血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验

➢ 高HDL血症分为原发性和继发性两类。
KEY POINTS
➢ Classification and functions of the main lipids, lipoproteins and apolipoproteins in the blood.
➢ Characteristics and functions of the main receptors, lipid-binding proteins and enzymes related to the lipoprotein metabolism.
➢ 失去TG之后的VLDL转变成VLDL残粒（IDL）。
➢ IDL有两条代谢途径：一是直接经肝脏ApoE受体 结合摄取进入肝细胞代谢；二是经HTGL作用转 变成以ApoB100和游离胆固醇为主要成份的LDL， 经末梢组织的LDL-R结合进入细胞内，进行代谢。
VLDL、IDL、LDL代谢
3．HDL代谢
LDL受体途径 （LDL receptor pathway）
若胞内游离胆固醇浓度升高， 则： ①抑制HMGCoA还原酶，以 减少自身的胆固醇合成； ②抑制LDL受体基因的表达， 减少LDL受体的合成，从而 减少LDL的摄取； ③激活内质网ACAT，使游 离胆固醇在胞质内酯化成胆 固醇酯贮存，以供细胞的需 要。
（二）电泳法
➢ 根据血浆脂蛋白表面 电荷量大小不同，在 电场中，其迁移速率 也不同，分为： ☆乳糜微粒 ☆β-脂蛋白 ☆前β-脂蛋白 ☆α-脂蛋白
超速离心法与电泳法分离血浆脂蛋白的 相应关系
二、血浆脂蛋白的组成和特征
三、载脂蛋白的组成和特征
➢ 脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白 (apolipoprotein，apoprotein，Apo) 。
一、血浆脂蛋白的分类
➢ 血浆脂质总量为4.0～7.0g/L。包括：
1. 胆固醇 (total cholesterol，TC)
游离胆固醇 (free cholesterol，FC)
胆固醇酯 (cholesterol ester，CE)
2. 磷 脂
(Phospholipid，PL)
3. 甘油三酯 (triacylglycerol/triglyceride，TG)
SRs分为SR-A、SR-B、SR-C、 SR-D、SR-E和SRF六大类。 ◆清道夫受体配体 均为多阴离子化合物。 ①乙酰化或氧化等修饰的LDL； ②多聚次黄嘌呤核苷酸，多聚 鸟嘌呤核苷酸； ③多糖如硫酸右旋糖酐； ④细菌脂多糖，如内毒素等。 ◆清道夫受体功能 1.巨噬细胞通过清道夫受体清 除细胞外液中的修饰LDL，尤 其是氧化LDL，是机体的一种 防御功能。 2.具有清除血管过多脂质和病菌 毒素等。
➢ 在肝脏和小肠合成时属于未成形的HDL（nascent HDL， HDLn）。
➢ HDLn获取CM、VLDL表层的磷脂和ApoAⅠ而变成园盘状 的新生HDL。
➢ 新生HDL从末梢组织细胞膜获得游离胆固醇，经LCAT作用 生成CE进入HDL内部，形成成熟型HDL3和球型HDL2。
➢ HDL3在CETP介导下，与VLDL、LDL进行CE/TG交换， 使末梢组织的FC输送到肝脏。
CETP对胆固醇的逆转运过程
五、血浆脂蛋白的代谢
（一）血浆脂蛋白代谢密切相关的酶类
参与脂质代谢的酶有： ➢ 脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，LPL） ➢ 肝脂酶（hepatic triglyceride lipase，HTGL） ➢ LCAT等。
1．L
➢ LPL是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺 细胞以与巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种 糖蛋白，分子量为60kD。
lipid determinations.
