第二章 样品前处理
样品前处理的方法
样品前处理的方法
样品前处理是指在进行分析测试前对样品进行的一系列化学和物理处理方法。
这些处理方法旨在提取、富集、净化或改变样品中的目标分析物，以便更好地进行后续分析。
常用的样品前处理方法包括：
1. 提取：将样品中的目标分析物从复杂的基质中分离出来。
常用的提取方法包括固相萃取、液液萃取、固液萃取等。
2. 富集：将目标分析物从样品中富集到一个较小的体积中，以提高检测的灵敏度。
常用的富集方法包括固相微萃取、固相萃取柱、液相萃取柱等。
3. 净化：去除样品中的干扰物，以减少对分析的影响。
常用的净化方法包括固相萃取、凝胶层析、离子交换等。
4. 转化：将分析物转化为更易于测定的形式。
常用的转化方法包括水解、溶解、酸碱处理等。
5. 分散：将固态样品颗粒分散为均匀的溶液或悬浮液，以提高分析的精确度和准确度。
常用的分散方法包括超声波处理、研磨、溶解等。
6. 过滤：去除样品中的悬浮固体或杂质，以净化样品。
常用的过滤方法包括滤纸过滤、膜过滤、纤维素酯膜过滤等。
以上仅为常用的样品前处理方法，具体需要根据样品的性质、目标分析物的种类和测定方法的要求选择合适的处理方法。
液相色谱分析纯化样品前处理
液相色谱分析纯化样品前处理液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种广泛应用的分离与分析技术，已成为现代分析化学中必不可少的手段之一、液相色谱的样品前处理是指在样品进入液相色谱仪进行分析之前，为了提高分析结果的准确性和灵敏度，需要对样品进行一系列的处理步骤。
1.样品预处理样品预处理是指将样品转化为液相色谱合适的形式，消除样品中的固体颗粒、胶体颗粒和大分子物质。
常用的样品预处理方法包括离心、过滤、稀释等。
离心是将样品置于离心管中，以离心力使它们沉淀到离心管底部，从而分离固体颗粒和胶体颗粒。
过滤是将样品通过滤膜或滤纸，去除固体颗粒和胶体颗粒。
稀释是将样品中的高浓度物质通过加入适量的溶剂进行稀释，以减少样品中物质的浓度。
2.样品的萃取和浓缩样品的萃取和浓缩是将样品中目标物质与其他物质分离的重要步骤。
常用的方法有固相萃取、液液萃取和微量浓缩等。
固相萃取是利用固相吸附剂将目标物质从样品中吸附出来，然后用溶剂洗取目标物质，最后将溶液注入液相色谱进行分析。
液液萃取是利用两种互不溶的溶剂相，将目标物质从一个相中转移到另一个相中。
微量浓缩是将大体积的样品溶液经过一系列的萃取和浓缩步骤，将目标物质的浓度提高到适合液相色谱分析的范围。
3.样品的净化和纯化样品的净化和纯化是去除样品中的干扰物质，提高色谱分析结果的准确性和灵敏度的关键步骤。
常用的方法有凝胶过滤、离子交换、分子筛等。
凝胶过滤是将样品溶液通过特定孔径大小的凝胶，去除分子量较大的物质。
离子交换是利用离子交换树脂将样品中的离子物质与树脂上的离子交换，从而去除样品中的离子物质。
分子筛是利用有机聚合物、硅胶等材料对样品进行分子大小的筛选，去除样品中的大分子物质。
总之，液相色谱分析纯化样品前处理是提高分析结果准确性和灵敏度的重要步骤，其中包括样品预处理、样品的萃取和浓缩、样品的净化和纯化等步骤。
通过合理选择和组合上述处理方法，可以有效地去除样品中的杂质，减少色谱柱的堵塞和磨损，提高液相色谱的分离效果和分析结果的准确性。
第二章 样品的采集、制备处理及保存
第二章 食品样品的采集与处理
图2-2 萃取操作示意 1-三角瓶；2-导管；3-冷 凝器；4-欲萃取相
图2-3 常压蒸馏装置
3、盐析法：溶液中加入某种盐类，降低了 某溶质在溶液中的溶解度，使 之从溶液中分离出来的方法。
4、超临界萃取法（SFE） Supercritical Fluid Extraction
超临界流体及其性质 a.流体是非液非气的,具有气体较强的穿透 能力和液体较大的密度及溶解度,有较大 的吸附能力,流动性好. b.萃取速度快
什么物质适合于二氧化碳超临界萃取 二氧化碳超临界萃取的优点
a. 接近常温, 对物质没有变解作用. b. 易达到Pc和Tc c. 化学稳定性好, 无毒, 无色, 无味, 无污染 d. 萃取时间短 e. 费用低 f. 适用热敏感样品 g. 有防氧化和抑菌作用
然后层从的样四品角堆和放中
的不心同点部用位双，套按回
采样转件取数样确器定各具取
体采少样量袋样(品桶，、得
箱)检，样再，用再双按套上回
转取法样处管理采得样平。均
将取样样品管。插入包
装中，回转180。
取出样品，每一
包装须由上、中、
下三层取出三份
检样；把许多检
样综合起来成为
原始样品：用
“四分法”
这类物料不易充 分混匀，可先 按 总件数/ 2 确 定采样件(桶、 罐)数。启开 包装，用采样 器从各桶(罐) 中分层(一般 分上、中、
特点：简便快速，破坏彻底，减少 金属挥发。酸气刺激性大， 腐蚀性大。
第二章 食品样品的采集与处理
（1）硫酸-硝酸法 如图2-1所示。
（2）高氯酸-硝酸-硫酸法
（3）高氯酸（过氧化氢）-硫 酸法
