【精品】倒置荧光显微镜2PPT课件
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)1、明场观察方法步骤步骤 涉及部件主开关拨到“I ”准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑步骤 涉及部件I ” 载物台、标本夹3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤 涉及部件主开关拨到“I ” CD+或CD-钮主开关拨到“I ”ND 片插槽 /孔径光阑准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
，待弧载物台荧光激发块选择按钮载物台控制手柄 物镜选择钮 手动调焦调节瞳间距 观察筒 调节屈光度 屈光度调节环物镜转盘视场光阑杆使两斑点最清晰 汞灯透镜聚焦调节旋钮 使两斑点重合（先水平后重合） 汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致 集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央 视场光阑中心调节钮第二部分 使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP 。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/DigitalCapture ，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
倒置荧光显微镜
倒置荧光显微镜1．设备用途可观察细胞状态，观察荧光样本，用于科研工作。
2．主要技术指标2.1 研究级倒置显微镜#2.1.1 显微镜镜体，双层光路，第一层接电动8孔荧光激发块转盘，第二层可选配中间变倍体，提供更开放的试验平台*2.1.2 物镜转换器：电动6孔式物镜转换器（可安装DIC模块），防水结构。
#2.1.3 聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最小微调刻度单位：1μm），行程10mm，粗调旋钮扭矩可调，备有上限调节*2.1.4 光学系统：无限远校正光学系统，齐焦距离为国际标准45mm2.2透射光照明：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调2.3 观察镜筒：人机工程学，正象，可倾斜式双目镜筒，观察角度35度-85度，眼点高度调节范围0-65mm可调，瞳距可在50-76mm范围内进行调节，视场直径为222.4 精确定位功能手动载物台，具备XY锁定和复位功能；控制手柄扭力可调；尺寸：240mm(D) x 444.5mm(W)；移动范围Y≥75mm，X≥114mm；配备多孔板，35mm培养皿，及载玻片适配器。
*2.5 聚光镜：电动长工作距离万能聚光镜：电动7孔转盘(3孔用于直径30mm，4孔用于直径37mm)，电动孔径光阑和电动起偏镜，N.A.≥0.55，工作距离27mm。
2.6 物镜2.6.1 万能平场半复消色差相差物镜4X（N.A.≥0.13, W.D. ≥17.0mm）2.6.2 万能平场半复消色差物镜10X（N.A.≥0.3, W.D. 10mm）*2.6.3 高分辨率长工作距离平场半复消色差相差物镜20X（N.A.≥0.7, W.D.≥0.8-1.8mm）2.6.4 长工作距离平场半复消色差相差物镜40X（N.A.≥0.6, W.D.≥2.7-4.0mm）2.7 滤色镜：日光平衡滤色片2.8 目镜：高眼点目镜，10×，视场直径：222.9 反射荧光系统*2.9.1 荧光滤色镜盒：电动8孔位滤色镜转盘盒，内装光闸，防水结构2.9.2 荧光激发块：DAPI:Single Band Exciter: 360-370nm ,Single Band Emitter: 420-460nm ,Dichroic: 410nm GFP,:Single Band Exciter: 460-495nm ,Single Band Emitter: 510-550nm ,Dichroic: 505nm TRITC:Single Band Exciter: 530-550nm ,Single Band Emitter: 575-625nm ,Dichroic: 570nmPE:Single Band Exciter: 465-495nm ,Single Band Emitter: 565-585nm ,Dichroic: 510nm 2.9.3 光源：130W长寿命金属卤化物光源，冷光纤导入*2.10 高分辨率彩色制冷型显微专用数码相机2.10.1 芯片规格：1/1.2 英寸，2.35M彩色CMOS*2.10.2 最大图像分辨率：≥2070万，5760 X 3600（3CMOS模式）2.10.3 感光灵敏度：ISO 200/400/800/1600/3200/64002.10.4 像素混合：提供2 X 2像素混合（binning）2.10.5 图像速度：60幅/秒@1920 x 12002.10.6 图像传输速度：4s（最高分辨率5760 X 3600）2.10.7 测光方式：全幅，30% ，1%，0.1%2.10.8 测光模式：手动，自动，超级荧光自动（SFL）2.10.9 曝光时间：39μsec～60sec2.10.10 制冷模式：Peltier制冷2.10.11动态范围：12bit2.10.12成像类型：支持明场和弱荧光高质量成像2.10.13 显微镜同品牌制冷彩色相机2.11 显微图像控制及分析软件2.11.1 采集图像：支持多种型号专业CCD，支持TWAIN接口，界面直观，操作容易，使用户更加容易的集中精力关注生物试验过程；*2.11.2 专业图形编程系统，可轻松设计复杂流程实验，如多维、长时程、多通道、多位点等。
倒置相差显微镜及荧光显微镜原理、使用与注意事项_图文(精)
倒置相差显微镜及荧光显微镜的使用XXX,YYY,ZZZ(版权所有,仅限个人1倒置相差显微镜倒置相差显微镜,是将相差显微镜和倒置显微镜相结合的产物,倒置相差显微镜既具有倒置显微镜的倒置观察方式,同时又具有与相差显微镜相一致的成像原理。
因此,研究倒置相差显微镜的工作原理就需分别研究倒置显微镜和相差显微镜的工作原理。
1.1倒置显微镜的工作原理:倒置显微镜组成和普通显微镜一样,主要包括三部分:机械部分、照明部分、光学部分。
其中与普通显微镜有明显区别的是:物镜与照明聚光系统的相对位置。
相比于普通显微镜,倒置显微镜的物镜与照明聚光系统以载物台为轴颠倒位置,物镜在载物台之下,照明系统在在载物台之上。
这样的构造使得照明聚光系统与载物台的有效距离可以显著扩大,便于放置培养皿、细胞培养瓶等较厚的待观察器具,而同时物镜与材料之间的工作距离不必很大。
图1.1倒置显微镜由于倒置显微镜观察的材料一般都是培养的细胞,透明性大,结构对比不明显,故倒置显微镜常配备相差物镜,实际上也就构成了倒置相差显微镜(图1.1。
1.2相差显微镜的工作原理:1.2.1光学知识镜检时,视场中的样品只有在其透射光的波长(颜色和振幅(亮度与周围介质有明显变化时,才能被眼睛所分辨。
照明光线通过无色透明的物体时,透射光的波长和振幅都不发生明显改变,尤其是振幅,几乎无变化。
所以用普通光学显微镜观察时,难以辨清这样物体的结构,必须借助于固定和染色等理化方法,使样品和背景的透射光在波长或振幅上发生变化,即在颜色和亮度上有所差异,以供识别。
一束光线在透过折射率n不同的透明介质后,产生的衍射光和透过的直射光的波长没有明显变化,只是衍射光的振幅稍小于直射光,这也是透明不均质物质产生些许明暗变化的原因,但这一点变化很小,并不能有效分辨。
变化明显的是衍射光相对透射光在相位上有1/4λ的滞后,虽然人眼不能分辨相位的差别,但可以分辨振幅和波长的变化。
相差显微镜就是利用这一点,将相位的差别转变成振幅的变化,也就是将本来均为透明但折射率不同的各个结构显现出明暗差距,从而可以被清楚地分辨。
倒置荧光显微镜2ppt课件
李玉红
显微镜部件及称号
显微镜机体
明视场(BF)镜检
关键点： 从光路中卸下其它方式察看需求的一切光学组件，聚光器调理好〔调理聚焦 和对中〕，转动孔径光阑调理好似的明晰度。
1，复位
1〕 逆时针转动，松开透射照明器中的“聚光器再 聚焦指紧螺钉〞。 2〕 把“目镜筒转盘〞设置到＜O＞位。 3〕 把显微镜右侧的“中间放大倍数刻度盘〞打到 ＜1X＞。 4〕 逆时针转动，松开显微镜右侧粗∕微调旋钮后 面的“物镜再聚焦定位环〞。
3〕转动“聚光器调焦钮〞升降聚光器，使视场光阑像清 晰地成象在标本面上。
4〕转动两个“聚光器中心调理螺钉〞，使视场光阑像在 视场中心。
5〕改换40X物镜。 6〕调理“视场光阑调理杆〞，使视场光阑的象与视场大 致一样。
7〕转动两个“聚光器中心调理螺钉〞，使视场光阑像在 视场正中。
