常见大肠杆菌感受态的特点和用途
常用大肠杆菌感受态JM109,DH5a,BL21等的区别
【引用】常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别生命科学2011-03-31 14:48:42 阅读80 评论0 字号：大中小订阅本文引用自xxrrzq《常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别》1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌感受态制备及转化
大肠杆菌感受态制备及转化大肠杆菌（Escherichia coli）是一种广泛存在于自然环境中的细菌，常见于土壤、水体、人和动物的肠道等地方。
由于其易于培养和操作，成为生物学研究中常用的实验材料。
本文将介绍大肠杆菌的感受态制备及转化的过程。
感受态制备是指将大肠杆菌细胞从冻存状态恢复到活跃状态的过程。
为了保证感受态制备的成功，首先需要准备培养基和细菌菌种。
常用的培养基有LB培养基和SOC培养基，其中LB培养基适用于大肠杆菌的一般培养，SOC培养基则适用于感受态制备和转化实验。
培养基的配制需按照实验要求进行，注意消毒措施，避免污染。
感受态制备的过程一般包括以下几个步骤。
首先，将冻存的大肠杆菌菌种转移到预先加热的LB培养基中，进行孵育培养。
培养温度和时间根据实验需要进行调整，通常为37摄氏度下培养12-16小时。
其次，将培养物进行稀释，使其浓度适合后续实验操作。
最后，将稀释后的细菌液进行离心，去除上清液，沉淀后的菌体即为感受态大肠杆菌。
感受态大肠杆菌的转化是指将外源DNA导入到大肠杆菌细胞中的过程。
转化的前提是大肠杆菌细胞处于感受态，即细胞膜对外源DNA具有较高的通透性。
转化的关键是选择合适的质粒载体和转化方法。
常用的质粒载体有pUC19、pGEM-T等，这些载体具有含有抗生素抗性基因的特点，可以通过抗生素的选择来筛选转化成功的细菌。
质粒载体通常通过限制酶切与外源DNA进行连接，形成重组质粒。
将重组质粒与感受态大肠杆菌进行转化后，通过培养在含有抗生素的培养基上筛选，即可得到含有目标基因的转化菌落。
转化的方法有热激法、电穿孔法和化学法等。
热激法是将感受态大肠杆菌与重组质粒混合后，在高温条件下进行短暂的热冲击，使细菌细胞膜通透性增加，促进外源DNA的摄入。
电穿孔法是利用电场作用使细菌细胞膜产生孔隙，使外源DNA通过孔隙进入细胞。
化学法则是利用化学试剂改变细菌细胞膜的性质，增加其对外源DNA的吸收能力。
转化后的菌落需要进行筛选，常用的方法是通过抗生素选择。
常用大肠杆菌基础信息及使用说明
常用大肠杆菌基础信息及使用说明常用大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌群中的细菌，是一种革兰氏阴性菌，属于革兰氏阴性杆菌属中的大肠杆菌（Escherichia）属。
大肠杆菌长约2微米，呈棒状，通常是无运动的。
它是一种兼性厌氧菌，能够以不同的环境条件生存。
大肠杆菌广泛存在于自然界中，特别是动物的肠道中。
在人类肠道中，大肠杆菌具有重要的生理功能，保护肠道免受其他有害菌的侵袭，并参与食物消化和维持肠道的健康。
同时，大肠杆菌还对环境具有重要的指示作用，可作为一种指示性微生物来监测水质和食品的卫生状况。
大肠杆菌常用于实验室中的分子生物学研究和基因工程技术中。
它具有以下特点和优势：1.遗传稳定性：大肠杆菌具有较高的遗传稳定性和可操作性，其基因组较小、结构简单，易于研究和改造。
3.快速生长：大肠杆菌具有较快的生长速度，培养时间相对较短，便于实验操作和快速筛选。
4.易于培养和保存：大肠杆菌在实验室中培养相对简单，可通过液体培养和固体培养来获得足够的菌量。
同时，大肠杆菌具有较强的抗冷冻和抗干燥能力，便于保存和共享。
然而，使用大肠杆菌也存在一些注意事项和使用技巧：1.选择合适的菌株：根据实验需求选择不同的大肠杆菌菌株，如常见的DH5α、BL21等。
不同菌株具有不同的特性和表达系统，需根据实验目的进行选择。
2.处理菌株的遗传背景：大肠杆菌具有多样的遗传背景，可能会影响实验结果。
在进行基因表达、突变和克隆等实验时，需注意背景的一致性和对结果的可能影响。
3.增殖条件的优化：大肠杆菌对培养条件较为敏感。
在进行实验前，需对培养基、温度、pH值等条件进行优化，以获得最佳的菌落增殖情况。
4.严格控制污染：大肠杆菌在实验过程中容易受到其他菌株的污染，需进行严格的无菌操作，避免影响实验结果。
5.安全操作：大肠杆菌是一种被认为是相对安全的微生物，但仍需要注意避免直接暴露和接触，使用时应佩戴手套和实验室级别的防护措施。
常用大肠杆菌感受态JM109-DH5a-BL21等的区别(1)
【引用】常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别生命科学2011-03-31 14:48:42 阅读80 评论0 字号：大中小订阅本文引用自xxrrzq《常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别》1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌知识点总结
大肠杆菌知识点总结一、基本特征1、形态特征大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，细胞形态为短杆状，长度约2微米，直径约0.5微米，单株细胞通常呈革兰氏阴性，即没有颜色的结晶紫。
