大鼠肾纤维化模型

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冬虫夏草在肾间质纤维化大鼠模型中的作用及其对TGF-β1、α-SMA的影响

ｍｅｓｅｙａｔｍａｅｍｍｕｏｓａ：ｒｅｓｔｅｍａｋｒａｕｄｂｕｏｔｉｒｄｎａｓｙａｍｏｅｓｎｉｖｒｅｉ
ｏｈｎｅｆｃａｇｓｉＧＦＲｔａｒＨｒａｉｉｅＫｉｎｙＩｔ１９４ｎｈｎｓｏ１ｃｅｔｎ．ｄｅｎ，９５，７ｅｎ
—ａａｓ．ｍＫｄｅｉ２０，０２：２ —２６ｎｌｉＡＪｉｙＩｓ０２４（）２１２．ｙｓｎ），
７．ｗｍａ，ａｋｒＨ，ｗａｄ，ｔａ．ＳｒｍｙｔｔＮｅｎＤＪＴｈｋａＥｄｒｓＲＧｅ１ｅｕｃｓａｉＣｎ
１９，７４：８９９３（）３９—３５９．
３ＦｉｎｙＨ，ｗｍａＪＧｒｂｒＷ，ｔａ．Ｉｉａｅａｕｔｎｏ．ｎｅＮｅｎＤ，ｕｅｅ１ｎｔｌｖｌａｉｆｉｏ
ｃｓａｉａｕｅｎｙｐｒｉｌ —ｅｈｎｅｍｍｕｏｅｈｙｔｔＣｍｅｓｒｍｅｔｂａｔｅ— ｎａｃｄｉｎｃｎｎｐ —
４黄萍，．李国贤，黄爱霞．测定血清胱抑素一Ｃ在评估肾功能中
的意义．床肾脏病杂志，０３３２：０—６．临２０，（）６３
５许讯辉，建洲，．邹丁小强，．等血清胱抑素一Ｃ一种简便测定：肾小球滤过率的标志物．中国临床医学，０１８３：４２０，（）２０—
２４】．

两种造模方法致大鼠慢性肾病模型的肾功能及病理变化比较

两种造模方法致大鼠慢性肾病模型的肾功能及病理变化比较李天祎杨扬杨素萍李嘉琦马逸群王家平摘要目的探究两种造模方法对大鼠慢性肾病模型的肾功能影响及病理改变°方法采用单侧肾切除+尾静脉重复注射阿霉素(ADR)法(A组)和二次尾静脉注射ADR法(B组)测定各组大鼠肾功能(血尿素氮、血肌酐)、血清白蛋白°光镜下观察各组大鼠肾脏的病理变化，并分别与正常对照组(N组)进行比较°结果在4、8、12周末，A、B组血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)值均有显著上升(P<0.05),白蛋白降低(P<0.05)，表现为低蛋白血症，部分大鼠合并腹腔积液°光镜下，A、B两组肾小球均有不同程度萎缩、硬化，肾小管受损不均，肾间质均出现炎性改变°单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的肾脏损伤更为严重°结论单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的慢性肾病模型与二次尾静脉注射ADR法,均可使大鼠成模，两种方法比较，单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的病理改变相对较为典型°关键词慢性肾病阿霉素肾功能中图分类号R3文献标识码A DOI10.11969/j.issn.1673-548X.2020.12.014Comparison of Renal Function and Pathological Changes in Rats with Chronic Nephropathy Induced by Two Methods.Li Tianyi,Yang Yang,Yang Suping,et al.The Second Affiliated Hospital of Kunming Medical University,Yunnan650101,China Abstract Objective To explore the renal function and pathological changes of chronic kidney disease model in rats by two methods.Methods The methods of unilateral nephrectomy and repeated injection of adriamycin(ADR)in to caudal vein(Group A)and second injection of ADR into caudal vein(Group B)were used.Under the light microscope,the renal pathological changes of rats in each group were observed and compared with the normal control group(Group N).Results At the end of4,8,12weeks,the blood urea nitrogen(BUN)and serum creatinine(CR)of group A and group B were significantly higher than those of group n(P<0.05),and the albumin of group A and group B was lower(P<0.05),showing hypoproteinemia.Some rats were complicated with ascites.Under the light microscope,the glomeruli of group A and group B were atrophic and sclerotic in varying degrees,the renal tubules were damaged unevenly,and the renal interstitium showed inflammatory changes.The renal injury induced by unilateral nephrectomy and repeated tail vein injection of ADR is more serious and typical.Conclusion The chronic nephropathy model induced by unilateral nephrectomy and repeated tail vein injection of adriamycin can change the renal function of pared with the two methods,the pathological changes induced by unilateral nephrectomy and repeated tail vein injection of adriamycin are more typical.Key words Chronic kidney disease；Adriamycin；Renal function慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)是影响全球公共健康的主要疾病之一，全球发生率约为8%~16%[1]°临床多表现为蛋白尿、低蛋白血症、水肿以及高脂血症等°因CKD发生率逐渐增高,病程迁延，很难治愈，末期多发展为慢性肾衰竭，只能依靠透析、换肾等仅有的治疗方式缓解,已经逐渐成为威胁人类健康的一类慢性疾病°随着人们对慢性肾病基金项目：云南省卫生和计划生育委员会医学学科带头人培养计划项目(D-201647)作者单位：650101昆明医科大学第二附属医院放射科通讯作者：王家平，电子信箱：1603642110@ 发病机制和病理变化等研究的深入，建立慢性肾病动物模型对研究CKD的肾组织病理形态学变化以及探究治疗CKD的新方法有着重要的意义°目前，国内外公认的模拟慢性肾病效果较好的为阿霉素(adriamycin,ADR)大鼠模型°ADR在大鼠体内代谢较为缓慢,对心脏、肝脏、骨髓、胃肠等具有较强的不良反应，但经尾静脉注射后,其毒性可主要积累于肾脏[2]°因此，应用ADR造模时，应注意注射的方式、剂量等°近年来,应用较为广泛的方法主要有尾静脉注射法(单次或多次)、单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR和肾动脉注射法等°本研究比较单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR及二次尾静脉注射-53-ADR 这两种方法，旨在为更好地复制慢性肾病模型提供更加丰富的参考依据。