（4）硝酸-高氯酸法
样品前处理国标
样品前处理国标（原创版）目录一、样品前处理的概述二、样品前处理的方法和步骤三、样品前处理的重要性四、国标的相关介绍五、样品前处理国标的具体内容六、样品前处理国标的实施与影响正文一、样品前处理的概述样品前处理是在样品分析之前，对样品进行的一系列处理操作，目的是使样品达到分析方法所要求的状态，从而保证分析结果的准确性和可靠性。
样品前处理包括样品的采集、保存、制备、处理和检验等步骤。
二、样品前处理的方法和步骤样品前处理的方法主要有以下几种：1.样品采集：根据不同的样品性质，采用相应的采集方法，如土壤样品可用铲子采集，水样可用容器采集。
2.样品保存：采集后的样品应妥善保存，防止样品性质发生变化，影响分析结果。
3.样品制备：将采集的样品进行处理，使其达到分析方法所需的状态，如土壤样品需要经过干燥、研磨等处理。
4.样品处理：对样品进行化学或物理处理，以消除干扰物质，提高分析结果的准确性。
5.样品检验：对样品的质量进行检查，确保样品符合分析要求。
三、样品前处理的重要性样品前处理是分析过程中非常关键的环节，它的好坏直接影响到分析结果的准确性和可靠性。
正确的样品前处理可以消除干扰物质，提高分析方法的灵敏度和特异性，从而保证分析结果的可靠性。
四、国标的相关介绍国标，即国家标准，是我国对产品质量、规格、性能、方法等方面所制定的技术规范。
国标对于保证产品质量、推动技术进步、维护消费者权益具有重要作用。
五、样品前处理国标的具体内容样品前处理国标是对样品前处理方法和步骤的具体规定，包括样品的采集、保存、制备、处理和检验等方面的技术要求。
样品前处理国标的制定旨在规范样品前处理操作，保证分析结果的准确性和可靠性。
六、样品前处理国标的实施与影响样品前处理国标的实施，对于提高我国样品前处理技术水平，保证分析结果的质量具有重要影响。
食品安全检测第二章样品前处理技术
食品安全检测第二章样品前处理技术第二章样品前处理技术样品前处理：样品的制备和对样品中待测组分进行提取、净化和浓缩的过程。
在整个食品安全性的检测分析中，70%～80%甚至更多的时间用在样品的前处理上，而给实验带来的误差有60%以上来自样品的前处理。
样品前处理的目的就是浓缩被测物质、消除基质干扰、保护仪器、提高方法的准确性、精密度、选择性和灵敏度。
主要的样品前处理方法：1、超声萃取；2、微波萃取；3、液－固萃取；4、加速溶剂萃取；5、超临界萃取；6、固相萃取；7、固相微萃取；8、基质分散固相萃取；9、液－液萃取；10、微量化学法技术；11、液－液萃取；12、柱层析样品制备的基本要求1、食品危害残留物质分析,特点：基体复杂；目标化合物检测限量越来越严格；某些危害残留物质在食品样品中存在的浓度极低；各目标化合物的性质差异较大；可能同时存在多种组分。
2、评价前处理方法是否合理,应考虑的因素：操作是否简便、省时；被测组分的回收率是否高；成本是否低廉；对人体及环境是否产生影响。
萃取技术萃取：用有机溶剂等方法把被测物从试样中提取出来，净化后供测定使用。
萃取技术要求溶剂尽可能选择性溶解残留危害物质，而不是不溶解和少量溶解食品基体，萃取效果的关键是溶剂的选择，残留危害物质提取回收率的大小直接决定整个分析步骤的精确度。
分类：1、液－固萃取；2、超声萃取；3、微波萃取；4、液－液萃取；5、加速溶剂萃取；6、超临界萃取1、萃取技术————超声萃取超声萃取（SAE）就是在溶剂萃取过程中引入超声波，提高溶剂萃取的过程。
基本原理：空化效应、热效应、机械作用。
高频声波空化作用产生的极大压力造成生物细胞及整个生物体破碎，同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解。
影响SAE的因素：超声波的强度、频率、提取时间、提取溶剂等。
SAE的操作方法：将样品和溶剂放于密闭的容器中，置于一定能量的超声波水浴中，数秒后拿出，再放入、拿出2、萃取技术————微波萃取微波萃取（MAE）就是在溶剂萃取过程中引入微波，加速溶剂萃取的过程。
气相色谱法(样品前处理)-研究生课程(第二周)
样品在充有 常压或高压 氧的密闭容 器燃烧，然 后被吸收液 吸收，进行 测定。
在一定气氛和 温度范围内加 热，灼烧破坏 有机物和样品 ，将残留的矿 物质灰分溶解 在合适的稀酸 中测定
用适当的酸 或混酸分解 样品，使被 测元素形成 可溶性盐， 然后进行测 定。
将样品放置在 微波炉内特制 的溶样罐中， 利用微波辐射 加热分解样品 ，按严格的程 序控制溶样过 程。
样品种类
气体： 大气中的微量气体成分、气溶胶、大气颗粒物、挥发性 金属化合物等
液体： 各种水体、饮料、酒类、奶类、酱油、醋、汽油、洗 涤剂和食用油等
固体：土壤、沉积物、矿物质、与人类活动有关的食物和废 弃物等
生物样品： 广泛的陆生及水生动植物
基体的种类及其均匀程度
非均匀质的环境样品：选择合适的具有代表性的地点，有 条件的要使用卫星定位系统，准确确定采样地点的经纬 度，以便下次或多次重复采样或长期观察。
