动物肝脏中提取DNA
动物肝脏dna的提取实验报告
动物肝脏dna的提取实验报告动物肝脏DNA的提取实验报告摘要：DNA提取是生物学研究中的一项基本实验技术，本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，探究DNA提取的原理和方法。
实验结果表明，通过适当的操作步骤和试剂，可以成功地从动物肝脏中提取到高质量的DNA。
引言：DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它为我们了解生物的遗传信息提供了基础。
而动物肝脏作为一个重要的代谢器官，其中的DNA含量丰富，因此成为DNA提取的理想来源之一。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，探究DNA提取的原理和方法。
材料与方法：1. 实验材料：动物肝脏样本、细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、异丙醇、氯仿、等温酒精、TE缓冲液等。
2. 实验步骤：a. 取一定量的动物肝脏样本，用细胞裂解缓冲液将其均匀悬浮。
b. 加入适量的蛋白酶K，使其在适宜的温度和时间下进行消化。
c. 加入异丙醇和氯仿，进行DNA的沉淀和分离。
d. 用等温酒精洗涤DNA，去除杂质。
e. 用TE缓冲液溶解DNA，获得高质量的DNA溶液。
结果与讨论：通过实验操作，我们成功地从动物肝脏中提取到了DNA。
观察DNA溶液的外观，呈现出透明且黏稠的特点，符合DNA的理化性质。
进一步通过紫外光谱检测，发现DNA溶液在260nm处有明显的吸收峰，而在280nm处几乎没有吸收，表明DNA溶液中没有蛋白质的污染。
此外，通过琼脂糖凝胶电泳分析，我们可以看到明显的DNA条带，进一步证明了提取到的DNA的完整性和纯度。
DNA提取的关键步骤是细胞裂解和DNA分离。
细胞裂解缓冲液中的离子和蛋白酶K的作用可以破坏细胞膜和核膜，使DNA释放到溶液中。
异丙醇和氯仿的加入可以通过沉淀和分离的方式将DNA从溶液中提取出来。
等温酒精的洗涤可以去除DNA溶液中的杂质，如蛋白质和盐类。
最后，用TE缓冲液溶解DNA，可以得到高质量的DNA溶液。
结论：本实验通过提取动物肝脏中的DNA，探究了DNA提取的原理和方法。
动物肝dna提取实验报告
动物肝dna提取实验报告动物肝DNA提取实验报告引言：DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内的遗传物质，对于研究生物进化、基因表达和遗传变异等方面具有重要意义。
DNA提取是分子生物学研究中的基础实验之一，它可以用于进一步的PCR扩增、测序以及其他分子生物学实验。
本实验旨在通过提取动物肝脏中的DNA，了解DNA提取的基本原理和方法。
材料与方法：1. 实验材料：- 动物肝脏样本（例如小鼠、大鼠、猪等）- 细胞裂解缓冲液（含有蛋白酶K）- 乙酸酚/氯仿提取液- 乙醇- TE缓冲液（含有Tris-HCl和EDTA）2. 实验仪器：- 离心机- 恒温水浴- 紫外可见分光光度计- 电泳仪实验步骤：1. 取动物肝脏样本，将其置于细胞裂解缓冲液中，用块状器械将其均匀研磨。
2. 将研磨后的样本转移到离心管中，离心10分钟，以去除细胞碎片和蛋白质。
3. 将上清液转移到新的离心管中，加入等体积的乙酸酚/氯仿提取液，轻轻摇匀，离心10分钟。
4. 分离上清液和有机相，将上清液转移至新的离心管中，加入等体积的冷乙醇，缓慢倾倒，使DNA沉淀。
5. 用离心机离心10分钟，将上清液倒掉，加入70%乙醇洗涤沉淀3次，每次离心5分钟。
6. 倒掉乙醇，将离心管倒置在吸水纸上，待DNA沉淀干燥。
7. 加入适量的TE缓冲液溶解DNA，使其充分溶解。
8. 使用紫外可见分光光度计检测DNA的浓度和纯度。
9. 可以将提取得到的DNA用于后续的PCR扩增、测序等实验。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地从动物肝脏样本中提取到了DNA。
通过紫外可见分光光度计检测，我们可以得到DNA的浓度和纯度信息，以确保提取到的DNA质量良好。
此外，我们还可以使用电泳仪对提取得到的DNA进行质量检测，观察DNA的大小和完整性。
DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它为后续实验提供了可靠的DNA样本。
