溶磷微生物的分离与筛选
鳗草根际溶磷微生物分离、筛选及其对鳗草生长的影响
中国水产科学 2020年1月, 27(1): 82-95 Journal of Fishery Sciences of China研究论文收稿日期: 2019-05-05; 修订日期: 2019-06-11.基金项目: 国家海洋公益性行业科研专项(201405010); 山东省支持青岛海洋科学与技术试点国家实验室重大科技专项(2018SDKJ0501).作者简介: 张雪梅(1993–), 女, 硕士研究生, 从事资源增殖生态学研究. E-mail: Zhang.XM@ 通信作者: 张秀梅, 教授. E-mail: xiumei1227@ DOI: 10.3724/SP.J.1118.2020.19091鳗草根际溶磷微生物分离、筛选及其对鳗草生长的影响张雪梅1, 张秀梅1, 2, 李文涛11. 中国海洋大学, 海水养殖教育部重点实验室, 山东 青岛 266003;2. 青岛海洋科学与技术试点国家实验室, 海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室, 山东 青岛 266072摘要: 为明确鳗草(Zostera marina )根际溶磷微生物溶磷能力及其对鳗草生长的影响, 采用选择性无磷培养基从鳗草根际土壤中分离获得4株具较高溶磷能力的菌株(P1、P2、P3和P4), 从形态学、生理生化特征及16S rDNA 等方面对菌株进行了鉴定, 探讨了菌株的最适培养条件, 研究了其对鳗草植株存活、生长、生理及根际土壤酶活力的影响。
结果表明, 菌株P1~P4分别为芽孢杆菌(Bacillus altitudinis P1)、桑肠杆菌(Enterobacter mori P2)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli P3)和Cobetia marina P4; 72 h 菌株培养液中可溶性磷含量分别为116.98 mg/L 、123.13 mg/L 、130.21 mg/L 和76.54 mg/L; 最适培养温度分别为34.67℃、33.95℃、34.60℃和31.19℃; 最适培养盐度分别为27.10、28.29、29.54和26.08; 最适初始pH 分别为8.26、7.92、8.17和8.21。
沾化冬枣根际解无机磷细菌的分离、鉴定及其在土壤中溶磷效果的研究
，
（ １ ． Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｆ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｂ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｂ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ ２ ５ ６ ６ ０ ３ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
华 北 农 学 报 ・２ ０ １ ３， ２ ８（ ３）： ２ ０ ４ — ２ ０ ９
沾 化 冬 枣 根 际解 无机 磷 细 菌 的分 离 、 鉴 定及 其在 土壤 中溶磷 效 果 的研 究
， 郝 雅 丽 ， 刘 南 南
２ ５ ６ ６ ０ ３ ） （ １ ． 滨州学院 生命科学系 ， 山东 滨 州 ２ ５ ６ ６ ０ ３ ； ２ ． 山 东 省 黄 河 三角 洲 野 生 植 物 资 源 开 发 利 用 工 程 技 术 研 究 中心 ， 山东 滨 州 ２ ５ ６ ６ ０ ３； ３ ． 滨 州 市 食 品 安 全重 点 实 验 室 ， 山东 滨 州
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ｗｉ ｌ ｄ Ｐ ｌ ａ ｎ ｔ Ｒｅ ｓ ｏ ｕｒ ｃ ｅ ｓ Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｙｅ ｌ ｌ ｏ ｗ Ｒｉ ｖ ｅ ｒ Ｄｅ ｌ ｔ ａ，
验， 以 及 促 进 土 壤 中有 效 磷 含 量 增 加 等 一 系 列 研 究 。结 果 显 示 ， 本 试 验 从 沾 化 冬 枣 根 际 土 壤 中分 离 出 １株 耐 盐 高 效
高效溶磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性
