处理
称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10μL试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4℃11000g离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至605nm，蒸馏水调零。
2、每个样本需要900μL工作液，按样本数加一取出一定量的工作液于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中孵育5min。
3、空白管：在1mL比色皿中加入900µL工作液和50µL水，混匀，立即记录605nm处初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2，计算ΔA空白=A1-A2。
4、测定管：在1mL比色皿中加入900µL工作液和50µL样本，混匀，立即记录605nm处初始吸光值A3和1min后的吸光值A4，计算ΔA测定=A3-A4。
三、PDH活性计算
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性（U/mg prot）=[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr)÷T
=904.762×(ΔA测定-ΔA空白)÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性(U/g鲜重)=[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷(ε×d)×109]÷(W×V样÷V样总)÷T
=913.81×(ΔA测定-ΔA空白)÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟消耗1nmol2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性(U/104cell)=[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T
=1.828×(ΔA测定-ΔA空白)
V反总：反应体系总体积，9.5×10-4L；
ε：2,6-二氯吲哚酚摩尔消光系数，2.1×104L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；
V样：加入样本体积，0.05mL；
V样总：加入试剂一和试剂二体积，1.01mL；
T：反应时间，1min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
500：细菌或细胞总数，500万。
注意事项：
1、测定过程中所有样本在冰上放置，以免变性和失活。
2、测定管的ΔA值在0.01-0.25之间，若测定管的ΔA值大于0.25，需将样本进行稀释。