9. 进展察看 1〕选择要运用的物镜 2〕挪动系统聚光器上的“孔径光阑调理杆〞，使孔径为 物镜数值孔径的 70－80%。〔“把目镜筒转盘〞设到 ＜B＞位置，转动勃氏镜调焦螺钉使其聚焦，当察看 到物镜的出瞳和孔径光栏的象时，调理其大小。〕 3〕调理“视场光阑调理杆〞使视场光阑像与视场相大致 一样。 4〕把透射照明器里的“ND减光片〞进入或退出光路以调 节视场亮度。 ◆ 补充阐明 假设不需求色温很准确的颜色，可以经过显微镜 左侧的“亮度调理盘〞，改动灯泡电压来调理亮 度。 10. 改换样品 利用显微镜主体上的“物镜再聚焦定位环〞，照明器上 的“倾斜安装〞，“聚光器再聚焦指紧螺钉，可容易更 换样品。
3〕用右眼对着右侧目镜，转动目镜 “屈光度调理环〞， 使取景框中的双十字线明晰成像。
4〕将显微镜前部的“摄影取景框转盘〞顺时针旋转，使 其退出光路。
全自动智能荧光显微镜(倒置)-技术性能指标课件
全自动智能荧光显微镜(倒置) 技术性能指标1. 倒置荧光显微镜主机1套1.1光学系统：无限远校正光学系统，齐焦距离45mm，保证光通过目镜到物镜整个光路中的所有棱镜及镜片时的绝对平行。
1.2具有明场、微分干涉、荧光、数字成像功能。
1.3六位电动物镜转换器，电动调焦，智能编码，光强随物镜变换自动调整并具备记忆功能（非软件设定）。
1.4电动型六位物镜转换器，支持在线齐焦（不用关闭软件，即可调整齐焦）1.5透射光照明：LED光源，寿命大于4万小时。
1.6目镜：10X，视野数25，含目镜罩，屈光度可调节1.7宽视野镜筒：FOV251.8载物台：电动扫描台：三叠载物台，行程范围127x83mm，行程可覆盖整个多孔培养板，X-Y分辨率为0.02-0.04um，重复精度优于1um，配备培养皿及多孔板插件。
*1.9独立的全自动微分干涉棱镜转盘，做荧光图像时，棱镜自动转出光路，保证荧光100%透过。
1.10硬件防漂移系统：采用850nm LED红外光跟踪培养皿底部细胞，用于生理实验，长时间活细胞观察。
可实时有效补偿因加药、温度变化、细胞游动生长等而引起的漂移现象1.11 Z轴调焦行程12mm，可满足不同培养皿，培养瓶的需求。
1.12显微镜前端，配有彩色触摸屏，控制机显示参数，触摸屏角度可调，操作者不需要改变姿势，即可将当前参数尽收眼中，并且进行操作。
1.13明场光源和荧光光源均可通过同一旋钮调节光强。
1.14透射光带触发光闸，速度小于等于5 ms1.15 7孔位电动型聚光镜，1.16智能机身功能键：一键式功能转换，不同观察方式切换。
2.物镜，所有物镜均为荧光专用物镜，：5x物镜，数值孔径≥0.12，工作距离≥14mm10x 物镜，数值孔径≥0.3，工作距离≥11mm20x 物镜，数值孔径≥0.4，工作距离≥6.9mm 带玻片厚度矫正环40x 物镜，数值孔径≥0.6，工作距离≥3.3mm 带玻片厚度矫正环63x相差油镜63x/1.25 PH3（油镜）3. 荧光3.1显微镜主机荧光光强五档电动调节：可精确选择荧光激发强度，防止样本淬灭，同时可记忆当时的荧光强度，也可通过软件调节。
倒置荧光显微镜简具体操作及说明
DMi 8倒置荧光显微镜具体操作及说明第一部分，显微镜机身按钮说明A，机身右侧1，荧光减光片：（用于降低荧光激发的照射强度。
完全推进去最亮，完全拉出来最弱）2，荧光光圈：(用于调整荧光光斑照射大小，推进去最小，拉出来最大)3，荧光挡光板：（用于开/关荧光光路，当只观察透射光明场时需要把此推进遮挡住荧光照射，同时荧光滤块转盘转至无滤块，观察荧光时需要把此杆拉出来，让荧光照射进光路）4，目镜/照相机光路切换拉杆：（推进去只能目镜观察，拉出来照相机观察）5，荧光滤块转盘：（当进行荧光观察是转动此转盘切换荧光通道，根据照射出的色彩来判断具体光路，紫色照射激发蓝光染料，相应的蓝色激发绿色，绿色激发红色，橙色激发红色波段）B，机身左侧1, 透射光强调节旋钮：用于调节透射照射强度。
2，调焦旋钮：用于调节焦距高低，左右各一个3，荧光滤块转盘：用于调节荧光滤块通道，左右各一个C，透射光柱顶部，STOP：用于遮挡透射光路的通和断，当进行荧光观察时需要推上STOP遮挡住光路，避免干扰荧光观察。
D,聚光镜部分1，孔径光阑：用于透射光光圈调整，白光观察是调节到1-8之间的位置，可以得到亮度不同，景深分辨率也不同的白光视野，具体需要根据不同物镜和样本厚度而定。
当进行相差观察是需要调节转盘1至PH位置，然后再转动转盘2，选择相应的相差环。
2，相差环转盘：用于相差环转换，PH0对应5倍，PHI对应10倍、20倍物镜，PH2对应40倍和63倍物镜。
当白光观察时，需要转至非PH0\1\2的任意位置。
第二部分，软件操作说明1，打开桌面操作程序→界面进入,选择确定2，进入主页面：一，明场(白光)的拍摄方法A，拍摄图片：首先调节显微镜亮度和焦距，使视野中得到清晰的相差或白光的图像→拉出机身右侧的光路切换拉杆,让光路由目镜切换到摄像头上。