在革兰氏染色中，细胞壁由内向外依次为细胞膜、纤维素层、网状层和唇多糖层。
2、代谢特点大肠杆菌是一种严格厌氧生物，能够在缺氧环境下进行葡萄糖发酵产生能量。
此外，大肠杆菌还具有多种代谢途径，如异源代谢、乳酸发酵、融合发酵等，在不同环境下能够灵活应对。
3、遗传特征大肠杆菌具有较高的遗传变异能力，其遗传物质以DNA分子形式存在，主要位于细胞质内。
大肠杆菌拥有近似5000-6000个基因，其中约一半的基因编码蛋白质。
二、生长特性1、生长条件大肠杆菌是一种嗜温性菌种，适宜生长的温度范围为20-42°C。
除此之外，大肠杆菌还对酸碱度、氧气浓度、营养物质等生长条件有一定的要求。
2、生长曲线大肠杆菌的生长曲线呈现出在适宜环境条件下的指数增长。
在培养基中，大肠杆菌的生长曲线可分为潜伏期、对数期和平稳期三个阶段。
三、代谢特点1、氧气代谢大肠杆菌可以在缺氧环境中进行乳酸发酵或醛酸发酵，产生能量。
在氧气充足的情况下，大肠杆菌则采用氧化磷酸化途径来产生ATP，同时释放二氧化碳和水。
2、营养代谢大肠杆菌具有多种代谢途径，能够利用多种碳源、氮源和能量源进行生长。
此外，大肠杆菌还可以合成营养物质、产生酶类等，以适应不同环境条件。
3、产气代谢大肠杆菌在肠道中的代谢产物主要为氢气、二氧化碳和甲烷等气体，这些气体对人体健康起到一定的作用。
四、致病机制1、肠毒力大肠杆菌具有一定的毒力，其中一些菌株可以产生肠毒素（enterotoxin），引起胃肠道炎症。
这些肠毒素主要通过损伤肠黏膜上皮细胞或刺激免疫系统而导致病理反应，表现为腹泻、呕吐等症状。
2、毒素分泌大肠杆菌还可以分泌多种毒素，如细胞外蛋白毒素、外毒素、细胞内毒素等，这些毒素可以引起细胞毒性、神经毒性、肠毒性等病理反应。
大肠杆菌感受态
实验概要大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化实验原理处于对数生长期的细菌经CaCl2 处理后接受外源DNA的能力显著增加。
细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。
在自然条件下，很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内，但在人工构建的质粒载体中，一般缺乏此种转移所必需的mob基因，因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。
如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态，以摄取外源DNA。
转化（Transformation）是将外源DNA分子引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。
转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体（R-,M-），它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。
受体细胞经过一些特殊方法（如电击法，CaCl2 ，RbCl(KCl)等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞（Compenent cells）。
进入受体细胞的DNA分子通过复制、表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。
将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（Transformant，即带有异源DNA 分子的受体细胞）。
目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2和RbCl(KCl)法，RbCl(KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高，但CaCl2法简便易行，且其转化效率完全可以满足一般实验的要求，制备出的感受态细胞暂时不用时，可加入占总体积15%的无菌甘油于-70℃保存（半年），因此CaCl2法使用更广泛。
主要试剂(1)0.1mol/L CaCl2溶液(2)LB液体培养基(3)30%甘油：30mL甘油溶于100mL蒸馏水，高压灭菌。
主要设备(1)超净工作台(2)冷冻离心机(3)恒温摇床(4)－70℃冰箱(5)10mL移液管(6)吸耳球(7)1mL、200μL移液枪（配套枪头）(8)50mL 离心管(9)1.5mL离心管实验材料(1)大肠杆菌DH5α（R-，M-，Amp-）实验步骤（一）受体菌的培养(1)从LB平板上挑取新活化的E. coli DH5α单菌落，接种于3～5mL LB液体培养基中，37℃下振荡培养过夜（12h左右）。
常用大肠杆菌感受态JM109-DH5a-BL21等的区别(1)
【引用】常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别生命科学2011-03-31 14:48:42 阅读80 评论0 字号：大中小订阅本文引用自xxrrzq《常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别》1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析（5篇模版）
