诱发蚕豆根尖细胞微核试验研究

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4种环境污染试剂诱导蚕豆微核现象的研究

4种环境污染试剂诱导蚕豆微核现象的研究杨蓓;许守明;赵丽芸;苏思【摘要】[目的]检测4种试剂处理后蚕豆的微核情况,以此评估一些污染物的危害性.[方法]通过蚕豆根尖微核试验,根据微核出现的频率来评价环境诱变因子对蚕豆微核的损害程度,镜捡计数后计算微核率.[结果]甲醛、丙烯酰胺、硝酸铅、O2衍生物可导致蚕豆根尖细胞间期细胞微核频率明显升高,但每种污染物在不同浓度会有不同程度的微核现象,且在一定浓度范围内微核率上升,浓度达到一定值时下降.[结论]丙烯酰胺、甲醛对蚕豆根尖细胞具有明显的遗传毒性效应;硝酸铅对蚕豆根尖细胞不具有明显的遗传毒性效应;SO2衍生物低浓度时对蚕豆根尖细胞有一定遗传毒性效应,高浓度效应明显.%[Objective] The aim was to study micronucleus phenomenon of Vicia faba induced by four invorment pollution reagent in order to assess some of the dangers of pollution. [ Method] By the mature root tip cells of Vicia faba micronucleus in substantial progress in water pollution monitoring, micronucleus phenomenon of Vicia faba induced by four invorment pollution reagent was studied. [Result] It was found that a representative of the environmental pollutants such as formaldehyde, acrylamide, lead nitrate, SO, derivatives could result in root tip cells of Vicia faba micronucleus frequency of interphase cells to increase significantly, but different pollutants at different concentrations varied degrees of micro-nuclear phenomenon, and in a certain range of concentration would increase the micronucleus rate, but would decline. [ Conclusion] Formaldehyde and acrylamide had evident genotoxic effects on root tip cells of Vicia faba, lead nitrate had not evident genotoxic effects, and S02derivatives had a certain genotoxic effect at low concentration, and had evident genotoxic effects at high concentration.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)021【总页数】2页(P12793-12794)【关键词】环境污染;微核;遗传毒性;蚕豆【作者】杨蓓;许守明;赵丽芸;苏思【作者单位】河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004【正文语种】中文【中图分类】S181蚕豆（Vicia faba）根尖细胞微核技术应用于水质污染监测具有良好的指示作用［1］。

蚕豆根尖微核技术实验方案

实验方案(蚕豆根尖微核技术)
一、实验题目
蚕豆根尖微核技术检测流仓河污水污染情况
二、实验目的
1、利用植物压片技术和微核实验原理，设计实验方案，研究环境中存在的毒害物；
2、理解环境致突变因子对生物体DNA的损伤
3、掌握环境因子遗传毒性检测的微核实验方法
4、培养初步的科研能力
三、材料仪器与方法
1.1材料仪器
选取蚕豆大小均匀籽粒饱满无虫害100颗，采集于流仓河污水，烧杯，剪刀，培养皿，量筒100ml，，胶头滴管，显微镜，卡诺固定液，5 mol/L盐酸，石炭酸品红溶液，天平（带砝码）
1.2方法
1.2.1污水处理
将采集到的污水稀释100倍、10倍、不稀释，用自来水做对照
1.2.2蚕豆根尖的培养处理
将蚕豆用蒸馏水浸泡一天使其充分吸胀，然后用滤纸浸水放于培养皿中在25℃恒温箱中培养24h。

每12小时换水一次。

待蚕豆初生根长至2cm左右，选取长度一致的蚕豆，分别用蒸馏水，1倍稀释液，10倍，50倍，100倍，分别处理6h，其中蒸馏水作为阴性对照处理。

然后再放于25℃恒温箱恢复培养24h。

卡诺固定液固定24 h；固定好的幼根以蒸馏水浸洗两次，用5 mol/L的盐酸于28℃水解约25 min，至幼根被软化即可；然后用蒸馏水洗净切取0.5cm的根尖，用改良的石炭酸品红溶液染色5~10分钟。

1.2.3制片
用常规压片法制作临时装片。

1.2.4镜检计数
每剂量组选取5个根尖，每个根尖随机镜检1000个细胞，计算微核率MCN‰=观察到微核细胞数/观察细胞总数*1000‰。

TMV溶液诱导蚕豆根尖微核的研究

TMV溶液诱导蚕豆根尖微核的研究摘要：应用蚕豆根尖微核试验初步研究了一定浓度的烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，tmv）溶液对环境污染的效应。

结果表明，tmv溶液浓度与各处理蚕豆根尖微核率的相关性较强（r=0.982），且差异极显著（p=0.0030.01），且蚕豆根尖微核率与处理时间相关性不强（r=0.312）。

