高效液相色谱柱
watershsst3色谱柱说明书
watershsst3色谱柱说明书Waters HSS T3色谱柱是一种高效液相色谱柱,被广泛应用于生命科学、制药、环境和食品分析等领域。
该柱具有优异的分离性能和稳定性,可用于分离复杂的混合物,提供准确和可靠的分析结果。
以下是关于Waters HSS T3色谱柱的详细说明:1. 柱材料:Waters HSS T3色谱柱采用高质量的硅胶材料制成,具有特殊的表面处理,能够提供优异的色谱性能和稳定性。
2. 柱尺寸:Waters HSS T3色谱柱的常见尺寸为4.6mm乘250mm,具有较大的分离能力和样品容量。
此外,还提供其他规格的色谱柱可供选择。
3. 分离性能:Waters HSS T3色谱柱具有极好的分离性能,可有效分离复杂样品中的成分。
其独特的柱底和柱壁结构可以增强样品和柱相之间的相互作用,提高分离效果。
4. 稳定性:Waters HSS T3色谱柱具有出色的稳定性和重现性,可持续运行大量样品分析而不产生漂移或降解。
柱底和柱壁的特殊表面处理使得该色谱柱不易受到污染和损害,有助于保持柱的使用寿命。
5. 应用范围:Waters HSS T3色谱柱广泛适用于各种样品类型的分析,包括有机化合物、天然产物、药物、代谢产物等。
它可用于定量和定性分析,以及结构鉴定和纯化工作。
6. 色谱条件:Waters HSS T3色谱柱适用于反相液相色谱和离子对色谱法。
在反相液相色谱中,可以使用不同的流动相和梯度条件来优化分离效果。
在离子对色谱中,可以添加离子对试剂来改变运行条件。
7. 包装和存储:Waters HSS T3色谱柱以高压不锈钢柱体包装,旨在保护柱底和柱壁免受损坏和污染。
柱体上标有批号和有效期,以便用户能够正确追踪使用日期和有效期限。
该色谱柱应存放在避光、干燥和温度控制的环境中,以确保其质量和性能。
总之,Waters HSS T3色谱柱是一种优质的色谱柱,具有卓越的分离性能和稳定性,适用于各种复杂样品的分析工作。
高效液相色谱柱的选择
液相色谱柱的选择、使用、维护和常见故障的排除液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。
本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用:一、反相色谱柱的选择1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。
但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。
一般的C18柱PH值范围都在2~8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。
一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷。
同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。
如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时,建议选择PH范围大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。
2.填料的端基封尾(或称封口)把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾,可改善对极性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分离;填料稳定性好了,组分的保留时间重现性就好。
如果待分析的样品属酸性或碱性的化合物,最好选用填料经端基封尾的色谱柱。
3.戴安公司Acclaim柱子介绍—极性封尾C16固定相柱戴安公司有28种类型的柱子,Acclaim反相柱填料高纯,金属含量极低,完全封尾。
PH 2-9范围内兼容,低流失,高柱效。
尤其是2003年推出的Acclaim极性封尾C16柱,是最先商品化的磺酰氨-O链接键的色谱柱,具极低的硅羟基活性,能在极性溶剂甚至100%水的条件下长期使用。
对酸性和碱性化合物有极为尖锐的好的色谱峰形,与现有的一流色谱柱相比有更好的立体选择性。
(下图是Acclaim极性封尾C16柱和市售极性封尾一流色谱柱分离酸性化合物谱图的比较)二、液相色谱柱的使用色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
高效液相色谱柱的正确使用 液相色谱操作规程
高效液相色谱柱的正确使用液相色谱操作规程色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。
高效液相色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压,注意温度和酸碱度,正确及时的冲洗等。
1.加装保护柱保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。
尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。
保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。
保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(5~1次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