常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析（5篇模版）第一篇：常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析1:DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用 pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argFU169, deoR , recA1, endA1, hsdR17(rk-, mk+, phoA , supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA1 2:BL21(DE3 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如pET 系列的基因。
T7噬菌体 RNA 聚合酶位于λ 噬菌体 DE3区,该区整合于 BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-, ompT , hsdS(rBB-mB-, gal , dcm(DE3 3:BL21(DE3 pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS ,因此具有氯霉素抗性。
PLysS 含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-, ompThsdS(rBB-mB-, gal , dcm(DE3, pLysS , Camr 4:JM109菌株该菌株在使用pUC 系列质粒载体进行DNA 转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型 :recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac-proAB /F’[traD36, proAB+, lacIq , lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增 ,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌化转感受态制备
大肠杆菌化转感受态制备大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，具有广泛的生物学功能和应用价值。
化转感受态制备是一种常用的方法，通过改变大肠杆菌的遗传物质，使其表达特定的转基因产物。
本文将介绍大肠杆菌化转感受态制备的原理、方法以及应用。
一、大肠杆菌化转感受态制备的原理大肠杆菌化转感受态制备是利用大肠杆菌的自然特性和遗传工程技术，将外源DNA导入大肠杆菌细胞内，并使其稳定表达。
大肠杆菌细胞通过自身的DNA复制和转录机制，将外源DNA整合到自身的基因组中，从而使外源基因在大肠杆菌中得以表达。
1. 质粒转化法：将质粒DNA与大肠杆菌细胞一起处理，使质粒DNA 进入大肠杆菌细胞内，并通过质粒DNA上的选择标记基因筛选转化成功的细胞。
2. 噬菌体转染法：利用噬菌体作为载体，将外源DNA导入大肠杆菌细胞内，并通过噬菌体的复制和感染机制，使外源DNA稳定表达。
3. 电穿孔法：利用高压电脉冲使大肠杆菌细胞膜发生破裂，外源DNA得以进入细胞内，并通过细胞自身的修复机制，使外源DNA稳定表达。
4. 钙离子转化法：利用钙离子与外源DNA形成复合物，通过渗透作用使其进入大肠杆菌细胞内，并通过细胞自身的代谢机制使外源DNA稳定表达。
三、大肠杆菌化转感受态制备的应用1. 蛋白表达：通过将目的基因导入大肠杆菌细胞内，使其表达目的蛋白，广泛应用于基因工程、生物制药等领域。
2. DNA克隆：利用大肠杆菌的高效复制和转录机制，将目的DNA片段插入质粒中，并通过质粒在大肠杆菌中的复制和传递，实现DNA 的克隆和扩增。
3. 突变分析：通过外源DNA的插入、缺失或替换，研究大肠杆菌基因的功能和调控机制，为进一步研究生物学问题提供重要工具。
4. 基因敲除和敲入：通过将外源DNA的特定片段插入大肠杆菌基因组中，实现对目的基因的敲除或敲入，研究基因功能和调控网络。
5. 抗生素筛选：利用大肠杆菌对抗生素的敏感性，通过将目的基因导入大肠杆菌中，筛选抗生素抗性基因。
常用大肠杆菌感受态的区别
常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dla cZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体R NA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于B L21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLys S，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DN A产生的L acZa多肽和JM09编码的L acZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DN A克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌感受态制备
摇床
用于大肠杆菌的振 荡培养。
恒温振荡器
用于大肠杆菌的恒 温振荡培养。
03 实验步骤
细菌培养
01
02
03
培养基选择