研究表明蚕豆根尖细胞微核技术可应用于烟草花叶病毒遗传毒性监测。

关键词：烟草花叶病毒（tmv）；蚕豆根尖；微核率中图分类号：q943 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）03-0561-03存在于水体中的植物病毒可能导致植物病毒病流行，给农业生产带来不良影响。

目前很难估计水体中植物病毒对农业生产的潜在威胁程度，但烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，tmv）通过植物根侵染植物已得到证实。

曾嵘等[1]研究发现在烤烟漂浮育苗中，tmv可以通过营养液侵染烟苗发病；刘勇等[2]研究表明水窖水体中的tmv具有侵染力。

已有从水体中分离到烟草花叶病毒的报道[3-9]，水体中存在的tmv有可能对环境造成一定的污染。

环境污染物（如物理、化学、生物污染源）能诱发植物细胞的染色体畸变，染色体断片游离在细胞质中于分裂末期形成微核。

蚕豆根尖细胞微核试验（micronucleus test，mcnt）是以蚕豆根尖细胞微核出现的频率为测试终点的监测方法[10]。

目前对水体植物病毒污染及其环境效应的研究极少，本研究以不同浓度的tmv溶液处理蚕豆根尖，分别统计各处理的蚕豆根尖微核率以及相应的污染指数，旨在初步探讨一定浓度的tmv溶液对环境污染的潜在威胁。

1 材料与方法1.1 材料供试蚕豆为青皮蚕豆（本地种），供试病毒为烟草花叶病毒的普通株系。

1.2 方法1.2.1 供试病毒液的制备将纯化的tmv接种于普通烟株k326（nicotiana tabacum cv. k326），3周后采病叶提纯tmv病毒[11]，经紫外扫描测得其浓度为109.9 μg/ml[12]，并将其稀释，配成浓度分别为2.7、5.4、8.1、10.8和13.5 μg/ml的病毒液各10 ml，4 ℃保存备用。

诱变物质的微核检测技术—蚕豆根尖微核检测与应用

v 更多问题……
五、实验流程——准备工作 ——
v 每个自然班分成4个组
§ §
人数基本相同、确定每小组的组长确定试验目的、各小组所用的处理因素(阴性对照、阳性对照、两种污水处理) 上报分组名单(组长)、试验目的、因素实验开始前提交试验方案(班内协调、统一时间安排)
§ §Leabharlann 实验工作时间安排参考§
若干种待测诱导物(如不同来源的污水)，由各组同学采集阳性对照(NaN3)：已证明可诱导微核形成阴性对照(洁浄水样)：微核形成率接近于0
§ §
五、实验流程
准备工作 § 查阅文献 § 确定研究目的 • 如：待测物、蚕豆品种差异等 § 制订试验方案 v 蚕豆发根、取材 v 处理与恢复培养 v 取材制片、镜检观测 v 结果分析、撰写报告(论文)
诱变物质的微核检测技术诱变物质的微核检测技术
——蚕豆根尖微核检测与应用 —— 蚕豆根尖微核检测与应用 (综合型实验) (
四川农业大学普通遗传学课程组
提纲纲
1. 实验目的 2. 实验原理 3. 实验材料 4. 用具与药品 5. 实验流程
一、实验目的
v v v
了解诱变物质微核检测技术原理与应用掌握蚕豆根尖微核检测技术了解研究性试验开展的基本环节
§ §
实验教学角度：综合性实验实验内容角度：研究性试验(非验证性实验)
二、实验原理
u u u
微核的概念与形成微核检测技术微核检测的应用
（一）微核的概念与形成
v
微核(micronuclei, MN/MCN)
天数工作内容方案、材料与待测物准备 1 2 3 5 6 7 8+ 浸种(其间换水两次) 第一阶段催芽第二阶段催芽(其间检查水分) 诱导处理恢复培养根尖取材、固定解离、制片观察结果分析与报告写作 24h 12~24h 36~48h 12~24h 22~24h 24h 2~4h 大致时间注意班、组自然班组组组组组组组

实验5蚕豆根尖细胞微核检测技术

编辑课件
微核试验的应用微核试验广泛应用于药品、食品添加剂、农药、化妆品、工
业化学品、环境污染物等遗传毒性的检测、安全性评价和遗传损害的监测,为接触有害物质人群提供遗传损害检测和工作环境监测,为行政管理部门的决策、立法奠定理论依据。
环境物质监测和致突变物检测化疗后的细胞学损伤观察放疗的遗传学损伤分析特定人群的突变损伤检测和早期预报利用微核试验筛选抗癌物质利用微核试验指示环境污染的程度
编辑课件
微核形成机理
化学毒性物质染色体断裂剂可诱发染色体发生断裂的遗传毒性物质。细胞
核的主要成分是染色体,在正常的情况下细胞分裂时染色体被纺锤丝牵引平均分向细胞的二极,形成二个正常的核,被平均分配给二个细胞。在染色体断裂剂如丝裂霉素存在下,染色体发生断裂,并不发生重接或不在原处重接,则形成了无着丝粒的段片,在细胞分裂后期不能向两极移动,而残留在细胞中央的赤道板附近,当子细胞形成时则游离于细胞质中形成不含着丝粒的微核。
编辑课件
2）污染指数（pollution index)
污染指数（PI)=样品实测MN‰ 平均值/标准水MN‰ 平均值 PI在 0- 1.5 区间为基本无污染
1.5-2.0区间为轻度污染 2.0-3.5区间为中度污染 3.5以上为严重污染注：1）对严重污染的水环境，监查处理时造成根尖死亡，应稀释后再做测试； 2）如RT> 35℃，MN本底会增高，但可经污染指数数据处理，不会影响监测结果。
一般认为微核是有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即形成了微核。微核率的多少与和作用因子的剂量或辐射累积效应有正相关。