庆大霉素诱导大鼠肾小管间质纤维化模型的建立

，
（．ｘｅｍｅｅｅｔｒｆＳｉｎｅａｄＴｃｎｌｇ，ＳａｇａｎｖｒｉｆｒｄｔｎｌＣｉｅｅＭｅｉｉｅｈｎｈｉ０２３，Ｃｉａ１ＥｐｆｎｅＣｎｅｃｅｃｎｅｈｏｏｙｈｎｈｉＵｉｅｓｙｏａｉｏａｈｎｓｄｃｎ，Ｓａｇａ１０ｉｏｔＴｉ２ｈｎ；２．ｏｅｅｏｕｓｇ，ＳａｇａＵｉｅｉｆＴａｉｏａＣｉｅｅＭｅｉｉｅｈｎｈｉ０２３，ＣｉａＣｌｇｆｒｉｌｎｎｈｎｈｉｎｖｒｔｏｒｄｔｎｌｈｎｓｄｃｎ，Ｓａｇａ１０ｓｙｉ２ｈｎ）
【键词】急性肾损伤；关间质纤维化；化应激氧
【中图分类号】Ｒ９．６２１
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１７ —８６２０）９０６ —５６１５（０８０．０７００
ＥｓａｌｈｅｔｏｔＭｏｅｆＲｅａｂｌｉｔｒｔｔａｔｂｉｍｎｆａＲａｓｄｌｏｎｌＴｕｕｏｎｅｓｉｉｌ
细胞浸润，质明显增宽。电镜下可见模型组 Ⅱ大鼠肾小管上皮细胞核固缩、裂现象；质中有较多的胶原纤间碎间
维，纤维细胞增多。模型组 Ⅱ大鼠血肌酐、尿素氮、４ｈ尿蛋白总量明显高于正常组 Ⅱ（＜０Ｏ）结论氧成血２Ｐ．１。化应激引起的脂质过氧化损伤参与了庆大霉素所致的肾小管上皮细胞变性坏死，者导致了慢性炎症和修复的反后复进行，终导致肾间质纤维化。最

UUO模型大鼠肾间质纤维化动态进展及α-SMA、TGF-β1和VDR表达变化

UUO模型大鼠肾间质纤维化动态进展及α-SMA、TGF-β1和VDR表达变化谢盛彬;王伟铭;陈楠【摘要】目的观察单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾小管间质纤维化动态进展,研究该病理过程中肾脏纤维化相关蛋白表达的变化.方法 32只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(n=16)和UUO模型组(模型组,n=16).两组大鼠分别于术后(模型组建模后)第2、5、9、14天分批(n=4)处死,留取手术侧(模型组梗阻侧)肾脏组织.分别采用HE和Masson染色、免疫组织化学染色及Western blotting等方法,评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、维生素D受体(VDR)及转化生长因子β1(TGF-β1)等相关蛋白的表达.结果肾脏组织形态学观察显示,随着输尿管梗阻时间的延长,肾小管间质纤维化程度逐步加重.免疫组织化学染色显示,模型组大鼠建模后各时间点肾间质α-SMA和FN 阳性面积百分比均显著高于假手术组(P＜0.05),且随着梗阻时间的延长逐渐升高,至建模后第14天时达到高峰.Western blotting分析表明,模型组大鼠建模后各时间点α-SMA和TGF-β1相对表达量均显著高于假手术组(P＜0.05),而VDR相对表达量显著低于假手术组(P＜0.05);建模后第2天,模型组大鼠肾脏组织α-SMA相对表达量已显著增加;建模后第14天,模型组α-SMA和TGF-β1相对表达量分别增高至假手术组的12.7倍和8.8倍,而VDR相对表达量下降至假手术组的3%.结论 UUO 模型大鼠建模后第14天可出现显著的肾间质纤维化;建模早期肾间质中α-SMA表达增加提示肾间质成纤维细胞的活化;VDR表达的进行性减少提示其与肾间质纤维化有关.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(030)007【总页数】7页(P752-757,796)【关键词】肾小管间质纤维化;单侧输尿管梗阻;α平滑肌肌动蛋白;维生素D受体;转化生长因子β1【作者】谢盛彬;王伟铭;陈楠【作者单位】上海交通大学,医学院瑞金医院肾脏内科,上海,200025;上海交通大学,医学院瑞金医院肾脏内科,上海,200025;上海交通大学,医学院瑞金医院肾脏内科,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R692.6肾小管间质纤维化是多种病因所致慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)进展至终末期肾病的最后共同通路。