邵锴,邱业先，徐婧.高效溶磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性[J ].江苏农业科学,2017,45(8) =253 -257. doi ： 10.15889/j . issn . 1002 - 1302.2017. 08. 068高效溶磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性邵锴，邱业先，徐婧(苏州科技学院，江苏苏州21000)摘要:为了从根际土壤中筛选出具有较高溶磷能力的菌株及优化溶磷条件,通过种子萌发初步研究溶磷促生效应。
通过稀释涂布法分离、筛选菌株,并进行ATB 细菌鉴定仪及16S rD N A 测序鉴定;采用单因子试验及正交试验优 化菌株溶磷发酵条件，利用种子发芽指标测定菌株的促生能力。
结果显示，筛选出菌株B D -1的溶磷能力最强，经 ATB 细菌鉴定仪及16S rD NA 测序，该菌株被鉴定为路德维希肠杆菌。
正交试验结果表明，在温度为30丈、摇床转速为180 r /mm 、接种量为2 ml ^、初始p H 值为7.0的条件下培养7 d 的溶磷效果最好，其溶磷量为181.73 g /L 。
种子萌 发试验结果表明,该溶磷菌对作物种子萌发具有一定的促进作用。
关键词:溶磷菌;微生物肥料;条件优化;解磷能力;种子萌发;鉴定;筛选;溶磷特性 中图分类号：S 154. 38 + 1文献标志码：A文章编号：1002 -1302(2017)08 -0253 -04江苏农业科学2017年第45卷第8期一 253 —磷是植物生长必需的营养元素之一，植物的光合作用和 体内的生化过程都必需有磷参与[1<，但其在土壤中主要以 难溶性矿物态存在[3]，难溶性矿物态磷无法被作物直接吸收 利用。
为提高作物产量，超过/ k /hm 2磷肥被施用于土壤 中[]，部分磷肥被作物吸收利用，大部分被转化成难溶性磷 返施于土壤。
大量化学磷肥的施用，伴随土壤板结、土壤酸 化、土壤贫瘠化日益严重。
因此，提高土壤中磷的利用效率对 降低化学磷肥的施用量具有十分重要的意义。
解磷微生物的分离与筛选
解磷微生物的分离与筛选钟传青;曹广祥;黄为一【摘要】Phosphorus is the main component of organic compounds in plant and necessary for the biological nitrogen fixation.Most of the phosphorus is insoluble in soil,which cannot be absorbed by plants directly.P-dissolving microbes can promote the transformation of insoluble phosphorus to available phosphorus in soil.The study was centered on the current situation of effective phosphorus deficiency in cultivatedland.Diversity of P-dissolving microbes was explored by construction of screening model during the study of initial screening medium and re-screening culture medium.More than 2000 strains of P-dissolving microbes were isolated from different soil samples by solid plate method .Results are shown as follows.P-dissolving microbes are most in vegetable garden soil because of its high content of organic matter.Quantity and kinds of P-dissolving microbes are different in soil from different area.BacillusP17,Brevibacterium P10,Rhodotorula Y3 are isolated and identified.P-dissolving microbes could be isolated with the screening model by solid plate method,but P-dissolving effect is still needed to be determined combined with liquid screening model.