甲硝唑诱导蚕豆根尖细胞微核的研究

ｍａｎｙｓｄｅｎｔｉｘｅｍｅｔｔｎＢｙｔｓｓｕｙｉｓｏｄｍａ：ｉｌｔｉｄｉｈｓｅｐｒｎａｉ．ｈｔｄ，ｔｈｗｅｔｆ）Ｗｈｎｔｅｍｅｏｉａｏｅｕｉｏｉ１ｅｈｔｎｄｚｌｒ
Ａｓｒｃ：ＴｅｆｃｔａｍｅｏｉａｏｅｎｕｅｅｃｏｕｌｕｆｏｔｐｃｌｉｉｆｂａｂｔａｔｈｅｔｈｔｔｎｄｚｌｉｄｃｓｈｒｎｃｓｏｅｓｎＶｃａｗｓｅｒｔｍｉｅｏｒｔｉｌｉａａ
ｗａａｐｒｎｏａｅ－ｆｅｔｒｌｏｓｐｅｗｅｎｈｏｃｎｒｔｎｏｔｏｉａｏｅａｄｔｅｓＤａｅｔｄｓｇ－ｅｃｅｍｉｎｈｂｔｅｔｅｃｎｅｔｉｆｍｅｎｄｚｌｉａｏｒｎｈ
ｃｎｅｔｔｎｗａ．／，／１／４ｍｇＬｎ０／ｔｅｍｉｒｎｃｅｓｆｅｕｎｉｓｏｃｎｒｉｓ０１ｍｇＬ６ｍｇＬ，ｍｇＬ，０／ａｄ５０ｍｇＬ，ｈｃｏｕｌｕｑｅｃｅａｏ２ｒ
中图分类号：Ｑ３９．１＋４
文献标识码：Ａ
文章编号：１０ —７１０１０．０６００９７９（１）４０５ —３２
ＲｓｒｈｎｈｃｏｕｌｓｆｏｔｉｅｓｎＩｉｆｂｄｃｄｙｔｎｄｚｌｅａｃｅｒｎｃｕＲｏ ห้องสมุดไป่ตู้ ｌｔａａｎｕｅｒｉｏｅｏｔＭｉｅｏＴＣｌｉＣａｃＩｂＭｅｏａｅ

蚕豆根尖细胞微核试验

蚕豆根尖细胞微核试验
南晓光
【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2003(018)005
【摘要】以蚕豆根尖为材料,研究了3种洗洁精的诱变效应.结果表明,在一定浓度下(0.25%～2.00%),3种洗洁精均可诱发明显的微核效应(P＜0.05或P＜0.01),但没有表现出明显的剂量-效应关系(P＞0.05).
【总页数】2页(P415-416)
【作者】南晓光
【作者单位】内蒙古民族大学,临床医学院,内蒙古,通辽,028041
【正文语种】中文
【中图分类】Q31
【相关文献】
1.3种农药诱发蚕豆根尖细胞微核试验研究 [J], 唐正义;胡蓉;卿东红;黄作喜
2.蚕豆根尖细胞微核试验监测甲基对硫磷污染研究 [J], 唐维;吕康鸿
3.运用蚕豆根尖细胞微核试验分析校园水体的污染 [J], 王玉翠;朱清
4.蚕豆根尖细胞微核试验对水质检测的研究 [J], 庞振凌;张二芹;杜瑞卿
5.蚕豆根尖细胞微核试验尼古丁引起蚕豆根尖细胞损伤的诱变效应 [J], 蒲明秋;毛飞鹏
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蚕豆根尖微核测试

蚕豆根尖诱变物质的微核测试一、实验目的了解微核测定的方法和意义二、实验原理微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。

微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。

在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。

有实验证明，整条染色体或几条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。

当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即形成了微核。

已经证实，微核率的大小是和作用因子的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点与染色体畸变的情况一样。