转化生长因子β1在肾间质纤维化大鼠模型中的表达及意义

免疫组化方法观察各组大鼠肾组织的Ｔ的表达部位、表达水平及平滑肌肌动蛋白（ｍｏｔｓｌａｔ，ＧＦ０ａｓｏｈｍｕｃｃｎｅｉ
ＱＳ —ＭＡ）的表达情况；ＨＥ及Ｍａｓｎ染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组Ｔ－。 —ＭＡ的表达及ｓｏＧＦＩ、ＱＳ￣肾小管间质损伤指数明显高于假手术组（＜００）而科素亚治疗组、霉酚酸酯治疗组均明显低于模型组（Ｐ．５；Ｐ＜００）．５；科素亚治疗组与霉酚酸酯治疗组相比，各项指标差异均无统计学意义（Ｐ＞００）．５；ＴＧ一与肾小管间质Ｆ０损伤指数（一０７８＜ＯＯ）及ａＳｒ．８，Ｐ．１－ＭＡ（一０９０ｒ．４，Ｐ＜ＯＯ）呈正相关。结论．１
ｆｒｓｓａｄｔｅｅｆｃｓｏｏａｔｎｐｔｓｉｍａｌｔａｄｍｙｏｈｎｌｔｆｔｌｏｈｒｃｓｆｔｅｆｒｓｓＭｅｈｄＮｉｅｉｏｉｎｈｆｅｔｆｌｓｒａｏａｓｕｔｂｅｎｃｐｅｏａｅｍｏｅｉｎｔｅｐｏｅｓｏｈｉｏｉ．ｂｂｔｏｓｎｄｙｆｅｎｌｔｒｌｒｔｒｌｂｔｕｔｎ（ＵＯ）ａｉｌａｓａｔｒｉｅａｅｅａｓｒｃｉｕａｕｏｏＵｎｍａｄｌｗｅｅｍａｅｔｅｅｐｅｓｏｓｏｍｏｅｓｒｄ，ｈｘｒｓｉｎｆＴＧＦＢａｄＱｓｏｈｍｕｃｅａ — — 】ｎ — ｍｏｔｓｌｃｔｎｔｅｏｓｒｃｅｉｎｙｗｅｅｍｅｓｒｄｂｍｍｕｏｉｔｃｅｓｒｔｏｅｐｃｉｅｙＡｔｔｅｓｍｅｔｉｉｈｂｔｕｔｄｋｄｅｒａｕｅｙｉｎｎｈｓｏｈｍｉｔｙｍｅｈｄｒｓｅｔｌ．ｈａｉ，ｔｅｄｇｅｆｔｂ — ｖｍｅｈｅｒｅｏｕｕ

低氧在单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质纤维化中的作用初探

小管间质纤维化的程度逐渐加重，术后１０ｄ组纤维化程度约增加了１０倍。自术后４８ｈ组ＴＧＦ一１７１ｍＲＮＡ和蛋白水平均出现进行性上升，主要集中在小管上皮细胞。术后１２ｈ组，肾脏低氧的范围和程度有明显加重，免疫
ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ（ＵＵ０）ｒａｔｍｏｄｅｌａｎｄｉｔｓｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｍｅｔｈ－
点及低氧与肾间质纤维化的关系。方法
组）、单侧输尿管结扎术后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、３ｄ、５ｄ、７ｄ和１０ｄ组，每组４只。除Ｓｈａｍ组外，均结扎左侧输尿管
建立ＵＵＯ模型。各组大鼠处死前１．５ｈ腹腔麻醉后，经阴茎静脉注射低氧探针（Ｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ一１，Ｃｈｅｍｉｃｏｎ
Ｉｎ０ｍｇ／ｋｇ，然后开腹取左肾。对各组肾脏Ｍａｓｓｏｎ三色染色后，半定量分析肾小管间质纤维化程度；用ＲＴ — ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及免疫组织化学方法检测其转化生长因子（ＴＧＦ）一７１１表达，用免疫组织化学方

大鼠单侧输尿管梗阻肾间质纤维化动物模型的实验研究

ｏｅａｉｒｕ１ａｅａｄｍｏｅｇｏｐ（６ｒｔｓ．ｏｒｒｔｓｉｅｃｒｕｒｉｅｎｔｅ３ｄｌｔ，ｐｒｔｎｇｏｐ（６ｒｔｓ）ｎｄｌｒｕ１ａｅ）Ｆｕｅｎａｈｇｏｐｗｅｅｋｌｄｏｈｒ，Ｏｈｏａｌ
死时抽取其腹主动脉血测定血清肌酐、素氮水平；肾组织行ＨＥ染色，态观察肾病理学变化，尿左动
评定各组大鼠肾间质损害程度；疫组化方法测定肾间质ａＳ免 —ＭＡ，分析其与肾间质损伤指数的并
相关性。结果各组大鼠２蛋白无统计学意义（＞００）４ｈ尿Ｐ．５。各组大鼠血肌酐、素氮在第３尿天时无统计学意义（＞００）Ｐ．５。模型组血清肌酐、素氮在１尿０ｄ时高于假手术组（＜００）２Ｐ．１，０ｄ达到高峰，继之出现下降。模型组的肾间质损伤指数及ａＳ —ＭＡ的表达明显高于假手术组（＜Ｐ
验证ＵＵＯ制作ＲＩＦ动物模型的可行性。方法将３２只Ｗａｔｒ大鼠随机分为假手术组、型组，ｓｅ模
每组１６只。在术后３１、０３组各处死４只，、０２、０ｄ每处死前１ｄ测定各组大鼠２４ｈ尿蛋白定量，处
ｍｅｎｆｎｌｅａｕｅｒｌｂｔｃｏ（ａｓｉｔｒｌｒｔａｏｓｒｔｎＵＵＯ）Ｍｅｈｄ２ｗａｔｒａｅｅｅｒｎｏｙｄｖｄｄｉｔｅｓａｏｕａｅｕｉ．ｔｏｓ３ｓｔｓｒｄｍｌｉｅｏｔｈｍ— ａｒｗａｉｎｈ