选择适合大肠杆菌生长的 培养基，如LB培养基，以 保证细菌正常生长。
培养温度
将细菌培养在37℃恒温摇 床中，振荡培养至对数生 长期。
细菌密度
通过观察细菌的生长情况， 控制细菌密度，通常在 OD600值为0.6-0.8时进 行后续操作。
参考文献2
02
03
参考文献3
大肠杆菌感受态制备技术进展， 作者：XXX，出版日期：XXXX 年X月，出版社：XXX出版社。
大肠杆菌感受态制备实验指南， 作者：XXX，出版日期：XXXX 年X月，出版社：XXX出版社。
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实验原理
感受态
感受态是指细菌处于一种生理状态，能够接受外源DNA并与之结合， 进而发生转化。
转化过程
外源DNA通过细菌的细胞膜进入细胞内，并在DNA结合蛋白的作 用下与细菌染色体上的同源序列发生交换，从而实现基因的克隆和 表达。
影响因素
影响感受态形成的因素包括细菌生长状态、培养基成分、温度、渗透 压等。
转化子的筛选和验证
筛选方法
转化子可以通过抗生素筛选、蓝白斑筛选等方法进行 筛选。
验证方法
验证转化子是否含有目的基因，可以通过PCR、酶切、 测序等方法进行。
注意事项
在筛选和验证过程中，需要注意避免假阳性或假阴性 的结果，确保实验结果的准确性。
优化实验条件
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温度
感受态细胞的转化需要在一定的温度下进行，不 同的温度可能会影响转化效率，因此需要选择适 宜的温度进行实验。
常用几种感受态区别
常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21的区别1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。
高一生物大肠杆菌知识点
高一生物大肠杆菌知识点大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰氏阴性菌，属于杆菌科（Enterobacteriaceae）。
它存在于人和动物的肠道中，同时也是一种重要的病原菌。
下面将为你介绍大肠杆菌的特点、分类、代谢能力和感染途径。
一、特点大肠杆菌的非致病菌株一般具有以下特点：1. 形态特征：大肠杆菌的形态为革兰阴性的杆状细菌，细胞长0.5-4.0微米，直径约为0.3-0.8微米。
2. 嗜氧性：大肠杆菌是一种嗜氧菌，即只能在氧气充足的环境中生长。
3. 产生胃酸耐受素：大肠杆菌的一种耐受素称为胃酸耐受素，使其能够适应胃酸的环境，从而引起胃肠道感染。
4. 发酵产酸气：大肠杆菌代谢糖类时产生酸气，常导致酸性环境，抑制其他细菌的生长。
二、分类根据不同的表型特征和致病性，大肠杆菌可分为多个菌株。
其中，以下三个菌株是常见的：1. 大肠埃希菌（EPEC）：大肠埃希菌是一种通过人与人之间的口-粪传播途径传播的肠道致病菌，主要引起婴儿和幼儿的肠病。
2. 致病性大肠杆菌（EHEC）：致病性大肠杆菌主要通过摄入受污染的食物或饮水引起感染，可引发出血性腹泻、溶血性尿毒症综合征等严重疾病。
3. 胶原纤维素（EIEC）：胶原纤维素大肠杆菌主要通过食物或水污染引起感染，可引起类似细菌性痢疾的疾病。
三、代谢能力大肠杆菌具有丰富的代谢能力，能够分解、吸收和利用多种碳源和氮源。
以下是一些典型的代谢能力：1. 糖代谢：大肠杆菌能够分解和利用多种糖类，如葡萄糖、乳糖、蔗糖等。
2. 氨基酸代谢：大肠杆菌能够利用多种氨基酸作为氮源进行生长和代谢。
3. 脂肪酸代谢：大肠杆菌能够分解脂肪酸，从中获取能量。
4. 产气代谢：大肠杆菌产生气体，其中包括二氧化碳、氢气和甲烷等。
四、感染途径大肠杆菌感染主要通过消化道传播，包括以下几种途径：1. 食物和饮水传播：摄入受污染的食物或饮水，常导致胃肠道感染。
2. 接触传播：直接接触受感染的人或动物的粪便，或触摸受污染的表面，可引起细菌的传播。
各种感受态细胞的特征和用途
1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1JM110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。
大肠杆菌科普文章
大肠杆菌科普文章
大肠杆菌——微生物界的巨人
引言：
人们常说“知己知彼，百战不殆”。
而对于微生物界的巨人——大肠杆菌，了解它的特点和作用，对我们的生活和健康都有着重要的意义。
本文将带您深入了解大肠杆菌的科学知识，从而更好地认识和应对这个微生物世界中的重要成员。
一、大肠杆菌的基本特征
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性菌，属于肠杆菌科。
它的形态呈杆状，具有强大的生存能力和适应性。
大肠杆菌广泛存在于人和动物的消化道中，同时也分布于土壤、水体等自然环境中。
这种微生物的生命周期短暂，繁殖速度快，使其在微生物界中扮演着至关重要的角色。
二、大肠杆菌的重要作用
1. 消化道健康
大肠杆菌在人体肠道中起着维持肠道菌群平衡的重要作用。
它能够分解食物中的复杂碳水化合物，产生有益的短链脂肪酸，为肠道提供能量。
同时，大肠杆菌还能抑制有害菌的生长，保护肠道免受病原微生物的侵害。
2. 食品工业
大肠杆菌在食品工业中也有着重要的应用。
它能够产生某些酶，用于食品加工过程中的酶工程。
同时，大肠杆菌还被用于生产某些食品添加剂和调味料，为食品的质量和口感提供保障。
3. 生物技术
大肠杆菌是生物技术领域中最常用的宿主细胞之一。