2.过滤流动相和样品流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。
当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。
所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。
要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。
装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
高效液相色谱柱
高效液相色谱柱高效液相色谱柱是一种在分析化学领域中广泛使用的技术。
它的原理是通过溶液在色谱柱中的流动过程中,对溶质进行分离和纯化。
高效液相色谱柱的优点是分析速度快、分离效果好、操作简便等。
本文将介绍高效液相色谱柱的原理、种类、应用以及未来的发展趋势等内容。
高效液相色谱柱的原理主要包括固定相和移动相两个基本要素。
固定相负责分离溶质,常用的固定相有疏水相、离子相、亲合相等。
移动相则是将溶质带动在柱子中流动的溶剂,通常是有机溶剂和水的混合物。
这样,在溶液在色谱柱中流动过程中,不同溶质会在固定相的作用下发生分离,从而实现对混合物的分析和纯化。
高效液相色谱柱根据固定相的不同可以分为几种不同的类型。
例如,疏水相色谱柱广泛应用于有机物的分离和分析,它的固定相表面通常具有疏水性,可以对有机物进行选择性的吸附和分离。
离子相色谱柱则适用于进行离子化合物的分离和分析,例如酸和碱等。
亲合相色谱柱主要是基于生物大分子与其他化合物之间的生物亲和性进行分析。
高效液相色谱柱在实际应用中有着广泛的用途。
在生命科学研究领域,高效液相色谱柱可以用于对蛋白质、核酸等生物大分子的分离和纯化。
在药物分析领域,高效液相色谱柱经常被用于药物的纯化和质量控制。
在环境监测方面,高效液相色谱柱可以用于对环境污染物的检测和分析。
此外,高效液相色谱柱还被广泛应用于食品安全、农药残留检测、天然产物分析等领域。
随着科学技术的不断进步,高效液相色谱柱也在不断发展和完善。
目前,研究人员正在努力提高高效液相色谱柱的分离效率和分离速度,使其更加适用于复杂物质的分离和分析。
同时,也在研发新的固定相和移动相,以满足不同类型化合物的分析需求。
此外,一些新的检测技术和装置也被引入到高效液相色谱柱中,提高对溶质的灵敏度和准确性。
总之,高效液相色谱柱是一种重要的分析技术,具有广泛的应用前景和发展空间。
它在生命科学、药物分析、环境监测等领域都有着重要的作用。
随着科学技术的不断进步,相信高效液相色谱柱在未来会发展出更多的新技术和新应用,为我们的科研和生产提供更多的支持和帮助。
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养一、高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养1. 注意安全在进行高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养时,应注意安全,不要将手放在柱子上或柱子的内部,以免受到电击。
同时,也要注意防止外界的杂质进入柱内,避免影响柱子的性能。
2. 清洁色谱柱首先,使用湿抹布将色谱柱表面清洁干净,然后使用笔刷和溶剂将柱子内壁清洁干净。
清洁完毕后,需要将柱子放置在洁净的空气中,以便完全自然晾干。
3. 保养色谱柱在保养色谱柱时,需要注意柱子的密封,定期检查柱子的密封情况,如果发现柱子有渗漏现象,及时采取措施进行修理。
另外,还需要定期检查柱子的耐压强度,以免因耐压强度不足而造成柱子的破裂。
4. 定期更换色谱柱定期更换色谱柱是高效液相色谱仪色谱柱的保养工作之一。
色谱柱的使用寿命一般为2-3年,随着使用时间的延长,色谱柱的性能会发生变化,从而影响测试结果的准确性。
因此,需要定期更换色谱柱,以保证测试结果的可靠性。
二、色谱柱的存储1. 色谱柱应存放在干燥、无污染的环境中,避免阳光直射,以免受到湿气和污染物的侵害。
2. 色谱柱应放置在室温下,避免高温环境,以免影响色谱柱的性能。
3. 色谱柱应存放在通风良好的环境中,避免过多的湿气,以免影响色谱柱的密封性能。
4. 色谱柱应存放在有足够空间的地方,以免柱子撞击,造成损坏。
5. 色谱柱应存放在牢固的架子上,以免柱子受到重力的影响,造成损坏。
6. 色谱柱应存放在有足够防护措施的地方,以免受到杂质的污染,影响柱子的性能。
三、总结高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养是高效液相色谱仪色谱柱使用的必要措施,既要注意安全,又要注意清洁和保养,定期更换柱子,并且要认真维护存储环境,以确保高效液相色谱仪色谱柱的正常使用。
agilent高效液相色谱仪用的色谱柱
一、概述1.1 随着科学技术的发展,高效液相色谱仪在化学、生物等领域中发挥着日益重要的作用。
1.2 色谱柱作为高效液相色谱仪的核心部件,对于色谱分离的效果和质量具有至关重要的影响。
1.3 本文将重点介绍Agilent高效液相色谱仪用的色谱柱及其应用。
二、Agilent高效液相色谱仪用的色谱柱概述2.1 Agilent是一家知名的科研和生命科学领域的仪器设备制造商,其生产的高效液相色谱仪广泛应用于实验室。
2.2 Agilent的高效液相色谱仪用的色谱柱具有高分辨率、高分离效率、稳定性好等特点,适用于各种复杂样品的分析和检测。
2.3 Agilent色谱柱的种类繁多,根据不同分析需求,可选择不同品牌、规格和填料的色谱柱进行使用。