→点击软件最上一栏，可得到上图的界面→点击左下角动态图像→调节得到亮度和色彩最佳的图像→点击下方拍图完毕。
倒置荧光显微镜
4. 使用特定灯泡、保险丝和电源线 如果使用不恰当的灯泡、保险丝或电源线可能导致仪器损坏或仪器火灾。如果使用加长电源线， 必须使用有接地的电源线（PE）。
5. 显微镜需防高温、防潮、防异物 为防止发生短路或其它故障，请不要长时间在高温，潮湿的环境下使用，适宜工作环境温度 5° C~35°C，相对湿度 20%～80%（25°C 时）。如果有水洒在显微镜上时，请立即关闭电源开关，并拔掉电源线， 然后用干布将水擦去。当有异物进入或滴入显微镜时，请停止使用并与供应商联系。
● 倒置透射显微观察........................................................................................................................................ - 10 ● 相衬显微观察................................................................................................................................................ - 15 ● 摄影摄像装置的操作.................................................................................................................................... - 16 ● 落射荧光显微观察........................................................................................................................................ - 17 六. 灯泡与保险丝管更换............................................................................................................................................. - 20 ● 更换透射照明用卤素灯泡............................................................................................................................ - 20 ● 更换主机保险丝管........................................................................................................................................ - 20 ● 更换落射照明用汞灯.................................................................................................................................... - 21 ● 更换荧光电源箱保险丝管............................................................................................................................ - 21 七. 仪器保养与维护..................................................................................................................................................... - 22 八. 常见故障与解决办法............................................................................................................................................. - 23 -
