葛根解酒功效的研究

葛根解酒功效的研究

1，葛根提取液的配制

考虑到乙醇作为提取溶剂会影响葛根解酒功效的实验结果，故选用蒸馏水作为提取溶剂;另外为保证提取率，增加了提取次数。

称取葛根饮片(小方块长约3一scm)1209于大烧杯中，用蒸馏水在超声清洗器中超声

提取3次，每次3Omm，超声温度70℃，固液比为1:10，每次都要经4000转m/m离心机离心过滤30min，然后弃去滤渣，将滤液合并，在真空旋转蒸发仪浓缩至120IllL。得到浓度相当于1克生药/ml的溶液，备用。

2动物管理

小鼠购得后，先在动物室适应3天。动物室温度20℃，湿度为60%，通风良好。小鼠采用分笼饲养，每天早晚各添加饲料一次，自由进食和饮水。3天后开始正式作实验

4饮用酒用量的选择

取小鼠(雌雄兼用)25只，随机分为5组，每组5只。禁食12小时后，各组分别按比

例(酒量:体重)灌胃饮用白酒北京红星二锅头01毗/109、o15mL/10g、oZmL/10g、

025毗/lg0·O3mL/10g，观察小鼠醉酒率及死亡情况。小鼠醉酒与否以翻正反射消失作为指标，即将小鼠背向下轻轻放在动物笼里，若仰位姿势保持305以上，则认为翻正反射消失。5防醉药效实验

防醉药效实验即先灌胃药物再灌胃饮用酒。取小鼠(雌雄兼用)20只，随机分为2组，

每组10只。分别为:空白对照组和葛根提取液受试药物组。禁食1h2后，空白对照组灌胃

0lmL/10g蒸馏水;受试药物组灌胃ollllL/109葛根提取液。2组均在3omm后以。巧mL/109 剂量灌胃饮用酒。记录各组的醉酒(翻正反射消失)和醒酒(翻正反射恢复)时间(以给酒后

开始计时)。

.2.2.76醒酒药效实验

醒酒药效实验即先灌胃饮用酒再灌胃药物。分组方法同防醉实验，只是将2组先灌胃

O巧mL/109剂量饮用酒，30mm后再灌胃olmL/1g0药物。记录2组的醒酒(翻正反射恢复) 时间(以给酒后开始计时)。

7对小鼠血液乙醇浓度的影响

乙醇脂溶性较大，可透过血脑屏障入脑，其在脑内的浓度与血中浓度差别不大，因此可以根据血中乙醇浓度推断酒醉状态，作为考察葛根解酒防醉药效的指标。

东北农业大学工学硕士学位论文

(1)动物分组

将40只小鼠(雌雄兼用)随机分为2组:空白对照组和葛根提取液受试药物组。每组

20只。禁食12小时后，受试药物组先灌胃葛根提取液ollllL/109，空白对照组灌胃同剂量蒸馏水，30mm后再均灌胃饮用酒。巧mL/109。方法同防醉酒实验。然后分别于灌胃饮用酒3Omln、6Omln、gomln、12Omln、18Omln后每组各取4只断头取血。

(2)血乙醇(ALc)定量试剂盒原理及方法

A血乙醇(ALc)定量试剂盒原理:

乙醇一NAD+→乙醛+NADH+

在34n0m波长下，测定每分钟NADH吸光度的变化值(AA/分钟)大小与乙醇含量成正

仁匕。

B工作试剂的制备:

根据血乙醇(ALc)定量试剂盒说明书操作，ALc干粉用smL缓冲液(试剂盒自带)

溶解，放置3一smm后即可应用。在2一SC，48小时内稳定。吸取20林L乙醇浓缩标准液(试剂盒自带)加30IllL蒸馏水混合，配制成标准应用液。其浓度为:IOmmoL几。当日应用。

3)样品的测定

小鼠断头取血后，血样收于15mL离心管中，放在离心管架上，置于4一8ċC冰箱中过夜，使血清充分析出，小心避免溶血，次日将血样经4o00/rmm离心机离心10min，进一步沉淀分

离红细胞。取上层血清50林L，加入至500林L的血乙醇(ALc)工作试剂中，即可在半自动生化分析仪上进行检测。进样前后均以蒸馏水充分清洗比色池，以50匹蒸馏水加入至500林L

的血乙醇(ALc)工作试剂作为空白调零;以50林L配制好的标准应用液加入至500林L的血乙醇(ALc)工作试剂作为标准。无样品空白输入。直接所得读数即为样品血乙醇的浓度。

8解酒功效实验结果数据处理

解酒功效实验数据结果均用统计学处理，实验数据用均数士标准差表示(万士S)表示，

采用t检验判断组间是否存在差异性。

2饮用酒量的选择

按照阵274}所述方法进行。结果显示以OlmL/10g、O巧mL/10g、02毗/109、O25mL/10g、03毗/lg0分别给小鼠灌胃饮用白酒。结果显示:oZmL/10g以上剂量组即有小鼠发生急性酒

精中毒死亡。而。.15mL/109剂量既有翻正反射消失，使小鼠呈现醉酒状态(翻正反射消失) 而又无小鼠死亡，所以本实验选用O巧毗/109饮用酒量为宜。

3防醉药效实验

按照【2275]所述方法进行。结果见表3一20。

结果与分析

表3一20防醉药效实验结果

Tab3一20The resul of drug eeffect of Prventing drunk

组别动物数(只) 醉酒数(只) 醉酒时间(min) 醒酒时间(min)

空白对照组10 10 94士427 28480士3429

受试药物组10 10 156士384 24230士1394

注:*受试药物组同空白对照组比p<005:**受试药物组同空白对照组比p<001

结果可以看出:受试药物组与空白对照组相比较，从正常到醉酒时间相对延长了6596%，

而醒酒时间相对提前了1492%。醉酒时间和醒酒时间二个指标均存在着明显的显著性差异(p<001)。说明了葛根提取液的确可以在饮酒前起到显著的防醉效果。