三、Agilent高效液相色谱仪用的色谱柱的分类及特点3.1 根据填料种类的不同,Agilent色谱柱可分为正相、反相、离子交换、手性等不同类型。
3.2 正相色谱柱适用于亲水性物质的分离,反相色谱柱适用于疏水性物质的分离,离子交换色谱柱适用于带电离子的分离,手性色谱柱适用于手性分子的分离。
3.3 Agilent色谱柱的特点包括:分离效果好、重复性好、稳定性好、寿命长等。
四、Agilent高效液相色谱仪用的色谱柱的应用4.1 在药物分析领域,Agilent色谱柱可用于分离和检测各种药物成分,包括药物中间体、代谢产物等。
4.2 在环境监测领域,Agilent色谱柱可用于分析土壤、水质、大气等样品中的有机污染物、农药等化合物。
4.3 在食品安全领域,Agilent色谱柱可用于分析食品中的添加剂、农药残留、毒素等有害物质。
4.4 在生物学研究领域,Agilent色谱柱可用于分析蛋白质、氨基酸、核酸等生物大分子。
五、Agilent高效液相色谱仪用的色谱柱的维护和管理5.1 定期检查色谱柱的使用情况,根据柱前负荷情况选择不同的柱后保护装置。
5.2 注意使用和存储环境,避免高温、湿度、阳光直射等情况。
高效液相色谱柱注意事项
高效液相色谱柱注意事项高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的调配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分别成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱柱注意事项:1、柱效和保护柱拿到一根新柱时,肯定要先看其使说明,然后测柱效,定期检测柱效,保存在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件,定期检测仪器的谱带展宽。
若应用于在线监测,应对色谱柱供应在线的物理保护和化学保护,例如采取安装在线过滤器,自装填料保护柱和预装保护柱等。
在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效,在需要高柱效的时候常用,常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。
缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效,特别是在用微柱时,常用的是普通自装填料的保护柱。
近新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱,它的特点是高质量、高效填料、加添分析柱效、对脏样品载荷本领大,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,重要适用于特别脏特别多而杂的样品本底,例如生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情况。
2、清洗对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱本领强的流动相清洗,对于硅胶柱,先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100—20OraL依次活化,对于键和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗,每种色谱柱有特定的清洗方法,肯定要看其使用说明。
3、存放存放前除掉杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避开色谱柱床的干枯,避开机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。
5 % 二苯基-95 % 二甲基聚硅氧烷色谱柱
5 % 二苯基-95 % 二甲基聚硅氧烷色谱柱
5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷色谱柱是一种常用的高效液相色谱柱,它的固定相是由 5%的二苯基和 95%的二甲基聚硅氧烷组成的。
这种色谱柱通常用于分离非极性或弱极性化合物,如烃类、脂肪酸、酯类、酮类等。
5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷色谱柱的优点包括:1. 高分离效能:由于其固定相的特殊组成,这种色谱柱能够提供较高的分离效能,对于复杂混合物的分离具有较好的效果。
2. 良好的稳定性:二苯基和二甲基聚硅氧烷的化学稳定性较好,能够在广泛的 pH 范围内使用,并且不易被极性化合物破坏。
3. 广泛的适用性:这种色谱柱适用于多种类型的化合物分离,包括非极性、弱极性和中等极性的化合物。
在使用 5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷色谱柱时,需要注意选择合适的流动相和流速,以获得最佳的分离效果。
同时,还需要注意柱子的保养和维护,定期进行清洗和再生,以延长柱子的使用寿命。
高效液相色谱仪色谱柱类型
高效液相色谱仪色谱柱类型
高效液相色谱仪可使用多种色谱柱类型,其中常见的有以下几种:
1. 反相色谱柱(Reverse Phase Chromatography Column):常用于非极性或弱极性物质的分离,如有机化合物的分析。
常见的填充物包括C18、C8、C4、C2等。
2. 正相色谱柱(Normal Phase Chromatography Column):适用于极性化合物的分离,如小分子有机物和天然产物。