在实际应用中，我们可以利用提取得到的DNA进行PCR扩增，以研究特定基因的表达情况；也可以进行测序，以了解DNA序列的变异情况。
动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告
动物肝脏dna的提取和鉴定实验报告动物肝脏DNA的提取和鉴定实验报告研究背景•DNA提取是基因研究和遗传分析的基础步骤之一，对于动物肝脏DNA的提取和鉴定具有重要意义。
•本实验旨在探究动物肝脏DNA的提取方法，并通过PCR技术对其进行鉴定和分析。
实验设计和方法1.实验所用材料和仪器：–动物肝脏样本–DNA提取试剂盒–离心管、显微管–PCR反应体系组分–PCR仪2.DNA提取步骤：–取动物肝脏样本，加入提取试剂，进行细胞破裂和蛋白质消化。
–通过离心将细胞碎片分离，再加入酒精将DNA沉淀。
–对DNA进行洗涤、干燥和溶解，得到纯净的DNA提取物。
3.DNA鉴定和PCR步骤：–制备PCR反应体系，包括DNA模板、引物、酶和缓冲液等。
–进行PCR反应，使用特定的温度和时间条件进行扩增。
–通过凝胶电泳分析PCR产物，检测特定的DNA序列是否存在。
实验结果和分析•经过DNA提取和PCR扩增，成功从动物肝脏中提取到DNA，并进行了鉴定和分析。
•凝胶电泳结果显示，PCR反应产物呈现出预期的大小和条带清晰，表明目标DNA序列存在于动物肝脏中。
结论•本实验成功地提取和鉴定了动物肝脏中的DNA。
•通过PCR技术，可以快速、准确地检测和分析动物肝脏的遗传信息。
•这一研究结果对于进一步深入了解动物遗传特征具有重要意义。
参考文献[1] Smith A, Jones B. A review of DNA extraction techniques for biofilm analysis in wastewater treatment systems. Water Research, 2018, 132: 87-96.[2] Brown C G, McKinstry J L, et al. Comparison of seven methods for extraction of bacterial DNA from fecal and cecal samples of mice. Journal of Microbiological Methods, 2019, 164: 105682.讨论与展望•本实验采用DNA提取试剂盒的方法，相比传统的有机溶剂法，具有操作简便、提取效率高、污染少等优点。
动物肝脏DNA的提取
动物肝脏DNA的提取点击次数：414 发表于：2008-07-08 17:32转载请注明来自丁香园来源：互联网一、目的：了解分离提取DNA的一般原理，掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。
二、原理：在浓氯化钠（1—2mol·L-1）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小。
在稀氯化钠（0.14mol·L-1）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。
因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。
将抽提得到的核蛋白用SDS（十二烷基磺酸钠）处理，DNA（或RNA）即与蛋白质分开，可用氯仿一异戊醇将蛋白质沉淀除去，而DNA则溶解于溶液中。
向溶液中加入适量乙醇，DNA即析出。
为了防止DNA（或RNA）酶解，提取时加EDTA（ethy-lenediamine tetracetic acid，乙二胺四乙酸）。
三、器材及试剂：1．器材：①新鲜猪肝（一次用不完一定要冷冻保存）②匀浆器③离心机5000r·min-1④量筒50ml（×1）、10ml（×1）⑤水浴锅⑥纱布⑦真空干燥器2．试剂：①5mol·L-1NaCl溶液：将292.3gNaCl溶于水，稀释至1000ml。
②0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA-Na溶液：溶8.18gNaCl及37.2gEDTA-Na于蒸馏水，稀释至1000ml。