%磷是植物体内有机化合物的主要成分，为生物固氮所必需，土壤中大部分磷以难溶态存在，不能被植物直接吸收利用，解磷微生物可以促进土壤难溶磷向有效磷的转化。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定随着农业生产的不断发展，土壤中的养分供应问题逐渐凸显出来。
磷和钾是土壤中必不可少的元素，对植物的生长发育具有重要的影响。
由于土壤中无机磷和钾的含量有限，很大一部分呈结合态，无法直接被植物吸收利用，需要通过微生物的参与，转化为植物可利用的形态。
溶磷和解钾微生物是一类能够有效分解土壤中有机磷和结合态钾的微生物，对于提高农作物的吸收利用率具有重要的意义。
分离筛选与鉴定这些菌株可以为农业生产提供一种新的途径，用于改善土壤肥力，并减少化肥的使用。
分离筛选这些溶磷解钾菌的关键是寻找适合生长的培养基。
常用的培养基有PDA、LB 和液体MS等。
从农田土壤中采集土壤样品，并将样品带回实验室进行处理。
将土壤样品稀释后接种在已经准备好的培养基上，将培养皿密封后放置在适当的温度和湿度下培养。
在合适的时间内，从培养皿中观察出现菌落的样品，进行进一步的分析与鉴定。
鉴定这些菌株的关键是通过形态学、生理生化以及分子生物学等多种手段进行分析。
通过形态学的方法，可以观察菌落的形态、色素的产生以及孢子的形态等特征。
然后，通过生理生化的方法，可以测试菌株对不同物质的利用能力，如磷酸盐的水解能力和钾离子的溶解能力。
通过分子生物学的方法，可以利用PCR技术扩增16S rRNA基因，并进行测序分析，以确定溶磷解钾菌的亲缘关系。
通过以上的分离筛选和鉴定工作，可以得到一株具有较好解磷和溶钾能力的菌株。
之后，可以进一步对其进行大规模培养和应用试验，以验证其在农业生产中的作用。
通过利用这些菌株，可以提高土壤肥力，减少农药的使用，改善农作物的产量和品质，为可持续农业的发展做出贡献。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定溶磷解钾菌是指具有能够分解无机磷、解离钾盐并将其转化为有机物质的细菌。
这类菌株广泛存在于土壤中，对于植物和农业生产具有重要意义，能够促进作物生长和提高产量。
因此，分离出具有溶磷解钾能力的菌株对于土壤生态系统的调节和农业生产的发展具有积极作用。
本实验旨在从土壤中筛选出溶磷解钾菌，并对所得菌株进行鉴定和分类。
实验步骤如下：实验材料：1.土壤样品2.磷酸二氢钾、氯化钾3.高氯酸盐酸铂(IV)4.琼脂、蔗糖、酵母粉、肉汤、营养琼脂培养基实验步骤：1. 采集土壤样品，处理成均匀状态。
2. 在含有磷酸二氢钾和氯化钾的营养琼脂培养基上进行菌落筛选。
将土样涂布在琼脂培养基上，放置温箱中，培养24小时。
3. 筛选出的菌株进行溶磷解钾能力测试。
将每个菌株接种于含有磷酸二氢钾的营养琼脂培养基上，培养48小时。
然后在营养琼脂培养基上加上1%酵母粉，继续培养48小时。
观察菌落中是否有出现溶解带，并记录其直径大小。
4. 对具有溶磷解钾能力的菌株进行分类鉴定。
首先进行生长特性观察，记录菌落特征、颜色、形态、透明度等；然后进行生理生化特性测试，包括淀粉酶、氧化酶、葡萄糖发酵、产气等反应，将结果与相关分类鉴定手册进行对照，确定其菌属和菌种。
结果分析：经过菌落筛选和溶磷解钾能力测试，筛选出44株溶磷解钾菌株。
经过对这些菌株进行分类鉴定，得出以下结果：1. 有34株归属于假单胞菌属，属于γ-变形菌门。
2. 有5株归属于龙门菌属，属于γ-变形菌门。
3. 有2株归属于芽孢杆菌属，属于芽孢杆菌门。
4. 有1株归属于链球菌属，属于革兰氏阳性菌门。
2株未能鉴定出其菌属和菌种。
结论：通过对土壤样品进行菌株筛选和分类鉴定，得到44株具有溶磷解钾能力的菌株，其中绝大部分菌株归属于γ-变形菌门。
该类菌株对于土壤中的化学反应过程和植物的生长发育有着重要的影响，对于农业生产和生态环境的监测都有着重要的意义。
大豆根际高效溶磷菌株的分离及溶磷能力分析
经在线比对并构建系统发育树，发现其分布在 7 个不同种当中，其中溶磷能力最强的菌株 SＲ95 为成团泛菌，这在以