填充物常见的有二氧化硅(Silica)等。
3. 离子交换色谱柱(Ion-exchange Chromatography Column):适用于离子样品的分离。
根据离子的带电性质,分为阳离子交换和阴离子交换两种类型。
4. 锁相色谱柱(Size Exclusion Chromatography Column):适用于大分子化合物的分离,如蛋白质、聚合物等。
通过孔径大小的区别,将大分子排除在柱外,使小分子进入柱中分离。
5. 亲和色谱柱(Affinity Chromatography Column):适用于生物分析中的特定分离。
通过样品与柱中的特定配体结合,实现分离和富集。
6. 手性色谱柱(Chiral Chromatography Column):适用于手性化合物的分离。
填充物上带有手性选择性,可以区分和分离两种手性异构体。
这些色谱柱类型的选择取决于分析物的性质、研究目的以及仪器的配置。
不同的色谱柱类型具有不同的分离机理和分离性能,可以根据实际需求选择合适的柱型。
超高效液相色谱柱
超高效液相色谱柱
超高效液相色谱柱,简称UHPLC柱,是一种用于分离复杂混合物的高灵敏度、高分离性以及高精密度的柱填料。
它使用高流动速率,以及微小的孔径大小和细长的柱体,能够更快地将混合物分离出来。
UHPLC柱具有极高的分离效率和良好的精确度,且分析时间更短,并且对样品的要求也比传统的液相色谱柱要求更低,因此被广泛用于生命科学领域的分析检测中。
UHPLC柱的工作原理是利用液体的压力来把混合物分离开,基本过程是将样品加入柱内,然后通过柱腔内的驱动力,利用液相色谱的原理,将样品里的不同组分慢慢分离出来,最后收集分离出来的每一组分。
UHPLC柱具有细长柱体,小孔径以及高流速,使得它具有更高的分离效率,而且分离时间更短。
UHPLC柱的优点是分离效率高、分离快、灵敏度高、精确度高。
由于它分离更快,因此可以避免部分组分降解或凝固,防止样品组分的损失。
即使是一种复杂的混合液,也可以在更短的时间内完成分离,从而节省大量的时间和人力资源。
它的灵敏度很高,可以更准确地检测出来,精确度也更高,因此它可以提供更准确的数据。
然而,UHPLC柱也有一些缺点。
由于柱体很细,孔径很小,因此运行时易于堵塞,容易造成故障,需要定期维护和清洗,以保证柱的性能。
另外,UHPLC柱的价格高于传统的液相色谱柱,因此不太适合小型实验室的使用。
总之,UHPLC柱是一种高效的色谱柱,具有极高的分离效率和精确度。
它可以更快更准确地将混合物分离出来,而且分析时间更短,在不同的分析检测中有着广泛的应用。
但是由于它价格昂贵,容易堵塞,所以仍然有一定的局限性。
高效液相色谱柱基础知识
色谱柱的种类
➢ 高分子聚合物 • 常用的是以高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或聚甲基丙
烯酸酯为基质的球形填料。 • 压力限度比无机填料低; • 在整个pH范围内稳定,可以用NaOH或强碱来清洗
分离有机酸、碱、盐这些离子型化合物。 ➢ 样品容量随烷基链长增加而增大,且长链烷基可
使溶质的保留值增大,并常常可改善分离的选择 性;短链烷基键合相具有较高的覆盖度,分离极 性化合物时可得到对称性较好的色谱峰。苯基键 合相与短链烷基键合相的性质相似。
反相键合相色谱
流动相为极性的水或缓冲液,常加入甲醇、 乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶 的有机溶剂以调节保留时间。
ZORBAX Extend-C18,pH9~12, ➢ 基质的颗粒度 颗粒度越小:柱效越高(传质好,涡流扩散小),分离度越好,柱压
越高(渗透性差),常用5μ。 ➢ 基质的颗粒分布 颗粒分布越宽:柱效低(渗透性差) ➢ 基质的颗粒形状 球型:柱效高、重现性好、柱床结构均匀 无定型(不规则形状):柱床结构不均匀,流动相线性速度不均匀,
色谱柱 ; • 聚合物基质在流动相发生变化时会出现膨胀或收缩,
对于小分子化合物柱效低; • 主要用于大分子化合物,常制成凝胶柱或离子交换
柱。
化学键合相色谱柱
➢ 定义:将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶 表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。
➢ 种类 非极性键合相(反相):键合相表面基团为非极性
高效液相色谱柱基础知识
张润平
色谱柱的构造
✓ 色谱柱由柱管、填料压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、 于70 kg/cm2 时,也可采用 厚壁玻璃或石英管。为提高柱效,减小管壁效应,管内壁要求 有很高的光洁度,不锈钢柱内壁多经过抛光。
高效液相色谱(HPLC)柱效测定
实验六高效液相色谱(HPLC)柱效测定093858 张亚辉一. 实验目的1、学习高效液相色谱仪的基本操作方法。
2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。
3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。
二. 实验原理高效液相色谱法是以液体作为流动相,借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。
在高效液相色谱中,若采用非极性固定相,如十八烷基键合相,极性流动相,即构成反相色谱分离系统。
反之,则称为正相色谱分离系统。
反相色谱系统所使用的流动相成本较低,应用也更为广泛。
