ELISA试剂盒

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实验室中那些不同种类的常见ELISA试剂盒区别在哪

【一】心肌梗塞检测elisa试剂盒：

如肌钙蛋白、肌红蛋白、C-反应蛋白等。

【二】细胞因子检测试剂盒：

如白介素、选择素、集落刺激因子，肿瘤坏死因子，干扰素，转化生长因子，趋化因子，细胞因子受体，粘附分子，生长因子，凋亡因子等。

【三】肝纤维化检测elisa试剂盒：

如纤维连接蛋白，透明质酸，胶原，基质金属蛋白酶抑制因子，elisa试剂盒基质金属蛋白酶，层粘蛋白等。

【四】内分泌检测elisa试剂盒

如甲状腺、胰腺、性激素、孕酮、睾酮、生长激素、生长抑素、内皮素、皮质醇、骨钙素、催乳素、促肾上腺皮质激素、促卵泡素、雌二醇、雌三醇、5-羟色胺，17-羟孕酮等。

【五】传染病检测elisa试剂盒

如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,elisa试剂盒抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A 族链球菌等。

【六】自身免疫检测elisa试剂盒：

如甲状腺,盐水可提取核抗原抗体（ENA）,抗核抗体,DNA,抗心磷脂抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱疮,蛋白酶,抗组蛋白抗体,粒细胞弹性蛋白酶,皮肤抗体,肾上腺抗体,肾小球基底膜,肾小球基底膜抗体,髓过氧化物酶,条纹肌抗体,网硬蛋白抗体,胃壁细胞抗体,胃蛋白酶,系统性红斑狼疮,细菌性渗透性增强因子等。

小鼠血肌酐(S-Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书

小鼠血肌酐（S—Cr）ELISA检测试剂盒使用

说明书

小鼠血肌酐（SCr）ELISA检测试剂盒使用说明书

检测原理

试剂盒采纳双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被血肌酐（SCr）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。颜色的深浅和样品中的血肌酐（SCr）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明

elisa试剂盒原理

ELISA试剂盒（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，又译作免疫夹配酶联免疫吸附测定法）是一种常用的生物化学技术，它能够快速、灵敏地检测固定量的抗原或抗体。它的原理建立在具有特异性的抗原与抗体发生免疫反应的基础上，并且利用酶联免疫吸附测定法将其特异性特性发挥到极致。

ELISA试剂盒的原理实际上是利用一种可用来衡量两种特定分子结合情况的“酶联免疫反应”，即抗体可以特异性地结合抗原（如病毒、细菌、细胞、植物体等），然后会把这种特异性关联变成数量上的增加。这种数量上的增加是金属蛋白酶（enzyme）所带来的。当抗原被特异性抗体结合时，同时伴随着金属蛋白酶在抗原上的结合，而金属蛋白酶又被某些特定物（如丙二醛或氯仿等）所诱导，从而使抗原上的特异性结合物产生数量上的增加。

ELISA试剂盒的工作原理以上就是ELISA试剂盒的基本原理，它主要利用酶联免疫吸附测定的特异性原理，将特定的抗原或抗体酶联到具有特异性的样品上，最后检测数量上的增加。ELISA技术具有高灵敏度、简便快捷、操作可靠等优点，被广泛应用于疾病诊断、抗原定性与定量检测、免疫活性评价以及生物体病原学研究等诸多领域。 ELISA试剂盒的工作原理主要包括抗原与抗体的结合、酶的结合与产物的检测等环节。首先呈现的是抗原及抗体的结合，抗原及抗体在液体相中可以特异性地结合；其后的酶的结合是将抗原及抗体结合后，利用具有特异性的金属蛋白酶，将酶与抗原结合，从而使得结合

物数量上有所增加；最后一步是检测，也就是检测酶结合物产生的数量上的增加，从而获取结果。

人脂肪炎症因子(Apelin)ELISA检测试剂盒简介说明

人脂肪炎症因子(Apelin)ELISA检测试剂盒

简介说明

人脂肪炎症因子(Apelin)ELISA检测试剂盒说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被脂肪炎症因子（Apelin /APLN）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪炎症因子（Apelin /APLN）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解

冻。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

4abio mouse TNF-α ELISA 试剂盒使用说明书

REV20190712

仅供研究，不用于临床诊断。

客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱:

公司官网:

简介 ........................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................... - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................... - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................... - 5 -其他实验材料(不提供，但可协助购买) : ............................................................................................. - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................... - 5 -样本收集处理及保存方法 ....................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................... - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................... - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................... - 8 -操作要点提示 ........................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................... - 9 -结果重复性 ............................................................................................................................................. - 10 -灵敏度 ..................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ..................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ................................................................................................................................................. - 11 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。

小鼠磷酸二酯酶（PDE）酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

小鼠磷酸二酯酶（PDE）酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织等样本中磷酸二酯酶（PDE）的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠磷酸二酯酶（PDE）水平。用纯化的小鼠磷酸二酯酶（PDE）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入小鼠磷酸二酯酶（PDE），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠磷酸二酯酶（PDE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠磷酸二酯酶（PDE）含量。

试剂盒组成：

样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集

上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心

20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程

中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转

/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学

实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。ELISA检测试剂

盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进

行ELISA实验。

1.准备实验材料：

-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，

确保其在储存和运输过程中无损坏。

-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。确保

样本的质量和浓度满足实验要求。

-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有

无污染。

-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。

2.实验步骤：

-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根

据实验步骤进行下一步操作。

-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。

-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需

要加入100-200μL的样品。

-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。洗板时应注意

洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。

-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加

入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。

-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各

孔中，确保加入的量准确无误。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。

elisa试剂盒检测原理

以elisa试剂盒检测原理为标题，本文将介绍ELISA（酶联免疫吸附实验）试剂盒的工作原理及其在生物医学领域的应用。

ELISA是一种常用的免疫学实验技术，也是一种高度敏感和特异性的方法，用于检测和定量分析体内外的抗原或抗体。ELISA试剂盒通常由多个组分组成，包括固相载体（通常是微孔板）、酶标记的抗体或抗原、底物和检测试剂。

ELISA的工作原理基于抗原与抗体的特异性结合。首先，将待测样品加入到涂有特定抗原或抗体的微孔板孔中，使抗原或抗体与固相载体表面结合。然后，洗涤孔中未结合的物质，以去除非特异性结合。接下来，添加酶标记的抗体或抗原，使其与待测样品中的目标物质结合。再次洗涤，去除未结合的物质。最后，添加底物，使其与酶标记的抗体或抗原发生反应，产生可测量的信号。通过测量底物的反应产物的光学密度，可以定量分析待测样品中目标物质的浓度。

ELISA试剂盒在生物医学研究和临床诊断中有广泛的应用。它可以用于检测病原微生物、肿瘤标志物、激素、抗体等多种生物分子。例如，在感染性疾病的诊断中，ELISA可以检测病原微生物的抗原或抗体，帮助医生准确判断病原体的种类和感染程度。在肿瘤标志物的检测中，ELISA可以定量分析血液中特定蛋白质的浓度，从而

判断肿瘤的存在和发展情况。此外，ELISA还可以用于血液筛查、药物监测、食品安全等领域。

ELISA试剂盒的优点在于其灵敏度高、特异性强、操作简便、结果可靠等。但同时也存在一些局限性，如可能受到样品中其他成分的干扰，需要对样品进行预处理等。因此，在使用ELISA试剂盒进行实验时，需要仔细选择合适的试剂盒类型、优化实验条件，并结合其他检测方法进行确认。

elisa试剂盒开发流程

Elisa试剂盒开发流程

简介

Elisa（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）试剂盒是一种常用的生物化学实验工具，用于检测特定抗原或抗体的存在和浓度。下面将详细介绍Elisa试剂盒的开发流程。

