抑菌活性实验设计方案

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抗菌肽抑菌活性测定方法的研究

抗菌肽抑菌活性测定方法的研究
释 至 1 × 10 cfu/mL , 取 100 μL 接 种 于 TTC 营 养 琼
6
2 2.1
结果与分析
TTC 浓 度 对 测 定 菌 生 长 的 影 响
氯化三苯
脂 平 板 ,另 取 一 普 通 营 养 琼 脂 平 板 作 为 空 白 对 照 。 按 照 GB/T 4789.2-2003 的 方 法 测 定 菌 落 总 数 。 实 验 均 重 复 3 次 ,取 平 均 结 果 ,以 下 同 。
表1
2.2
K-B 琼 脂 扩 散 法 药 敏 结 果
K-B 法 测 定 抗
菌肽对 3 种标准菌株都显示出抑菌活性, 对绿脓 杆 菌 的 活 性 尤 为 明 显 ,抑 菌 圈 清 晰 可 见 ,但 对 大 肠 杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌不明显,虽肉眼 可 看
TTC 浓 度 ( mg/mL )
不 同 TTC 浓 度 的 营 养 琼 脂 平 板 菌 落 数
于 聚 苯 乙 烯 U 型 微 量 板 每 孔 加 入 100 μL 。 将 以
80℃ 后倒平板备用 , 厚度约 4 mm 。 3 ) 标准菌株 。 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus
MH 培 养 基 培 养 的 处 于 对 数 生 长 期 的 3 种 标 准 菌
分 别 用 无 菌 生 理 盐 水 稀 释 至 0.5 麦 氏 标 准 浓 度 单 位 (1.5 × 108cfu/mL) , 将 这 种 菌 液 再 稀 释 10 倍 , 使 终 浓 度 达 到 107cfu/mL 后 , 作 为 接 种 菌 液 。 在 U 型 微 量 板 上 , 每 孔 加 入 5 μL 菌 液 , 最 终 接 菌 量 为

抑菌活性实验方案

抑菌活性实验方案

八宝景天抑菌活性实验方案

1 材料与仪器

1.1 材料

八宝景天(茎、叶、花),采摘于吉林农业大学校园,去离子水洗净,阴干,经粉碎机粉碎(过40~60 目筛),所得植物粉用密封袋于遮光处保存备用。

1.2 微生物

真菌:黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum nigrum)由吉林省蔬菜花卉科学研究院提供。番茄叶霉病菌( Fulvia fulva )、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜茎腐病菌(Fusarium gramimearum)、水稻立枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜菌核病菌(Sclerotinia sclerrotium) 均由吉林农业大学农学院植物病理研究室提供。

1.3 试剂与仪器

95%乙醇分析纯国药集团化学试剂有限公司

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琼脂粉生化试剂天津科密欧化学试剂有限公司

马铃薯

JFSD-100粉碎机上海淀久中药机械制造有限公司

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新型抗菌药物的研发及临床试验研究

新型抗菌药物的研发及临床试验研究

新型抗菌药物的研发及临床试验研究

研究方案:新型抗菌药物的研发及临床试验研究

引言:

随着抗生素的广泛应用,耐药菌株的出现导致了严重的医疗难题。开发新型抗菌药物成为医药学领域的一个重要研究方向。本研究旨在研发新型抗菌药物,并通过临床试验评估其疗效和安全性,为解决抗菌药物耐药问题提供有价值的参考。

一、研究方法

1.1 药物筛选

我们将对已有的药物进行筛选,主要通过文献调研和实验数据分析,评估它们对耐药菌株的敏感性。根据筛选结果,选择具有潜在抗菌活性的药物作为后续研究的对象。

1.2 药物改造

在确认有潜在抗菌活性的药物基础上,我们将进行药物改造。通过结构优化、合成新化合物或引入其他结构基团,改良原有药物的抗菌性能。采用计算机辅助设计和化学合成的方法,合成一系列新型抗菌化合物。

1.3 体外活性评估

将合成的新型抗菌化合物进行体外活性评估,包括最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和抑菌环直径分析。