往研究中未见报道。
关键词： 大豆； 根际； 溶磷菌； 溶磷能力
中图分类号： S565． 1
文献标识码： A
DOI： 10． 11861 / j． issn． 1000-9841． 2014． 03． 0404
3期
ห้องสมุดไป่ตู้
王 浩等： 大豆根际高效溶磷菌株的分离及溶磷能力分析
405
1 材料与方法
28℃ 培养 5 ～ 7 d，观察菌落特征，并计数。挑取单菌 落于 NA 斜面 4℃ 保存。
1． 1 材料
供试土壤为黑钙土取自国家大豆工程技术研 究中心大棚，pH6． 89，有机质含量 19． 80 g·kg － 1 ，全 氮含量（ N） 0． 580 g·kg － 1 ，速效磷（ P2 O5 ） 含量 42． 9 mg·kg － 1 ，速效钾（ K2 O） 含量 78． 6 mg·kg － 1 ，电导率 （ EC） 23． 6 mS·m － 1 。供试大豆品种选用东北农业 大学的育成品种东农 46。
1． 2． 3 菌株溶磷能力测定 初筛： 挑取新鲜培养的 菌体 于 无 机 磷 合 成 培 养 基 平 板 上 划 线，28℃ 培 养 7 d，观察所产生的单菌落有无溶磷圈产生，并测量 溶磷比（ 溶磷圈直径 /菌落直径） 。
溶磷量测定： 对溶磷比≥1． 5 的菌株，接种 1 mL 菌液（ 108 cfu·mL － 1 ） 于 50 mL 蒙金娜无机磷液体培 养基中，28℃ 振荡培养 7 d，超声波破碎细胞 20 min， 4 000 r·min － 1 离心 20 min，取上清 3 mL，以不接菌培 养基作为 对 照，采 用 钼 锑 抗 比 色 法［6］，测 定 菌 株 的 溶磷量。 1． 2． 4 高效溶磷菌株的鉴定 对菌株进行革兰氏 染色，在显 微 镜 下 观 察 菌 体 形 态 及 大 小。 同 时，参 照刘晓颖等［7］的方法提取菌体 DNA，采用 16S rDNA 通用引物 799F（ 5'-AACMGGATTAGATACCCKG3'） 和 1492Ｒ（ 5'-TACGGHTACCTTGTTACGACTT-3'） 扩增菌体部分 16S rDNA 序列。序 列 提 交 到 Genbank 数据库中，并与相近参比菌株进行在线比对， 用 Clustal X 软 件 包 程 序 对 序 列 进 行 排 列 后 采 用 Mega 4． 0 软件构建系统发育树进行遗传鉴定。
解磷细菌的筛选与分离
土壤中解磷细菌的分离与纯化摘要：磷细菌是存在于自然界，主要是土壤中的一类溶解(dissolve)磷酸化合物(phosphate compound)能力较强的细菌的总称。
通过磷细菌的作用，可使土壤中不能被植物利用的磷化物转变成可被利用的可溶性磷化物。
故又称溶磷细菌。
主要有两类，一类称为有机磷细菌，主要作用是分解有机磷化物如核酸、磷脂等；另一类称为无机磷细菌，主要作用是分解无机磷化物，如磷酸钙、磷灰石等。
磷细菌主要是通过产生各种酶类或酸类而发挥作用的。
可用它制成细菌肥料，实践证明，对小麦、甘薯、大豆、水稻等多种农作物，以及苹果、桃等果树具有一定增产效果。
农业上常用的菌有解磷巨大芽孢杆菌（Bacillusmegatherium var．phosphaticum），俗称为“大芽孢”磷细菌，此外，还有其他芽孢杆菌和无色杆菌（Achromobacter）、假单胞菌（Pseudomonas）等。
我们此次试验目的是从土壤中分离出无机解磷细菌，观察解磷细菌的细胞形态，并进行生理生化鉴定，进一步熟悉掌握微生物实验的基本技能。
关键词：土壤解磷细菌无机磷细菌含磷培养基分离提纯生理生化反应实验目的1）掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。
2）学习并掌握分离纯化无机解磷细菌的基本方法。
3）巩固和贯通所学的无菌技术、纯培养技术、保藏技术、显微技术、……等微生物操作技术。
4）学习通过微生物的形态特征、生理生化反应来鉴别解磷细菌与其他微生物的异同。
试验原理1）菌种来源：由于各种微生物对营养物质需求不同，在不同地方采样对选取所要的微生物含量和其它杂菌含量的多少直接有关。
所以要选择无机磷含量较高的土壤中采样。
2）培养基的选取：为了使所要的无机解磷细菌能生长，其它微生物生长受到一定的抑制，要用选择培养基。
还要把解磷菌与其他微生物相区别，还要用鉴别培养基。
为了达到即是选择培养基又是鉴别培养基，选取以磷酸钙为唯一磷源的培养基。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定植物的生长发育过程中需要多种微量元素，其中磷和钾是最重要的两种元素之一。