致变因素——化学因素：药物（环磷酰胺、氮芥、白硝安、甲氨喋呤、阿糖胞苷等抗癌药物；农药（有机磷农药）；工业毒物（苯、甲苯、铝、砷、二硫化碳、氯丁二稀、氯乙烯单体等）；食品添加剂（食品的防腐剂、色素等）物理因素：电离辐射，微小剂量的射线能不断积累生物因素：生物体产生的生物类毒素；某些生物体（如杂色曲霉等）母体因素：因年龄等三、实验材料1.蚕豆——根尖细胞的染色体大，DNA含量高，因而对诱变因子反应敏感。

2. 器具和药品显微镜、手动计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯。

6mol/L盐酸、甲醇、冰醋酸、醋酸洋红、K2Cr2O7。

四、实验内容实验选取蚕豆50粒，平均10粒分5组进行实验，ABCDE,100mg/L K2Cr2O7 100ml稀释到600ml，除E组外平均每组150ml浸泡，时间梯度增加，观察时间单位上相同因素对细胞的影响。

A组浸泡24hB组浸泡24+4hC组浸泡24+4+4hD组用浸泡24+4+4+4hE组蒸馏水浸泡24h五、实验步骤（1）浸种催芽：将实验用蚕豆按需要量放入盛水烧杯中，在25℃下浸泡24小时，此间至少换水两次，所换水应25℃预温。

实验06 蚕豆根尖微核检测技术

实验六蚕豆根尖微核检测技术一、实验目的⒈了解微核测试原理和毒理遗传学意义。

⒉学习蚕豆根尖的微核测试技术。

二、实验原理微核（micronucleus,MCN）是真核生物细胞经各种理化因子作用后引起染色体畸变，在间期细胞中的一种表现形式。

在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3～1/10，染色与主核一样或稍浅。

一般认为微核是由无着丝粒的染色体断片或落后染色体，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。

当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即微核。

三、实验器材和药品松滋青皮蚕豆、显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、Carnoys固定液、1mol／L盐酸、改良苯酚品红染液、NaN3。

四、方法与步骤⑴浸种催芽：择饱满、均匀的种子，洗净后用蒸馏水常规浸种、催芽24～30h，此期至少换水2次；待种子充分吸胀后，移入铺有干净、双层湿纱布的托盘内培养。

⑵用被检测液处理根尖：当初生根长到1～2cm时，选初生根生长良好的蚕豆6～8粒，分别放入蒸馏水（CK）、0.４mmol／L、0.８mmol／L、1.2mmol／L的NaN3中染毒8～12h。

⑶根尖细胞恢复培养：处理后的种子用蒸馏水（自来水）浸洗3次，每次2～3 min；将处理液洗净后，置于湿棉花上恢复22～24h；同时均设蒸馏水处理为空白对照组。

以上温度均为25℃。

⑷根尖细胞固定：将恢复后的种子，从根尖顶端切下1～1.5cm长的幼根，用Carnoys 固定液固定20～24h。

固定后的根如不及时制片，可换入70%的酒精溶液中置4℃冰箱中保存备用。

⑸酸解：用1mol／L盐酸在60±5℃下酸解8min，幼根软化即可。

⑹染色：吸去盐酸，用蒸馏水浸没幼根3次，每次1～2分钟。

最后浸于水中。

制片前取出置载玻片上，截下1～2mm左右长的根尖，滴1-2滴改良苯酚品红染液染色10～15min 后，加上盖玻片，覆以吸水纸常规压片。

实验四蚕豆根尖微核监测技术

实验四蚕豆根尖微核监测技术（VMT）一、实验目的学习如何利用高等植物间期体细胞遗传检测系统以监测环境中的致突变物。

二、原理在细胞分裂早期，若受到有害理化因子的攻击，使染色体发生断裂，产生染色体片段。

在这些片段中，有些可能重新愈合恢复正常，随细胞分裂进入子细胞，有些则由于缺乏着丝点，不能移向细胞的极部而变成圆球体，像卫星一样分布在主核的周围，这便是微核，由于染色体片段的大小和数量不一，所以微核的大小和数量也不相同。

而蚕豆根尖细胞的染色体大，DNA含量多，因而对诱发物的反应敏感，通过显微镜下的观察和计数，便可监测环境污染。

三、器材与试剂（一）显微镜、温箱、恒温水浴箱、冰箱、手揿计数器、解剖盘、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、试剂瓶、烧杯等显微镜压片实验用具。

（二）试剂1.5N HCl、45%醋酸、卡诺氏液（无水乙醇3份加冰醋酸1份配成，固定根尖时随用随备）、Schiff试剂、SO洗涤液。

2四、操作步骤1、蚕豆浸种催芽（1）浸种：将当年或前一年的松滋青皮豆种子按需要量放入盛有有自来水的烧杯中，臵25℃温箱内，浸泡20~30小时，此期间至少换水2次，换用的水最好事先臵于25℃温箱中预温。