1.4 动物模型实验

选择适当的小动物模型(如小鼠或豚鼠),在体内评估新型抗菌化合物的抗菌活性和安全性。根据药物浓度-时间曲线(PK/PD)和治疗剂量,确定合适的给药方案。

二、实验设计

2.1 实验组和对照组

将小鼠分为实验组和对照组。实验组接受新型抗菌化合物给药,对照

组接受常规抗菌药物给药或者安慰剂。

2.2 给药方案

根据体外活性评估结果和PK/PD曲线,确定新型抗菌化合物的最佳给药方案。给药途径可以选择静脉、口服或局部给药。

2.3 观察指标

观察指标主要包括小鼠的生存率、细菌负荷(CFU/g)和炎症因子(如TNF-α、IL-6等)的水平。并进行相应的组织病理学分析。

常用抗菌药物的抑杀菌活性检测与评价PPT精品课件

常用抗菌药物的抑杀菌活性检测与评价PPT精品课件

广谱抗生素对多种病原菌有抗生作用,例 如青霉素对多种革兰氏阳性细菌都有良好药效, 链霉素对多种革兰氏阳性和阴性细菌都有良好 药效,对结核杆菌有特殊的疗效。
10/11/2018
Tankertanker Design
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实验原理
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——抗生素的特点
平板 1 2
菌落数 164 262 214
菌落总数(cfu/mL) —— —— 2.14×10^7
x
10/11/2018
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2.滤纸法测抑菌效果实验分析
2.1各种药品对大肠杆菌的抑菌圈结果示意图
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链霉素
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实验菌种:大肠杆菌(G-),白色葡萄球菌(G+)
滤纸片200个(直径6mm) ,牛津杯(100个),培养皿(60 个),试管及试管塞(20套),移液枪和移液管,离心 管,涂布棒,酒精灯,镊子,pH试纸,接种环
10/11/2018
Tankertanker Design
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10/11/2018
Tankertanker Design
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实验原理 ——检测化学抑杀菌剂的作用活性的方法

植物精油抑菌活性研究进展

植物精油抑菌活性研究进展

植物精油抑菌活性研究进展

1. 引言

1.1 植物精油抑菌活性研究进展概述

植物精油是一种天然植物提取物,具有广泛的生物活性,包括抗菌、抗病毒、抗真菌等功效。随着人们对天然健康产品需求的增加,

植物精油的应用也逐渐受到关注。植物精油的抑菌活性是其最重要的

功能之一,相关研究也逐渐得到加强。

植物精油的抑菌活性研究进展主要集中在以下几个方面:研究人

员通过不同的方法对植物精油的抑菌活性进行评估,包括传统的筛选

方法和现代的高通量筛选技术。影响植物精油抑菌活性的因素也成为

研究的重点,如植物种类、提取方法、化学成分等。一些新颖的研究

方法也逐渐被引入到植物精油抑菌活性研究中,如纳米技术、复合材

料等。植物精油的抑菌活性不仅在医药领域有广泛的应用,还在农业、食品工业等领域发挥着重要作用。

在未来,植物精油抑菌活性研究将继续受到重视,其意义和价值

也将得到更多的认可。通过深入研究植物精油的抑菌机制,可以为开

发新型抗菌药物提供重要参考,对于解决抗生素耐药性等问题具有重

要意义。植物精油抑菌活性研究也将进一步拓展其在农业、食品安全

等领域的应用,为人类健康和生活品质的提高作出更大贡献。

2. 正文

2.1 植物精油抑菌活性的研究方法

1. 筛选试验:首先从大量的植物精油中筛选出对目标菌株具有明显抑菌活性的精油样品。这一步通常通过对不同浓度的精油进行筛选实验,评估其对目标菌株的最小抑菌浓度。

2. 确定抑菌谱:确定植物精油对不同种类的细菌、真菌等微生物的抑菌谱。这可以通过在不同培养基上进行抑菌实验,观察不同菌株在不同条件下对植物精油的敏感性。

地衣芽孢杆菌的计算实验报告

地衣芽孢杆菌的计算实验报告

地衣芽孢杆菌的计算实验报告

地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)是一种广泛存在于自然环境中的细菌,它具有多种生理特性和广泛的应用价值。为了深入了解地衣芽孢杆菌的特性和应用潜力,我们进行了一系列的计算实验。本报告将详细介绍我们的实验设计、方法、结果和讨论。