细胞观察倒置相差显微镜观察ppt培训课件
实时观察
倒置相差显微镜不仅可以用于观察细胞，还可以进行样品制备、培养、操作等实验操作，具有很高的多功能性。
多功能性
02
细胞观察倒置相差显微镜的操作流程
贴壁细胞
将细胞接种至培养皿或培养板中，待细胞生长至汇合度约70%-80%时进行观察。
悬浮细胞
将细胞接种至适当的培养基中，轻轻摇动培养基以避免细胞沉淀，待细胞生长至汇合度约70%-80%时进行观察。
应用拓展与未来展望
环境监测领域
02
倒置相差显微镜可以用于观察和监测水体、土壤等环境中的微生物生态，为环境保护和治理提供有力支持。
科研领域
03
随着科研工作的不断深入，倒置相差显微镜将成为科研人员的重要工具，例如在化学反应机理研究、材料科学研究等领域的应用将进一步扩大。
06
细胞观察倒置相差显微镜的相关问题及解决方案
细胞活性检测不准确
采用多种检测方法相互验证，如MTT法和CCK-8法等，提高检测准确性。
倒置相差显微镜操作不熟练
加强培训和实践操作，熟悉显微镜的各项功能和操作流程。
技术难题及解决方案
THANKS
感谢观看
干涉图中的明暗区域代表了样品的不同特征，如细胞的边界和内部结构。
倒置相差显微镜的特点
倒置相差显微镜具有高分辨率，能够清晰地观察细胞的细节和结构。
高分辨率
由于倒置相差显微镜采用倒置设计，可以方便地观察活细胞和组织，无需进行样品制备和染色等步骤。
观察活细胞
倒置相差显微镜可以实时观察细胞的变化和运动，为科学研究提供重要的实验数据。
增强自动化
自动化技术将在倒置相差显微镜中发挥越来越重要的作用，包括自动聚焦、自动调整亮度和对比度等功能，从而提高观察的效率和准确性。
倒置显微镜培训
否则会刮伤镜头表面，严重损坏镜头，也不要用水擦试镜头，这样会 在镜头表面残留一些 水迹，因而可能滋生霉菌，严重损坏显微镜。 仪器工作的间歇期间，为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面，可将目镜 防尘塞盖上，或用防尘罩将仪器罩住。 不允许随意拆卸仪器，特别是中间光学系统或重要的机械部件，以免 降低仪器的使用性能。
倒置显微镜使用基础培训
提纲：
1、显微镜基础知识 2、 IX71结构介绍 3 、IX71操作流程 4 、操作注意事项 5、常见问题及处理
普通显微镜【CX31】
BX41
体 视 荧 光 显 微 镜
IX71
激光共聚焦
IX71倒置相差荧光显微镜
正置显微镜
倒置显微镜
原理
倒置显微镜系统（IX7系列）是在透镜成像原理基 础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光 源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜 对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜 所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分 辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用 于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置 了明场、相差、荧光等技术模块。
物镜
4倍 10倍、20倍
40倍
明场ห้องสมุดไป่ตู้察，选择BF
操作步骤
相差观察过程 5万元以上仪器填写使用登记表 ↓ 解开防尘罩，拿下目镜上的防尘盖
↓ 打开电源
↓ 将光路选择杆拨到“眼睛“ 观察
↓ 选择滤光片
↓ 将样品放置在载物体中心板上
↓ 转动荧光激发块转盘，使未装入激发块的位置进入光路
↓ 适当调节光强，让视野变亮
↓ 转入低倍镜（聚焦）
倒置荧光显微镜
倒置荧光显微镜
技术参数：
1. 工作环境: 温度10 ～35 °C, 相对湿度20 ～80%
2. 设备用途：用于活细胞培养观察及拍摄
3.技术规格：
3.1 光学系统：无限远校正光学系统，齐焦距离国际标准≤45mm。
3.2 观察镜筒：宽视野三目镜筒，视场数≥22，可升级照相装置
3.3 照明装置：高性能LED光源
3.4 物镜：半复消色差相差物镜4X, 数值孔径≥0.13
相差物镜10X, 数值孔径≥0.25
长工作距离相差物镜20X, 数值孔径≥0.4
长工作距离半复消色差相差物镜40X, 数值孔径≥0.6
3.5 载物台：备有右手用低位同轴XY轴传动旋钮。
载物台行程：X≥110mm，Y≥74mm。
3.6 目镜：10×，视场直径为22
3.7 备有可拆装的超长工作距离聚光镜：N.A.≥0.3，W.D.≥72mm