四、操作步骤：1．取猪肝20~30g，用适量0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液洗去血液，剪碎，加入约30~50ml0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液，置匀浆器或研钵中研磨，研磨一定要充分，待研成糊状后，用单层纱布滤去残渣，将滤液离心10分钟（4000r·min-1）弃去上清液，沉淀用0.14mol·L-1NaCl-0.10mol·L-1EDTA溶液洗二、三次。
动物肝脏中DNA得提取及检测实验报告
动物肝脏中DNA得提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸(DNA,为英文Deoxyribonucleic acid得缩写),又称去氧核糖核酸,就是脱氧核糖核酸染色体得主要化学成分,同时也就是组成基因得材料。
有时也被称为“遗传微粒”,原因就是在繁殖过程中,父代会把它们自己DNA得一部分复制传递到子代中,从而完成性状得传播。
DNA就是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高得粘度,可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来得水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间得氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA 得解螺旋。
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染色体,整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言,正常得体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期又可划分为:G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物,如动物、植物及真菌而言,染色体主要存在于细胞核内;而对于原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中得拟核内。
染色体上得染色质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与其她蛋白质进行交互作用,进而调节基因得转录。
脱氧核糖核酸得结构DNA得结构: DNA得结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构与四级结构四个水平。
DNA就是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP 脱氧腺苷)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP 脱氧胸苷)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP 脱氧胞苷)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP 脱氧鸟苷)。
而脱氧核糖(五碳糖)与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。
动物肝脏中DNA的提取检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构：DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
动物肝脏DNA的提取
动物肝脏DNA的提取
试剂、器材和实验材料
一、试剂：0.15mol/LNaCl-0.015mol/L柠檬酸钠、0.15mol/LNaCl-0.15mol/LNa2EDTA 溶液、10%SDS、5mol/LNaCl溶液、氯仿—异丙醇混合液、95%乙醇
二、器材：离心管、电子台秤、恒温水浴、量筒、烧杯、刻度吸管、离心机。
三、实验材料：新鲜兔子肝脏
实验操作
1.取处理好的肝脏组织于离心管中，加入40mlSSC溶液，将肝脏中的冰块捣碎，平衡后3000rpm离心10min.
2.弃去上清液，收集沉淀，重复第一步操作，再弃去上清液，得到DNP粗制品。
3.沉淀物悬于25mlPH8.0的Na2EDTA溶液中。
4.缓慢滴加10%SDS溶液3ml，边加边搅拌，同向轻搅。
5.60℃恒温水浴10min，不断搅动。