定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。
分离度(R)的计算公式为:R= 2[t(R2)-t(R1)] /1.7*(W1+W2)式中 t(R2)为相邻两峰中后一峰的保留时间; t(R1)为相邻两峰中前一峰的保留时间; W1及W2为此相邻两峰的半峰宽。
除另外有规定外,分离度应大于1.5。
本实验对象为邻苯二甲酸酯,又称酞酸酯,缩写PAE,常被用作塑料增塑剂。
它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品,如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。
但研究表明,邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用,是一类内分泌干扰物。
待测物性质见表1。
表1色谱柱测试条件如果要检测不同条件对谱图分离的影响,可按表1配制几种物质的混合溶液,在不同条件下进行HPLC分离检测。
三.仪器与试剂1、仪器Agilent 1100高效液相色谱仪,50ul微量注射器。
2、试剂甲醇(色谱专用),高纯水四. 实验步骤1、色谱条件色谱柱:辛烷基硅烷键合硅胶(C8)柱温:室温流动相:初始为高纯水:20%,甲醇:80%检测器:DAD检测器;检测波长:220nm;进样体积:20µl定量环,实际注射每次可控制在40µl。
高效液相色谱柱
其他无机物填料柱
这类色谱柱仅限于特殊用途,主要有石墨化碳、氧化铝(Al2O3)、氧化锆(ZrO2) 等填料。不需要进行表面改性,其自身表面即可对各类化合物有强保留。可在任意pH (氧化铝除外,不能大于12.0)及高温度(可达100℃)下使用。其中,石墨化碳填料
柱能分离多种化合物,主要用于分离几何异构体;氧化铝柱刚性强,柱床稳定,可分离 多种化合物且多用于制备色谱;氧化锆柱较氧化铝柱有更强的pH适用范围及能耐受更高 的温度,但其应用尚待进一步研究。
2.液相色谱柱的分类与应用范围
分类方法很多,可按键合相类型、用途(分析型与制备型)、基质种类 等进行分类。 硅胶基质柱(4大类):
目前,分析型液相色谱柱多为硅胶基质柱,细分为: 高纯硅胶柱:以高纯度硅烷化硅胶( Silica )为填料,应用范围较广,但只能在 PH2.0-7.5,小于60度的条件下使用。又由于强极性硅羟基(Si-OH)的次级保留效 应较强,所以应用受到局限,已被键合相柱所取代。 反相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合弱极性官能团的固定相。目前多 用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(phenyl,苯基)等。用于分离大 多数有机化合物,应用范围最广。 正相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合极性官能团的固定相。目前较多 的为:NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羟基,也常做HILIC单独分类 列出,多用于分离有机酸、蛋白质等)。多用于分离光学异构体和反相柱子不能 分离的极性比较大的物质 。
③特别说明:如不是特殊情况,按其他办法可行,则最好不要反冲色谱柱和拆卸筛板。
(2)柱效降低:主要特征性现象有柱压基本正常,但出现拖尾峰、秃峰、分叉峰、 前延峰、峰变宽、基线漂移、理论板数降低、分离度降低等。需要进行再生处理,具 体方法如下:
高效液相色谱柱
高效液相色谱柱高效液相色谱技术是一种广泛应用于化学、分析、生物学、材料科学等领域的分析技术。
近年来,随着科学研究专业技术的发展,高效液相色谱柱也发展了出更高精度和更低操作费用的性能。
高效液相色谱柱是一种常用的分离和分析技术,它可以快速、精确地测定复杂的混合物组分,而无需进行复杂的操作。
高效液相色谱柱主要由柱体、填充体和检测器等部件组成,它们分别具有灵活的结构和形状,可以满足各种研究需求。
柱体主要由色谱管、高压胶管、检测器和泵等组成。
色谱管用于将被测物质按照不同物分率和分子量分离,高压胶管用于将溶剂从柱体中顺流滴定,检测器用于收集柱体的信号,泵用于将溶剂或样品从柱体中压入检测器。
此外,高效液相色谱柱具有良好的分离能力。
它可以将混合物组分按照物种大小,以不同的程度分离出来。
分离后的物种具有良好的精确度,尤其是用于分析复杂混合物中的微量元素,精度几乎等于单一成分的分析测定。
此外,高效液相色谱柱的操作费用也比较低。
分离过程可以使用最少的溶剂,而且操作程序也比较简单,可以减少操作时间和费用的开支。
此外,它的操作成本还比传统的液相色谱柱更低,而且可以节约溶剂使用量更少,减少人力及场地面积的支出。
另外,高效液相色谱柱还具有极高的安全性能。
它采用特殊构造设计,使系统操作具有高度可靠性,能够很好地防止系统操作失误,有效预防因进料、泵和柱头损坏等原因造成的意外污染,更大程度地保护环境。
综上所述,高效液相色谱柱是一种重要的分离技术,具有极强的分析能力、准确性、费用效益和安全性等优点,在对混合物组分进行快速和精确分离分析方面具有重要应用。
此外,该技术也可以广泛应用于化学、分析、生物学、材料学等领域,为科学研究带来优质的技术支持。
因此,高效液相色谱柱也受到了越来越多的青睐,它不仅可以提高分析效率,提高研究质量,而且还可以降低分析成本,使研究人员更容易、更有效地开展复杂的科学研究。
五氟苯基色谱柱
五氟苯基色谱柱
五氟苯基色谱柱是一种高效液相色谱柱,在化学分析中被广泛应用。
一、什么是五氟苯基色谱柱?