3.8 荧光附件：配置长寿命荧光光源，蓝、绿激发滤色镜组
4.主要配置：
4.1 显微镜主机（含三目观察筒）和明场、荧光光源
4.2相差物镜4X、10X、20X、40X
技术服务要求
1设备安装调试: 在买方指定的地点完成安装调试，并配合买方进行测试验收。
2质保期验收合格日起12个月。
3维修响应时间: 接到维修通知后，1个工作日内做出响应，3个工作日内到场排除故障。
4交货地点：用户指定位置。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤) (使用IPP第二部分拍摄图像流程相差观察、荧光观察) 明场观察(拍摄图像流程第三部分BX2-BSW使用观察方法步骤第一部分 1、明场观察方法步骤涉及部件步骤”主开关拨到“I打开电源开关三目观察筒选择杆拨至最内选择目镜观察光路聚光镜选择钮聚光镜选择明场（BF）相差移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路开始观调节瞳间观察筒瞳间距调节调节屈光目镜屈光度调节环寻找标载物台控制手柄手动调调节光照亮图像采准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
①聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮②用10X物镜聚焦至清晰③视场光阑打至最小视场光阑④逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮⑤调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮⑥逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑⑦稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路选择与物镜匹配的相差环聚光镜选择钮进入光路PH对10物镜PH对20物镜PH对40物开始观调节瞳间观察筒瞳间距调调节屈光目镜屈光度调节寻找标载物台控制手手动调调节光照亮图像采3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光开始观选择合适的物物镜选择按钮选用合适N滤色荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反视场光阑/孔径光阑图像采准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
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显微镜部件及名称
9. 进行观察 1）选择要使用的物镜 2）移动系统聚光器上的“孔径光阑调节杆”，使孔径为 物镜数值孔径的 70－80%。（“把目镜筒转盘”设到 ＜B＞位置，转动勃氏镜调焦螺钉使其聚焦，当观察 到物镜的出瞳和孔径光栏的象时，调节其大小。） 3）调节“视场光阑调节杆”使视场光阑像与视场相大致 相同。 4）把透射照明器里的“ND减光片”进入或退出光路以调 节视场亮度。 ◆ 补充说明 如果不需要色温很准确的颜色，可以通过显微镜 左侧的“亮度调节盘”，改变灯泡电压来调节亮 度。 10. 更换样品 利用显微镜主体上的“物镜再聚焦定位环”，照明器上 的“倾斜装置”，“聚光器再聚焦指紧螺钉，可容易更 换样品。
照明器上的“倾斜”装置及“聚光器再聚焦指紧螺钉”，
可容易更换样品。
调焦装置
● 当使用TE2000-U/时： 不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮，否则会导 致显微镜损坏。 粗动调焦钮达到限定位置后，如果继续向同一方向旋转会 引起显微镜故障。请不要旋转过度。 旋钮的转动量与物镜的移动量关系如下所示。粗微调焦钮 所提供的物镜往复范围为：基准位置上方 7 毫 米，下方3毫米。 粗微调旋转量 物镜的垂直移动量 微动调焦钮旋转一个刻度 1微米 微动调焦钮旋转一周 0.1微米 粗动调焦钮旋转一周 4.9毫米
3.关机 取下观察对象，推拉光源亮度调节器至最暗。关闭镜体下端的开关，并断开电源。旋 转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。
相差是倒置显微镜最常用的观察方法。该方 法不要求标本染色，用于观察活体细胞和微生物 最为理想。
相差成像技术提供了带中性背景的明亮、高 对比度、高分辨率的图像。