6.取出，冷却，加入5mol/LNaCl溶液8ml，转移到500ml的烧杯中。
7.加入40ml氯仿—异丙醇混合液，在室温下摇动20min。
8.将混合物转移至离心管中，平衡后，3000rpm离心5min，离心后混合物分为三层。
9.用吸管小心吸取上清液，放到30ml95%乙醇中，用玻璃棒轻轻缠出DNA丝状物。
讨论
1.用玻璃棒进行搅拌时，要注意同向轻搅，因为提取的DNA比较容易断裂。
2.在室温下摇动时，要注意只能顺时针或逆时针摇动。
简述动物肝脏中dna提取的基本原理
简述动物肝脏中dna提取的基本原理动物肝脏中DNA提取的基本原理DNA提取是分子生物学中的一项基础技术，它是研究生物学、医学、农业等领域的重要手段。
在动物肝脏中提取DNA，可以用于研究动物的遗传信息、基因表达、疾病诊断等方面。
下面将介绍动物肝脏中DNA提取的基本原理。
1. 细胞破碎首先需要将肝脏组织中的细胞破碎，使DNA从细胞内释放出来。
常用的方法有机械破碎、化学破碎和超声波破碎等。
其中，机械破碎是最常用的方法，可以用搅拌器、研钵等设备将组织细胞破碎。
2. DNA分离破碎后的细胞混合物中含有DNA、RNA、蛋白质等多种分子，需要将DNA与其他分子分离。
一般采用酚/氯仿法或商用DNA提取试剂盒进行DNA分离。
酚/氯仿法是一种传统的DNA提取方法，它利用酚的亲油性和氯仿的亲水性，将DNA与其他分子分离。
商用DNA 提取试剂盒则是一种快速、简便的DNA提取方法，其中的试剂已经经过优化，可以快速地将DNA分离出来。
3. DNA纯化分离出的DNA还需要进行纯化，去除杂质和其他分子的干扰。
纯化方法包括乙醇沉淀法、离心柱纯化法等。
其中，乙醇沉淀法是最常用的方法，它利用乙醇的亲水性和DNA的亲疏水性，将DNA沉淀下来。
离心柱纯化法则是利用离心柱的特殊结构，将DNA与其他分子分离。
4. DNA定量最后需要对提取出的DNA进行定量，以确定DNA的浓度和纯度。
常用的方法有紫外分光光度法、凝胶电泳法等。
其中，紫外分光光度法是最常用的方法，它利用DNA分子的吸收特性，测定DNA的浓度和纯度。
动物肝脏中DNA提取的基本原理包括细胞破碎、DNA分离、DNA 纯化和DNA定量。
这些步骤需要严格控制条件，以保证提取出的DNA质量和纯度。
DNA提取技术的不断改进和优化，为动物遗传学、分子生物学等领域的研究提供了有力的支持。
动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告
动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸（DNA，为英文Deoxyribonucleic acid的缩写），又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。
有时也被称为“遗传微粒”，原因是在繁殖过程中，父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中，从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物，DNA溶液为高分子溶液，具有很高的粘度，可被甲基绿染成绿色。
DNA对紫外线（260nm）有吸收作用，利用这一特性，可以对DNA进行含量测定。
当核酸变性时，吸光度升高，称为增色效应；当变性核酸重新复性时，吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的氢键断裂，双螺旋结构解开—也称为DNA 的解螺旋。
在细胞内，DNA能与蛋白质结合形成染色体，整组染色体则统称为染色体组。
对于人类而言，正常的体细中含有46条染色体。
染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制，细胞分裂间期又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。
对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。