ACEI类药物及MMP7在肾脏纤维化大鼠模型中的作用文献综述

ACEI类药物及MMP7在肾脏纤维化大鼠模型中的作用文献综述发表时间：2018-11-07T15:04:39.757Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第26期作者：杨舒贺康晓明杨松聂晶[导读] 探究是否ACEI类药物可作用于MMP7进而对肾纤维化进程产生影响。

佳木斯大学附属第一医院黑龙江佳木斯 154002 摘要：慢性肾病（CKD）是一个全球性问题。

全球疾病2013（GBD 2013）研究报告称，CKD是过去23年中死亡率最高的非传染性死因。

随着时间的推移，共计有15％至20％的CKD患者可能有逐渐丧失肾功能的风险，并且发展为终末期肾病（ESRD）。

肾脏纤维化是ESRD的主要病理生理基础，防治肾脏纤维化是延缓终末期肾病的重要方法。

本文就国内外对于ACEI类药物及MMP7因子的相关研究进行文献综述总结，探究是否ACEI类药物可作用于MMP7进而对肾纤维化进程产生影响。

关键词：ACEI类药物；肾功能衰竭；肾脏纤维化；MMP7 1.ACEI类药物肾素－血管紧张素－醛固酮系统（RAAS）广泛存在于局部组织，局部RAAS与组织纤维化关系密切。

ACEI类及血管紧张素受体阻滞剂（ARB类）两种药物均可产生阻断血管紧张素II的作用，但ACEI的特点是通过减少缓激肽降解，释放一氧化氮和前列腺素进而使血管舒张[1]。

1.1.ACEI类药物与纤维化有试验证实ACEI对大鼠背侧伤口的伤口愈合和瘢痕形成的影响，并且已经证明了ACEI和TGF-β1的相互作用。

ACEI类可通过经典和非经典TGF-β1途径的抑制进而调节SMAD2 / 3和TAK1的磷酸化。

当使用用TGF-β1刺激细胞时ACEI可降低小鼠成纤维细胞的增殖进而可以减少异常的伤口愈合和纤维化的发展。

2.ACEI类药物与肾脏纤维化 RAS阻滞被认为可以减慢慢性肾病（CKD）患者的肾脏进展。

无论CKD的潜在病因如何，注意力主要集中在控制血压（BP）和降低尿蛋白排泄，ACEI可引起肾脏出球小动脉的优先舒张，从而降低肾小球的滤过压力，进而发挥作用。

瘦素受体在大鼠肾小管间质纤维化模型中表达的观察

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中存在的瘦素受体结合而发挥作用。肾脏存在大量瘦素短型受体（ｂＲ）ｏ＿ａ和少量瘦素长型受体（ｂＲ）并且是少数ｏ—ｂ，
表达ｏ－的外周组织之一… 但其功能不详。ｂＲｂ１，肾小管问质纤维化是肾脏疾病进展至终末期肾功能衰竭的共同病理表现。近来研究认为，小管问质纤维化较肾
２２免疫组织化学结果：素受体在肾脏的表达见表１．瘦。瘦素受体主要在肾小管上皮细胞表现为阳性染色，肾小球及血管系统未观察到阳性染色。阳性细胞呈棕黄色，在胞
质有着色。ＵＵＯ大鼠患肾阳性细胞明显增加，且随纤维并化程度的增强表达进行性增加。ＵＵＯ各组之间差异均有
２结果
．
瘦素是肥胖基因的产物，主要由脂肪细胞分泌，是关系
到营养吸收和能量代谢的重要激素。瘦素与肾脏疾病的关
系，既往的研究集中在瘦素与肾脏疾病患者的营养上。而近来的研究提示，高瘦素血症（肥胖、２型糖尿病）肾小球是硬化和小管问质纤维化的独立危险因素。瘦素通过与组织
小球硬化与肾小球滤过率更具相关性Ｊ。本研究中，们我
２１病理结果：．假手术组各时间点肾脏病理未兜明显变
化。ＵＵＯ组术后３ｄ可见肾间质水肿，远端小管扩张，而近端小管扩张不明显，远端小管上皮细胞扁平、间质增宽，失去“ 背靠背 ” 特征，小管问质内有散在炎细胞浸润，但小球

