关于分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)

3．确认各参数无误后， 按 “启动 ”键，启动电泳仪输出程序。 在显示屏状态栏中显示 Start! 并 蜂鸣 4 声，提醒操作者电泳仪将输出高电压，注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。
同时在状态栏中显示 “Run”，并有两个不断闪烁的高压符号，表示端口已有电压输出。在状 态栏最下方，显示实际的工作时间（精确到秒）
实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介
实验室主要仪器，设备的简介及使用方法
微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分 别是：
0.5～ 10μ l( 读数窗显示 0.5～ 10.0,每转 1 档为 0.1μ l);
PCR 仪，也称 DNA 热循环仪、基因扩增仪，是使一对寡核苷酸引物结合到正负
DNA 链上
的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列
DNA 片段，它的每一循环包括在三
种不同温度进行 DNA 变性、引物复性、 DNA 聚合酶催化的延伸反应的三个过程
PCR 仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、 临床诊断、法医学等等 操作步骤
4、如果要输入新的程序，则在 《Proceed》，
RUN-ENTER 菜单上用箭头键选择 ENTER PROGRAM, 按
1）命名新的程序，最多 8 个字母，输入后按《 Proceed》确认 (如何输入字母、数字 )。
2）输入程序步骤：名字输入后，确认，然后输入相关程序 5、输入完成的程序后，到 RUN-ENTER 菜单，选择新程序，开始运行。 6、其它：用《 pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。 用《 stop》或《 Cancel》可停止运行的程序。 如何设置一个 PCR 程序： 一般分为 8 步：
10～ 100μ l( 读数窗显示 10.0～ 100, 每转 1 档为 1μ l);
20～ 200μ l( 读数窗显示 20～ 200, 每转 1 档 1μ l);
100～ 1000μ l( 读数窗显示 100～ 1000, 每转 1 档为 5μ l).
量液的操作步骤：
1． 将微量移液器装上吸头（不同规格的移液器用不同的吸头）
物， 15 分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。
3）工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。 4）操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂 擦拭消毒。
5）最后开启工作台紫外灯，照射消毒 注意事项：
30 分钟后，关闭紫外灯，切断电源。
操作时一定注意关掉紫外，防止对实验人员造成伤害
停止灯亮、
运行灯闪烁；按下启动离心开始（常用，最高转速为
13000r/min ，时间最长为 20 分钟）；
注意：对应的转子则对试管或转子有 损坏。
6、离心机时间倒计时到 “0”时，离心机将自动停止，当转子停转后，打开门盖取出离心管， 关断电源开关。
注意事项：
2、打开门盖，将离心管放入转子内，离心管必须成偶数对称放入，且要事先平衡，完毕用 手轻轻旋转一下转子体，使离心管架运转灵活。
3、关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关紧。
4、插上电源插座，按下电源开关（电源开关在离心机背面，电源座上方）
。
5、设置转子号、转速、时间：
在停止状态下时， 用户可以设置转子号、 转速、 时间， 此时离心机处于设置状态，
量液操作注意问题
1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2． 一定要在允许量程范围内设定容量， 千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围， 否 则会造成损坏。
3． 不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。 5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 二， 离心机的功能： 分离，纯化 注意事项：
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 低温台式高速离心机
离心机的分类
低速：每分钟几千转
高速：每分钟 1 ~ 3 万转
超速：每分钟 3 万转以上
离心机的功能： 分离，纯化
低速：细胞等大分子
高速： DNA ，蛋白等
超速 : 病毒，蛋白等，根据用途又可分为分析超速离心
机和制备超速离心机。
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段
使用及性能：
超净工作台为分子生物学无菌操作提供可能，分为垂直送风和水平送风两种。
超净台由三相电机作鼓风动力，功率 145～ 260W 左右，将空气通过由特制的微孔泡沫塑料
片层叠合组成的 “超级滤清器 ”后吹送出来， 形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流， 即所
谓“高效的特殊空气 ”，它除去了大于 0.3μm 的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流
4．电泳结束，仪器显示： “ END”，并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣 注意事项
1． 电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能 到电泳槽内取放东西，如需要应先断电， 以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端， 漏电。
以防
2． 仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生， 设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
1、预变性：可用 94～ 95℃， 2～ 10min, 一般用 5min。 2、变性：一般用 95℃， 30s~2min, 一般 45s~1min 。 3、退火：温度自定， 30s~2min 。 4、延伸： 72℃，对于〈 1kb=1min, 每增加 1kb 加 1min 。
5、循环数：一般 25～ 35 个循环 (2,3,4 步循环）。 6、最终延伸： 72℃， 5～ 15min 。 7、保存： 4℃，时间设为 0。
速为 24～ 30m/min ，这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染， 这样的流速也不会妨碍
采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。 工作人员就在这样的无菌条件下操作， 保持无菌
材料在转移接种过程中不受污染。 操作程序：
1）使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。
2）接通电源， 提前 30 分钟打开紫外灯照射消毒， 处理净化工作区内工作台表面积累的微生
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样 恒温气浴摇床
使用及性能：
摇床（振荡器）为实验室的常规设备。广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、
发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。实验室常用的液体摇匀，微生物、细菌和
细胞培养。
SHK-99- Ⅱ型台式空气恒温摇床，采用微电脑控制系统，温度范围：室温＋
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台面接触和均匀受力，以免产生振 动。
3、离心前， 离心管加液要平衡， 若加液差异过大运转时会产生大的振动，此时应停机检查， 使加液符合要求，离心试管必须成偶数对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机处理。
2． 将微量移液器按钮轻轻压至第一停点； 3． 垂直握持微量移液器， 使吸嘴浸入液样面下几毫米， 千万不要将吸嘴直接插到液体底部；
4． 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液 器内部，或吸入体积减少；
5． 等一秒钟后将吸嘴提离液面
6． 平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体；
7． 提起微量移液器，然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。 量液操作注意问题：
1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2． 一定要在允许量程范围内设定容量， 千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围， 否 则会造成损坏。
3． 不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。
4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5℃～ 60℃，精
度± 0.5℃；时间范围： 1 分钟～ 99 小时 59 分钟；转速范围： 60RPM ～ 250RPM
操作程序：
1）样品瓶牢固放入弹簧夹中
2）接通电源开关，仪器进入准备状态
3）参数设定， （设定温度、时间、转速等参数 ）
4） 按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转；
5）按下控制面板的电源键两秒，显示屏显示消失，关闭电源总开关 超净工作台
如是手动的灭菌锅， 在灭菌过程中， 应注意排净锅内冷空气， 锅内冷空气如排放不净， 会影 响灭菌效果，达不到彻底灭菌的目的。 要等温度降为 “0”，才可打开灭菌锅锅盖； 由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达 120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格 按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。
PCR 仪
8、 END 。
电泳仪
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。 电泳一般分为自由界面电泳和区带电
泳两大类， 自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、 等速电泳、密度梯度电泳及显微电
泳等， 这类电泳目前已很少使用。 而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，
常用的支
持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶
的十二烷基硫酸钠（ SDS）浸泡消毒。所有的细胞培养、细菌培养的操作，都应在紫外线消 毒后的超净工作台中进行 操作程序：
1）开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没至板上
2）通电：将控制面板上电源开关按至 ON 处，若水位低（ LOW ）红灯亮
3）堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过
200mm× 100mm× 100mm 为宜，各包装之
虽然仪器内部附
3． 由于不同介质支持物的电阻值不同， 电泳时所通过的电流量也不同， 其泳动速度及泳至 终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。