一、实验设计

我们的实验目标是研究地衣芽孢杆菌的生理特性和应用潜力。为了达到这个目标,我们设计了以下几个实验内容:

1.生长曲线实验:通过测量地衣芽孢杆菌在不同培养时间下的菌落数量,绘制生长曲线,以了解其生长速度和最适生长条件。

2.产酶实验:地衣芽孢杆菌具有多种产酶能力,我们将通过测定其产酶的能力和活性,探究其在生物降解、发酵和制药等方面的应用潜力。

3.抗菌活性实验:地衣芽孢杆菌被广泛应用于抗菌剂的生产,我们将评估其产生的抗菌物质对不同病原菌的抑制效果,为其在医药领域的应用提供参考。

二、实验方法

1.生长曲线实验:我们在不同培养基中培养地衣芽孢杆菌,并每隔一段时间测量菌落数量。通过绘制菌落数量与培养时间的关系曲线,得到生长曲线。

2.产酶实验:我们选取几种常见的酶,如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶,将地衣芽孢杆菌接种到含有特定底物的培养基中,培养一段时间后,通过测定底物的降解程度和酶的活性,评估其产酶能力。

3.抗菌活性实验:我们选取几种常见的病原菌,如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,将地衣芽孢杆菌培养产生的抗菌物质与这些病原菌接触,观察并比较其抑菌效果。

三、实验结果

1.生长曲线实验结果显示,地衣芽孢杆菌在适宜温度和培养基条件下,呈现出典型的生长曲线,包括潜伏期、对数增长期和平台期。最适生长温度为30℃,最适培养基为LB培养基。

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义

1.实验目的及意义:

通过观察抑菌圈实验,使学生了解细菌的生长与分裂以及抑菌圈的形成原理;同时,通过抑菌圈的直接表示,以简明易懂的形式表达药物的抗菌性能,提高学生的实验动手能力和实验数据的分析能力。

2.实验要求及适用范围:

本实验适用于中学生物课程的实验教学,要求学生依据教师提供的实验步骤和实验资料,自行设计实验方案,并进行实验操作。同时,鼓励学生进行实验数据的分析和实验结果的讨论。

3.实验步骤:

(1) 准备无菌培养基和细菌样品。

(2) 在无菌平板上,将细菌悬液接种于其上。

(3) 将教师提供的不同浓度的抗生素药片分别放在不同区域的平板上。

(4) 然后在恒温培养箱中进行培养,观测药片周围的细菌生长情况,以判断患者的感染情况。

(5) 结束实验后,观察每个药片周围的抑菌圈,计算药物的最小抑菌浓度,分析药物的抗菌性能。

4.实验结果分析及讨论:

(1) 抗菌药物的抑菌效果会随着药物的浓度或种类不同而产生变化,教师可将不同浓度的抗生素药片和不同种类的药物提供给学生进行实验,以便学生比较不同药物的抗菌效果。

(2) 抑菌圈的大小与药物的抗菌效果成正比,药效越强,则抑菌圈的直径越大。

(3) 抑菌圈的形成是由于药物的杀菌成分能够有效抑制菌落的扩散,因此,抑菌圈的直径越大,则表明药物的抑菌能力更强。

(4) 通过实验观察,学生可以了解细菌在平板上生长的情况,以及药物的抗菌性能;同时,通过实验数据的统计和分析,学生可以进一步掌握实验结果的科学分析方法。

5.实验教学的改进方案:

(1) 采用多样化的实验教学方法,例如,采用视频、图像等多媒体方式,使学生更加直观地了解实验流程和结果。

抑菌实验程序

抑菌实验程序

抑菌实验程序

2 抑菌实验基本程序,先确定抑菌性,后确定最小抑菌浓度(活性)