聚光器座的转动
拧松聚光器座旋转指紧螺钉，聚光器座就可 以转动。 此功能主要用于微分干涉显微术时调节偏振 方向。 当用系统聚光器及无起偏器时(例如进行明场 显微术或相差显微术时)，此功能可用来左右 移动聚光器转盘位置，为显微操作器或其它 系统留下空间。
故障及对策
维护 1. 镜头的清洁
不要将灰尘、指纹等留在镜头上。镜头、滤色片上的灰尘将影响视场中的图像。 如果镜头变脏，按以下方法进行清洁。 • 将灰尘用软刷刷去，或用纱布轻轻擦掉。 • 如果镜头上有指纹或油脂，可用一块沾有纯酒精（乙醇或甲醇）的柔软清洁的 棉布、镜头纸或纱布擦去。 • 当擦物镜上的浸油时，使用石油醚。如果没有石油醚，请用乙醇。但是，因为 乙醇的清洁效果没有石油醚效果好，需要重复擦表面。（通常清洁镜头要三到四 次。） • 勿用石油醚清洁目镜筒底部的镜头或目镜筒表面。 • 纯酒精和石油醚均为高度易燃品。因此在使用、保管、搬运过程中应格外小心。 操作电源开关或台灯尚热时，勿将它们放在灯泡附近。 • 使用纯酒精时，请遵守厂家提供的使用说明书。
如果不需要色温准确的颜色，可以通过显微镜左侧的
“亮度调节盘”，改变灯泡电压来调节亮度。
5. 使用不同放大倍数的物镜进行观察 1) 把所需放大倍数的相差物镜移入光路。 2) 转动“聚光器转盘”，使其与在光路上物镜（步骤 1 中所安置的）具有相同的ph标记。 3) 调节放入光路中的环形光阑中心。(见程序3) 6. 更换样品 利用使用显微镜主机上的“物镜再聚焦定位环”，透射
简易操作程序： 倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色，是观察活细胞 和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景 色的、高对比度的、高清晰度的图像。
1.开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。
2.使用 (1)准备：将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器，选择较小的物镜。观察，并 调节铰链式双目目镜，舒适为宜。 (2)调节光源：推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。通过调节聚光镜下面的光栅来 调节光源的大小。 (3)调节像距：转三孔转换器，选择合适倍数的物镜；更换并选择合适的目镜；同时调 节升降， 以消除或减小图像周围的光晕，提高了图像的衬度。 (4)观察：通过目镜进行观察结果；调整载物台，选择观察视野。
尼康采用了“切趾"相衬的新技术，减少了 成像光晕，从而产生对比度优越、色调范围更广 的图像。
荧光：在涉及荧光蛋白质这样的活体细胞显微 术中，这种方法不可或缺。 尼康独创的消杂光机构最大限度地消除了背景 杂光，从而在动态活细胞成像试验中观察发微弱 荧光的标本时能产生更高信噪比的图像。
霍夫曼调制相衬(HMC)方法使用尼康的专用物镜 和标镜，它将相们梯度转换为光强度变化，使透 明的活体标本产生生动、具有三维立体感的图像。 HMC成像技术中，标本可以置于塑料培养皿中观 察，弥补了诺马斯基微分干涉相衬技术的不足。
11. 显微镜操作结束后 1) 关闭电源开关(开关拨至O) 2) 灯室冷却后，把显微镜上的聚乙烯防尘罩盖好。
相差（PH）显微术 关键点： 将有ph标记的物镜与物镜相同ph标记的聚光器模块一起送入光路， 在进行显微术前，校正(对中)物镜里的相差板及聚光器模块里的环形光阑。
1. 用明视场（BF）显微术对样品聚焦。 2. 相差观察时对显微镜的调整。 1) 将ph物镜转入光路。 2) 转动“聚光器转盘”，使其与在光路中的物镜(步骤1中所安置 的)具有相同的ph标记。 3) 向右转动聚光器上的“孔径光阑调节杆”，完全打开孔径光阑。 ◆ 补充说明 如果孔径光阑没有完全打开，光路中的环形光阑将受到限制， 影响相差效果。 4) 提高透射照明器中的“视场光阑调节杆”位置，使视场光阑完 全打开。 3. 对中环形光阑 1) 把“目镜筒转盘”设到<B>位置，转动勃氏镜聚焦螺 钉，使环形光阑像清晰。 2) 用六角起子转动聚光器模块中的两个“环形光阑对中 螺钉”，使环形光阑像与物镜中的相差板环形像同心。 3) 把目镜筒转盘位置再转到<O>上。
4. 进行观察 1) 把聚光器“孔径光阑”完全打开。 2) 移动透射照明器上的“视场光阑调节杆”，使视场光 阑像大小与视场大小接近。
3) 把透射。(提高反差) 4) 可通过把“ND滤色片”移进或移出光路来调节视场亮度。 ◆ 补充说明