肾纤维化模型研究进展

肾纤维化模型研究进展肾纤维化是各种形式肾脏病发展的最终共同途径，其结果是肾脏功能进行性不可逆转的损害，给人类健康带来巨大威胁。

肾纤维化类型多种多样，不同的致肾脏损害因素，均可导致肾纤维化。

因此，建立好的肾纤维化模型对于研究肾纤维化的发病机制、预防和治疗、延缓肾纤维化的措施均有十分重要的意义。

动物实验证实，肾纤维化与炎性细胞的侵润、成纤维细胞分化/增殖、细胞外基质蛋白的沉积和肾小管萎缩有关［1］。

肾纤维化的发生机制是一个非常复杂的慢性病理过程，很多细胞介质和生长因子都直接或间接参与了这一过程。

目前的研究主要集中于以下 3 个方面: 细胞生长因子的作用，主要包括促纤维化的转化生长因子β( TGF－β)、成纤维细胞生长因子( FGF) 、血管紧张素Ⅱ( Ang Ⅱ) 和起保护作用的肝细胞生长因子( HGF);肾小管上皮细胞－肌成纤维细胞转分TEMT or EMT) 过程的作用，包括表达α平滑肌肌动蛋白(α－SMA) 的肌成纤维细胞、细胞外基质成分如胶原( Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ) 、纤维连接蛋白( FN) 等; 信号转导通路的作用，包括 Smad 依赖性信号转导通路( 主要是Smad2、Smad3 和起负调节作用的Smad7) 和非TGF－β依赖的Smad 信号转导通路( 如ERK/P38MAPK) 。

1 单侧输尿管结扎(UUO)导致的肾纤维化模型大鼠UUO模型的制作方法：大鼠氯胺酮麻醉后取右侧卧位，局部剃毛，常规消毒铺孔巾，选择左侧背部肋下约0.5cm为切口，依次切开皮肤至腹膜后，游离肾脏及输尿管，将左侧输尿管用组织钳托起取中段部位，用止血钳夹住，在管两端各用丝线结扎后剪断输尿管，然后连续缝合皮肤。

UUO的特点是：进行性小管萎缩及间质纤维化。

小管和间质细胞增生，肾实质巨噬细胞、单核细胞浸润,这些改变最终导致小管间质纤维化和小管萎缩[2]，肾实质被纤维组织取代，而肾小球相对不受影响，不会产生高血压或脂代谢异常[3]。

树突状细胞在多柔比星诱导的大鼠肾纤维化模型中的作用

２１００—１ —１收１７接基金项目：省自然科学基金（号：７４３７）安徽编００１０４作者单位：安徽医科大学第一附属医院肾脏内科，肥合作者简介：汪燕，，士研究生；女硕２０２３０２
９０、聚赖氨酸（ｏ．—ｙｉｅｏｔｎＬ－００）多ＰｌＬＬｓＳｌｉ，ＺＩｙｎｕｏ９０）ＤＢ试剂盒（Ｌ－０２、Ｅ０５、ＡＺＩ３）ＡＣ试剂盒（Ｌ— ９ＺＩ
张伯科，，男教授，硕士生导师，责任作者， — ｉ：ｂｌｄＥｍａｚｋｆｆｌ
＠ｙｈｏｃｍ．ｎａｏ．ｏｃ
养１后，周定性测尿蛋白阴性后用于实验。１２药物和试剂．盐酸多柔比星购自浙江海正公
司，临用前溶解在生理盐水中，Ｈ７０尿蛋白测定ｐ．；试剂盒、马斯亮蓝蛋白测定试剂盒购自南京建成考生物工程研究所；兔抗大鼠ＨＦｃＭｔ抗体、Ｘ２Ｇ（－ｅ）０６单克隆抗体购自美国ＳｎｒｚＳａｔＣｕ；Ｐ试剂盒（ＰａＳ一
蛋白及２尿蛋白排泄率；用Ｍｓｏ色观察肾脏组织４ｈ应ａｓｎ染
但因其极易损坏而致探测和分离肾组织内ＤＣ在技
术上难度很大，到１９直９４年才找到肾组织内存在Ｄｃ的确凿证据Ｊ而目前仍缺乏Ｄ，Ｃ在慢性肾纤维化过程中作用的研究资料。本研究利用大鼠多柔比星蛋白尿慢性肾损伤模型，察肾组织内Ｄ观Ｃ数量