科学家们利用大肠杆菌的遗传特性，进行基因工程和蛋白表达等研究。
这种微生物的简单结构和易于培养的特点，使其成为了生物技术研究的重要工具。
三、大肠杆菌与人类健康的关系
尽管大肠杆菌在人体中有着重要的功能，但某些菌株也可能引发健康问题。
例如，某些致病性大肠杆菌可以引起食物中毒，导致腹。
常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析
1:DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用 pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argFU169, deoR , recA1, endA1,hsdR17(rk-, mk+, phoA , supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA12:BL21(DE3 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如 pET 系列的基因。
T7噬菌体 RNA 聚合酶位于λ 噬菌体 DE3区,该区整合于 BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-, ompT , hsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE33:BL21(DE3 pLysS菌株该菌株含有质粒 pLysS ,因此具有氯霉素抗性。
PLysS 含有表达 T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-, ompThsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE3, pLysS , Camr4:JM109菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage载体进行转染时,由于载体 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09编码的LacZΔM15进行α-互补 ,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型 :recA1, endA1, gyrA96, thi -1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac -proAB/F’[traD36, proAB+, lacIq , lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增 ,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌形态特征
大肠杆菌形态特征大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，是人体和动物肠道中最主要的有益菌之一、它具有以下的形态特征：1.形态特征大肠杆菌呈杆状，通常为直杆状或稍微弯曲。
它的长度约为1.5至6微米，直径约为0.5微米。
细菌细胞之间通常呈单独分离的独立状态。
2.色素特征大肠杆菌没有颜色，通常呈无色透明状态。
然而，一些毒力菌株可能会产生特定的荧光色素，并具有特定的荧光染色。
3.附着结构大肠杆菌具有许多附着结构，包括鞭毛、菌毛和纤毛。
这些结构通过细菌细胞表面的附着蛋白质发挥作用。
鞭毛是长丝状的结构，在细菌移动和感受环境刺激方面起着重要作用。
菌毛比鞭毛短，呈柱状，用于细菌之间的附着和交流。
纤毛也是附着细菌的结构，通常细菌细胞表面具有几百到几千个纤毛。
4.胞外多聚物（胞外多糖）大肠杆菌的表面覆盖有多种胞外多聚物，包括多糖。
这些多糖在保护菌体免受环境的侵害以及与其他细菌或宿主细胞进行交互方面起着重要作用。
5.壁结构大肠杆菌有复杂的细胞壁结构，包括内层质膜、纤维素外层膜和外层膜。
内层质膜起到维持细菌细胞形状和膜蛋白质定位的作用。
纤维素外层膜是由纤维素组成的蛋白质复合物，具有保护细菌免受宿主免疫系统攻击的作用。
外层膜是含脂质的双层结构，与环境中的物质交换起重要作用。
总之，大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，它具有直杆状的形态、无色透明的外观和多种附着结构。
它的表面覆盖有胞外多聚物，并具有复杂的细胞壁结构。
这些形态特征是大肠杆菌在生物学功能和与环境相互作用中的重要基础。
大肠杆菌的菌落形态特征(一)
大肠杆菌的菌落形态特征(一)大肠杆菌的菌落形态特征大肠杆菌是人类体内常见的一种肠道细菌，有着特殊的菌落形态特征。
本文将就大肠杆菌的菌落形态特征展开阐述。
大肠杆菌的基本特点大肠杆菌属于革兰氏阴性菌，是一种不动杆菌。
它能在多种载体上存活生长，是一种厌氧菌。
它具有好氧和厌氧代谢通路，能够利用各种有机物作为能源和碳源。
大肠杆菌的菌落特征大肠杆菌的菌落通常呈灰白色或者淡黄色，表面光滑，边缘清晰，呈大圆形或不规则形，有较强的透明度和光泽。
在培养基表面，大肠杆菌的菌落通常较小，在厚度和高度上都不如肉眼观察可见的其他菌落。
大肠杆菌的菌落能够在培养皿上形成独立的圆形菌落，平均直径在1mm 至2mm之间，每个菌落内含有大约10-100万个菌体。
大肠杆菌的菌落在不同培养基上具有不同的特征，可分为3大类。