的挥发损失； （2）生物样品注意保持活性。 （3）形态分析中被测组分形态不能发生改变。 保存的一般方法： （1）放在密闭、洁净容器内，置于阴暗处保存。 （2）易腐败变质的放在0—5℃冰箱内，保存时间也不能太长。易
分解的要避光保存。 （3）特殊情况下，可加入不影响分析结果的防腐剂或冷冻干燥保
应保证采样按时，准确、完全。 采样结束前，应仔细检查采样记录和水样，若有漏采或
不符合规定者，应立即补采或重来。 水样现场测定与描述
水温、 pH值、溶解氧、透明度、电导率、水样感 观指标的描述、水的颜色、水的气味、水文参数、气象 参数。
水样的预处理与贮存
水样的保存
水样从采集到分析这段时间里，由于物理 的、化学的或生物的作用会发生不同程度 的变化，必须采取相应的保存方法，努力 将这些改变降到最小限度。
样品前处理的步骤和方法
样品前处理的步骤和方法引言：在科学研究和实验中，样品前处理是一个非常重要的环节。
样品前处理是指在进行实验或分析之前对样品进行一系列的处理和准备工作，以确保获得准确可靠的实验结果。
本文将介绍样品前处理的步骤和方法，包括样品收集、样品保存、样品分割、样品粉碎和样品溶解等。
一、样品收集样品收集是样品前处理的第一步，它的目的是从样品源头获取代表性的样品。
在进行样品收集时，需要注意以下几点：1.选择合适的采样点：采样点应具有代表性，能够反映整个样品的特征。
2.避免污染：在采样过程中，要避免样品被外界污染物污染，可以使用无菌容器或密封容器进行采样。
3.采样工具的选择：根据不同的样品特点选择合适的采样工具，如采用不锈钢铲子、无菌手套等。
二、样品保存样品保存是样品前处理的重要一环，它的目的是保证样品在处理前后的稳定性。
在进行样品保存时，需要注意以下几点：1.选择合适的保存温度：根据样品的性质和分析要求选择合适的保存温度，如冷藏、冷冻等。
2.样品密封：将样品放入密封容器中，避免空气、湿气和外界污染物的进入。
3.避免反复冻融：避免样品的反复冻融，可以分装成适量的小份，每次只取出一部分进行处理。
三、样品分割样品分割是将大样品分割成适当的小样品的过程，其目的是为了方便后续的处理和分析。
在进行样品分割时，需要注意以下几点：1.选择合适的分割方法：根据样品的性质和要求选择合适的分割方法，如手工分割、机械分割等。
2.分割工具的选择：根据样品的特点选择合适的分割工具，如刀具、剪刀等。
3.分割时的卫生措施：在进行样品分割时，要注意卫生措施，避免交叉污染。
四、样品粉碎样品粉碎是将样品粉碎成适当的粒度的过程，其目的是为了提高样品的均匀性和可溶性。
在进行样品粉碎时，需要注意以下几点：1.选择合适的粉碎方法：根据样品的性质和要求选择合适的粉碎方法，如机械研磨、超声波破碎等。
2.粉碎工具的选择：根据样品的特点选择合适的粉碎工具，如球磨机、研磨杯等。
检疫02-水产品样品采集与前处理技术解析
• 按照随即原则，从大批物料中抽取部分样品。 • 操作时，应使所有物料的各个部分都有被抽
到的机会。
2020/11/1Βιβλιοθήκη 72、采样数量和方法
• （1）百分比抽样
不论产品的批量大小，按同样的百分比从批中 抽取样品。
• （2）计数调整法
把正常抽样方案，加严抽样方案和放宽抽样 方案用一整套的调整规则联系起来，即调整 型抽样方案。
验 ③平均样品
原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用，
称为平均样品。
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（1）化学检验样品制备
• 鱼类平均样品制备 ①小型鱼：
将鱼从背脊纵向切开，取鱼体一半
②中型以上的鱼：
取纵切的一半，再横切成2~3cm的小段，选其 奇数或偶数段切碎，混匀。
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（1）化学检验样品制备
酮、石油醚等，从艳萍中提取被测物质或除 去干扰物质，是常用的处理食品样品的方法。
（1）浸取：
用液体溶剂浸泡固体样品，以提取其中的溶质
（2）萃取:
用液体溶剂提取与它互不相容或部分相容的液体样品 （被测物质或者杂质）
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7.有机质破坏法
• 有机质破坏：
将有机质的分子结构以长时间的高温处理，并且常 伴随与若干强氧化剂作用，使有机质的分子结构受 到彻底破坏。 ①C、H、O元素→→CO2+H2O ②有机金属化合物中的金属部分→→简单的无机金属 离子化合物。
优点：高效、快速、易于控制、对环境无污染、节能 降耗。
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2、微波萃取
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2-样品前处理技术(2)PPT课件