抗肾纤维化药物高内涵筛选模型的建立及应用

抗肾纤维化药物高内涵筛选模型的建立及应用孙雪娇;刘祎;李城;王曦廷;吴清华;张宇欣;栗世铀;李亚东;李彧【摘要】目的建立可用于高内涵分析的肾纤维化体外的细胞模型,为抗肾纤维化中药化合物的筛选和机制研究奠定基础.方法本研究通过TGF-β1诱导正常大鼠肾成纤维细胞NRK49F,以肌成纤维细胞标志α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)作为检测指标,通过高内涵成像分析系统对α-SMA荧光表达强度进行检测分析,并对细胞种板密度、诱导时间、诱导培养基中血清浓度等各种条件进行优化,建立稳定的肾纤维化体外模型.在此基础上以TGF-β1受体阻滞剂SB525334和姜黄素、大黄素对模型进行验证.并进一步探讨吡非尼酮是否具有抗肾纤维化功效.结果实验通过对细胞密度、诱导时间、培养基中血清浓度进行优化,确立了可用于高内涵分析的NRK49F 肾纤维化体外模型的建立条件.SB525334、姜黄素、大黄素和吡非尼酮均能减少TGF-β1诱导的α-SMA过表达,抑制NRK49F的活化.结论实验建立了可用于高内涵筛选技术的肾纤维化体外模型,并能相对稳定地筛选具有抗肾纤维化作用的药物.吡非尼酮在本模型中抑制了成纤维化细胞向肌成纤维细胞转化,提示其可能具有抗肾纤维化作用,为抗肾纤维化药物初筛对象的选择提供了思路.%Aim Toestablishacellularmodelofrenal fibrosis in vitro,which can be used for the high-content analysis,and lay a good foundation for the screening and mechanism study of traditional Chinese medicine compoundswithanti-fibroticeffect.Methods Inthis study,normal rat kidneyfibroblasts(NRK49F)were induced by TGF-β1 .As the maker ofmyofibroblast,al-pha smooth muscle actin (α-SMA)was detected andanalyzed by high content imaging analysis system,and the cell plate density,induction time,the concentra-tion of serum in medium wereoptimized,to establish a stable model of renal fibrosis in vitro.Then the model was validated by TGF-β1 receptor blocker SB525334, curcumin and emodin.On this basis,whether pirfeni-done had the effect of anti-renal fibrosis was explored. Results Byoptimizingthecelldensity,inductiontime and serum concentration in culture medium,the conditions of NRK49 F renal fibrosis model in vitro for high content analysis were established. SB525334, curcumin and emodin and pirfenidone reduced the ex-pression of α-SMA in NRK49 F induced by TGF-β1 . Conclusions Aninvitromodelofrenalfibrosis, which can be used for high content screening technolo-gy,is established and can be used to screen drugs withanti-renal fibrosis effects relatively stably.Pirfenidone in this model inhibits the transformation of NRK49 F in-to myofibroblasts,suggesting that it may be able to in-hibit renal fibrosis,providing a way for the selection of objects for anti-renal fibrosis drug screening.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2017(033)003【总页数】8页(P327-334)【关键词】肾纤维化;细胞模型;高内涵分析技术;NRK49F;α-SMA;中药化合物【作者】孙雪娇;刘祎;李城;王曦廷;吴清华;张宇欣;栗世铀;李亚东;李彧【作者单位】北京中医药大学基础医学院,北京 100029;北京中医药大学基础医学院,北京 100029;北京中医药大学基础医学院,北京 100029;北京中医药大学基础医学院,北京 100029;中国科学院北京基因组研究所,北京 100101;北京中医药大学中药学院,北京 100029;中国科学院北京基因组研究所,北京 100101;北京中医药大学基础医学院,北京 100029;北京中医药大学基础医学院,北京 100029【正文语种】中文【中图分类】R-332;R282.71;R363-332;R692.9;R965.1肾纤维化是各种原因引起的慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)进展至终末期肾病(end stage renal disease，ESRD)的共同病理特征，包括肾间质纤维化、肾小球硬化，以大量的细胞外基质积聚、肾脏正常的生理结构和功能破坏为特征，现代医学尚未发现行之有效的治疗方法，仅能依靠透析或者肾移植维持生命，给患者及其家属带来极大的痛苦[1]。

通心络胶囊对糖尿病肾病模型大鼠肾纤维化的干预作用

通心络胶囊对糖尿病肾病模型大鼠肾纤维化的干预作用Δ白璐＊，沈士朋，王倩，李敏，郭帅，刘茂东（河北医科大学第三医院肾内科，石家庄　050051）中图分类号 R 965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2023）13-1584-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.13.08摘要目的探讨通心络胶囊对糖尿病肾病（DN ）模型大鼠肾纤维化的干预作用及机制。

方法随机选取8只大鼠作为对照组（普通饲料），其余大鼠给予高糖高脂饲料饲养联合腹腔注射链脲佐菌素（35 mg/kg ）建立DN 模型。

造模成功的大鼠随机分为模型组（纯化水）、厄贝沙坦组（阳性对照，14.12 mg/kg ）、通心络胶囊组（0.3 g/kg ），其中模型组12只，其余2组各11只。

各组大鼠灌胃相应药物或水，每天给药1次，连续16周。

末次给药后，检测大鼠空腹血糖、24 h 尿蛋白（24 h UTP ）；观察大鼠肾皮质病理形态学变化；检测大鼠血清中纤溶酶原激活物（PA ）、纤溶酶原激活剂抑制因子 1（PAI-1）水平；检测大鼠肾皮质中转化生长因子β1（TGF-β1）、Ⅳ型胶原蛋白（COL-Ⅳ）、Wnt 4、β-连环蛋白（β-catenin ） mRNA 表达水平；观察或检测大鼠肾皮质中TGF-β1、COL-Ⅳ、黏着斑激酶（FAK ）、整合素连接激酶（ILK ）、E-钙黏蛋白（E-cadherin ）、PA 、PAI-1、Wnt 4、β-catenin 蛋白沉积或表达水平。

结果与模型组比较，通心络胶囊组大鼠24 h UTP 均显著降低（P ＜0.05）；肾皮质病理损伤及纤维化程度均减轻；血清和肾皮质中PA 表达水平均显著升高、PAI-1表达水平均显著降低（P ＜0.05）；肾皮质中TGF-β1、COL-Ⅳ蛋白沉积及相应mRNA 表达水平均显著减少或降低（P ＜0.05），ILK 、FAK 蛋白沉积均减少，E-cadherin 蛋白沉积均增多，Wnt 4、β-catenin 蛋白和mRNA 的表达水平均显著降低（P ＜0.05）。