2(1 抑菌性实验:在灭菌平皿中加入牛肉汤培养基后,中间划一线,两侧点接药物和细菌,35?孵育16~20h,看菌与药物接触处菌落是否变形,若变形即为有抑菌性,可进行下面的实验 2(2 最小抑菌活性确定:

思路:菌种准备—抗菌培养基(不同梯度剂量)—温育—观察生长情况—确定最小浓度方法:

2(2(1 菌种准备:准备10支试管,排成1排,内置去离子水配成的生理盐水(0.8%), 除第1管加入10 ml外,其余每管加入肉汤9ml,在第1管加入活化的菌1-2环,混匀振荡后,吸取1ml至第2管,混匀后再吸取1ml至第3管,如此连续倍比稀释至第10管,并从第10管中吸取1ml弃去,(使用时可通过预实验数菌落数,也可以直接选用其中的第7,8管)即为浓度为104 CFU,一般可直接用于接种测试。

2(2(2 培养基制备:牛肉浸膏琼脂培养基,以1NNaOH或HCl调pH7.2~7.4,灭菌后备用

2(2(3 梯度药物浓度培养基制备:准备十支灭菌水的试管,排成一排,除第1管加入1.6ml无菌水外,其余每管加入肉汤1ml,在第1管加入抗菌药物原液

0.4ml混匀,然后吸取1ml至第2管,混匀后再吸取1ml至第3管,如此连续倍比稀释至第9管,并从第9管中吸取1ml弃去,第10管为不含药物的生长对照。

根据实验设计,将已倍比稀释的不同浓度的抗菌药物分别加入已加热溶解,并在45~50?水浴中平衡的MH琼脂中,充分混匀倾倒灭菌平皿,琼脂厚度3~4mm。通常按1?9比例配制药物琼脂平板,根据需要来选择药物浓度范围。

植物多酚抑菌活性、作用机理及应用研究进展

植物多酚抑菌活性、作用机理及应用研究进展

五、未来研究方向
尽管银系纳米抗菌材料展现出了优异的抗菌性能,但在实际应用中仍存在一 些挑战。未来研究方向应包括:(1)优化制备工艺,降低成本,提高产率;(2) 深入研究银系纳米材料与细菌的作用机制;(3)针对不同领域的应用需求,设 计具有特定功能的银系纳米抗菌材料;(4)研究长期使用银系纳米抗菌材料的 安全性和体内分布情况等。
摘要
the inhibition zone experiment, minimum inhibitory concentration determination and cell toxicity test. Finally, the results are analyzed and summarized, and future research directions are proposed.
二、天然植物精油的作用机理
3、干扰细胞壁合成:部分天然植物精油中的化合物可以干扰微生物细胞壁的 合成,导致细胞壁缺陷,进而使微生物失去抵抗力。
二、天然植物精油的作用机理
4、诱导产生ROS:一些天然植物精油中的化合物可以诱导微生物产生过氧化 氢等活性氧,导致微生物细胞损伤。
二、天然植物精油的作用机理
内容摘要
植物多酚,一类具有多种生物活性的天然化合物,从水果、蔬菜、谷物到草 药,几乎无处不在。它们以结构多样性和功能多样性而著名,吸引了无数科学家 进行深入研究。本次演示主要探讨植物多酚的结构特征和生物学活性。

抑菌活性实验方案

抑菌活性实验方案

八宝景天抑菌活性实验方案

1 材料与仪器

1.1 材料

八宝景天(茎、叶、花),采摘于吉林农业大学校园,去离子水洗净,阴干,经粉碎机粉碎(过40~60 目筛),所得植物粉用密封袋于遮光处保存备用。

1.2 微生物

真菌:黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum nigrum)由吉林省蔬菜花卉科学研究院提供。番茄叶霉病菌( Fulvia fulva )、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜茎腐病菌(Fusarium gramimearum)、水稻立枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜菌核病菌(Sclerotinia sclerrotium) 均由吉林农业大学农学院植物病理研究室提供。