流程概述

Elisa试剂盒的开发涉及以下几个关键步骤：

1.抗原或抗体选择：根据检测的目标，选择与之特异结合的抗原或

抗体作为试剂盒中的关键成分。

2.试剂组装：按照一定比例将抗原、抗体和其他必要试剂组装成试

剂盒。

3.试剂盒验证：对组装好的试剂盒进行验证，确保其具有准确性和

可重复性。

4.市场推广：将验证通过的试剂盒投放市场，并进行相应的推广活

动。

详细流程

抗原或抗体选择

在Elisa试剂盒的开发中，选择适当的抗原或抗体至关重要。以

下是具体步骤：

•确定检测目标：明确需要检测的特定抗原或抗体。

•搜集相关文献：通过文献研究，了解该目标的已有研究成果。

•筛选候选物质：从已有研究成果中筛选出与检测目标特异结合的候选抗原或抗体。

•确定最佳组合：通过细致的实验，确定最佳的抗原或抗体组合。

试剂组装

将选择好的抗原、抗体等组装成试剂盒：

•准备试剂：确定所需的抗原、抗体和其他试剂的种类和规格。

•按比例混合：根据试剂盒的组成，按照一定的比例将抗原、抗体和其他试剂混合。

•包装和标签：将混合好的试剂以适当的方式包装，并进行标签。

试剂盒验证

验证试剂盒的准确性和可重复性，确保其质量：

•设计验证实验：制定验证方案，包括实验设计、样本数量等要素。

•进行验证：按照验证方案进行实验，并记录实验结果。

ELISA试剂盒操作方法

1.准备工作

-将所需试剂和物质取出，并按照使用说明书中的要求进行储存和保存。确保试剂完整无损，并严格遵守保存条件。

2.样品处理

-根据试剂盒的要求，处理待测样品。这可能涉及到稀释、离心、过滤等步骤，以确保样品符合试剂盒的要求。注意避免样品的污染和损坏。

3.准备试剂和标准曲线

-根据试剂盒的要求，准备所需的试剂和标准曲线。试剂通常由酶标板和洗涤缓冲液组成。标准曲线是用于确定未知浓度样品的参考标准。

4.酶标板涂层

-先加入涂层抗体或抗原到酶标板的孔中，然后将其在室温下孵育一段时间。这会使孔中形成抗原或抗体的层，以便后续的反应。

5.吸附溶液去除

-将酶标板颠倒并用纸巾轻轻拍干，以将未吸收的溶液去除。

6.样品和标准品加入

-根据试剂盒的要求，将样品和标准品加入到孔中。同时留有几个孔作为空白对照。注意将样品和标准品加入到正确的孔中，避免交叉污染。

7.孵育和洗涤

-放置酶标板在孵育箱中（一般在37摄氏度）孵育一段时间，以促使样品中的目标物质与酶标记的抗体结合。然后将液体从孔中洗涤掉，以去除未结合的物质。

8.酶标记的二抗加入

-加入酶标记的二抗（通常是抗人IgG的辣根过氧化物酶）到酶标板中的每个孔中，使其与目标物质结合。

9.孵育和洗涤

-将酶标板重新放回孵育箱中孵育，然后再次进行洗涤，以去除未结合的物质。

10.底物添加

-向每个孔中加入底物，使其与酶发生反应，产生颜色的变化。反应时间根据试剂盒的要求进行控制。

11.反应终止

-加入反应停止液，停止酶的反应，防止进一步的颜色变化。具体的反应停止方法要根据试剂盒的要求进行。

ELISA 检测试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

小鼠

小鼠（（Mouse

Mouse））肿瘤坏死因子可溶性受体

肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ（TNFsR-

TNFsR-ⅠⅠ）

ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

抗原试剂盒的用法

1抗原试剂盒的定义

抗原试剂盒又称ELISA试剂盒，是利用酶联免疫吸附反应（ELISA）检测，可用于检测特定抗原物质（如抗体、蛋白、抗原、细胞因子或其它外源能够与抗体结合的物质）在样品中的相互作用。

2各种抗原试剂盒

抗原试剂盒可以分为常规ELISA试剂盒、全自动ELISA试剂盒、多因子ELISA试剂盒和金属ELISA试剂盒几种。

常规ELISA试剂盒是反应回路最简单的试剂盒，通常包含一种抗体或抗原、几种杂交液、一种酯化底物，用于检测特定抗原或抗体，能简便、快捷地进行单一或相互间因子检测，具有较多的应用。

全自动ELISA试剂盒是在常规ELISA试剂盒上完善后出现的，添加了稳定和吸附等因素，并采用微量无毒技术，该试剂盒的特点是环境友好、方便快捷。

多因子ELISA试剂盒是在全自动ELISA试剂盒的基础上添加多个组分，具有检测多种抗原物质的能力。金属ELISA试剂盒是在金属氧化物的显色底物和稳定抗体反应的基础上发展起来的，可用于检测有机金属污染物。

3抗原试剂盒的用法

（1）准备检测样品：首先将抽取后的样品稀释至稳定液，经过多次混匀，将水溶液中的Tween20去除。

（2）添加抗原：将抗原溶液加入模拟ELISA反应盒，添加抗原可通过改变抗原浓度来优化检测效率。

（3）添加抗体：将抗体溶液加入模拟ELISA反应盒，添加抗体可以提高检测的灵敏度。

（4）添加抗体复合物：将抗体复合物溶液加入模拟ELISA反应盒，抗体复合物是由抗原与抗体结合的复合物。

（5）调整混合液：将模拟ELISA反应盒中的混合液调节至pH值6.5-7.5范围内，以保证ELISA反应过程顺利进行。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的实验技术，用于检测目标物（如蛋白质、抗原或抗体）的存在和浓度。ELISA试剂盒是ELISA实验的