（2）催芽：待种子吸胀后，用纱布松松包裹臵解剖盘内，保持温度，在25℃的温箱中催芽12~24小时。

待种子初生根露出2~3mm时，再选取发芽良好的种子，放入铺有薄层温脱脂棉的解剖盘内，仍臵入25℃的温箱中继续催芽，注意保护湿度。

再经24~36h，种子大部分初生根长至2~3cm，根毛发育良好，这时就可用来作为监测水源样品或药物溶液突变效应之间。

2、被监测液处理根尖（1）每一处理选取6~8粒初生根尖生长良好，根长一致的种子，放入盛有被测液的培养皿中，被测液浸泡住根尖即可，用自来水处理作对照，方法相同。

（2）处理时间4~6h。

3、根尖细胞恢复培养：（1）将处理的种子，用自来水浸洗8次，每次2~3min。

（2）洗净后的种子再放入新铺好湿脱脂棉的解剖盘内，按前述培养条件使根尖细胞恢复22~24h。

蚕豆根尖微核检测技术

蚕豆根尖微核检测技术实验名称: 方便面面饼液对蚕豆根尖微核率的影响专业年级: 2010级级生物科学成员: 尹忠围安树珺谢林芝刘伟指导教师:实验时间: 2013年4 月一、摘要用蚕豆根尖细胞微核技术检测不同种类方便面面饼液微核的诱变效果。

设置了阴性对照:自来水处理组，实验组:康师傅、统一、老坛，麻老表四组饼液分别处理蚕豆根尖，阳性对照:用0.02g/L的醋酸铅溶液处理。

发现方便面面饼液在诱导微核产生方面影响明显，醋酸铅溶液具有诱导微核产生的作用。

关键字:蚕豆根尖，方便面面饼，微核千分率，污染指数二、实验背景和目的随着现代社会的发展，越来越多的化学物质运用到人们的日常生活之中，如种类繁多的食品添加剂。

而其中有些物质具有较强的危害，如致畸，致癌，致突变等。

为了检测已存在或潜在的危害，各种检测技术应运而生。

微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。

无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。

用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤仍是一个直观有效可行的方法,在遗传毒理、医学、食品、药物、环境等诸多方面得到了广泛的应用。

微核计数经济,迅速,简便,不需要特殊技能,可以统计更多的细胞并实现计算机自动计数。

我们采用蚕豆作为实验材料，采用植物微核技术来检测方便面面饼中添加剂对人体是否产生危害。

方便面是日常生活中经常接触到的食品，其市场占据快餐食品的大壁江山，在超市中油炸方便面与非油炸方便面占到快餐食品的60%到70%。

另一方面，在各媒体的报道中，经常出现有关方便面的食用危害，而且很有争议，所以这也是我们进行本实验的一个原因。

三、实验原理微核是间期细胞中在细胞核之外存在的一个或多个圆形或杏仁状结构，大小在主核的1/3以下，是有丝分裂后期丧失着丝粒的落后的染色体片段形成。

20世纪70年代初，Matter和Schmid等首先用动物骨髓细胞微核率来测定怀疑具有诱变活力的化合物，并称之为微核。

利用蚕豆根尖细胞的微核实验进行安全毒理评价

利用蚕豆根尖细胞的微核试验进行安全毒理评价摘要当致畸性化学物质作用于细胞周期G1期和S期时，可以诱发染色体畸变，作用于G2期，诱发染色单体畸变。

染色体畸变后在显微镜下可观察到微核。

[1]用洗发水、洗面奶、洗衣粉处理蚕豆根尖，并根据微核出现率与对照组进行了t检验。

结果表明：三种毒液均会诱发微核效应，其中洗发水、洗面奶基本无污染，洗衣粉属轻度污染。

关键词蚕豆根尖微核效应安全评价微核是染色体畸变的一种表现形式，为有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片段，在分裂末期未能进入主核，便在细胞质中形成了一个或多个圆形或杏仁状结构。

微核游离于主核之外，大小在主核的1/3以下。

其折光率与细胞化学反应性质和主核一样，也具有合成DNA 的能力。

许多理化因素，如辐射、化学药剂等作用于分裂细胞会诱发染色体畸变，形成微核。

通过测定微核率，可应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂、环境检测的安全评价及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。

.尤其是各种化学产品与日俱增,研究和探索与人民生产和生活密切相关的化学产品对人类健康的影响和潜在危害性有重要的意义。

[2]1材料与方法1.1材料蚕豆宿舍同学使用的洗发水、洗面奶和洗衣粉自来水卡诺氏I液Giemsa染色1mol/L的HCl1.2方法1.2.1蚕豆种子的吸涨和发芽取20粒蚕豆种子，用自来水于22—23℃下浸种24h。