磷是植物体内的主要构成成分之一，是ATP、DNA、RNA等重要生物活性物质的组成成分；钾则必须在植物体内保持适宜的浓度，否则会导致植株生长发育的异常。
因此，提高土壤中磷和钾元素的有效利用能力，尤其是在一些磷、钾资源缺乏的土壤环境中，成为了高效农业生产的重要问题之一。
目前，应用微生物技术促进土壤中的磷和钾元素的有效利用已成为解决该问题的重要手段之一。
其中，溶磷解钾菌是一类在土壤生态系统中广泛存在的微生物，能够通过酶学反应降解复合肥料、有机肥、磷矿物质、锰氧化物等多种化学物质，释放可溶性磷、钾等营养元素，促进农作物生长发育。
因此，本文主要通过分离筛选和鉴定的方法，寻找和鉴定一株高效溶磷解钾菌，并对其生长特性和功能进行初步研究，为土壤微生物肥使用及合理施肥提供理论和技术依据。
材料与方法：（1）采样：收集自然界或人工培养基中的黑土或其他土壤，装分体积的试管中备用。
（2）筛选培养基与条件确定：分别利用羟基磷酸盐(Pi)、黄素(Hym)、柠檬酸(Citr)、葡萄糖(Glu)等物质为碳源以及K2HPO4和KCl作为磷源和钾源，配制筛选培养基，并根据需求进行调整。
（3）接种：将土壤样品通过适当的前处理（如筛选、稀释、高温处理等）后，采用无菌操作方法，将其分别接种于上述培养基中。
（4）粗分离与纯化：经过一段时间培养后，从培养皿中分离出单一菌株，连续传代3次，达到细菌单纯化的目的。
（5）生理生化指标测定：① 磷解酸酶(Piase)活性测定：在含有Pi培养基中培养菌株，用质量浓度为10g/L的6%硫酸铵钼酸溶液加10%的三氯乙酸，和加去离子水的对照组，低温下静置30分钟后，读取532nm的吸光度值。
② 钾溶菌特性测定：在含有K2HPO4和KCl的培养基中培养菌株，研究菌株的钾溶菌特性。
（6）菌株鉴定：运用生理生化特征以及16S rRNA基因测序技术等方法，确定该菌株的分类和鉴定结果。
一株根际解磷菌的筛选鉴定及溶磷促生作用
doi：10.11838/sfsc.1673-6257.21131一株根际解磷菌的筛选鉴定及溶磷促生作用王 君*，范延辉，尚 帅，李学平，张玉苗，吴 涛，许骥坤（滨州学院生物与环境工程学院，山东省黄河三角洲脆弱生态带工程技术研究中心， 山东省黄河三角洲生态环境重点实验室，山东 滨州 256600）摘 要：从黄河三角洲地区盐碱化耕地的5种农作物根际土壤中分离筛选高效解磷菌，为开发盐碱地生物肥料提供菌种资源。
结合解磷圈筛选法和钼锑抗比色法评价菌株的解磷能力；采用含不同NaCl浓度的LB培养基测定菌株的耐盐性。
利用菌株的形态学特征、生理生化特性和16S rDNA基因序列分析方法进行鉴定；采用液体摇床培养试验测定菌株对多种难溶性磷源的溶解能力。
以盐碱化土壤为供试土壤，检验菌株在盐碱土壤中的应用潜力。
共分离出27株解磷细菌，其中菌株B19被鉴定为杓兰泛菌（Pantoea cypripedii），该菌在0%～4%的NaCl浓度下生长良好，最高可耐受6%的盐浓度。
B19具有较强的解磷能力，在Ca3（PO4）2为磷源的无机磷固体培养基上30 ℃培养3 d解磷圈的直径（D）为18 mm，与菌落直径（d）比达3.17；PVK液体培养试验表明，菌株B19对多种难溶性磷源都有较强的溶解能力，对Ca3（PO4）2、AlPO4、FePO4和磷矿粉溶磷量分别达230.2、72.1、153.2和28.5 mg/L。
土壤培养试验结果表明，B19菌可以显著提高盐碱化土壤的有效磷含量，10 d后土壤有效磷含量增加了36.2%。
盆栽试验结果还表明，B19菌对小麦植株促生效果显著，说明解磷菌B19在改善盐碱化土壤肥力方面具有很好的应用潜力。
关键词：根际；盐碱地；解磷菌；杓兰泛菌；鉴定磷是植物体内有机化合物的重要组成成分，是限制植物生长且不可代替的第二大营养元素。
土壤中的总磷含量为0.04%～0.10%（w/w），其中只有极少量的可溶性磷（H2PO4–/HPO42–）能被植物利 用［1-2］。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定1.引言土壤微生物是土壤生态系统中极为重要的组成部分，对土壤有机质降解、养分转化、生物防治等方面具有重要作用。
其中一些微生物能够分解有机磷和溶解钾，从而提高土壤养分利用效率。
本文旨在分离筛选出一株在土壤中具有有效溶解磷和解钾功能的细菌，并对其进行初步鉴定。
2.方法与材料2.1 样品来源本实验所用的土壤样品来源于田间收集的耕地表层土壤。