染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进行组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用，进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物，组成单位为四种脱氧核苷酸，即腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP 脱氧腺苷）、胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP 脱氧胸苷）、胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP 脱氧胞苷）、鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP 脱氧鸟苷）。
而脱氧核糖（五碳糖）与磷酸分子借由酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。
每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列，可组成遗传密码，指导蛋白质的合成。
动物肝脏DNA提取和鉴定
核酸制备中常用旳蛋白质变性剂
作用： 1.使蛋白质变性、沉淀，从核酸提取液中分离除去，以防造
成蛋白污染。
2.某些蛋白质变性剂也有克制 RNase活性和破裂细胞旳作用。
如：苯酚、氯仿、盐酸胍、DEPC
核酸制备中常用旳酶
DNase:降解DNA RNase：降解RNA 蛋白酶K：降解蛋白质
溶菌酶：破碎细胞
动物肝脏DNA提取和 鉴定
核酸旳分类
DNA (脱氧核糖核酸) 主要存在于细胞核旳染色体中。 核外也有少许DNA，如线粒体DNA（mtDNA），叶绿 体DNA（cpDNA），质粒DNA。
RNA（核糖核酸） 存在于细胞质中，如mRNA, rRNA, tRNA等。
除上述DNA，RNA外，还有非细胞形式存在旳病毒和噬 菌体，其或只含DNA，或只具有RNA。
核酸制备中常用旳去垢剂
核酸本身带负电荷，结合带正电荷旳蛋白质。用于核 酸提取旳去垢剂，一般都是阴离子去垢剂。 去垢剂旳作用： 1．溶解膜蛋白及脂肪，使细胞膜破裂； 2．溶解核糖体上面旳蛋白质，使其解聚，将核酸释放出 来； 3．对RNase、DNase有一定旳克制作用。 如：SDS、脱氧胆酸钠、4-氨基水杨酸钠、萘-1.5-二磺 酸钠、三异丙基萘磺酸钠
DNA原则液200ug/ml:DNA钠 盐用5mmol/L旳NaOH配制。
95%冷 乙醇、 NaCl固 体
0.14mol／L NaCl－0.05mol／L 柠檬酸钠缓冲液(PH=6.8)
二苯胺： 称取纯 二苯胺 1g溶于 100ml冰
组织捣碎匀浆机
猪肝8g 16ml旳0.14mol／L NaCl－
0.05mol／L 柠檬酸钠缓冲液
匀浆
离心， 4000r/min ,10min
实验一 动物肝脏组织中基因组DNA提取和鉴定-精
动物肝脏中DNA的提取
动物肝脏中DNA的提取南京⼤学医学院⽣化实验报告———————————————————————————动物肝脏中DNA的提取⼀实验⽬的1.学习和掌握⽤浓盐法从动物组织中提取DNA的原理和技术2.了解分离提取DNA的⼀般原理⼆实验原理⼀、核酸提取的主要步骤：1.破碎细胞：研磨、组织匀浆、超声波、冻融；⼀硫氰酸胍、碱裂解；酶解（溶菌酶）2.除去与核酸结合的蛋⽩质以及多糖、脂类等⽣物⼤分⼦：酚/氯仿抽提、蛋⽩质变性（SDS、异硫氰酸胍等）、蛋⽩酶处理、⾼盐洗涤3.除去其他不需要的核酸分⼦4.沉淀核酸，去除盐类，有机溶剂等杂质⼆、提取DNA的注意事项1.避免过酸、过碱及⾼温2.加⼊DNA酶抑制剂：柠檬酸、氰化物、砷酸盐、EDTA、SDS、苯酚等3.蛋⽩变性剂反映不宜过于剧烈，以防机械张⼒使核酸链破坏。
4.加⼊RNA降解酶除RNA三、DNA的主要来源1.动物组织及器官：脾、肝、胸腺、鱼类精⼦等。
2.植物：种⼦的胚芽等3.微⽣物：细菌、酵母菌等核酸和蛋⽩质在⽣物体中以核蛋⽩的形式存在，其中DNA主要存在于细胞核中，RNA主要存在于核仁及细胞质中。
⽣物体组织细胞中的脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），⼤部分与蛋⽩质结合，以核蛋⽩——脱氧核糖核蛋⽩（DNP）和核糖核蛋⽩（RNP）的形式存在，这两种复合物在不同的电解质溶液中的溶解度有较⼤差异。
在低浓度的NaCl溶液中，DNP的溶解度随NaCl浓度的增加⽽逐渐降低，当NaCl浓度达到0.14mol/L时，DNP的溶解度约为纯⽔中溶解度的1%（⼏乎不溶）；但当NaCl 浓度继续升⾼时，DNP的溶解度⼜逐渐增⼤，当NaCl浓度增⾄0.5mol/L时，DNP的溶解度约等于纯⽔中的溶解度，当NaCl浓度继续增⾄1.0mol/L时，DNP 的溶解度约为纯⽔中溶解度的2倍（溶解度很⼤）。