核心，包括特定的试剂和材料，用于执行特定的步骤和操作。以下是一般ELISA试剂盒的操作方法，包含以下步骤：

1.准备实验样品：收集所需分析物的样品（例如血清、细胞上清液或

组织提取液等），并适当保存或稀释以便后续操作。

2.预处理步骤：根据实验的目的和试剂盒的要求，进行样品的预处理。这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。

3.涂覆酶联免疫板：打开试剂盒中提供的酶联免疫板，将其放置在工

作台上。将涂覆物质（如抗体或抗原）加入到每个酶联免疫孔中，通常使

用多通道移液器或微量移液器进行操作。涂覆后，尽量避免泡沫和交叉污染。

4.触发剂孵育：将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中，

在适当的温度下孵育一段时间。此步骤的目的是固定涂覆物质，并优化其

活性。

5.洗涤：将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中，并倾斜孔盘轻

轻敲打或使用洗板仪进行洗涤，以去除未结合的物质和杂质。通常，洗涤

液需要多次更换，充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。

6. 过量引物（Block）：加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中，目的

是防止非特异性结合的发生。阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。

7.加入样品和控制物质：将处理好的样品和控制物质，如阳性对照和阴性对照，加入到各个酶联免疫孔中。注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。

8.孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，按照试剂盒的要求进行孵育。完成孵育后，继续进行洗涤步骤，以去除未结合的物质。

ELISA 检测试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

人（Human Human））17-17-羟皮质类固醇（羟皮质类固醇（羟皮质类固醇（17-OHCS 17-OHCS 17-OHCS）

）ELISA 检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被17-羟皮质类固醇（17-OHCS）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的17-羟皮质类固醇（17-OHCS）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.

血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞

刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地

分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.

组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟

取上清。5.

保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于

-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱操作注意事项1.

试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备

1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备：根据实验要求，准备样本。如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤

1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。

3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

elisa试剂盒原理

ELISA（又称酶连结免疫吸附试验）是一种常用的免疫分析研究手段，是一种用于检测特定抗原或抗体的生化分析方法，由分子生物学家Edward Kabat在1970年提出，通过酶连结表面抗原（ELISA）来检测抗原特异性抗体，可以在几小时内检测得到大量特异性抗体，目前ELISA试剂盒在生物化学、分子生物学、药物研究、免疫学以及肿瘤等学术研究中以及临床上发挥着重要的作用。

ELISA仪器可以检测出抗原特异性抗体，有两种形式，沉淀式和双抗原ELISA。沉淀式ELISA试剂盒利用抗原结合试剂盒中的特异性抗体，将抗原特异性抗体沉积在反应物磁珠或磁芯上，这种方法通常用于特定的病毒检测。双抗原ELISA试剂盒中，两种特异性抗体分别结合在抗原特异位点上，由于它们之间的特异性结合，使抗原结合试剂盒的两种特异性抗体的吸附形成一个特异性抗体复合物，这种方法通常用于细胞因子的检测。

ELISA试剂盒的原理是，当被检测物质被抗体识别时，抗体可通过两种方式与目标物质结合，一是特异性结合，二是特异性抗体-受体结合（一种特殊的蛋白质-蛋白质相互作用）。当特异性结合或抗体-受体结合发生时，抗体与特定抗原的结合会形成一个复合物，这个复合物可与另一种特定的抗体结合能力非常弱，把特定抗原与第二种特异性抗体结合在一起形成一个抗原复合物，从而形成一个复合体。 ELISA试剂盒有两种，一种是发光ELISA（FELISA），另一种是酶标ELISA（ELISA），原理是将一种特定抗体和一个特定抗原结合后，

形成一个抗原-抗体复合物，再加上酶，并利用酶的活性将反应物矿化，产生定量的发光信号，来检测与抗原结合的抗体的数量。酶标ELISA依赖于特定的色素，将抗原及抗原特异性抗体复合物标记在特定的位置，然后加入能够将特定的色素变色的酶，最终可以根据变色程度来判别待检样本是否携带抗原。

ELISA试剂盒

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