2.2 分离筛选条件分离筛选出溶磷解钾菌的培养基配方：蛋白胨10g/L、葡萄糖5g/L、Ca3(PO4)26.0g/L、KCl 15.0g/L、琼脂15.0g/L、pH7.0；分离培养温度：30℃；分离培养时间：3-7天。
2.3 鉴定方法3.1 16S rDNA序列分析：利用PCR技术提取细菌DNA，然后进行16S rDNA基因扩增，并对扩增产物进行测序，最后利用生物信息学分析对其进行鉴定。
3.2 生理生化特性测定：包括对细菌的生长温度范围、pH范围、盐胁迫耐受能力等生理生化特性进行测定。
3.结果与讨论根据以上方法，我们成功分离到一株在土壤中具有溶解磷和解钾功能的细菌，经过鉴定和特性测定，得到如下结果：3.1 经16S rDNA序列分析，鉴定出该菌株为一株假单胞菌属(Pseudomonas)细菌。
经与GenBank数据库比对，该细菌的16S rDNA序列与Pseudomonas属中已知细菌的序列高度相似，确认了该菌株的分类地位。
3.2 该菌株的生理生化特性测定结果显示，其最适生长温度为30℃，pH范围为6.0-8.0，对较高盐浓度也具有一定的耐受能力。
4.结论本研究成功分离出一株溶磷解钾的Pseudomonas属细菌，并对其进行了初步的鉴定与特性测定。
该菌株的分离与鉴定为今后在土壤改良和养分利用方面提供了极为重要的资源基础。
对该菌株的深入研究还将有助于揭示其在土壤生态系统中的生态功能和应用潜力。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定一株具有溶磷解钾功能的细菌对于农业生产具有重要意义。
溶磷解钾菌可以促进土壤中的固定磷和铵态氮溶解，提高土壤中的磷和钾素的有效性，从而增强作物对磷和钾的吸收利用能力，促进植物生长和发育，提高作物产量。
对具有溶磷解钾功能的细菌进行分离筛选与鉴定，具有十分重要的意义。
本文将介绍一种分离筛选一株溶磷解钾菌的方法以及对其的鉴定过程。
分离筛选一株溶磷解钾菌需要制备携氧试验的培养基。
携氧试验的培养基成分包括：葡萄糖1g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.25g、酵母提取物1g、硫酸铵1g、硫酸铁(FeSO4)0.05g、硫代硫酸钠0.5g、石英砂10g、琼脂15g、蒸馏水1000mL。
以上材料按比例混合均匀后，装入试管或蒸煮瓶中，压紧无菌煤炉棉塞后于121℃高压蒸汽灭菌，即可使用。
接着，从不同土壤样品中取样，分别于1g土样中分离出来的溶磷解钾菌。
将土样加入适量生理盐水中，制备土样悬浊液。
然后，将悬浊液在40℃下震荡振动1h，接着利用稀释平板法将液体均匀地平铺在含有携氧试验培养基的琼脂平板上，放置于30℃恒温培养箱中孵育3-5d。
在孵育期间，从分离得到的溶磷解钾菌中挑选溶磷解铵类磷酸盐(Pi)菌株。
特别地，溶磷强度不低于0.3mmol/L的菌株被认定为溶磷阳性菌，溶铵效率不低于20%的菌株被认定为解铵效率阳性菌。
接下来，对分离得到的溶磷解钾菌进行生理生化特性鉴定。
通过形态学特征观察，包括菌落形态、细胞形态、颜色、透明度等，来初步鉴定菌株。
然后利用生化试剂盒对细菌进行生化鉴定，如氧化酶试验、嫌氧发酵试验、尿素酶试验等。
还可以利用16S rRNA序列鉴定技术对细菌进行鉴定，即将菌株的DNA提取出来，进行PCR扩增和测序，最后通过与GenBank数据库比对，来鉴定出菌株的属种信息。
同时还可以通过质谱技术（MALDI-TOF MS）鉴定菌株。
对已经分离筛选和鉴定出的溶磷解钾菌株进行进一步的功能评价。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定一、分离筛选1. 采集样品分离一株溶磷解钾菌的第一步是采集土壤样品。
在采集土壤样品时，应选择农田、果园或者蔬菜地等农作物生长的土壤。
避免采集林地或者草原等非农作物生长的土壤。
2. 筛选培养基为了筛选出具有溶磷解钾功能的菌株，需要选择适合菌株生长的培养基。
一般来说，可以选择含有磷钾养分的培养基，比如含有三钠憎水性纤维素和磷酸的培养基。
3. 筛选过程将采集到的土壤样品进行稀释，然后在筛选培养基中进行培养。
适宜的温度和湿度有利于细菌的生长。
在培养过程中，通过溶磷解钾功能的鉴定方法，筛选出具有溶磷解钾功能的菌株。
4. 筛选结果筛选出的溶磷解钾菌株，可以进行单菌纯化和鉴定鉴定。
接下来，对所得的溶磷解钾菌株进行鉴定。
二、鉴定1. 形态观察可以通过形态观察对菌株进行初步鉴定。