⽽RNP则不⼀样，它在浓NaCl溶液和稀NaCl溶液中的溶解度都很⼤。
因此，可以利⽤不同浓度的NaCl 溶液将DNP和RNP分别抽提出来。
动物肝脏中dna的提取和鉴定
动物肝脏中DNA的提取和鉴定一、实验目的1.学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。
2.掌握琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理和方法。
3.学习核酸染色的方法。
二、实验原理为了研究DNA分子在生命代谢中的作用，常常需要从不同的生物材料中提取DNA。
由于DNA分子在生物体内的分布及浓度不同，要选择适当的材料提取DNA。
动植物中小牛胸腺、动物肝脏、脾脏、鱼类精子、植物种子的胚中都含有丰富的DNA。
微生物中，谷氨酸菌体含7%～10%，面包酵母含4%，啤酒酵母含6%，大肠杆菌9%～10%。
从各种材料中提取DNA方法不同，分离提取的难易程度也不同。
对于低等生物，如从病毒中提取DNA比较容易，多数病毒DNA相对分子量较小，提取时易保持其结构完整性。
从细菌及高等动植物中提取DNA难度大些。
细菌DNA相对分子质量较大，一般达2×109Da。
因此易被机械张力剪短。
细菌DNA，除核DNA外，还有质粒DNA等。
1.DNA的基本功能生物遗传信息复制的模板和基因转入的模板，是生命遗传繁殖的物质基础，也是个体生命活动的基础；作为DNA分子中的某一区段，有复制、转录和翻译等主要功能称为基因。
2.核酸的结构与功能核酸（nucleic acid)是以核苷酸为基本组成的生物大分子。
天然存在的核酸有两类，一类为脱氧核苷酸（deoxyribonucleic acid,DNA)，另一类为核糖核酸（ribonucleic acid,RNA)。
DNA存在于细胞核和线粒体中，携带遗传信息。
RNA存在于细胞质和细胞核内，参与细胞内DNA遗传信息的表达。
3.DNA的存在形式天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白（DNP）形式存在于细胞核中。
要从细胞核中提取DNA时，先把DNP抽提出来，再把P除去，再除去细胞中的糖、RNA及无机离子等，从中分离DNA。
DNP和RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响而不同。
DNP在低浓度盐溶液中几乎不溶解，如在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，仅为在水中溶解度的1%，随着盐浓度的增加溶解度也增加，至1mol/L氯化钠中溶解度很大，比纯水高2倍。
简述动物肝脏中dna提取的基本原理
简述动物肝脏中dna提取的基本原理DNA是生命体中的重要分子，包含了生命体的遗传信息，因此对于DNA的研究在生命科学领域中具有重要的意义。
而动物肝脏是DNA 含量较高的组织之一，因此在DNA提取中常常使用肝脏作为样本。
本文将简述动物肝脏中DNA提取的基本原理。
一、DNA提取的基本步骤DNA提取的基本步骤包括细胞破碎、蛋白质去除、DNA分离和纯化。
其中，细胞破碎是提取DNA的第一步，其目的是破坏细胞膜和核膜，释放出细胞内的DNA。
蛋白质去除是为了去除DNA周围的蛋白质和其他杂质，以保证提取出的DNA纯度和质量。
DNA分离是指将DNA 与其他细胞成分分离开来，这可以通过酒精沉淀或离心来实现。
纯化则是为了去除DNA中的杂质，如RNA和酶等，以获得高纯度的DNA。
二、动物肝脏中DNA提取的基本原理动物肝脏中DNA提取的基本原理与其他组织的DNA提取相似，但由于肝脏中含有较高浓度的脂肪和胆汁，因此需要采用一些特殊的方法来提取DNA。
1. 细胞破碎细胞破碎是提取DNA的第一步，其目的是破坏细胞膜和核膜，释放出细胞内的DNA。
对于肝脏组织，可以使用切片或切碎的方式将细胞破碎。
在切片或切碎前，可以将肝脏组织放入液氮中冷冻，以保持DNA完整性。
此外，为了避免DNA的氧化和降解，应在提取过程中添加抗氧化剂和蛋白酶抑制剂等。
2. 蛋白质去除蛋白质去除是为了去除DNA周围的蛋白质和其他杂质，以保证提取出的DNA纯度和质量。
对于肝脏组织，可以使用蛋白酶K等蛋白酶来去除蛋白质。