样品前处理技术
多次萃取
经n次萃取后，水相中残留溶质A的平衡浓度Cn为：
Cn
当Vaq＝Vorg时：
C0(VaVqa/Vq/oVrogrgD)n
Cn
C0
1 (1D)n
式中C0为水相中A的最初浓度，即总浓度。
样品前处理技术
4. 分离系数 （分离因子）
osmium（ Os，
锇）来自希 腊文中“易
挥发”
样品前处理技术
分配比（D）
因为同一物质的每种形态在两相中的分配系数都不一 样。故分配比定义为某种物质在两相之间各形态总浓度的 比值。
D
CoAr g CaAq
[Ai ]org
i
[Ai ]aq
i
注：1. 分配比不一定是常数，随实验条件（pH，萃取
剂，溶剂，盐析剂等）而变化。 2. 当溶质在两相中只有一种形态时，D＝KD
样品前处理技术
溶剂萃取法的优缺点
优点
• 仪器设备简单，操作方便； • 分离选择性高； • 应用范围广。既可以用于无机物萃取，又可用于有机物
萃取。既可进行大量物质分离，又可用于微量组分富集。 • 处理量大，适合工业规模分离，易于实现连续自动操作。
缺点
• 有机溶剂易挥发，多对人体有害 • 手工操作比较麻烦，费时 • 分离效率（柱效）不高。（比LC小2－3个数量级）
萃取——泛指任意两相间的传质过程，包括液-固萃取（固相 萃取）、SFE、逆流（色谱）萃取等。
反萃取——被萃物进入有机相后，再用水相将其中部分组分萃 取出来。主要目的是把随目标物质进入有机相的杂质除掉。
样品前处理技术
溶剂萃取
样品前处理技术
药物分析-样品的前处理
品的净化。
浓缩方法与技巧
蒸发浓缩法
冷冻干燥法
将样品溶液加热至沸腾，使溶剂蒸发， 留下目标成分。适用于热稳定性好的 样品。
将样品溶液冷冻成固体，然后在真空 条件下使冰直接升华，留下目标成分。 适用于热敏性、易氧化样品。
富集目标物质
对于量较低的目标物质，通过前处理进行富集， 以提高检测灵敏度和分析效率。
改变样品性质
通过前处理改变样品的物理或化学性质，使其更适 合后续的分析方法或仪器要求。
样品前处理的流程
01
样品接收与登记
接收样品并进行详细登记，包括样品名称、来源、数 量、保存条件等信息。
02
样品制备
根据分析方法的要求，对样品进行适当的制备，如研 磨、均质、稀释等。
旋转蒸发法
在减压条件下，通过旋转样品瓶使溶 液形成薄膜，加快溶剂蒸发速度。适 用于易挥发、热稳定性差的样品。
净化与浓缩的注意事项
在进行样品净化时，应 根据目标成分的性质选 择合适的净化方法，避 免目标成分的损失。
在进行样品浓缩时，应 注意控制加热温度和真 空度，避免目标成分的 分解或挥发。
在操作过程中应注意防 止交叉污染和实验室污 染，保证结果的准确性 。
03
提取与分离
采用适当的提取方法将目标物质从样品中提取出来， 并进行必要的分离和纯化。
04
浓缩与富集
对提取液进行浓缩和富集，以提高目标物质的浓度和 检测灵敏度。
05
定容与保存
将处理后的样品定容至适当体积，并按要求保存以备 后续分析。
样品前处理的重要性
01
第二章 样品预处理方法
使用采集方法的注意事项
（1）采集的样品应具有代表性，要注意采 样的时间、地点及采样位置的选择。
（2）所有样品都要采集双份，一份分析样 品，一份保存样品，备复查时使用。
（3）样品的采集和储存过程要作记录，详 列采样时间、地点、准确位置等。
（4）采集储存中待测组分不应有损失或发生化学变 化。
损失—包括挥发、在储存容器上的吸附等物理原 因
加速样品的制备时间 降低样品前处理的成本 提高分析的准确性及回收率 更容易自动化 减少样品处理步骤 降低对不稳定样品的影响 提高安全性
SPE小柱
SPE 小柱的应用领域 除去杂质及干扰组份 把样品分成不同极性的组进行分析 富集微量的组份
SPE 小柱的主要种类 反相 正相 离子交换
新溶剂冲洗
氮气吹扫
ASE工作流程
溶剂
循环 0.5 1–2
泵
吹扫阀
炉体
萃取池
静态阀
萃取结束 Total (min) 准备分析
12–18
氮气瓶
收集瓶
食品安全评价中ASE的应用
• 水果和蔬菜中的农药 • 动物组织中的二噁英和多氯联苯 • 粮食中的农药 • 粮食中的毒枝菌素 • 熏肉中的多环芳烃 • 葡萄干中的杀真菌剂 • 咸肉中的硝酸盐/亚硝酸盐 • 一些正在发展的方法
固相萃取样品小柱
样品预处理的过程
去除微粒
过滤 过滤膜/过滤装置 有机(0.5m)/无机(0.45m) 膜片可更换 一次性使用的膜 使用方便简单，交叉污染小 有更小内径，可用于微量样品的处理
高速离心 大于：10,000g
超滤
机理
超滤是一种基于分子量分离的技术
目的
化学变化——包括被氧化、微生物引起的分解、 各组分间的化学反应等
样品的前处理方法
样品的前处理方法1.溶解和稀释：对于固体样品，首先需要将其溶解或稀释成适当的溶液，以便于后续的分析。
常见的方法包括溶解在溶剂中、酸溶解、碱溶解等。
而对于液体样品，可能需要稀释以调整其浓度。