1.3 试剂与仪器

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马铃薯

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微生物试验 抑菌效果预测

微生物试验 抑菌效果预测
4、链霉素对枯草芽孢杆菌的抑制作用随着药剂浓度的增加而缓慢增加。在浓度 为100 ug/mL至500 ug/mL时,出现为平稳期,但过短。而后随着药剂浓度的 增加,抑制作用又加强。
5、链霉素对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制曲线未出现平稳期或平稳期过短, 故不选用该药物进行下一步实验。
红药水浓度梯度配置
分析结果
从丙酸对细菌的直径-药剂浓度对数曲线中可以看出: 1、丙酸对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌均有明显的杀菌作用,50%的丙酸甚至 出现了49mm的抑菌圈; 2、相同浓度的丙酸对枯草芽孢杆菌的杀菌作用大于对大肠杆菌的杀菌作用; 3、丙酸对大肠杆菌的杀菌作用随着药剂浓度的增加而缓慢增加。在浓度为 2%至10%时丙酸对大肠杆菌的杀菌作用为平稳期。而后随着药剂浓度的增 加,杀菌作用又加强。 4、丙酸对枯草芽孢杆菌的抑制作用随着药剂浓度的增加而缓慢增加。 5、丙酸的杀菌作用虽然在50%出现了49mm的抑菌圈,但在所选浓度范围 内未出现平稳期或平稳期过窄,因此不选用此药物进行下一步实验。
本实验通过自主设计,研究一 些常用抗生素、消毒剂的抑杀菌 效果
掌握检测化学抑杀菌剂作用 效果的方法
了解一些常用化学抑杀菌剂的 作用机理以及效果差异。
通过实验操作,进一步巩固已 学习的微生物实验技能,学以致 用。
待测菌种:大肠杆菌(G-),枯草芽孢杆菌 (G+)
药剂:抗生素类药物——氨苄青霉素、链霉素 (50μg/μL) 消毒剂和防腐剂——红药水、丙酸