1.形态类大肠杆菌在三硝基作用培养基上的菌落形态典型，呈白色粗糙菌落。
在常规营养琼脂培养基上的表现较为均匀。
2.颜色类在嗜酸性琼脂培养基上，大肠杆菌的菌落通常为蓝绿色，周围有透明带。
这是由于其产生了不同于其他革兰氏阴性菌的产色物。
3.透明类在普通营养琼脂培养基上的大肠杆菌菌落，由于其表面菌体分泌缝隙气体，因此菌落表面呈现透明状，即所谓水样菌落。
总结大肠杆菌的菌落形态特征非常显著，菌落大小较小，表面光滑，边缘清晰，颜色通常为灰白色或淡黄色。
在培养基上，其菌落可分为形态类、颜色类和透明类。
下次在实验室里遇到大肠杆菌，相信你已经能更好地理解它的特点了。
大肠杆菌的应用价值虽然大肠杆菌在医学上通常被视作致病菌，但是由于其易于培养和操作，以及其基因组的完整性和稳定性，大肠杆菌也被广泛应用于基因工程和分子生物学领域。
大肠杆菌被作为实验室中常用的表达宿主，即利用其对哺乳动物嗜血杆菌素等重要蛋白的产生能力来制备对各种蛋白进行纯化、鉴定、创制新药等方面提供了很大的帮助。
此外，大肠杆菌在生物技术、食品和环境污染监测等方面也具有广泛应用。
结语大肠杆菌是一种生活在人体肠道内的细菌，也是一种十分特殊的菌种。
各种感受态细胞的特征和用途
1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1JM110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。
大肠杆菌菌落形态特征
大肠杆菌菌落形态特征大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，属于革兰氏阴性菌，可以在自然环境中生存繁殖，也可以在动植物肠道中生长。
大肠杆菌对于人体的生理功能有着重要的作用，同时，也是一种常见的病原体，其中某些菌株可以引起各种不同疾病，如腹泻、肠炎等。
在这些病原菌中，一些菌株可以形成不同的菌落，不同的形态特征提供了我们对于菌株的区分和诊断手段。
一、菌落形态特征不同的大肠杆菌菌株，其在固体培养基上形成的菌落颜色、形态和大小都不相同，通过这些特征可以很好的区分不同的菌株。
通常，菌落的形态特征可以通过肉眼观察和显微镜观察两种方法进行判断。
1. 肉眼观察在固体培养基上，不同菌株形成的菌落在肉眼观察时有不同的大小、形状和颜色。
大肠杆菌的菌落形态特征主要包括以下方面：（1）直径大小：不同的菌株在相同的培养条件下，其生长速度和繁殖能力都不相同，因此，其形成的菌落大小也有所不同。
通常菌落的直径大小在1-2mm之间。
（2）菌落形状：大肠杆菌的菌落形状可以是圆形、不规则形和菊花形等。
在肉眼观察时，通常可以通过观察菌落的边缘形状和颜色来区分不同菌株。
（3）菌落颜色：菌落的颜色是由菌落中不同物质的吸收反射引起的。
不同的菌株形成的菌落颜色有所不同，可以是白色、黄色、橙色、红色和黑色等。
2. 显微镜观察大肠杆菌菌落形态特征可以通过显微镜观察来进一步判断和识别。
显微镜观察通常包括两种方法：高倍显微镜和扫描电镜。
（1）高倍显微镜观察：菌落制备后可以在载玻片上进行染色和固定，然后使用高倍显微镜进行观察。
在高倍显微镜下，可以观察到菌落的特征，如表面形态、细胞形态和染色情况等。
（2）扫描电镜观察：扫描电镜是一种高分辨率的电子显微镜，可以观察到个体的分子甚至原子。
使用扫描电镜观察大肠杆菌菌落，可以观察到菌落表面的结构特征，如菌落顶部的形状、突起和凹陷等。
二、菌落形态特征在菌株鉴定中的作用大肠杆菌菌落形态特征在菌株鉴定和分类上具有重要作用，不同的形态特征可用于区分不同的大肠杆菌菌株，对于临床诊断和治疗有着积极意义。
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1：DH5a菌株
DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
2：BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）
3：BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr
4：JM109菌株
该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株
基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]
5：TOP10菌株
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，
araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG
6：HB101菌株
该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验
基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1
7：M110或SCS110
大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。
常用的菌株都会产生dam,dcm，从而受到甲基化的影响.
部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。
大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如XbaI, BclI等。