2.过滤和离心：对于含有悬浮物的液体样品，可以通过过滤将悬浮物去除，以获得清晰的溶液。
而对于固体颗粒的样品，可以通过离心将其沉淀到底部，然后将上清液用于后续处理。
3.搅拌和超声处理：对于含有悬浮物或沉淀物的样品，可以通过搅拌或超声处理来使其更均匀地分布在溶液中，以便于后续处理或分析。
4.萃取和萃取液浓缩：对于有机物或有机溶剂的样品，可以使用萃取方法将所需的成分提取出来。
常见的方法包括液液分配萃取、固相萃取等。
而对于萃取液中含有较多的有机溶剂，可以使用浓缩方法将有机溶剂去除，从而得到目标物质。
5.衍生化：对于一些样品，为了能够更好地进行分析，需要进行衍生化处理。
衍生化可以改变样品中的官能团或结构，以提高其稳定性、挥发性或检测性能。
常见的衍生化方法包括酯化、取代、酰化等。
6.清洗和去除干扰物：在分析过程中，可能存在一些干扰物或杂质，需要使用清洗方法将其去除。
常见的清洗方法包括洗涤、过氧化物清洗、溶剂萃取等。
7.浓缩和净化：对于样品中目标物质的含量较低或需要进一步净化的情况，可以使用浓缩或净化的方法。
常见的方法包括减压浓缩、柱层析、电析等。
8.pH调整和稳定化处理：有些分析方法对样品的pH值有要求，因此需要通过调整和稳定样品的pH值来满足分析的要求。
常见的方法包括加入酸或碱等。
9.补偿因子的添加和校正：在一些实验或分析中，可能需要添加一些补偿因子或内标物质，以进行结果的校正和修正。
常见的添加物包括内标物质、标准溶液等。
《食品分析》课程笔记
《食品分析》课程笔记第一章：绪论一、食品分析的目的和任务1. 食品分析的定义食品分析是一种跨学科的技术活动，它综合运用化学、物理学、生物学、微生物学等多个学科的知识和技术，对食品的组成成分、营养价值、安全性、品质特性等进行定性和定量测定。
食品分析是食品科学研究和食品质量控制的基础。
2. 食品分析的目的（1）保障食品安全：通过检测食品中的有害物质（如农药残留、重金属、霉菌毒素等）、微生物污染情况，确保食品不含有对人体健康造成威胁的物质。
（2）评估食品营养价值：分析食品中的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等营养成分，为消费者提供营养信息。
（3）监控食品品质：通过对食品的色泽、口感、气味、质地等感官特性的分析，以及物理和化学指标的测定，监控食品的品质变化。
（4）支持食品科学研究：为食品加工、储藏、运输等过程中的变化机制研究提供数据支持。
（5）促进食品法规和标准的制定：为食品安全法规和食品质量标准的制定提供科学依据。
3. 食品分析的任务（1）建立和完善食品分析方法：不断研究和开发新的分析技术，提高现有方法的准确度、精密度和灵敏度。
（2）进行食品质量控制：在食品生产、加工、流通等环节进行质量检测，确保产品质量符合标准。
（3）开展食品安全风险评估：对食品中潜在的风险因素进行监测和分析，为食品安全风险管理提供数据。
（4）进行食品真伪鉴别：通过分析手段鉴别食品的真伪，打击假冒伪劣产品。
二、食品分析的方法和发展方向1. 食品分析方法（1）化学分析法- 滴定法：通过化学反应的定量关系进行成分分析，如酸碱滴定、氧化还原滴定等。
- 重量法：通过测量沉淀物的重量来确定样品中某成分的含量。
- 光度法：利用物质对光的吸收或发射特性进行定量分析，如紫外-可见分光光度法。
（2）仪器分析法- 光谱法：利用物质对光的吸收或发射光谱进行成分分析，如原子吸收光谱法、红外光谱法。
- 色谱法：根据物质在两相之间的分配系数差异进行分离和分析，如气相色谱、液相色谱。
2样品前处理技术_2023年学习资料
超临界流体萃取在食品分析中的应用-优势：-大大提高了萃取的效率-应用：-÷萃取果蔬中的农药残留-~萃取食物 的环境污染物（如多环芳烃-萃取奶粉中的总脂肪-16
2加速溶剂萃取-ASE,Accelerated Solvent Extraction-。ASE是用溶剂对固 、半固体的样品进行萃取的技术。-·ASE通过选择合适的有机溶剂、升高温度50~200℃和压力-10.3~2 .6MPa来提高萃取过程的效率。-ASE的优点有-5有机溶剂用量少，1g样品仅需要1.5mL溶剂；-ó提取 度快，一般仅需15min左右；-6回收率高。-所以ASE被美国环保局EPA选定为推荐的标准方法，广泛用-于 境、药物、食品和高聚物等样品的前处理，特别是农药残留-的分析。
ASE®300-~12个样品连续自动萃取-÷样品池体积为34、66和-回1色-100毫升，使用萃取溶剂-4 -125毫升-用于大体积样品萃取-20
第二章样品前处理技术-Sample Pretreating Methods
本章主要内容-超临界流体萃取-加速溶剂萃取-萃取技术-微波萃取-样品前处理-超声波萃取-柱层析法-净化技术 固相萃取法-固相微萃取
概述-81-样品前处理（Sample Pretreating是指样品的制备和对样-品中待测组分进行提取、净 、浓缩的过程。-样品前处理的目的是消除基质的干扰、保护仪器、提高方法-的准确度、精密度、选择性和灵敏度。品样品的前处理，除了取样外，主要是指提取和净化步骤