金银花绿原酸提取物的抑菌作用研究

金银花绿原酸提取物的抑菌作用研究

金银花绿原酸提取物的抑菌作用研究

【摘要】

本研究旨在探究金银花绿原酸提取物在抑菌作用中的机制。通过

对金银花绿原酸的来源、抑菌机制研究、抑菌实验设计、抑菌结果分

析以及抑菌作用影响因素的详细分析,揭示了金银花绿原酸作为抗菌

剂的潜力。研究发现,金银花绿原酸通过影响菌体膜结构和代谢活性,展现出显著的抑菌效果。未来,金银花绿原酸在抗菌领域有望发挥更

广泛的应用,如医药、食品保鲜等领域。研究中仍存在一些不足之处,需要进一步深入研究和完善,以发挥金银花绿原酸在抗菌领域的最大

潜力。

【关键词】

金银花、绿原酸、提取物、抑菌作用、研究、来源、机制、实验

设计、结果分析、影响因素、应用前景、不足与展望、抗菌领域。

1. 引言

1.1 背景介绍

金银花,又名忍冬,为忍冬科一种常见的中草药,具有清热解毒、利尿通淋等功效。金银花中含有一种重要的活性成分——绿原酸,具

有抗菌、抗病毒、抗氧化等多种生物活性。绿原酸是一种强效的自由

基清除剂,能有效清除人体内的自由基,具有抗衰老、抗肿瘤等功

效。

本研究旨在探讨金银花绿原酸提取物的抑菌作用机制,为其在抗

菌领域的应用提供理论依据。通过对金银花绿原酸抑菌作用的实验设

计和结果分析,揭示其在抑菌过程中的影响因素,为今后的研究提供

参考。希望通过本研究,可以更深入地了解金银花绿原酸的抑菌作用

及其应用前景,为人类健康和生命安全做出贡献。

1.2 研究目的

研究目的是探究金银花绿原酸提取物对细菌和真菌的抑菌作用机制,为其在抗菌领域的应用提供科学依据。通过了解金银花绿原酸的

来源、抑菌机制、实验设计以及结果分析,可以深入研究其抑菌作用

微生物综合设计性实验论文——不同抗生素对细菌抑制作用的研究

微生物综合设计性实验论文——不同抗生素对细菌抑制作用的研究
刘春艳*
(中央民族大学 北京市海淀区 10wenku.baidu.com081)
摘要: 目的 比较研究链霉素、卡那霉素对大肠杆菌和白色葡萄球菌的不同抑菌效果,确定抗生素的最低
抑菌浓度(MIC)。方法 利用滤纸片法进行两种抗生素对大肠杆菌和白色葡萄球菌抑菌效果的测定,通过 对照实验比较相同浓度下两种抗生素的不同抑菌效果,运用空白对照通过设定抗生素的不同浓度进行试验, 以抑菌圈的大小来指示抑菌效果,通过平行对照实验统计抑菌圈直径寻找抗生素对两种菌种的最低抑菌浓 度(MIC)。结果 链霉素对大肠杆菌和白色葡萄球菌的 MIC 为 5µg/mL 和 8µg/mL;卡那霉素对大肠杆菌和 白色葡萄球菌的 MIC 为 15µg/mL 和 25µg/mL。结论 两种抗生素对两种细菌都有抑制作用,并且随着其浓 度的降低而减弱。通过比较 MIC 值可知,不论是对大肠杆菌还是对白色葡萄球菌,卡那霉素的 MIC 值都 大于链霉素,由此可知链霉素的抑菌效力大于卡那霉素。
关键词: 抗生素;最低抑菌浓度(MIC);抑菌效力
Study on the Antibacterial Effect
of different antibiotics to Common Bactria
Liu Chunyan*, Liu Qingfeng, Jian Zhengxin, WanYekai
中央民族大学生命与环境科学学院 微生物综合设计性实验报告

(推荐)抑菌活性实验方案

(推荐)抑菌活性实验方案

八宝景天抑菌活性实验方案

1 材料与仪器

1.1 材料

八宝景天(茎、叶、花),采摘于吉林农业大学校园,去离子水洗净,阴干,经粉碎机粉碎(过40~60 目筛),所得植物粉用密封袋于遮光处保存备用。

1.2 微生物

真菌:黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum nigrum)由吉林省蔬菜花卉科学研究院提供。番茄叶霉病菌( Fulvia fulva )、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜茎腐病菌(Fusarium gramimearum)、水稻立枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜菌核病菌(Sclerotinia sclerrotium) 均由吉林农业大学农学院植物病理研究室提供。

1.3 试剂与仪器

95%乙醇分析纯国药集团化学试剂有限公司

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琼脂粉生化试剂天津科密欧化学试剂有限公司

马铃薯

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抗生素抑菌实验实验报告

抗生素抑菌实验实验报告

抗生素抑菌实验实验报告

抗生素抑菌实验实验报告

一、引言

抗生素是一类能够抑制或杀死细菌的药物,对于治疗细菌感染起着至关重要的

作用。然而,近年来,抗生素耐药性的问题日益严重,给人类健康带来了巨大

的挑战。本实验旨在通过抗生素抑菌实验,研究不同抗生素对细菌生长的抑制

作用,进一步了解抗生素的作用机制,为合理使用抗生素提供实验依据。

二、实验材料与方法

1. 实验材料:

- 大肠杆菌培养基

- 水平培养皿

- 纯化的不同抗生素溶液(包括青霉素、头孢菌素和红霉素)

- 细菌培养液

2. 实验方法:

- 准备细菌培养液:将大肠杆菌接种于含有营养物质的培养基中,培养24小时。- 制备抗生素溶液:将各种抗生素溶解于适量的溶剂中,制成不同浓度的溶液。- 进行抗生素抑菌实验:将细菌培养液均匀涂布于水平培养皿中,然后在不同