BMP-在UUO模型大鼠肾组织的表达及意义

７表达下调可能是肾间质纤维化发生发展的机制之一】Ｒ３４３【献标识码】Ａ文【文章编号】１０－５１２０｝７０８—３０４００（０７０ — ９０６
Ｔｌｅｐｅ￣ｎｏｂｎｏｐｏｅｉｐｏｅ－ａｄｉ￣ｌｉｉｅｉｎｌｉｉｆｎａｅａｕｅｒｌｂｔｃｏａｒｏ — ｉｘｒｓｏｆｏｅｍｒｈｇｎｃｒｔｉ７ｎｔｅｎｓｌｃｌｎｒａｆｓｅｏｕｉｔｒｌｒｔａｏｓｒｔｎｒｔｄｉａＣｆｅｓｌｌｅｕｉｏ
ｄ．ＸｕｕＬａｅＭａＸｎｙ，ｔ１ＷｅｔＣｉａＨｏｉｌＳｃｕｎＵｉ，ｉＣｅｇｕ，ｉｕｎ６０４，ｈｎ施ｈａ，ｕｎＳｎ，ｉｇｉｅａ．ｓｈｎｓｔ，ｉｈａｎ￣ｒｔｐａｓｙ，ｈｎｄＳｃａ１０１Ｃ／ａｈ
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EMMPRIN在大鼠肾间质纤维化过程中的表达变化

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ麻醉后，常规消毒，行腹正中纵行切口，逐层切开皮肤至腹ｍａｔｒｉｘｍｅｔｌａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｉｎｄｕｃｅｒ，ＥＭＭＰＲＩＮ），又名ＣＤ１４７，是一种表达于多种组织的单次跨膜糖蛋白，
为假手术组（Ｓｈａｍ组）、模型组（ｕｕｏ组）。给予大鼠标准饲料、自由进水，每周记录体质量。兔抗鼠Ｅ－ｃａｄｈｅｉｆｎ多克隆抗
达，为进一步探讨ＥＭＭＰＲＩＮ在肾间质纤维化ＥＭＴ
过程 ห้องสมุดไป่ตู้的作用提供一定的实验依据。
赵阿丽，孙文娟，杜锐，孙世仁，何丽洁，黄晨（第四军医大学西京医院肾脏内科，陕西西安７１００３２）
［摘要］目的检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（ＥＭＭＰＲＩＮ）在大鼠肾间质纤维化模型中的表达变化。方法６４只
肾间质纤维化（ｒｅｎａｌｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＲＩＦ）是ｔｅｒａｌｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，ｕｕｏ）大鼠肾组织中ＥＭＭＰＲＩＮ的表各种不同病因的慢性肾脏病（ｃｈｒｏｎｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅｓ，ＣＫＤ）进展为终末期肾脏病（ｅｎｄ — ｓｔａｇｅｒｅｎａｌｄｉｓｅａｓｅ，ＥＳＲＤ）的共同病理过程。其主要病理特征包括肾小管上皮问质转分化（ｅｐｉｔｈｅｌｉａ１．ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉ — １材料和方法

金匮肾气丸对肾纤维化模型大鼠的干预作用及机制

金匮肾气丸对肾纤维化模型大鼠的干预作用及机制作者：张明昊俎兆轩张童郭申杜婧雯赵绅来源：《中国药房》2022年第15期中圖分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）15-1848-07DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.15.11摘要目的基于转化生长因子β1/Smads（TGF-β1/Smads）和TGF-β1/细胞外信号调节激酶（TGF-β1/ERK）信号通路探讨金匮肾气丸对肾纤维化模型大鼠的干预作用及机制。

方法将雄性SD大鼠灌胃腺嘌呤混悬液（250 mg/kg）以复制肾纤维化模型，造模成功后，按体质量随机分为模型组、秋水仙碱片组（阳性对照，0.45 mg/kg）和金匮肾气丸低、中、高剂量组（0.5、1、2 g/kg），每组10只;另取10只健康大鼠作为正常组。

各药物组大鼠灌胃相应药液，正常组和模型组大鼠均灌胃羧甲基纤维素钠溶液，每天1次，连续30 d。

末次给药后，检测大鼠血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平以及肾脏质量和体质量，并计算BUN/Cr比值及肾脏系数;观察大鼠肾脏组织的病理形态;检测大鼠肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、ERK1、ERK2蛋白和mRNA的表达水平。