种子吸涨后，保持湿度和温度催芽2天。

1.2.2毒液处理各取10粒种子，分别用自来水和三种毒液分别培养种子1天后，用蒸馏水将根浸洗，洗净后再将其置于培养皿中保持温度培养24h。

1.2.3Giemsa染色和压片剪取上述种子根尖约1cm，用卡诺氏I液固定数小时。

用蒸馏水浸洗两次，吸干后加入1mol/L的HCl将幼根于60℃下酸解10—15min，使幼根软化。

倒去HCl，吸干水再加Giemsa染液染色10—15min。

[3]1.2.4微核（micronuclei,MN.）的统计选择根尖分生组织区平铺均匀的细胞，在油镜下直接观察计数。

芦笋汁抑制白酒和咖啡诱发蚕豆根尖细胞微核的研究

由饮用酒和咖啡引起遗传损伤的作用。
关键词：笋；芦白酒；啡；豆根尖；核率咖蚕微中图分类号：５．Ｒ１１４文献标识码：Ａ
ＴｈｔｄｆＭｉｒｎｃｅｓＴｓｃｎｑｅｉｃａＦｂｎｔｅｅＳｕｙｏｃｏｕｌｕｅｔＴｅｈｉｕｎＶｉｉａａｏｈ
性的影响，以指导合理膳食。方法
根尖细胞微核技术检测，检测结果进行分析。结果白酒加咖啡组的蚕豆根尖细胞微核率为（３０４对６．０－１．ｏ ‰ ，白酒组的（７６ ±３５）及咖啡组的（４０ ±３６）比较，异均有统计学意义（＜００）４ｏ）与１．７．１‰ ２．０．０ ‰ 差Ｐ．１；白酒、咖啡加芦笋汁组的微核率为（４３士１．７ ‰ ，白酒加咖啡组降低，异有统计学意义（＜００）４．３０９）比差Ｐ．５。结论白酒和咖啡的遗传毒性具有叠加效应，芦笋汁能显著降低白酒和咖啡诱发的微核率，能具有减轻而可
ｏｕｓｒｇｕ．ＣｏｃｕｉｎＴｈｅｐｓｎｏｕｒｄｔａｓｎｄｏｆｅｈｓａｉｉｅｅｆｃ；ｉｄｄｔｏｔａｐａａｓｎｌｓｏｏｉｏｓｈｅｅｉｙｏｆｓｍｈｕａｃｆｅａｄｄｔｖｆｅｔｎａｉｉｎ，ａ — 研究与实践

蚕豆微核诱变实验

蚕豆微核诱变实验正式报告一、实验目的1、了解细胞微核形成的机理及其形态特点，2、学习植物根尖细胞的微核检测技术。

3、进行小组合作，掌握设计实验基本能力二、实验原理微核(micronuclei)简称MCN，是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。

在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。

微核形成:有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片不能向两极移动，游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，在核产生一到几个很小的圆形结构—微核，直径大约是细胞直径的1/20～1/5。

三、诱变剂和拮抗剂的选择诱变剂：亚硝酸钠：拮抗剂：平菇多糖，维生素C选择亚硝酸钠的原因：亚硝酸钠是工业用盐，它是一种白色不透明晶体，形状很像食盐。

亚硝酸盐对人体有害，可使血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去运输氧的能力而引起组织缺氧性损害。

亚硝酸盐不仅是致癌物质，而且摄入0.2-0.5g即可引起食物中毒，3g可致死。

而亚硝酸盐是食品添加剂的一种，起着色、防腐作用，广泛用于熟肉类、灌肠类和罐头等动物性食品。

鉴于亚硝酸盐对肉类腌制具有多种有益的功能，现在世界各国仍允许用它来腌制肉类，但用量严加限制。

通过本实验，研究亚硝酸钠的引起细胞畸变的能力。

选择平菇多糖和维生素C作为拮抗剂的原因：平菇多糖是可食真菌-平菇中显生物活性的一种高分子多糖类活性物质。

平菇中的蛋白多糖体对癌细胞有很强的抑制作用，能增强机体免疫功能。

常食平菇不仅能起到改善人体的新陈代谢，调节植物神经的作用，而且对减少人体血清胆固醇、降低血压和防治肝炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、高血压等有明显的效果，而这些药理作用主要得益于平菇多糖的活性。

另外VC具有良好的抗氧化性，因此本小组决定用平菇多糖和VC作为诱变剂的拮抗剂进行实验。

四、实验材料蚕豆五、实验仪器设备及药品显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、试管、镊子、广口瓶、脱脂棉、恒温培养箱、恒温水浴锅等；无水乙醇、冰醋酸、改良石炭酸品红染液、盐酸、六、实验步骤1.浸种催芽选择无虫、饱满、大小均匀的蚕豆种子50粒放入盛有自来水的培养皿中，25℃浸泡24h,其中换水2次。