蛋白酶K是一种广谱性的蛋白酶，可将蛋白质水解成小分子，从而方便DNA的提取和纯化。
3. DNA分离DNA分离是指将DNA与其他细胞成分分离开来，这可以通过酒精沉淀或离心来实现。
对于肝脏组织，由于其含有较高浓度的脂肪和胆汁，因此需要在DNA分离前去除这些物质。
可以通过添加乙酸和异丙醇等溶液来去除脂肪和胆汁，然后再用酒精沉淀或离心将DNA分离出来。
4. 纯化纯化则是为了去除DNA中的杂质，如RNA和酶等，以获得高纯度的DNA。
动物肝脏DNA提取和鉴定-实验技术
实验过程包括肝脏组织的研磨、细胞裂解、DNA沉淀、洗 涤和溶解等步骤，每一步都有严格的操作要求和注意事项。
实验结果
通过电泳检测，观察到清晰的DNA条带，表明提取的 DNA质量较高，可用于后续的分子生物学实验。
实验中遇到的问题及解决方案
问题1
肝脏研磨不充分。
解决方案
在研磨过程中，应确保充分研磨动物肝脏组织，使其充 分破碎。
基因功能研究
通过比较不同物种或个体间的基因序列，可以研究基因功能和进化关系，进一步 揭示生物多样性和物种起源。
分子生物学实验
分子标记
DNA提取是进行分子标记的关键步骤，如SSR、SNP等标记 技术，可用于遗传图谱构建、亲子鉴定和品种鉴别等。
基因克隆与表达
提取高质量的DNA是进行基因克隆和表达的前提，有助于研 究基因结构和功能，以及开发新的生物技术。
DNA浓度测定
紫外分光光度法
利用DNA在260nm处的紫外吸收峰 ，通过测量吸光度值计算DNA浓度 。
荧光染料染色
利用荧光染料如PicoGreen等染色 DNA样品，通过测量荧光信号的强度 计算DNA浓度。
04 DNA应用与拓展
基因组学研究
基因组测序
通过DNA提取，可以对动物基因组进行测序，了解其基因组成和变异情况，为遗 传学研究和疾病诊断提供基础数据。
01
实验前确保实验室环境 清洁、无菌，避免交叉 污染。
02
使用高质量的实验器具 和试剂，确保实验结果 的准确性和可靠性。
03
在操作过程中，要遵循 正确的实验步骤和操作 规程，避免误差和意外 事故的发生。
04
实验结束后，要及时清 理实验场地和废弃物， 保持实验室的整洁和卫 生。
动物肝脏dna的提取实验报告
动物肝脏dna的提取实验报告实验报告：动物肝脏DNA的提取一、实验目的本实验旨在提取动物肝脏中的DNA，了解和掌握动物组织中DNA提取的基本原理和方法，通过实验操作培养实验技能和加深对生物化学知识的理解。
二、实验原理DNA提取主要是根据DNA和蛋白质的理化性质，利用酶解、吸附和解吸附等步骤将DNA从动物组织中分离出来。
动物肝脏中含有丰富的核苷酸，因此成为DNA提取的理想材料。
本实验将采用试剂盒法提取动物肝脏DNA。
三、实验步骤1.准备所需试剂和器材，包括动物肝脏组织、DEPC水、DNA提取试剂盒、离心管、移液器等。
2.将动物肝脏组织放入研钵中，加入适量DEPC水研磨成匀浆。
3.将研磨后的匀浆转入离心管中，加入适量DNA提取试剂盒中的裂解液，轻轻混匀。
4.将混合液放入离心机中，以12000rpm的转速离心10分钟，分离出上清液。
5.将上清液转移至新的离心管中，加入等体积的酚-氯仿混合液，轻轻混匀后离心10分钟，分离出上清液。
6.将上清液转移至新的离心管中，加入等体积的氯仿-异戊醇混合液，轻轻混匀后离心10分钟，分离出上清液。
7.将上清液转移至新的离心管中，加入适量DNA沉淀剂，轻轻混匀后静置10分钟，使DNA充分沉淀。
8.将混合液倒入离心管中，以12000rpm的转速离心10分钟，分离出DNA沉淀。
9.用DEPC水溶解DNA沉淀，保存于-20℃冰箱中备用。
四、实验结果与分析1.通过观察和记录实验过程，我们成功地从动物肝脏组织中提取出了DNA。
在实验过程中，我们使用了DEPC水来消除组织中的RNase酶活性，确保了提取的DNA不会被降解。
同时，利用试剂盒中的裂解液和酚-氯仿、氯仿-异戊醇混合液等试剂将蛋白质和其他杂质去除，使DNA得到有效纯化。
2.通过比较实验前后的组织样品和提取的DNA溶液，我们可以看到组织样品的颜色为红色，而提取的DNA溶液呈现出透明无色，说明提取的DNA具有较高的纯度。
此外，通过观察和记录实验结果，我们可以看到在离心管中明显看到DNA沉淀，说明提取的DNA具有较高的浓度。
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动物肝脏中提取DNA
【实验目的】
1.掌握肝脏DNA分离的原理及操作过程
2.掌握主要试剂的作用
3.熟悉DNA纯度及含量鉴定方法
【实验原理】
