霍乱弧菌实验室检测ppt课件

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一、霍乱概述
• 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的
急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危 害严重的甲类传染病。 • 是国内交通检疫传染病之一。
• 也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。
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二、霍乱病原学
• 霍乱的病原学分类 • 霍乱的病原学特征
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样本采集、送检和保存
• 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～
3mL，亦可用棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm 处采取。急性期病人取水样便标本在增菌培养的同时 可取其粘液絮片或用棉拭子直接接种于碱性琼脂、 TCBS琼脂培养基。不能立即检查的粪便标本，要放入 碱性蛋白胨水中。
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疑似菌落初步鉴定：
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察， 如动力阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
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• 注意：
• 1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 • 2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动试验并
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霍乱弧菌抗原结构及分类
• 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热 的鞭毛（H）抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗 原有群特异性和型特异性两种抗原，是霍乱弧菌分群 和分型的基础。
• WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde ）和埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群 的特异抗原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A抗原与其他B与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC （稻叶，Inaba）、异型——AB（小川，Ogawa）和中间型 ——ABC（彦岛，Hikojima）。
革兰染色
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电镜负染色—鞭毛
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• 霍乱弧菌动力视频链接 http://v.youku.com/v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
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三、霍乱弧菌常规检验
样本采集、送检和保存 标本的检验流程
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霍乱实验室检测
2020/12/11
检验科
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霍乱病原菌发现
• 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 • 1 9 0 5 年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱
弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度 腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到 ElTor弧菌致病性 • 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌
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注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将 转种好的胨水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步 骤由微生物室来完成：门诊在上午11：00以后收到的标本， 需将转种好的胨水和患者化验单一起放置门诊35°C的培 养箱中培养，门诊拖班人员需跟当晚住院部夜班人员交班， 夜班人员需在转种胨水6-8h后看动力和转种庆大平板，记 录并审核结果，第二天由师傅将平板和化验单转运至微生 物室，后续步骤由微生物室来完成。
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检验流程
• 接收到大便动力弧菌培养标本，请先建单。方法如下
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1. 左键单击微生物检验，进入微生物检验窗口。
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2.单击标本号（左键、右键均可），会出现下拉框。单击“其它”
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3.该标本会由lis自动生成编号，如1505970005。
在LIS上记录和审核试验结果。 • 3.当动力和血清制动试验同为阳性时，为疑似霍
乱弧菌感染，要立即通知开单科室和医务处，对 病人采取相应的隔离治疗等必要措施。
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• 血清制动试验包括4瓶血清。第1瓶为O1群多价，第2、3 瓶为小川、稻叶型单价。第4瓶为O139群抗血清。当观察 到动力阳性，首先进行O1群多价的制动试验。如为阴性 ，接着做O139群的制动试验。两者均阴性，可初步排除 霍乱弧菌病感染。如O1多价制动试验阳性，则进一步进 行第2、3瓶的制动试验，即进行小川、稻叶型单价血清的 制动试验
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二、非01群霍乱弧菌：本群弧菌鞭毛抗原与01群相同，而菌体 （0）抗原则不同，不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集，依O 抗原之异，本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散 发的胃肠炎性腹泻，一般此类弧菌感染不作霍乱处理，但 1992年在印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行，后证实流行 菌不被01群和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为
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• 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力 ，进行6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入 35℃孵箱中培养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取 消之前的审核，在原报告单上进行审核（1505970005） 。
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Βιβλιοθήκη Baidu
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4.编号由lis自动生成后，根据病人实际信息，先选择“患者类别”，然后输 入患者编号（门诊号或住院号），项目类别自动显示为大便力霍乱弧培
养。最后一步，点“建单”。
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建单完成后，如下图
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• 5.取粪便标本在高倍镜暗视野下看动力，看完动力后，在“ 初步动力”栏录入结果（阴性或阳性），并审核打印报告 。同时粪便标本转种到碱性胨水中并放入35℃孵箱中培养, 在化验单上记录转种时间。
0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。
三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群 菌不产生肠毒素，因此无致病性
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霍乱病原学特点
• 形态与染色
– 弧状或逗点状 – 革兰染色阴性 – 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
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