而且甲基化只发生在特定序列，以XbaI为例，只有在位点序列旁出现GA或TC，该XbaI位才会被甲基化。
而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：
（1）选用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA识别切割位点与MboI相同；但不受甲基化影响；
（2）利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备，如E.coli JM110和链霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的DNA就能被上述酶切割。
8：E.coli JM110
要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110
如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化.
各种感受态细胞的区别用途特征
Xl1-Blue菌株
基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK-
mK+)。
特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
用途：分子克隆和质粒提取。
BL21(DE3)菌株
基因型：F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。
特点：该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。
T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合于非毒性蛋白的表达。
用途：蛋白质表达。
BL21(DE3)ply菌株
基因型：F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。
特点：该菌株带有pLysS，具有氯霉素抗性。
此质粒还有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。
适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
用途：蛋白质表达
DH5α菌株
基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–
特点：一种常用于质粒克隆的菌株。
其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。
recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109菌株
基因型：endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proAB) e14- [F‘ traD36 proAB+ lacIq
lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。
特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
DH10B菌株
基因型：
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 endA1 recA1 deoR Δ(ara,leu)7697 araD139 galU galK nupG rpsL λ-
The most widely used E. coli strain for BAC cloning is DH10B 。
host for pUC and other α-complementation vectors; pBR322
useful for generating genomic libraries containing methylated cytosine or adenine residues，useful for plasmid rescue procedures。
ELECTROMAX DH10B T1 CELLS
说明：
DH10B细胞是高转化效率的E. coli，可以完美应用于大多数实验应用。
DH10B基因型具有以下特点：
? lacZΔM15 用于重组克隆的蓝/白斑筛选
? 消除了mcrA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统，允许构建更多具有代表性的基因组文库(1,2)
? endA1突变，可以增加质粒产量和数量
? 高效率转化大小为150 kb的质粒，用于产生cDNA或基因组文库
DH10B?可以表达tonA的基因型，tonA能够提供对T1和T5噬菌体感染的抗性(DH10B? T1R)。
DH10B?的基因型：F · mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,
leu)7697 galU galK λ · rpsL (StrR) nupG
DH10B? T1R的基因型：F · mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ · rpsL (StrR) nupG tonA
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