动物肝脏。
小牛胸腺和鱼类精子含有较多的DNA，是提取DNA的良好材料。
动植物的DNA室以核蛋白的形式存在于生物体中（主要在核内），DNA核蛋白（DNP)在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度很低，近视它在纯水中的1%。
，而在1mol/L NaCl溶液中，其溶解度至少是纯水中的二倍。
相反，核糖核蛋白（RNP）能在0.15mol/L NaCl溶液中溶解。
利用这一性质，可使脱氧核糖核蛋白与核糖核蛋白分开。
制备过程中，当细胞破碎时，脱氧核糖核酸酶的活性增加，DNA将遭受降解，为此在提取液中加入柠檬酸盐、EDTA做抑制剂，并要求整个提取操作在4℃以下进行，以减少酶对DNA的破坏。
分离得到的DNP，进一步用十二烷基硫酸钠（SDS）使蛋白质变性，用含有异丙醇的氯仿除去变性蛋白，最后用95%的冷乙醇从溶液中把DNA沉淀出来。
DNA纯度可以通过A260/A280进行鉴定，而浓度可以用紫外吸收法、定磷法、二苯胺显色法测定。
【实验操作】
1．取新鲜猪肝脏，除去血水和结缔组织，在冰浴上切成小块，称取10g，加入2倍体积（20ml）0.15mol／L NaCl－0.015mol／L枸橼酸钠缓冲溶液，于组织捣碎机中迅速捣成匀浆，再以玻璃匀浆器2～3次使细胞破碎，最后加缓冲液至50ml。
2.组织匀浆移入离心管内，浸入冰盐溶液中冷却，而后在4℃下6000r／min离心5～10min。
弃上清（可用于制备RNA）。
将沉淀用2倍体积的冷的上述缓冲液洗涤2次，洗涤时用匀浆器研磨洗涤，离心条件同上。
3．将离心后所得沉淀物悬于5倍体积的0.15mol／L NaCl－0.1mol／L EDTA-Na2（pH8.0）溶液中，而后边搅拌边慢慢滴加5％SDS溶液，直至SDS的最终浓度达到1%为止。
然后加入固体NaCl，使其最终浓度达1mol/L。
继续不断搅拌30～45min，以确保NaCl
全部溶解，此时可见溶液由黏稠变稀薄。
4。
将上述混合溶液倒入一个300ml磨口三角瓶里，加入等体积的氯仿-异戊醇（20：1），振荡20min，室温3000r/min离心10min。
由此可见，离心管中分为三层，上层水溶液，中层变性蛋白，下层氯仿-异成醇。
振荡，离心取上清。
如此重复直至中间蛋白层消失。
5.最后一次离心后小心吸取上层水相，记录体积，放入小烧杯中，加入2倍体积预冷的95％乙醇。
加入时，用滴管吸取乙醇，边加边用玻璃棒慢慢顺一个方向在烧杯内转动。
此时可见白色DNA显微逐渐缠于玻璃棒上，直至无纤维出现为止。
6.纯度鉴定：将所得DNA纤维用75%乙醇洗涤2次，置于干净试管中，加入0.15mol/L NaCl-
0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液5ml，使其溶解。
测A260/A280，0.15mol/L NaCl-0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液做空白。
如果比值大于1.8说明含有RNA，如果比值小于1.8说明含有大奶：如果等于1.8说明DNA纯度较高。
7．含量测定：所得DNA制品可用紫外吸收法、定磷法、二苯胺显色法测定DNA含量。
【试剂和材料】
1.材料：猪肝
2. 0.15mol/L NaCl-0.015mol/L枸橼酸钠缓冲溶液(pH7.0）：称取8.77g NaCl和4.41g枸橼酸钠（Na3C6H5O7·2H2O），用蒸馏水溶解，以0.1mol/L NaOH调节pH至7.0，最后定容至1000ml。
3.0.15mol／L NaCl－0.15mol／L EDTA-Na2溶液（pH8.0）：称取8.77g NaCl和37.2g EDTA-Na2溶于800ml蒸馏水中，以2mol/L NaOH调至pH8.0，最后定容至1000ml。
4.5％SDS溶液（W/V）：称取5g SDS，溶至100ml45%的乙醇中。
5.氯仿一异戊醇溶液：按氯仿：异戊醇=20：1(V/V)配制。
6.95％乙醇溶液。
7.75％乙醇溶液。
【器材】
剪刀及天平；刻度吸管；试管；三角瓶及烧杯；量筒（10ml）；组织捣碎机和玻璃匀浆器；离心机；紫光分光光度计。
【注意事项】
1.制备肝细胞匀浆时不要过度匀浆，以免DNA断裂。
2.加入氯仿一异戊醇后勿剧烈振荡，以免DNA纤维断裂。
3.有机溶剂对人体有害，操作时要注意。
4.为了尽量降低DNA酶的影响，提取过程应在冰浴上进行。