食物样品的特点-·基质复杂-÷目标化合物检测限量日趋严格-∞如氯霉素限量为0.1ppb,ppb=109-÷ 些残留危害物在食品中存在的浓度极低-6如食品中的二恶英含量在1012数量级-÷各目标化合物的性质，如极性、 点、热稳定性等差异极大-需要同时检测多种组分
样品前处理
一、取样
（四）取样量 1.供试品的量一般不得少于试验所需量的3倍，即1∕3供试验 用，1∕3供复核用，1∕3供留样保存（至少一年）。 2.供试验用的供试品量，至少可供3次全检用，也即3份平行试 验用量。 3.总样品量一般为：
颗粒剂：100g 片 剂：200g 液体制剂： 200 ml 其它制剂：参照上述制剂的规定 贵重药品：可酌情少量抽取
二、前处理
样品的前处理也即供试品溶液的制备。一般步骤： 样品的粉碎（分散）→提取→精制富集→得供试品溶液。 （一）粉碎（分散） 大蜜丸：用小刀或剪刀将其切成小块，加硅藻土研磨分散。 水 丸：用乳钵直接进行研磨，研细即可。 片 剂：用小刀刮去糖衣层，置乳钵中研细即可。 栓 剂: 可使用小刀将其切成小块。 散剂、颗粒剂、硬胶囊剂: 一般不需粉碎，可直接提取。
一、取样
2.固体药品取样时，应从同一批号的批包装和最小包 装的四角和中间五处，随机取样，混合均匀后，得总样品。 再按四分法，多次（至少3次）递减取样，直到最后剩余 量满足检测所需量为止，即得（平均）样品。
3.液体制剂（注射剂、合剂、酒剂、糖浆剂、酊剂等） 应先将沉降在容器底部的液体摇匀，再取样。
【注】苯被禁用，氯仿要少用慎用，这些已在药典中体现。中 药制剂的前处理过程往往较复杂，需严格按照药典的规定进行操 作，防止“跑、冒、滴、漏”，以保证测试结果的准确性。
液液萃取
固液萃取
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
二、前处理
4.超声波提取法
一种先进的提取方法。在溶剂提取 法中，借助超声波的机械能、热能、空 化作用，可大大提高提取效率。该法在 中国药典中已被普遍采用，一般样品30 分钟即可完成提取，有些品种还规定了 提取功率和提取频率。例如，导赤丸制 备含量测定供试品溶液时规定“超声处 理（功率250W，频率33kHz）15分 钟”。
样品前处理
样品前处理CaP： 1、称取4g肉样均质物于离心管,加入8ml乙酸乙酯,振荡均匀, 用离心机离心10 min。
2、移取4ml上层有机相至干净玻璃试管中,于50－60℃水浴氮气吹干。
3、加入2ml正己烷，涡动1 min，再加入0.5 ml样品萃取液，涡动15s后，用离心机离心10 min。
4、除去上层有机相，取下层用于分析。
SAS： 1、称取5g肉样均质物于离心管,加入10ml 乙腈,振荡均匀,再用离心机离心10 min。
2、取2ml上清液至干净玻璃试管中,于50－60℃水浴氮气吹干。
3、加入2ml正己烷，涡动30s，再加入0.5ml样品稀释液，涡动30s后，用离心机离心10 min。
4、除去上层正己烷相，取下层用于分析。
QNS： 1、称取5g肉样均质物于离心管,加入10ml乙腈,振荡均匀,再用离心机离心10 min。
2、移取1ml上层有机相至干净玻璃试管中,于50－60℃水浴氮气吹干。
3、加入1ml正己烷，涡动1 min，再加入1 ml 10mMPBS涡动30s后，用离心机离心10 min。
4、除去上层正己烷相，取下层用于分析。
呋喃类：1、称取1g肉样均质物于离心管，分别加入4ml蒸馏水，0.5ml 1M盐酸溶液和100ul 1倍样品衍生化试剂，用振荡器振荡2min。
2、在37℃过夜孵育（大约16h）。
3、分别加入5ml0.1M磷酸氢二钾溶液、0.4ml 1M NaOH溶液和6ml乙酸乙酯，振荡30s，用离心机离心10min。
4、取3ml上层有机相至干净玻璃试管中,于50－60℃水浴氮气吹干。
5、加入1ml正己烷，涡动1 min，再加入0.5ml样品萃取液，涡动30s后，用离心机离心5 min。
6、除去上层有机相，取下层水相用于分析。
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第二章样品的前处理第一节样品前处理的目的饲料卫生检验所要检测的有毒有害物质通常都是微量存在于样品中，而一般的样品由于成分复杂、干扰因素多，不适于多数的检验项目。
因此，在进行正式分析前必须对样品进行前处理。
前处理的目的是将样品中的有毒有害物质提取出来，进行纯化和浓缩，除去干扰物质，使样品符合分析要求。
样品前处理的效果往往是决定分析成功如否的关键。
其包括样品的提取、样品提取液的纯化和浓缩三个步骤。
第二节样品的提取由于被测物质的性质、所使用的分析方法不同，其提取的方法也不同。
常用的提取方法有溶剂提取法、灰化法和蒸馏法三种。
一、溶剂提取法溶剂提取法是利用有机溶剂将样品中的有机毒物如农药、真菌毒素等提取出来加以纯化、浓缩供检测用的一种分离技术。