五氟苯基色谱柱是以五氟苯基为固定相的液相色谱柱。
它的独特化学
结构使它具有卓越的分离能力和高效的保留能力。
二、五氟苯基色谱柱的优点
1. 分离能力强:五氟苯基色谱柱具有强极性和高覆盖度,可用于分离
各种化合物。
2. 保留能力高:五氟苯基色谱柱表面较为极性,能与样品中的高极性
化合物有较强的相互作用,从而达到有效保留的效果。
3. 耐高温性能好:五氟苯基色谱柱可以在高温下工作,有助于提高柱
子的使用寿命。
4. 良好的合理性:使用五氟苯基色谱柱可以更好地控制某些有机物的
相互作用,这有助于提高某些化合物的分离效果。
三、五氟苯基色谱柱的应用
五氟苯基色谱柱主要用于分离和定量化合物,其应用领域包括:
1. 分析和检测食品中的有毒物质和添加剂。
2. 分离和定量药物及其代谢产物。
3. 气相色谱和液相色谱的衍生物分析。
4. 氯代芳烃、硝基芳烃等有机物的分离和定量。
四、五氟苯基色谱柱的维护
1. 五氟苯基色谱柱使用后应保持干燥,并放置在低温处。
2. 五氟苯基色谱柱使用前应洗涤干净,避免杂质污染。
3. 避免使用不当的洗涤剂或容器,以免损坏色谱柱。
4. 使用过程中不得超过最大使用压力限制,以免损坏色谱柱。
五、结论
五氟苯基色谱柱具有卓越的分离和保留能力,广泛应用于分析和检测
领域。
对于使用五氟苯基色谱柱的分析,需要注意柱子的维护和保养,以延长其使用寿命。
色谱柱hp和db
色谱柱hp和db全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:色谱柱是色谱分析中必不可少的设备之一,扮演着分离和分析样品成分的重要角色。
目前市场上常见的色谱柱主要有HP(高效液相色谱柱)和DB(气相色谱柱)两种类型。
它们在不同的分析场景下具有各自的优势和特点,下面我们就来详细介绍色谱柱HP和DB。
HP色谱柱(High Performance Liquid Chromatography Column)是一种针对液相色谱技术的色谱柱。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,被广泛应用于食品、医药、环境等各个行业的分析领域。
HP色谱柱的填料通常是一种多孔的固定相,填料的种类和粒径大小会直接影响到柱的分离效果。
HP色谱柱通常要求在高压下进行分离,因此需要使用高压液相色谱系统进行操作,同时还需要使用高品质的溶剂、梯度和检测器等辅助设备。
HP色谱柱的应用场景非常广泛,比如在医药行业中,HP色谱柱可以用于检测药物的纯度和含量;在环境监测中,HP色谱柱可以用于检测水质和大气中的污染物;在食品行业中,HP色谱柱可以用于检测食品中的添加剂和残留物等。
HP色谱柱的应用范围涵盖了许多领域,并且具有高效、准确、灵敏等优点,是色谱分析中不可或缺的重要设备。
与HP色谱柱相对应的是DB色谱柱(Deactivated Borosilicate),是一种适用于气相色谱技术的色谱柱。
DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,被广泛应用于各种气相色谱分析中。
DB色谱柱的填料通常是一种不活性的硼硅玻璃,填料的粒径大小和孔径大小不仅影响到柱的分离效果,还直接影响到样品的进样量和分析速度。
HP色谱柱和DB色谱柱是色谱分析中常见的两种色谱柱类型,它们在液相色谱和气相色谱分析领域中有着各自的优势和特点。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,适用于液相色谱分析;而DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,适用于气相色谱分析。
watersxbridge苯基柱使用说明
watersxbridge苯基柱使用说明摘要:1.简介2.苯基柱的安装与拆卸3.流动相的选择与配制4.流速的设置5.分析条件的优化6.常见问题与解决方法7.注意事项正文:Waters XBridge 苯基柱是一款高效液相色谱柱,适用于液相色谱(LC)分析。
在使用前,请确保充分了解并遵循以下使用说明。
1.简介Waters XBridge 苯基柱是一款用于液相色谱(LC)的高效液相色谱柱。
它具有柱效高、柱压低等优点,广泛应用于生物制药、食品分析等领域。
2.苯基柱的安装与拆卸在安装苯基柱时,请确保柱温低于30 摄氏度。
首先,将柱芯插入色谱柱入口,然后顺时针旋转至柱芯无法继续旋转。
在拆卸时,请逆时针旋转柱芯以松开,然后轻轻取出。
3.流动相的选择与配制流动相是液相色谱分析过程中样品在柱子中移动的介质。
根据需要分析的样品选择合适的流动相,如水、乙腈、甲醇等。
流动相需要使用去离子水和有机溶剂(如乙腈)配制,以获得适当的离子强度和极性。
4.流速的设置流速是液相色谱分析过程中样品在柱子中移动的速度。
根据色谱柱的规格和样品的要求设置流速,流速过快可能导致峰形变差,流速过慢则可能导致分析时间延长。
5.分析条件的优化分析条件的优化包括温度、流速、有机溶剂比例等因素。
根据样品分离的需要,调整这些条件以获得更好的分离效果。
6.常见问题与解决方法在使用苯基柱过程中,可能会遇到峰形异常、出峰时间过长等问题。
检查流动相、柱温是否合适,尝试调整流速,以解决这些问题。
7.注意事项在使用苯基柱时,请遵循液相色谱的操作规程。
避免柱子在高温下长时间存放,以免影响柱效。
总之,正确使用Waters XBridge 苯基柱,可以提高液相色谱分析的准确性和效率。
高效液相色谱柱