干电池浸出液对蚕豆根尖细胞的微核效应

干电池浸出液对蚕豆根尖细胞的微核效应摘要有毒物质会使细胞产生微核，干电池内的汞有一定的毒性，因此本实验研究不同浓度的干电池浸出液对蚕豆根尖的诱变效应试验。

采用蚕豆根尖细胞的微核试验方法，以不同浓度的干电池浸出液处理蚕豆根尖，观察蚕豆根尖细胞的微核率。

结果表明：干电池浸出液使根尖细胞的有丝分裂受到抑制，且供试干电池浸出液各浓度组的微核率一般明显高于对照组，说明这些干电池浸出液对蚕豆根尖细胞具有较强的诱变作用，且随着干电池浸出液浓度的增加，蚕豆根尖细胞的微核率升高。

关键词干电池浸出液蚕豆根尖染色体畸变微核效应前言蚕豆根尖微核试验作为一种环境致突变性的检测手段，在我国不少地区的环保部门和医疗卫生系统中都有广泛的应用。

蚕豆是一种很好的细胞遗传学研究材料，蚕豆的染色体组型为六对相当大的染色体，而且根尖含有较多的分裂细胞。

微核是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。

细胞的染色体发生断裂后,细胞进入下一次分裂时,染色体片段不能随有丝分裂进入子细胞,而在细胞浆中形成直径小于主核的、嗜色与主核一致、完全与主核分开的圆形或椭圆形微小核，位于细胞浆中独立于主核的核小体，其染色同主核，但比主核淡，其直径小于主核1/3，主要由外界损害因素(生物、物理、化学)作用细胞后，导致细胞染色体丢失或断裂，从而在胞浆中形成1个或数个小核。

1材料和方法1.1实验材料干电池浸出液、蚕豆、烧杯、纱布、培养盘、量筒、锥形瓶、标签、刀片、卡诺氏液、0.1mol/L 的盐酸、蒸馏水、醋酸洋红溶液、显微镜1.2实验方法1.2.1 浸泡发芽选用适量大小均匀、色泽一致的籽粒，将试验用蚕豆种子按需要量放人盛有自来水的烧杯中，浸泡24 h，此间至少换2次水。

种子吸胀后松散的铺在铺有2层浸湿滤纸的培养皿中，用2层浸湿纱布盖在种子上，保持湿度，在温室中催芽，待大部分初生根长至1～2 cm 左右时，再选取发芽良好的种子，作为实验材料，便可进行实验。

[小学]蚕豆根尖微核试验

[小学]蚕豆根尖微核试验学生设计性实验论文毒物对蚕豆根尖细胞的微核诱变效应姓名雷旭红学号2013131203专业生物科学班级 132相关实验课程名称细胞生物学实验,指导教师郝雪峰实验学期 2014-2015 学年第二学期太原师范学院教务处编印洗衣粉、洗衣露诱发蚕豆根尖细胞微核实验研究摘要掌握蚕豆根尖细胞微核检测技术的一般方法。

根据微核诱导的原理，利用蚕豆根尖细胞微核检测技术对洗衣粉的毒性状况给出客观评价。

结果表明:洗衣粉会诱导微核的产生，说明洗衣粉、洗衣露在超过一定浓度内对生物细胞是有毒的。

Abstract :Broad bean root tip cells micronucleus general method detection technology to master. According micronucleus induction principle, the use of nuclear civia toxicity testing technology gives an objective assessment of the situation detergent. The results showed that: detergent will produce micronuclei induction, indicating that exceed a certain concentration of detergent in a biological cell is toxic关键词蚕豆根尖细胞洗衣粉洗发露微核诱导作用损伤Key words : Civia detergent rinse micronuclei induced damage引言人类在发展经济的同时，对自然生活资源的肆意了开发和对环境的无偿利用，已造成了全球生态破坏、资源浪费和短缺、环境污染等重大问题。

为了探明环境污染物对生物机体是否有蓄积毒作用，必须从环境的一致性着手。

铅诱导蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的研究

铅诱导蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的研究
张英慧
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2017(045)027
【摘要】[目的]研究铅对蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的影响.[方法]用不同浓度的PbCl2溶液培养蚕豆种子,以蒸馏水培养作为对照,培养4~7d时,每天随机取根尖固定、染色、压片后镜检,观察微核和染色体畸变,计算微核率和染色体畸变率.[结果]培养第4~7天,1.0×10-4~5.0×10-4 mol/L Pb2+处理组的微核率和染色体畸变率均极显著高于对照组,且Pb2+浓度越大,微核率和染色体畸变率越高.[结论]Pb2+对蚕豆根尖细胞微核率和染色体畸变率有影响,其影响程度与Pb2+处理浓度和处理时间有关.
【总页数】3页(P4-5,9)
【作者】张英慧
【作者单位】西藏民族大学医学部基础医学院,陕西咸阳712082
【正文语种】中文
【中图分类】S-3
【相关文献】
1.铅诱导蚕豆根尖细胞产生的各种染色体畸变研究 [J], 张英慧
2.铬铅联合诱导蚕豆根尖微核细胞发生率作用的研究 [J], 徐厚铨;韩发彬
3.诊断级超声波诱导蚕豆根尖细胞微核发生率的研究 [J], 刘晋敏;王彬
4.四硼酸钠诱导蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的实验研究 [J], 杨其伟;訾惠君
5.甲硝唑诱导蚕豆根尖细胞微核的研究 [J], 李宏
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洗发水诱发蚕豆根尖细胞微核实验研究