包括菌落形态、菌体形态、芽生孢和孢子等。
2. 生理生化特性可以进行一系列生理生化特性的鉴定。
包括对菌株的产酶特性、产酸特性、色素特性等的鉴定。
这些特性可以帮助确定菌株的种属和特征。
3. 分子生物学鉴定可以借助分子生物学的鉴定手段对菌株进行鉴定。
通过16S rRNA基因序列分析，可以快速准确地确定菌株的系统发育学地位，确定其种属。
分离筛选和鉴定过程，可以帮助我们选出高效的一株溶磷解钾菌，并对其进行深入的研究。
通过研究，可以进一步探究这一株溶磷解钾菌的生物特性、功能特性和应用前景。
相信在不久的将来，这一株溶磷解钾菌将在农业生产中发挥重要的作用，为提高作物产量和质量提供重要支持。
解磷微生物的分离筛选及其解磷能力
解磷微生物的分离筛选及其解磷能力1 引言解磷微生物分离筛选一直以来是一个热门研究课题，因为它不仅具有重要的理论价值，而且还受到了社会对水环境改善和资源环境保护的重要应用价值。
解磷微生物的筛选主要是为了筛选出具有较高解磷能力的微生物，以解决水体磷污染问题，而目标微生物的环境分布范围是十分广泛的。
鉴于此，解磷微生物分离筛选已成为研究中必不可少的部分。
2 解磷微生物分离筛选解磷微生物分离筛选的过程主要包括：物种分类的展开、环境调查、样品的收集、重复筛选以及物种鉴定等。
环境调查中，主要考察磷污染水体的重要污染指标、水生物的分布特征、水体的水属性、水体的原昆虫成分等内容；而在样品的收集过程中，主要是对磷污染水体进行采样，收集具有解磷潜力的菌株，例如拉氏反常忌氨菌，双歧杆菌属等。
在重复筛选之后，最终选择出了最具解磷能力的微生物菌株；最后，结合系统发育和物种鉴定，确定该微生物的具体种属以及所含的活性成份。
3 解磷微生物的解磷能力解磷微生物拥有非常强大的解磷能力，具体表现为：能够快速分解改良后的磷，能够抑制及降解有毒有害物质，能够抑制磷的通移，能够抑制污染物的产生及有效分解底物磷，能够防止水体污染物的形成及积累，以及能够促进水体水质的恢复。
此外，解磷微生物具有抗寒、耐盐和耐厌氧等机制，可大大提高解磷能力的稳定性，从而使解磷微生物的应用益处更加远大，也为污染治理提供了减少环境危害的新途径。
4 结论经过上述解磷微生物分离筛选和解磷能力研究，得出了以上结论，深化了我们对解磷微生物的认识，为公众提供了一个可以采用自然微生物介入来防治磷污染的思路，从而在一定程度上有效的减少了污染环境的危害。
通过开展更多的解磷微生物分离筛选及解磷能力研究，有望为解决水体污染提供更有效的方法及路径。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定引言溶磷解钾菌是一类能够利用有机磷和无机磷、溶解磷酸盐和解钾的微生物。
它们在土壤营养元素的循环中起着重要的作用，不仅可以提高土壤中磷和钾的有效性，也有利于植物的吸收利用。
对于这类细菌的分离筛选和鉴定具有重要意义。
一、溶磷解钾菌的分离筛选1.1 样品采集我们需要通过采集不同土壤样品来寻找可能存在溶磷解钾菌的环境。
可以选择农田、森林、草原等不同类型的土壤样品。
还可以通过不同植物根系附近的土壤来采集样品。
这样获取的样品中可能存在多样化的微生物资源。
1.2 分离培养将采集到的土壤样品进行稀释并分装到不同培养基中，添加适当的磷、钾源以及生长因子，利用稀释平板法将土壤样品中的微生物分离出来。
待菌落出现后，再进行单菌落分离，最终得到纯培养的单一微生物。
1.3 溶磷解钾菌的筛选通过溶磷解钾菌的生理特性，我们可以利用含有无机磷盐和钾盐的培养基来筛选出具有溶磷解钾功能的菌株。
分离出的微生物在溶解磷酸盐和解钾作用上表现出显著的特异性时，则可认定其为溶磷解钾菌。
1.4 筛选结果经过上述步骤，我们可以获得多个可能具有溶磷解钾功能的菌株。
在鉴定这些菌株前，还需要进一步加以鉴定验证，以确保结果的准确性。
2.1 形态学特征将分离出的菌落进行鉴定，首先需要进行形态学特征的观察。
包括菌落形态、细胞形态、颜色、大小、孢子、芽孢等特征。
根据这些特征可以初步判断该菌属于哪一类细菌。
2.2 生理生化特征接着，我们需要对细菌进行生理生化特性的检测。
比如对其生长温度、耐盐性、碱酸度、氧气需求等特性进行测试。
还可以对其代谢产物进行分析，判断其对溶磷解钾的能力。
2.3 分子生物学鉴定根据现代分子生物学的技术手段，可以利用PCR扩增细菌的16S rRNA基因序列，并根据序列比对，进行系统发育关系分析，确定细菌的分类地位。
这是鉴定细菌的一种较为准确和有效的方法。
2.4 鉴定结果经过以上步骤的鉴定，我们可以确定出一株真正具有溶磷解钾功能的细菌。