Major Objectives
➢ 了解脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。 ➢ 熟悉脂蛋白的特征、脂代谢有关酶类的特点和生
理功能、高脂蛋白血症分型与其特征。
➢ 掌握血浆脂类组成及脂蛋白的分类、主要载脂蛋
白和脂蛋白受体的特征与功能、血浆脂蛋白代谢 紊乱的生物化学检验。
（一）高脂蛋白血症的分型
（二）原发性高脂蛋白血症
➢ 家族性多基因性高胆固醇血症 ➢ 家族性高胆固醇血症 ➢ 家族性异常β-脂蛋白血症 ➢ 家族性乳糜微粒血症 ➢ 家族性高甘油三酯血症 ➢ 其他家族性高脂血症
（三）继发性脂蛋白血症
➢ 糖尿病 ➢ 甲状腺功能减退 ➢ 肾脏疾患 ➢ 肥胖症 ➢ 酗酒 ➢ 药物
（四）高HDL血症
➢ 血浆HDL-胆固醇（HDL-C）含量超过2.6mmol/L，定义为高 HDL血症。
➢ CETP与HTGL活性降低是引起高HDL血症的主要原因。若 CETP缺陷，HDL内的CE蓄积，使HDL增多；若HTGL活性 降低，HDL被肝细胞摄取减少并使HDL2→HDL3转换过程减 慢而停留在血液中，并使其浓度增加，出现高HDL血症。
➢ Definition and types of hyperlipidemia. ➢ Relationship between the abnormity of lipoprotein
metabolism and atherosclerosis. ➢ Evaluation, comparison and clinical significance of
4. 游离脂肪酸 (free fatty acid，FFA)
血浆脂蛋白结构
➢ 脂蛋白一般以不溶于 水的TG和CE为核心， 表面覆盖有少量蛋白 质和极性的PL、FFA， 从而使脂蛋白颗粒能 稳定地分散在血浆中。
(一) 超速离心法
根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进行离心时，因漂浮 速率不同而进行分离的方法。
➢ HDL2中的TG经肝脏的HTGL作用，可以再变成HDL3，使 HDL在逆转运中再利用，从而防止动脉粥样硬化的发生。
第二节 脂蛋白代谢紊乱
一、高脂蛋白血症 二、低脂蛋白血症
一、高脂蛋白血症
➢ 高脂血症（hyperlipidemia）是指血浆中胆固醇和 /或TG水平升高。
➢ 由于血脂在血中以脂蛋白形式运输，因而实际上 高脂血症就是高脂蛋白血症 （hyperlipoproteinemia，HLP）。
（一）低密度脂蛋白受体受体结构
➢ 由836个氨基 酸残基组成 36面体结构 蛋白，分子 量约115kD， 由五种不同 的区域构成
LDL受体基因结构与功能
➢ 人LDL受体基因长度45kD，由18个外显子和17个内含 子组成。
➢ 受体亲和性 含ApoB100的脂蛋白可与LDL受体以高亲 和力结合。
➢ LDL受体广泛分布于肝、动脉壁平滑肌细胞、肾上腺 皮质细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、单核细胞和巨 噬细胞 。
➢ HTGL活性不需要ApoCⅡ作为激活剂；
➢ SDS可抑制HTGL活性，而不受高盐浓度与 鱼精蛋白的抑制；
➢ 主要作用于小颗粒脂蛋白如VLDL残粒、 CM残粒及HDL，调节胆固醇从周围组织转 运到肝，使肝内的VLDL转化为LDL。
3．LCAT
➢ LCAT由416个氨基酸残基组成，分子量为6.3kD， 属于糖蛋白。
➢ LCAT由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋 白结合的形式存在。
➢ 作用是将HDL中的卵磷脂的C2位不饱和脂肪酸转 移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯， 使HDL变成成熟的HDL球状颗粒。
（二）血浆脂蛋白代谢
➢ 外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和TG 在小肠中合成CM与其代谢过程。
➢ 内源性代谢途径：包括 ①由肝脏合成VLDL，VLDL转变为IDL和 LDL，LDL被肝脏或其它器官代谢的过程。 ②HDL的代谢过程。
➢ 接着CM中的TG被LPL水解产生甘油一酯及脂肪 酸，后者被细胞摄取利用或贮存。
➢ 剩下的残留物被称为CM残粒(CM remnant)，随血 液进入肝脏迅速被代谢。
CM代谢
2．VLDL、IDL、LDL代谢
➢ 体内合成的内源性TG与ApoB100、C、E等在肝 脏合成VLDL释放入血液。
➢ TG经血管壁的LPL水解生成脂肪酸被末梢组织利 用。
（二）极低密度脂蛋白受体
➢ 结构与LDL受体类似。 ➢ 仅 对 含 ApoE 的 脂 蛋 白
VLDL、VLDL 残 粒 有 高 亲和性结合，对LDL为显 著的低亲和性。 ➢ 在肝内几乎未发现，广泛 分布在代谢活跃的心肌， 骨骼肌、脂肪组织等细胞. ➢ VLDL受体不受细胞内胆 固醇负反馈抑制。
◆清道夫受体结构
➢ 有些蛋白质也可与HDL结合，但不产生或只产生 较弱的效应，则称之为HDL结合蛋白（HBP）。
（六）胆固醇酯转运蛋白
➢ 胆固醇酯转运蛋白（CETP）属于脂质转运蛋白（lipid transfer protein，LTP），是由肝、小肠、肾上腺、脾、 脂肪组织与巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白。
➢ cDNA编码的CETP含476氨基酸残基，分子量为53kD；成 熟CETP含4个天冬酰N-糖链，分子量为74kD。
➢ ApoCⅡ为其必需的辅因子。
➢ 作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使 脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。
➢ 活性LPL以同源二聚体形式存在，通过静电引力 与毛细血管内皮细胞表面的多聚糖结合，肝素可 以使此结合形式的LPL释放入血，并提高其活性。
2．HTGL
HTGL亦称为肝性LPL（hepatic LPL）其特 点：
1．CM代谢
➢ 从食物中摄取的脂质(主要是TG)，在肠内被胰腺 分泌的脂酶水解成脂肪酸和甘油一酯（MG），由 肠粘膜吸收进入细胞内再重新合成TG与磷脂。
➢ 新合成的TG与少量的胆固醇、磷酯、ApoB48、 ApoAI构成CM，经淋巴管至胸导管进入血液循环。
➢ CM在血液中从HDL转移获得ApoC和ApoE而变化 成熟型CM。
（三）清道夫受体 (scavenger receptor，SR)