高效液相色谱柱高效液相色谱柱(HighPerformanceLiquidChromatographyColumns,简称HPLC柱)是一种特殊的色谱柱,其具有更高的分离性能,也是液相色谱分析中重要的仪器部分。
HPLC柱具有广泛的应用前景,主要用于分析有机化合物、药物、生物组分等复杂的混合物,可以快速准确地分离和检测产品中的各种成分,因此在医药、食品分析等多个领域都有重要的意义。
HPLC柱的结构非常简单,并且有很多种不同的选择,即使是同一种柱,也有不同的尺寸。
HPLC柱的材料主要有:气凝胶、硅胶、聚乙烯、硅硫酸钠等,其中,气凝胶HPLC柱最常用,因为它具有良好的疏水性、耐酸碱性以及稳定的固定相层,而且表面活性不错,能很好的把溶质离子和分子结合起来。
另外,HPLC柱具有强大的分离气体和液体的能力,可以用于分离高分子溶质,如蛋白质、核酸、糖类、脂肪酸、金属离子和碳水化合物等。
液相色谱柱具有快速分离、高效率、重复性好和可调的各种参数的优势,是现代色谱分析中必不可少的仪器。
HPLC柱的常见应用包括药物分析、食品检测、化妆品质量检测、营养指标测定以及环境污染物检测。
药物分析是HPLC柱最常见的应用,主要用于测定有效成分、杂质和药剂强度等,如果这些参数超出了规定范围,则被认为是不合格品;此外,HPLC柱还可以用于饮料、食品质量检测,可以帮助检测样品中含量,如糖分、油脂、酸度、灰分、色素、有机氯等。
最后,HPLC柱的安全性也很高,使用时无需过多的控制和维护,操作简单,即使存在不良因素也可以精确地辨认溶质。
HPLC柱为科学研究提供了快速准确的数据,在惰性度检测、环境污染物检测等多个领域都有应用,也为后续的研究提供了可靠的基础。
总之,HPLC 柱是一种可靠的、高效的仪器,它在现代生命科学以及药学领域有着广泛的应用,未来将受到更多关注。
超高效液相色谱原理
超高效液相色谱原理
超高效液相色谱(Ultra-High Performance Liquid Chromatography, UHPLC)是一种高效的液相色谱分析技术。
超高效液相色谱的原理是利用特殊的色谱柱和高压泵进行分离,使得液相流动速度更快,分离效率更高。
具体原理如下:
1. 色谱柱选择:UHPLC常用的色谱柱粒径一般为1.8-
2.6 μm,相比传统液相色谱的
3.5-5 μm,更小的粒径可以提高色谱分离效率。
2. 高压泵:UHPLC使用高压泵提供高压力驱动液相流动,一
般工作压力可达到6000 psi或更高。
高压使得液相在色谱柱中
流动更快,加快分离过程。
3. 短柱长:UHPLC一般采用较短的色谱柱(通常为1-5 cm),与传统液相色谱相比,短柱可以减少柱内扩散,使得分离效率更高。
4. 快速检测器:UHPLC通常配备高灵敏度的快速检测器,如
紫外-可见光检测器(UV-VIS),质谱检测器等。
快速检测器
可以实时监测样品的测定信号,加快分析速度。
总的来说,UHPLC通过使用特殊的色谱柱、高压泵和快速检
测器等设备,提高了液相流动速度和分离效果,从而实现超高效的液相色谱分析。
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高效液相色谱柱
怎样选择色谱柱
现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。
但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。
1、正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
2、反相色谱
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料
聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
三、其他无机填料
其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。
由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。
如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。
这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。
氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。
但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达100℃。
由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。
怎样选择填料粒度
目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3um、5um
和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。
粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。
如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很有用的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相谱的背压却是5um的2倍。