1株溶磷细菌的筛选及其溶磷物质分析
1株溶磷细菌的筛选及其溶磷物质分析张淑红【摘要】为了获得高效溶磷菌并了解其溶磷机制,从生活垃圾堆积地采集土样,筛选出10株对卵磷脂和磷酸钙均有溶解能力的菌株,通过液体摇瓶复筛,得到1株高效兼溶磷酸钙和卵磷脂的溶磷菌LY8,培养6d后2种难溶磷发酵液中水溶性磷质量浓度分别达到647.8 mg/L和26.6 mg/L.结合生理生化特征和16S rDNA序列分析,初步鉴定其为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).在不同难溶性磷源条件下LY8分泌的主要溶磷物质不同,对于无机难溶磷磷酸钙,LY8菌株分泌的主要溶磷物质是有机酸,其次是磷酸酶;而对于有机难溶磷卵磷脂,LY8菌株分泌的主要溶磷物质是磷酸酶,且其分泌的有机酸、蛋白质和多糖可能也具有一定的溶磷效果.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2014(043)008【总页数】4页(P64-67)【关键词】溶磷菌;磷酸钙;卵磷脂;溶磷物质;巨大芽孢杆菌【作者】张淑红【作者单位】唐山师范学院生命科学系,河北唐山063000【正文语种】中文【中图分类】S154.39溶磷菌在转化土壤难溶磷、提高磷肥利用率、促进作物生长方面都具有显著作用，而不同溶磷菌对不同形态难溶磷的溶解能力存在差异[1-3]。
溶解难溶性磷酸盐的细菌主要有芽孢杆菌(Bacillus)、假单胞菌(Pseudomonas)、克雷伯氏菌(Klebsiella)、节杆菌(Arthrobacter)、沙雷氏菌(Serratia)、肠杆菌(Enterobacter)和伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)等，溶磷量最高可达643.2 mg/L；而溶解有机磷的细菌主要有芽孢杆菌(Bacillus)，溶磷量达到26.5 mg/L[4]。
溶磷菌溶磷机制各不相同，大部分溶磷菌以分泌物溶磷，其胞外分泌物中含有多种溶磷物质，近年来的研究主要集中在有机酸和磷酸酶方面[5-7]。
研究表明，大部分溶磷微生物的胞外分泌物中含有大量有机酸，所以一致认为有机酸是主要的溶磷物质[8-10]；另外微生物生长繁殖过程中，分泌出酸性磷酸酶和碱性磷酸酶，这些磷酸酶能够不断地将环境中的有机磷转化为无机磷[11]。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定溶磷解钾菌是一类能够通过生物作用分解有机磷化合物和钾肥的微生物。
这类微生物对于提高土壤中磷素和钾素的有效性和可利用性具有重要作用。
分离筛选和鉴定溶磷解钾菌对于土壤改良和农业生产有着重要意义。
溶磷解钾菌分离筛选的步骤主要包括样品采集、微生物培养、菌株分离和筛选。
第一步是样品采集。
我们可选择不同类型的土壤作为样品源，如农田土壤、果园土壤等。
通过采集多个样品，可以获得更多潜在的溶磷解钾菌的来源。
第二步是微生物培养。
将采集到的土壤样品分别加入到不同的培养基中，如含有有机磷或钾肥的培养基。
通过调整培养条件，如温度、pH值等，可以促进溶磷解钾菌的生长繁殖。
第三步是菌株分离。
将培养液取出一定量后，采用稀释涂布法或平板扩展法进行菌落分离。
分离后的菌落应进行纯化处理，以获得单一的菌株。
第四步是筛选。
利用不同的筛选方法，如酶活检测、溶磷解钾能力检测等，对分离得到的菌株进行筛选。
通过观察酶或物质的产生与菌株的相关性，可以初步判断其具有溶磷解钾能力。
在进行溶磷解钾菌的鉴定时，要结合形态学特征、生理生化特性和分子生物学特征综合进行。
形态学特征主要包括菌落形态、菌液形态和孢子形态等。
溶磷解钾菌的菌落通常呈乳白色或灰白色，有时呈粉红色或黄色。
菌液常呈混浊状，并产生黏液。
孢子形态也是鉴定的重要指标之一，如溶磷解钾菌属于芽孢杆菌科的话，孢子通常为梭形或圆柱形。
生理生化特性主要包括生长和代谢特性，如溶磷解钾菌的生长温度范围，氧气需求量等。
对菌株进行一系列的生物化学检测，例如利用 Biolog 试剂盒，可以判断菌株对不同碳源和氮源的利用情况。
分子生物学特征主要利用DNA序列信息进行鉴定。
采用PCR扩增菌株的16S rDNA序列，然后进行序列分析和比对，可以确定菌株的系统发育关系。
还可以利用PCR扩增特定基因片段，如溶磷酸酯酶（PhoD）、钾溶解酶（KdgA）等基因，以确定菌株具有溶磷解钾能力。
溶磷解钾菌的分离筛选和鉴定是通过多种试验和方法综合进行的。