洗发水诱发蚕豆根尖细胞微核实验研究Experimental study on Micronucleus of root tip cells of Vicia faba inducedby shampoo姓名:樊婧婧同组者：郭立指导教师：郝雪峰（太原师范学院生物系111班学号2011131139）摘要运用蚕豆根尖细胞微核技术，以微核千分率和污染指数作为指标，研究洗发水的水溶液对蚕豆根尖细胞的影响。

洗发水水溶液对蚕豆根尖进行污染处理后，通过观察微核的形态，记录微核的数目，测定蚕豆根尖细胞的微核率，并且在实验中以未经污染处理的蚕豆根尖作为对照，来比较测定该洗发水的毒性，用蚕豆根尖微核技术对其污染效应进行监测和评价既简便又比较可靠。

Abstract: using the micronucleus technique, the micronucleus permillage and pollution index as the index, effect of water solution of shampoo on Vicia faba root tip cells. Shampoo water solution for pollution treatment on Vicia faba root tip, through the observation of micronucleus form, record the number of micronuclei, micronucleus test of Vicia faba root tip cell rate, and in the experiment without pollution treatment of Vicia faba root tip as control group, to compare the toxicity determination of shampoo, with VAMCN of its pollution effect monitoring and evaluation is a simple and reliable.关键词蚕豆微核实验洗发水核变异引言微核（micronucleus,MCN）是真核生物细胞经各种理化因子作用后引起染色体畸变，是间期细胞中的一种表现形式。

实验六蚕豆根尖微核检测技术学时综合性设计性(ppt)

蚕豆根尖微核检测记录表
试验号
镜检日期
片号
第一片
各自观察的细胞细胞数微核数
数或微核数
镜检者
第二片
第三片
细胞数微核数细胞数微核数
总计平均微核千分率
实验六蚕豆根尖微核检测技术学时综合性设计性(ppt)
（优选）实验六蚕豆根尖微核检测技术学时综合性设计性
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们需要有一套高度灵敏、技术简单的测试系统来监视环境的变化。只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。
五、实验方法
1．实验材料的培育蚕豆根尖细胞的染色体大，DNA含量高，因而对
诱变因子反应敏感。松滋青皮豆是从不同蚕豆品种中筛选出来的一种较为敏感的品种。本品种引入后在栽培繁殖时要注意不要同其它蚕豆品种种在一起，不喷洒农药、以保持该品种较低的本底微核值。也可用其它蚕豆品种，但是必须设置对照组。种子成熟后，晒干贮藏于干燥器内或4℃冰箱内备用。
3．处理
每一处理选取6-8粒初生根生长良好、根长一致的种子，放入盛有待测物溶液的培养皿中，浸没根尖。阳性因子可采用CrO3（1.0和2.5 mol/L）、NaN3 （0.5、1.0和1.5mol/L）或EMS（150和200 mol/L），另取一处污水作待检测物质，用自来水作对照，共9 个处理，处理根尖6～24h(处理时间可视实验需要和被测液浓度而定)。

3--蚕豆根尖微核实验

蚕豆根尖微核实验（诱导与检测部分）一、实验目的1、了解环境诱变物对微核产生的原理。

2、掌握微核试验技术。

3、了解毒理遗传学在环境监测中的应用及意义二、实验原理微核是无着丝点的染色体断片，在有丝分裂后期由于不能向两极移动而游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，可在它附近看到若干个圆形的结构，直径大约是细胞直径的1/20到1/5，这就是微核。

微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。

在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1/3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。

已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。

所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。

由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们需要有一套高度灵敏、技术简单的测试系统来监视环境的变化。

只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。

且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。

目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。

利用蚕豆根尖作为实验材料进行微核测试，可准确的显示各种处理诱发畸变的效果，并可用于污染程度的监测。

微核产生的概率可与诱变因子的剂量成正比，因此可以用微核出现的频率来评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤程度。

三、实验器具、药品1、实验材料蚕豆种子2、实验器材光学显微镜、试管（10ml）、蚕豆发芽盒、镊子、手术刀、载玻片、盖玻片、滤纸等。

3、试剂1）NaN3(叠氮钠)2）卡诺氏固定液（乙醇和冰醋酸按照体积比3：1混合配制）4）6mol/L盐酸：配制：取49.5ml 37.5%的盐酸，再加入50.5ml水稀释至100ml容量瓶.四、实验步骤1、种子处理：蚕豆种子洗涤干净，室温（25℃）下用蒸馏水浸泡发芽24小时，此间至少换水两次，所换水应预温至25℃。