为了使毒物尽可能完全地被提取出来，而其它成分则尽可能少地进入提取液中，以便于纯化、浓缩，必须正确地选择合适的提取溶剂和提取方法。
㈠提取溶剂的选择提取溶剂的选择主要根据相似者相溶原理，即根据被测物质的记性大小来选择相应的提取溶剂。
常用溶剂的极性顺序为：氨水>水>乙酸>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>乙酸乙酯>氯仿>二氯甲烷>乙醚》苯>甲苯>四氯化碳>环己烷>正己烷。
其次，应考虑提取溶剂的沸点。
一般认为提取溶剂以沸点为40～80℃者为宜。
过高，则不易浓缩，在浓缩过程中易引起某些被测物质的破坏；过低则容易挥发，不便于定容。
此外，还需考虑溶剂的稳定性（即溶剂不能与样品发生反应）、价格、毒性以及分析所用的仪器（使用电子捕获检测仪时不能用含氯溶剂）等。
㈡提取方法的选择提取方法主要有振荡提取法、组织捣碎提取法和索氏提取法三种。
1、振荡提取法这是一种最为常用的有机毒物提取法。
将样品粉碎，过筛后放入磨口具塞的三角烧瓶中，加入适宜的溶剂，置于电动振荡器中振荡提取半小时至1小时，然后用过滤的方法将残渣与提取液分开，残渣再用有机溶剂洗涤数次，合并到提取液中。
2、组织捣碎提取法本法主要用于新鲜蔬菜、牧草等含水量较多的样品。
将样品切碎后放入组织捣碎机，加入适宜的溶剂，快速捣碎3～5分钟，然后过滤，残渣用溶剂洗涤数次，合并到提取液中。
此法提取效率高，但杂质的溶出也较多，在捣碎过程中所产生的乳化现象，可用离心法除去。
3、索氏提取法是一种应用索氏提取器进行连续回流提取的方法。
索氏提取器又称脂肪提取器，有烧瓶、抽提筒和冷凝管三部分组成。
将样品用滤纸包好，放在抽提筒内，溶剂放在烧瓶内，抽提时，加热下端烧瓶内的溶剂，溶剂不断蒸发，进入冷凝器中，被冷凝成液体进入抽提管中对样品进行抽提，当溶剂达到一定高度后，就借助虹吸管流到烧瓶中，溶剂不断地蒸发、冷凝、抽提、回流，直到样品中的被测物质全部地被抽提出来。
此法常用于谷类的提取。
优点是溶剂的使用量少，提取完全，回收率高，但较费时，一般每个样品要抽提12小时以上。
㈡灰化法本法是一种适用于分析样品中有毒矿物质的预处理方法。
样品中的矿物质如Hg、F、Pb等在饲料中与有机物结合形成稳定、牢固的难以解离的物质，故不能用一般的化学反应进行检测。
在分析样品中的有毒矿物质时，需将样品灰化，破坏有机物质，使结合状态的金属或非金属转变成无机物的形式，以便进行检测。
根据分析项目不同，破坏样品中有机物质的方法主要有灰化法和湿消化法两类。
1、干灰化法（Dry ashing）简称灰化法或灼烧法，是一种常用的有机物质破坏法，适用于除汞、砷以外的各种金属类金属元素。
⑴干灰化的方法根据灰化过程中是否加其它试剂，本法又分二种。
①直接灰化法：将样品放在坩埚中，在高温灼烧下，使样品脱水、焦化，在空气中氧的作用下，使样品中的有机物氧化分解成二氧化碳、水和其它气体而挥发，剩下无机物（盐类或氧化物），用适当溶剂溶解定容，供测定用。
②加助灰化剂灰化法：常用的助灰化剂有氧化镁、硝酸镁、氢氧化钠、氢氧化钙等。
加入助灰化剂，可使样品呈疏松状态，加速灰化过程，并使灰化完全。
此外，助灰化剂还可和被测物质结合成难挥发的盐类，防止灰化过程中被测物质的损失，如氧化镁或硝酸镁能使砷变成难挥发的焦砷酸镁（Mg2As2O7），氢氧化钙则转变成难挥发的CaF2等。
⑵干式灰化法的优缺点优点：①其它试剂少，减少了操作过程污染的可能性，因而空白值较低；②样品分解彻底，操作简便，仪器设备简单，一次可以处理大量的样品。
缺点：①干灰费时，一般500～550℃需4 hr，600℃需1hr～2hr；②长时间的高温加热易使一些被测物质挥发；③瓷坩埚能吸附金属，可造成结果偏低。
⑶干灰化法操作的注意事项①灰化前应进行样品的预炭化，预炭化系指将坩埚内的样品先放在文火上加热，直至样品变黑，然后转入控温茂福炉内550℃灰化，预炭化的目的在于防止样品因急剧灼烧引起的残灰飞散。
②瓷坩埚对金属有吸附作用，特别是新的瓷坩埚，因此在使用时应选用用过的坩埚。
③如果样品在灰化后仍不变白，可在冷却后沿坩埚边缘加入少量蒸馏水湿润，再使其充分干燥后继续灰化。
加水的目的是有助于灰分溶解，解除低熔点灰分对炭粒的包裹。
2、湿灰化法（Wet digestions）简称消化法，也是常用的样品无机化方法之一。
系利用氧化性强酸，结合加热将有机物质破坏使待测的无机物分解释放出来并形成难挥发的无机化合物供测定用。
它适用于易挥发散失的矿物质，除汞外，大多数金属均有良好效果。
（1）常用的氧化性强酸在消化过程中常用的氧化性强酸有浓硝酸、浓硫酸和高氯酸三种。
①浓硝酸通常使用的浓硝酸，其浓度为65～68%（ml/ml），有较强的氧化性，浓HNO3在温热条件下分解成O2、NO2和H2O，NO2进一步分解成O2及NO。
2HNO3 +1O2+H2O 2NO+O2沸点较低，硝酸易挥发，因而需要经常放冷补充，消化完成后消化液中常含有较多氮氧化物，必要时需加热或加水加热除去。