区域加入不同浓度的抗生素溶液。培养24小时后,观察抗生素对细菌生长的抑制情况。

三、实验结果

在本实验中,我们选择了青霉素、头孢菌素和红霉素作为抗生素,分别制备了

不同浓度的溶液。实验结果显示,随着抗生素浓度的增加,对细菌的抑制作用

也逐渐增强。在低浓度下,细菌的生长并未受到明显的抑制,但随着抗生素浓

度的增加,细菌的生长逐渐减缓甚至停止。在高浓度下,细菌的生长完全被抑制,培养皿上观察不到任何细菌生长。

四、讨论与分析

通过本实验,我们可以看出抗生素对细菌的抑制作用与其浓度呈正相关关系。

这是因为抗生素能够干扰细菌的生长和繁殖过程,从而达到抑制细菌的效果。

当抗生素浓度较低时,其作用不足以抵消细菌的生长速度,因此细菌仍能够继

复方紫草油体外抑菌实验研究

复方紫草油体外抑菌实验研究

复方紫草油体外抑菌实验研究

【摘要】

本研究旨在探讨复方紫草油在体外抑菌方面的效果。首先介绍了研究背景,探讨了复方紫草油的价值和应用前景。随后详细描述了实验方法,包括实验材料和操作步骤。结果分析部分展示了复方紫草油对不同细菌的抑制效果,通过对比实验数据得出结论。讨论部分对实验结果进行深入分析,并探讨复方紫草油的抑菌机制。根据实验结果和讨论内容得出实验结论,总结复方紫草油体外抑菌实验研究的重要发现。本研究为复方紫草油的应用提供了科学依据,为相关领域的研究和应用提供了参考依据。

【关键词】

复方紫草油、体外抑菌、实验研究、研究背景、实验方法、结果分析、讨论、实验结论、总结

1. 引言

1.1 复方紫草油体外抑菌实验研究

复方紫草油是一种常用的中药材,具有抗菌、抗病毒、抗炎等多种药效。本次研究旨在通过体外抑菌实验,探讨复方紫草油对不同细菌菌株的抑菌效果。

复方紫草油可以通过抑制细菌的生长和繁殖来达到抑菌的效果。实验采用了多种不同的细菌菌株,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、

枯草芽孢杆菌等。通过对这些不同菌株的抑菌实验,可以全面评估复

方紫草油的抗菌功效。

本次研究将采用标准的实验方法,包括制备复方紫草油溶液、接

种细菌、培养培养基上等步骤。通过测量细菌的生长曲线和最小抑菌

浓度等指标,评估复方紫草油的抗菌效果。

通过本次研究,我们可以更深入地了解复方紫草油的抗菌机制,

为其在临床应用中提供科学依据。希望本研究能够为复方紫草油的药

用开发和应用提供参考,为临床治疗提供更多选择。

2. 正文

2.1 研究背景

在体外实验中,复方紫草油已被证实能够对多种细菌和真菌具有

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八宝景天抑菌活性实验方案

1 材料与仪器

1.1 材料

八宝景天(茎、叶、花),采摘于吉林农业大学校园,去离子水洗净,阴干,经粉碎机粉碎(过40~60 目筛),所得植物粉用密封袋于遮光处保存备用。

1.2 微生物

真菌:黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum nigrum)由吉林省蔬菜花卉科学研究院提供。番茄叶霉病菌( Fulvia fulva )、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜茎腐病菌(Fusarium gramimearum)、水稻立枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜菌核病菌(Sclerotinia sclerrotium) 均由吉林农业大学农学院植物病理研究室提供。

1.3 试剂与仪器

95%乙醇分析纯国药集团化学试剂有限公司

葡萄糖分析纯国药集团化学试剂有限公司

琼脂粉生化试剂天津科密欧化学试剂有限公司

马铃薯

JFSD-100粉碎机上海淀久中药机械制造有限公司

JJ200型精密电子天平美国双杰兄弟有限公司常熟双杰测试仪器厂HH-S数显恒温水浴锅江苏省金坛市医疗仪器厂

RE-2000旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂

SHZ-III型循环水真空泵上海亚荣生化仪器厂

TDL-5A低速大容量离心机上海悦丰仪器仪表有限公司

生化培养箱SPX-250型上海跃进医疗器械厂

ZKF035电热真空干燥箱上海实验仪器厂有限公司

KQ5200B型超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司

不锈钢手提式灭菌器上海申安医疗器械厂

超净工作台上海生物科技有限公司

1.4 培养基的制备

真菌都用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)