与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
一、如何保证良好的柱性能与柱寿命
◆认证阅读色谱柱使用说明书;
◆使用填充良好的色谱柱;
◆尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;
◆使用保护柱及在线过滤器;
◆经常以强溶剂冲洗色谱柱;
◆充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与强保留成分;
◆用稳定的固定相(C18最稳定);
◆在中等PH值操作(6~8),用有机缓冲溶液;
◆色谱柱使用温度最好小于40℃;
◆硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0;
◆在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠;
◆流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;
◆过夜或贮存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存(乙晴最好)。
HPLC固定相及应用范围
二、如何解决色谱柱使用过程中出现的问题
1.保留值与分离度重现性不好原因分析
2.造成色谱峰(不对称)拖尾的原因
1.色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷;
2.柱头有污染;
3样品超载;
4样品溶剂不合适;
5.柱外效应;
6化学或二次保留(硅羟基)效应;
7缓冲容量不足或不合适;
8重金属污染。
3.如何解决峰形拖尾的问题
A.与化学有关的拖尾问题
1.流动相中,加入30mM的三乙胺(用与碱性化合物)或醋酸胺(用与酸性化合物),未知化合物加醋酸三乙胺;
2.如仍然拖尾,将三乙胺换为二甲基辛胺(或醋酸二甲基辛胺);
3.降低进样量至<1ug。
B.与色谱柱有关的拖尾问题
1.如柱头处有强保留的样品组分积聚,反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲醇,加1%氢氧化铵混合液冲洗,正向柱可用甲醇冲洗。
2.使用保护柱
C.与HPLC 系统有关的峰拖尾和峰加宽
1.进样体积过大,(通常≤25uL);
2.进样阀与色谱柱及检测器之间的管路体积过大(最佳连接管应<20cm,内径为0.007″);3.检测器流通池的体积过大。
4.如何储存色谱柱
1.防止缓冲溶液和水溶液流动相产生微生物,做到流动相用多少配多少,或在水流动相中加200ppm的叠氮钠以抑制细菌成长(一定当心其毒性和潜在的爆炸性);或在流动相中加20%的有机改性剂,也可抑制微生物生长,有机改性剂还有助于流动相脱气。
2.尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙晴最好)中,避免在缓冲溶液中保存。
3.使用缓冲溶液后的色谱柱,应用15~20倍柱体积的不含缓冲剂的同种水—有机溶剂流动相冲洗色谱柱,后换成100%有机溶剂储存。
4.避免用纯净水冲洗键合致密的C18柱。
5.将色谱柱的两端用堵头拧好,以免柱床填料干裂。
如何选择保护柱
怎样选择保护柱,但又不能影响分离分析?这是色谱工作者经常提出的一个问题。
通常,在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁。
对于大部分分析工作者来说,一只1cm长的保护柱,那么就应选择2cm或3cm长的保护柱。
保护柱越长,自然所装填的色谱填料就越多,则其越能避免污染物进入分析色谱柱的机会。
当然,随着保护柱的长度加长,样品的保留时间会比使用短保护柱长。
一般来说,保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或相当即可。
保护柱的填料装填方式也很重要。
目前有薄膜装填法的保护柱,使用过程很简单方便,而且可以在实验室中进行干装。
但是,其最大的缺点是不经济,特别是针对中国的具体情况,一次性使用相对费用较高。
另外,薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限,只能提供有限的保护作用;不过也因为所装填的色谱料较少,保护柱的长度也较短,所以对分析样品的保留时间的影响也很小。
另一种保护柱结构其实质是缩短了的色谱分析拄,设计方式上有直连式、手紧式或整体式。
整体式设计是由色谱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的,必须与色谱分析柱一同订货,可以非常方便地使用,但不能够被修改。
直连式结构设计可在任何时候有色谱工作者来安装连接,可以与任何品牌的色谱分析柱连接使用,而且还可以根据样品的相关情况选择不同的保护柱长度。
手上紧即可。
另外从保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯。
可以降低保护柱的使用成本。
大多数人是根据色谱分析柱的填料选择保护柱的填料,正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。
但是,根据实际的分析工作,也可不必与分析色谱柱的填料完全相匹配。
对于选择保护柱的原则是:在满足分析分离要求的前提条件下,尽可能的选择较短的保护柱结构,尽可能选择对分离样品小一些保留性的填料。