②高氯酸冷的高氯酸无氧化能力，但热的高氯酸却是一种极强的氧化剂，氧化能力强于硝酸和硫酸。
这是由于高氯酸在加热条件下能产生氧和氯的缘故。
4HClO47O2+2Cl2+H2O应予注意的是，HClO4在高温下直接接触还原性较强的物质如酒精、脂肪、糖类、甘油等有发生爆炸的可能，故一般不单独使用，并且勿使消化液烧干，以免发生危险。
③硫酸热的浓硫酸具有一定的氧化作用。
受热分解时，放出氧、二氧化硫和水。
H2SO412O2+SO2+H2O硫酸较硝酸、高氯酸弱得多，但硫酸沸点高，不易挥发。
（2）常用的消化方法在实际工作中，除了单独使用浓硫酸的消化法外，经常采取两或两种以上氧化性强酸配合使用，利用各种酸的特点，取长补短，以达到安全快速、完全破坏有机物的目的。
下面介绍常用的两种湿消化方法。
①硝酸-硫酸湿消化法将5g样品置于100ml的凯氏烧瓶中，随之加入与浓硝酸等体积的蒸馏水，缓缓加热至沸腾，继续加热至容积减半。
冷却后逐渐加入10ml硫酸，再加热，待内容物变黑，既加入少量浓硝酸，为防止过度炭化，加热必须适度，整个消化过程必须存在少量的硝酸，加热至发烟而不再变黑，最后至溶液无色，冷却、用蒸馏水稀释至一定体积备用。
本法可缩短炭化过程，减少消化时间，反应速度适中。
但因消化过程中使用硫酸，而碱土金属的硫酸盐溶解度较小，故本法不宜作碱土金属的分析。
②硝酸-高氯酸湿消化法将含有不超过2g干物质的样品至于200ml的凯氏烧瓶中，加入25ml硝酸（相对密度为1.42）缓慢蒸煮沸30min，冷却、加15ml高氯酸（60%w/w）。
缓慢煮沸至无色或近乎无色，继续沸腾1hr（注意防止瓶中内容物蒸干）。
冷却，用蒸馏水稀释至适当体积备用。
本法氧化能力强，反映速度快，炭化过程不明显；消化温度较低，挥发损失少。
但由于硝酸和高氯酸加热后均容易挥发，故如温度过高、加热时间过长，容易烧干，并可能引起残余物燃烧或爆炸。
本法对某些还原性较强的样品，如酒精、甘油、油脂和大量磷酸盐存在时，不宜采用。
⑵湿消化法的特点①优点：所用时间短，温度较低，因而挥发损失较少，同时应用玻璃仪器（凯氏烧瓶），吸附损失也较少。
②缺点：使用试剂较多，易造成高的试剂空白值，操作较复杂，危险性大，不便于大量样品的处理。
为此，美国分析化学家协会（AOAC）推荐一种湿消化法和干灰化法相结合的消化方法，其过程如下：1g样品置于上釉的高形陶瓷坩埚内，500℃灰化2hr，冷却，用10滴蒸馏水湿润，然后小心加入3～4ml硝酸（1:1），100～200℃下蒸发除去多余的硝酸，将坩埚转至马福炉内，500℃灰化1hr，冷却、用100ml盐酸（1:1）溶解并定量转至50ml的容量瓶中定容。
⑶湿消化法的注意事项①消化所用试剂要纯，同时必须做空白试验，以扣除消化试剂对测定数据的影响。
②样品中加入硫酸、硝酸后应先用文火加热，以防反应过于剧烈而产生大量泡沫，待反应平稳后方可加大火力，但整个消化过程的温度仍应严格控制，以防溶液溅出或消化不完全。
③消化过程中一定要保证瓶中有少量的液体，以防发生危险。
在补充氧化剂时要先停止加热，并稍微放冷后，然后沿瓶壁缓缓加入，以防反应过于剧烈而造成喷溅。
㈢蒸馏法蒸馏法是处理含挥发性毒物的样品的常用方法，兼有提取和纯化的双重作用。
常用蒸馏法有通气蒸馏法和水蒸气蒸馏法。
通气蒸馏法是使样品中的挥发性成分在一定条件下（加热或反应成气体）挥发，随通入的洁净气体（如二氧化碳、氧气或空气等）蒸馏出来，被吸收液固定下来（基本装置见粮油食品卫生检测P19）。
水蒸气蒸馏法是用水蒸气代替洁净气体将有毒成分蒸馏出来，并被冷凝管冷凝进入接受器（基本装置见P21）。
蒸馏时由于有毒成分变成气体被蒸馏出来，因而需注意整个蒸馏装置的密封性，以防有毒气体逸漏，造成毒害。
另外，水蒸气发生器要装一定安全管，以防蒸汽压力过高造成蒸馏装置炸裂。
三、提取液的纯化样品经提取，被测成分进入提取液中，但提取液成分仍很复杂，常含有多种杂质，有时会干扰正常的测定。
因此，必须将样品提取液经过适当处理，除去其中的杂质。
这个处理过程称为纯化（Clean up）。
根据样品的性质，可采用不同的纯化方法。
常用的纯化方法有：1、液液分配法（又称萃取法）是利用物质在两种互不相溶的溶剂中溶解度不同，将被测的有机污染物从抽提液转移到另一种溶剂中（即萃取剂）而与干扰物质分离，达到纯化目的的一种方法。
此法操作简便、快速、回收率高，因而被广泛应用。
为了获得较好的分离效果，萃取剂的选择至关重要。
萃取剂需要具备以下条件：①与抽提液互不相溶；②对被测的有机毒物（农药、真菌毒素等）有较大的溶解性；③对色素、脂肪、蜡质等杂质有较小的溶解性。
一般来说，农药、真菌毒素等的极性较色素、脂肪等杂质为大，即前者在强极性溶剂中溶解度大，而后者在弱极性溶剂中溶解度大。
因而通常萃取是用极性较大的氯仿、甲醇等溶剂来萃取石油醚等极性较小的抽提液，这样，极性物质被转移到萃取液中，而杂质仍在抽提液中。