马铃薯(去皮) 200g 葡萄糖20g琼脂20g水1000mL pH值自然

培养基具体制作方法是:将200g马铃薯去皮,去芽眼,切成小条放入铝锅中,加入1000mL水,煮沸20~30分钟左右至马铃薯软而不烂时,用6~8层纱布过滤,取滤汁于锅中,补水至1000mL,加入琼脂熔化,再加入糖搅拌均匀,趁热分装于试管或锥形瓶中。分装后121℃灭菌20min。

2 试验方法

2.1植物提取液的制备

准确称取100 g的样品,于250 ml锥形瓶中,加入200 ml 95%的乙醇,室温下,超声提取45 min,连续提取3次,过滤粗提物,离心(3500 r/min,20 min),过滤除杂,滤液用旋转蒸发仪浓缩至干,4 ℃冰箱中保存备用。

2.2八宝景天(茎、叶、花)提取物抑菌活性的测定

抑菌试验样品的准备:称取一定量的提取物,用20%(体积分数)乙醇将植物提取物配制成质量浓度为10 g/ml的供试药液做抑菌试验用。

菌的活化培养:供试真菌从4 ℃冰箱取出,接种于具有马铃薯葡萄糖琼脂培养基的培养皿中,于28℃下活化培养,待菌丝长满整个培养皿的80%时备用。

菌悬液的制备:取一定量已活化的供试菌于装有50mL的液体PDA培养基的锥形瓶中,制成菌悬液于28℃下培养48h,用无菌的移液管取1.0mL培养好的菌悬液于试管中,加入9.0mL的无菌水依次梯度稀释,每稀释一个试管,浓度降低10-1,用稀释培养基测数法测菌体个数,调至浓度为6.8×106CFU/mL(指每毫升样品中含有的细菌群落总数)。

八宝景天(茎、叶、花)提取物抑菌活性的测定采用菌丝生长速率法、稀释培养基测数法。

2.2.1菌丝生长速率法

又称抑菌圈法或琼脂平板法。生长速率是指将不同浓度的药液与融化的培养基混合,制成带毒培养基平面,在平面上接种病原菌,以病菌生长速度的快慢来

判断药剂毒力大小的方法,以一定的时间内菌落直径的大小来表示。

菌丝生长速率法试验步骤:1)制备带毒培养基平面准确的吸取一定量的上述植物提取物加入到已融化的培养基中,混合均匀倒入已灭菌的培养皿内,冷却后即成带毒的培养基平面2)接种病原菌用无菌打空器将已活化的菌制成直径为6mm的菌饼,用无菌镊子将菌饼接入平板中央,每培养皿放置1 个菌饼,置于25 ℃~28 ℃的电热恒温培养箱黑暗培养。3)结果采用十字交叉法测定菌落直径,按以下公式计算抑制率:

抑制率=[(CK菌落直径-0.6)-(处理菌落直径-0.6)]/(CK菌落直径-0.6)×100% 2.2.2稀释培养基测数法

根据微生物在高度稀释条件下,固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的技术方法,即一个菌落代表一个单细胞。

稀释培养基测数法试验步骤如下:1)稀释培养基测数法(最大或然数计数法Most probable number,MPN)测定每毫升原培养液含活菌数,根据MPN所得结果将原培养液稀释成约100CFU/mL;2)吸取20μL菌悬液于含提取物的固体培养基的平板中,用涂菌棒涂布均匀静置15 min,将培养基平板倒置(防止皿盖冷凝水下滴)于28℃生化培养箱培养24 h;3)数菌落数,对照组菌落数记为C0,涂布提取物平板菌落数记为C,按下式计算抑制率:

萌发率=萌发率= 孢子萌发数/ 检查孢子总数=C/C0×100%

抑制率(%)=(对照萌发率- 处理萌发率)/ 对照萌发率=(C0-C)/C0×100%

以上每种试验方法重复三次。

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