结果与正常组比较，模型组大鼠血清中Cr、BUN水平和肾脏系数均显著升高（P关键词金匮肾气丸;肾纤维化;TGF-β1/Smads信号通路;TGF-β1/ERK信号通路;机制Intervention effects of Jinkui shenqi pills on renal fibrosis model rats and its mechanismZHANG Minghao，ZU Zhaoxuan，ZHANG Tong，GUO Shen，DU Jingwen，ZHAO Shen （School of Medicine， Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou 450046， China）ABSTRACT OBJECTIVE To investigate the intervention effect of Jinkui shenqi pills on renal fibrosis （RF）model rats and its mechanism based on transforming growth factor β1/Smads（TGF-β1/Smads） and TGF-β1/extracellular signal regulated kinase （ERK） signaling pathway. METHODS Male SD rats were given adenine suspension （250 mg/kg） to induce RF model. After modeling， they were randomly divided into model group， Colchicine tablet group （positive control， 0.45 mg/kg） and Jinkui shenqi pills low-dose， medium-dose and high-dose groups （0.5， 1， 2 g/kg）， with 10 rats in each group. Other 10 healthy rats were selected as normal group. The rats in administration groups were given the corresponding drugs intragastrically; normal group and model group were given 0.1% sodium carboxymethyl cellulose solution， once a day， for consecutive 30 d. After last medication， the serum levels of creatinine （Cr） and blood urea nitrogen （BUN）， renal weight and body weight were detected. The ratio of BUN/Cr and renal coefficient were calculated. The pathological morphology of renal tissue in rats were observed. The protein and mRNA expressions of TGF-β1， Smad2， Smad3， ERK1 and ERK2 were detected. RESULTS Compared with normal group， serum levels of Cr and BUN and renal coefficient were all increased significantly in model group （PKEYWORDS Jinkui shenqi pills; renal fibrosis; TGF-β1/Smads signaling pathway; TGF-β1/ERK signaling pathway; mechanism肾纤维化（renal fibrosis，RF）是原发或继发慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）发展至终末期肾衰竭的共同病理途径，以肾小管萎缩、肾小球硬化为主要特征[1-2]。

黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

ACTA UNIVERSITATIS TRADITIO NIS M EDICALIS SINENSIS PHARM ACO LO GIAEQ UE SHANGHAI Vol．26No．1Jan．，2012黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响李均1王冬2曹轶璇2周萍2阳小敏21．遵义医学院第五附属（珠海）医院（广东珠海519100）2．遵义医学院珠海校区（广东珠海519041）【摘要】目的：研究黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。

方法：将56只雄性SPF 级大鼠随机分为正常组（n =8）、造模组（n =48）。

造模组建立大鼠肾纤维化模型，分为模型组（n =8）、黄芪丹参药对组分1ʒ1配伍组（n =10）、黄芪丹参药对组分1ʒ2配伍组（n =10）、黄芪丹参药对组分2ʒ1配伍组（n =10）、福辛普利组（n =10）。

造模后第2天开始各组给予相应干预措施，共干预14d 。

观察大鼠肾组织病理变化，检测大鼠肾功能，并采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA ）的表达情况。

结果：黄芪丹参有效组分不同剂量配伍各组对肾纤维化大鼠肾脏组织病理变化有不同程度的缓解作用。

与正常组比较，模型组的Scr 升高，差异有统计学意义（P ＜0．05），说明造模成功。

与模型组比较，不同剂量配伍治疗组肾组织E-cadherin 表达灰度值水平均明显降低（P ＜0．05），其阳性表达增强。

而福辛普利组、组分配伍1ʒ1组肾组织α-SMA 表达灰度值均明显升高（P ＜0．05），其阳性表达降低。

结论：黄芪丹参药对有效组分1ʒ1配伍可以通过抑制肾小管上皮细胞转分化（EMT ）而延缓肾纤维化的进展，其抑制转分化作用与福辛普利相当；其余不同剂量配伍对肾小管上皮细胞转分化抑制作用效果不明显。

【关键词】肾纤维化；EMT ；黄芪；丹参；有效组分【中图分类号】R285．5【文献标志码】A【文章编号】1008-861X （2012）01-0068-05［基金项目］国家自然科学基金资助项目（30960490）；贵州省社会攻关项目（黔科合SY 字［2009］3038）；贵州省省长基金项目（黔省专合字［2010］69）［作者简介］李均，博士，主任医师、教授，主要从事中医药防治慢性肾脏病的临床研究。

活性维生素D3抑制UUO模型大鼠肾间质纤维化作用的研究及其对TGF-β1,α—SMA表达的影响

摘要：目的：探讨活性维生素Ｄ。对单侧输尿管梗阻模型（ＵＵｏ）大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用，研究该病理过程中转化生长因子Ｂ１（ＴＧＦ一６１），ａ一平滑肌肌动蛋白（ａ —ＳＭＡ）的表达变化。方法：３６只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，随机分为三组，活性维生素Ｄ。组、假手术组、模型组，每组１２只。造模后活性维生素Ｄ。组给予罗盖全（骨化三醇）灌胃（３ｎｇ／１００ｇ），假手术组及ＵＵＯ模型组给予等量生理盐水灌胃。三组大鼠于给药后第１４天，２８ｄ分批（ｎ＝６）处死，留取造模侧肾脏。用ＨＥ染色及Ｍａｓｓｏｎ染色法观察肾小管间质纤维化程度，用免疫组化法测定ＴＧＦ —ｐ１，ａ —ＳＭＡ在各组大鼠造模侧肾脏的表达情况。结果：免疫组织
假手术组肾脏间质中有极少量ＴＧＦ— １及ａ —ＳＭＡ表达，模型组ＴＧＦ —ｐ１及ａ —ｓＭＡ表达明显增多，ＴＧＦ—ｐ１主要表达在肾间质细胞胞浆中，ｎ —ＳＭＡ主要表达在肾小管周围，活性维生素Ｄ３治疗组ＴＧＦ —Ｂ１及ａ —ＳＭＡ表达量较模型组明显减少如图１所示。
表１ＴＧＦ一口１及ａ —ＳＭＡ在大鼠肾脏间质阳性表达百分比结果（，士，ｎ：６）